抗hnRNPB1单克隆抗体结合131I对肺癌小鼠靶向治疗的实验研究

目的 观察131I-抗hnRNPB1单克隆抗体(131I-抗hnRNPB1 MAb)、抗hnRNPB1 MAb对肺癌小鼠移植瘤的靶向治疗作用.方法 用常规氯胺-T法合成131I-抗hnRNPB1 MAb,30只C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞7 d后,将荷瘤鼠随机分成5组, 每组6只.分别经尾静脉注射,Ⅰ组131I-抗hnRNPB1 MAb 11.1 MBq/鼠单次治疗,Ⅱ组131I-抗hnRNPB1 MAb 11.1 MBq/鼠强化治疗(给药2次,每次给药间隔3 d),Ⅲ组 Na131I 11.1 MBq/鼠,Ⅳ组抗hnRNPB1 MAb 50 μg/鼠,Ⅴ组(对照组)生理盐水0.12 mL/鼠.治疗开始后每周测量1次小鼠肿瘤的长径及短径,4周后处死小鼠,分离肿瘤并称其质量,计算抑瘤率,肿瘤组织作常规HE染色检查.结果 治疗结束时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组小鼠的平均肿瘤体积分别为(3869±192) mm3、(1987±149) mm3、(6922±532) mm3、(6962±509) mm3、(6597±521) mm3,其中Ⅰ、Ⅱ组分别与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05),且Ⅱ组的平均肿瘤体积小于Ⅰ组(P＜0.05),而Ⅲ、Ⅳ组治疗结束时平均肿瘤体积分别与对照组相比差异无统计学意义.Ⅰ、Ⅱ组的抑瘤率分别为67.17%和39.03%,高于Ⅲ(1.36%)、Ⅳ(0.9%)组的抑瘤率(P＜0.05),且Ⅰ、Ⅱ组间抑瘤率的差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 抗hnRNPB1 MAb结合131I对肺癌小鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,且抑制作用呈量效关系.     

~(131)I标记VEGFR-3高亲和融合多肽对荷人卵巢癌裸鼠靶向治疗的实验研究

目的观察131I标记血管内皮生长因子受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)高亲和融合多肽(phage-SHSWHWLPNLRHYAS)对荷人卵巢癌小鼠移植瘤的靶向治疗作用。方法用Iodogen法合成131I-多肽及131I-单抗,体外分别与人淋巴管内皮细胞(LEC)共培养,MTT法检测其对LEC细胞生长的抑制作用;体内44只裸鼠经皮下接种卵巢癌细胞株,成瘤后2周,将20只荷瘤小鼠按随机数字表法分成4组,每组5只。分别经尾静脉注射,Ⅰ组:多肽4.4μg/只,Ⅱ组:131I-多肽7.4MBq/只,Ⅲ组:131I-单抗7.4MBq/只,Ⅳ组:生理盐水0.2ml作为对照组。干预后每周测量1次小鼠肿瘤的长径及短径,观察4周。余24只荷瘤鼠瘤体达1cm后行SPECT显像。结果体外131I多肽组对LEC细胞的生长抑制率在72h达到最高,131I单抗组对LEC细胞的生长抑制率在96h达到最高;72h及96h131I多肽组与131I单抗组及多肽组比较抑制率差异均有统计学意义(P0.05);体内4周治疗结束时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组小鼠肿瘤的体积分别为(723±164)、(291±68)、(457±88)、(792±112)mm3,其中Ⅱ、Ⅲ组与Ⅳ组肿瘤体积相比差异有统计学意义(P0.05),而Ⅰ组治疗结束时肿瘤体积与Ⅳ组比较差异无统计学意义(P0.05),Ⅱ、Ⅲ组的抑瘤率分别为63%和44%。结论131I标记高亲和融合多肽对荷人卵巢癌小鼠移植瘤的生长具有显著抑制作用。     

131I标记抗CEA单克隆抗体C50对荷人乳腺癌裸鼠局部放射免疫治疗效果

目的：观察放射免疫导向药物局部用药对荷人乳腺癌裸鼠的治疗效果。方法：将抗CEA单抗C50与¹³¹I偶联,制成放射免疫导向药物¹³¹I-C50。将已乳腺原位接种人乳腺癌MCF-7细胞且肿瘤直径已达0.5 cm的裸鼠16只随机分为实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、实验对照组（Ⅲ组）及空白对照组（Ⅳ组）,每组4只。对荷人乳腺癌裸鼠进行肿瘤局部注射,Ⅰ组给予¹³¹I-C5018.5 MBq,Ⅱ组给予¹³¹Ⅰ-C50 3.7 MBq,Ⅲ组给予 ¹³¹I-mIgG18.5 MBq,Ⅳ组给予C50 0.75 μg,给药当日后6周内每周测定肿瘤大小,计算抑瘤率。结果:Ⅰ组和Ⅱ组与Ⅲ组之间的肿瘤体积、抑瘤率、重量比较差异有显著性（P<0.01）,Ⅰ组与Ⅱ组上述指标比较差异亦具有显著性（P<0.05）,Ⅲ组与Ⅳ组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:放射性核素 ¹³¹I标记抗CEA单抗C50局部治疗可抑制荷人乳腺癌裸鼠肿瘤的生长。¹³¹I-C50具有潜在的临床应用价值。     

~(131)Ⅰ标记抗c-erbB-2单克隆抗体对卵巢癌动物模型的生长抑制作用

目的:用131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体,探讨其对荷人卵巢癌裸鼠的生长抑制作用。方法:将抗c-erbB-2单克隆抗体与131I偶联,制成免疫靶向药物,将已接种卵巢癌SKOV3细胞且肿瘤直径已达1.0cm的裸鼠分为131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体3.7MBq低剂量组和11.1MBq高剂量组,以131I标记的mIgG(非治疗性抗体)为对照组,对三组荷人卵巢癌裸鼠模型分别进行肿瘤局部注射,于用药当日后6周内每周测量肿瘤体积、质量,计算抑瘤率,并与对照组进行比较。结果:131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体3.7MBq低剂量组和11.1MBq高剂量组与对照组比较肿瘤体积减小(P<0.05)、肿瘤质量减轻(P<0.05)、抑瘤率增高(P<0.05),同时131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体11.1MBq高剂量组肿瘤体积和肿瘤质量低于3.7MBq低剂量组(P<0.05)、抑瘤率高于3.7MBq低剂量组(P<0.05)。结论:131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体对荷人卵巢癌裸鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用,且以131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体11.1MBq剂量作用强于3.7MBq剂量。     

~(131)Ⅰ标记抗c-erbB-2单克隆抗体对卵巢癌动物模型的生长抑制作用

目的:用131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体,探讨其对荷人卵巢癌裸鼠的生长抑制作用。方法：将抗c-erbB-2单克隆抗体与131I偶联,制成免疫靶向药物,将已接种卵巢癌SKOV3细胞且肿瘤直径已达1.0 cm的裸鼠分为131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体3.7 MBq低剂量组和11.1 MBq高剂量组,以131I标记的mIgG（非治疗性抗体）为对照组,对三组荷人卵巢癌裸鼠模型分别进行肿瘤局部注射,于用药当日后6周内每周测量肿瘤体积、质量,计算抑瘤率,并与对照组进行比较。结果：131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体3.7 MBq低剂量组和11.1MBq高剂量组与对照组比较肿瘤体积减小（P<0.05）、肿瘤质量减轻（P<0.05）、抑瘤率增高（P<0.05）,同时131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体11.1MBq高剂量组肿瘤体积和肿瘤质量低于3.7 MBq低剂量组（P<0.05）、抑瘤率高于3.7 MBq低剂量组（P<0.05）。结论：131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体对荷人卵巢癌裸鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用,且以131I标记抗c-erbB-2单克隆抗体11.1 MBq剂量作用强于3.7 MBq剂量。     

白花蛇舌草提取物抗小鼠结直肠癌血管生成的实验研究

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物对小鼠结直肠癌血管生成的抑制作用.方法构建32只BALB/c小鼠皮下CT26结肠癌动物模型,随机分为4组,每组8只小鼠,分别为Ⅰ组:对照组生理盐水0.1 mL/(10 g.d),Ⅱ组:白花蛇舌草乙醇提取物90 mg/(kg.d),Ⅲ组:白花蛇舌草乙醇提取物180 mg/(kg.d),Ⅳ组:白花蛇舌草乙醇提取物360 mg/(kg.d).各组小鼠在接种CT-26结肠癌细胞后的第10天开始测量肿瘤的长径(mm)和短径(mm);接种后第12天开始采用灌胃给药法给药,连续给药10 d后停止给药,继续喂养观察至第32 d后处死小鼠,取肿瘤组织用免疫组化法检测微血管密度.结果Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组小鼠的肿瘤体积明显小于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的肿瘤组织微血管密度分别为(7.83±2.87)、(5.32±1.27)、(1.77±0.70)、(1.87±0.68);Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肿瘤组织血管数量明显少于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05).结论在一定剂量范围内,白花蛇舌草乙醇提取物对小鼠CT-26结肠癌有明显的抑瘤作用,其机理可能是通过抑制小鼠结肠癌血管生成而起到抗肿瘤的作用.     

KDR启动子驱动的双自杀基因抑制乳腺癌的体内实验研究

目的 探讨重组腺病毒介导的KDR启动子驱动的CD/TK融合双自杀基因系统(以下简称Ad-KDRP-CD/TK)对乳腺癌及其血管生长的抑制作用. 方法扩增、纯化重组腺病毒Ad-KDRP-CD/TK,获得的病毒滴度达2.0×1011 pfu/mL.建立荷人乳腺癌的裸鼠动物模型,随机分为4组,每组5只.Ⅰ组:注射重组腺病毒Ad-KDRP-CD/TK与前药5-氟胞嘧啶(5-FC)和更昔洛韦(GCV);Ⅱ组:仅注射前药5-FC、GCV;Ⅲ组:仅注射重组腺病毒Ad-KDRP-CD/TK;Ⅳ组:空白对照,不施加任何处理.观察各治疗组的治疗效果,微血管密度计数(MVD)分析该系统对乳腺癌血管形成的影响,用RT-PCR法检测各组的肿瘤组织内CD/TK融合基因的表达.结果 Ⅰ组裸鼠移植瘤的生长明显受到抑制,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肿瘤迅速生长.MVD:Ⅰ组为(2.60±1.14),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别为(13.20±2.16)、(16.00± 1.58)、(16.80±1.92).Ⅰ组MVD显著低于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,差异均有统计学意义(P＜0.01),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间差异无统计学意义(均P＞0.05).RT-PCR检测发现转染Ad-KDRP-CD/TK的肿瘤细胞有融合基因CD/TK的表达.结论 Ad-KDRP-CD/TK联合前药5-FC及GCV在体内可明显抑制裸鼠乳腺癌血管形成和肿瘤生长.     

烫伤小鼠供体皮肤特异性延长成活研究

目的：以烧伤小鼠为模型研究供体皮肤特异性延长成活的可行性。方法：C57BL/6小鼠造成20％TBSAⅢ度烧伤创面,48h后切痂,移植BALB/c或C3H/He小鼠皮肤,经60Co射线全身照射9Gy,立即注射无T淋巴细胞的C57BL/6小鼠和BALB/c小鼠的骨髓细胞。组Ⅰ为烧伤的C57BL/6小鼠移植BALB/c小鼠皮肤;组Ⅱ在组Ⅰ基础上行放射处理;组Ⅲ在组Ⅱ基础上行混合骨髓移植;组Ⅳ类似组Ⅲ,但移植的皮肤为C3H/He;组Ⅴ为C57BL/6小鼠同系皮肤移植对照组。结果：除组Ⅱ小鼠由于骨髓耗竭而全部死亡外,其他各组间动物死亡率无差异,未见移植物抗宿主病表现。异体皮平均成活时间组Ⅰ为(8.4±1.5)d;组Ⅱ(17.5±3.7)d;组Ⅳ(32.5±8.1)d;组Ⅲ为(78.2±5.6)d,与组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅳ比较P<0.05;组Ⅴ90d。结论：C57BL/6小鼠对BALB/c小鼠皮肤显示了特异性移植耐受,而排斥MHC不相关的C3H/He的小鼠皮肤。本研究也为进一步的临床基础研究奠定了基础。     

胶质瘤最小表观扩散系数值与Ki-67表达的相关性

目的 探讨胶质瘤最小表观扩散系数(minADC)值与Ki-67标记指数的相关性.方法 回顾性分析2009-2012年上海交通大学附属胸科医院和复旦大学附属华山医院78例经病理证实的胶质瘤患者常规MRI及DWI资料,ADC图上测量肿瘤组织minADC值.术后应用免疫组化检查测定Ki-67标记指数.结果进行统计学分析.结果 78例胶质瘤患者中,Ⅱ级28例、Ⅲ级21例、Ⅳ级29例.Ⅱ级胶质瘤组肿瘤平均minADC值[(1.23±0.23)×10-3 mm2/s]高于Ⅲ级组肿瘤平均minADC值[(0.92±0.20)×10-3 mm2/s] (P＜0.01)、也高于Ⅳ级组肿瘤平均minADC值[(0.80±0.16)×10-3 mm2/s] (P ＜0.01),但Ⅲ级与Ⅳ级组肿瘤平均minADC值差异无统计学意义(P =0.069).肿瘤minADC值与胶质瘤级别呈负相关(r=-0.678,P＜0.01).Ki-67标记指数在Ⅱ级(3.6％±2.3％)、Ⅲ级(14.8％±7.3％)、Ⅳ级胶质瘤(29.9％±l3.1％)之间差异均有统计学意义(均P＜0.01),且与级别呈正相关(r =0.835,P＜0.01).肿瘤minADC值与Ki-67指数呈负相关(r=-0.556,P＜0.01).结论 肿瘤minADC值有助于胶质瘤分级诊断.     

18F-FDG对于乳腺癌模型小鼠治疗作用的研究

[目的]探讨18氟-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)诱导乳腺癌细胞的凋亡作用及分子机制。[方法]使用0～7.4×106Bq/mL18F-FDG作用于体外培养乳腺癌细胞MCF-7,应用γ高能计数仪测定细胞摄取射线量;接种MCF-7细胞至24只雌性裸鼠腋下构建小鼠乳腺癌模型,成瘤后分别由尾静脉注射生理盐水、3.7 MBq、11.1 MBq和37 MBq18F-FDG,观察肿瘤生长情况,Micro-animal PET进行瘤体显像;Western Blot方法检测肿瘤瘤体凋亡相关蛋白BCL-2及cleaved CASPASE-3表达情况。[结果]体外MCF-7细胞摄取实验表明,在一定剂量范围内,随着射线剂量的增加,对数生长期的MCF-7细胞摄取射线剂量基本呈线性增长;治疗后,各治疗组小鼠肿瘤体积增长速度明显放缓,而高剂量组(11.1 MBq与37 MBq)较低剂量组(3.7 MBq)显示出更低的增长速度。Micro-an-imal PET显示荷瘤裸鼠的肿瘤部位可见18F-FDG浓聚,治疗组浓聚程度低于对照组,且随着治疗剂量增加,浓聚程度亦随之降低。Western Blot结果显示注射18F-FDG后,荷瘤裸鼠瘤体cleaved CASPASE-3相对表达量各治疗组(37 MBq、11.1 MBq、3.7 MBq18F-FDG)分别为4.935±1.521、5.560±1.459及2.138±0.844,均高于对照组的0.019±0.049(P<0.05或P<0.01),尽管在11.1 MBq剂量组与37 MBq剂量组间表达差异无显著性意义(P>0.05),但两组均高于3.7 MBq剂量组(P<0.05);BCL-2蛋白相对表达量分别为1.489±0.691、1.929±0.949、3.421±1.554,均低于对照组的5.143±1.813(P<0.05或P<0.01),尽管11.1 MBq剂量组与37 MBq剂量组间差异无显著性意义(P>0.05),但两组均低于3.7 MBq剂量组(P<0.05)。[结论]18F-FDG在适量情况下,能下调肿瘤BCL-2蛋白的表达和激活CASPASE-3表达诱导乳腺癌细胞凋亡。