聚丙烯酰胺凝胶电泳研究猪血清蛋白硫酸铵分级盐析

本文通过聚丙烯酰胺凝胶电泳研究了盐析时各种猪血清蛋白溶解度与硫酸铵饱和度的关系,结果显示猪血清蛋白析出区间为25%～70%硫酸铵饱和度,各种猪血清蛋白具有各自的沉淀区间。10倍稀释猪血清白蛋白最佳硫酸铵沉淀方案为:pH值7.4,调节硫酸铵饱和度到50%,离心除去沉淀,调清液pH值至4.5,硫酸铵饱和度至55%,沉淀白蛋白。pH值7.4,35%饱和度硫酸铵沉淀猪血清时,IgG得率为69.5%,纯度为76%;40%饱和度时,IgG得率为91.8%,纯度为61.6%。     

硫酸铵盐析羔羊皱胃酶条件的研究

以羔羊皱胃为原料,研究了硫酸铵盐析法盐析羔羊皱胃酶的工艺条件,系统分析了硫酸铵饱和度、pH、盐析温度以及盐析时间对羔羊皱胃酶盐析效果的影响.结果表明,当硫酸铵饱和度为95%,盐析pH为4.60,盐析温度为4℃,盐析时问为14h时,羔羊皱胃酶盐析效果最好,酶活性回收率为92.86%.     

聚丙烯酰胺凝胶电泳研究硫酸铵盐析分离猪血清IgG

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对硫酸铵盐析分离猪血清G型免疫球蛋白进行了研究，结果显示pH值7．4时，猪血清IgG主要沉淀区间为硫酸铵饱和度25-40％，10倍稀释猪血清IgG最佳硫酸铵沉淀参数为：pH值7．4，硫酸铵饱和度37％，此时IgG得率为80．5％，纯度为72．9％。沉淀的血清蛋白中还含有约12％白蛋白和9％其它γ-球蛋白。沉淀时IgG活性保持不变。     

八种小杂鱼肝胰脏中马尾藻多糖降解酶的分离纯化研究

以南海海域的部分小杂鱼肝胰脏为原料,经磷酸盐缓冲液抽提,硫酸铵分级沉淀,SephadexG-100凝胶柱层析纯化来制备马尾藻多糖降解酶。系统的分析了硫酸铵饱和度、pH、盐析温度以及盐析时间对盐析效果的影响。结果表明:当硫酸铵饱和度为80%、盐析pH为5.5、盐析温度为45℃、盐析时间为3h时盐析效果最好。经SephadexG-100柱层析纯化后比活力达到126.72U/mg,提纯倍数达8.45倍,回收率为32.26%。     

牛血清中免疫球蛋白的提取研究

免疫球蛋白是生物体内一种重要的免疫活性物质,对生物体的多种器官和系统有重要影响。该试验采用40%饱和度硫酸铵盐析法、超滤法及盐析-超滤结合法,对牛血清免疫球蛋白进行分离提取,得到免疫球蛋白的粗提物。通过对三种方法的提取率和产品回收率的比较,确定采用盐析-超滤结合法提取效果最佳,其提取率为9.378mg/ml,产品回收率为91%,是一种适合于血清中免疫球蛋白粗提的有效方法。并确定盐析-超滤结合法的最佳试验条件如下:PBS缓冲液pH值为7.4;血清-PBS缓冲液比例为1:1。     

响应面优化盐析法姬松茸多糖脱蛋白研究

目的:探讨盐析法对姬松茸多糖脱蛋白的最佳工艺。方法:采用盐析法对姬松茸多糖脱蛋白,探讨在磁力搅拌器的影响下,其盐析温度、盐析转数、盐析时间及硫酸铵粉末饱和度对蛋白脱除率和多糖回收率的影响,以单因素实验为基础,通过响应曲面分析确定最佳工艺。结果:各因素对姬松茸多糖蛋白脱除率和多糖回收率的影响由大到小依次为:盐析温度盐析转数盐析时间。最佳工艺为:盐析温度为51℃,盐析转数为660 r/min,盐析时间为31 min,硫酸铵粉末饱和度为20%时,蛋白脱除率和多糖回收率分别为80.29%和79.59%。结论:盐析法可安全便捷、快速有效地脱除姬松茸多糖中的蛋白,同时能够得到较高的蛋白脱除率和多糖回收率。     

响应曲面法优化卵白蛋白提取条件研究

以鸡蛋清为原料,采用饱和硫酸铵盐析和pH值调节相结合的方法对卵白蛋白进行提取。在饱和硫酸铵溶液浓度、提取液pH、提取温度、提取时间等单因素试验基础上,采用响应曲面法对卵白蛋白进行提取条件研究。结果表明,卵白蛋白的最佳提取条件为:饱和硫酸铵溶液浓度61%、pH4.6、提取时间124 min、提取温度52℃时,卵白蛋白的提取率为82.14%,纯度达90.12%。     

盐析法从牛初乳中提取IGF-1的工艺条件研究

目的:用盐析法从牛初乳中提取IGF-1,确定最佳盐析饱和度。方法:以新鲜牛初乳为原料,调脱脂乳等电点至4.2完全除去酪蛋白,收集乳清后选择不同饱和度硫酸铵盐析,SDS-PAGE、ELISA方法确定最佳盐析饱和度。结果:制备牛初乳IGF-1硫酸铵盐析饱和度为35%,产品回收率为75.338%,纯度为16.694×10-3%。结论:硫酸铵盐析制备IGF-1效率高,成本低,35%饱和度盐析时为最佳制备IGF-1的饱和度。     

多聚磷酸盐在猪血清IgG分离纯化中的应用

本实验对多聚磷酸盐分离纯化猪血清IgG进行了研究,其最佳工艺参数为:多聚磷酸盐浓度0.1%(W/V), pH值3.9,反应温度45℃;所得IgG的回收率与纯度分别为60.9%和 64.5%,活性保留率为87.3%.多聚磷酸盐分离纯化猪血清IgG技术适于食品用IgG的工业化生产.     

猪血中IgG的分离、纯化放大试验工艺研究

介绍以放大的盐析法从猪血中提取IgG。通过正交试验,结合721分光光度计吸光率测定与电泳分析,确定最佳工艺条件为:pH7.0～7.3,温度40℃,盐析时间1h,搅拌转速40r/min。盐析沉淀采用PBS液错流管渗析脱NH4 及部分杂质,再作超滤设备选型、工艺流程设计、工艺条件正交试验,获浓缩液,冷冻干燥,测得IgG(纯度≥95%)收得率1.16%,为工业化生产推广探索工艺及操作参数。     

头蛋白质分离及抗肿瘤作用的研究

利用Tris-HCl(pH7.5,100mmol/L)提取藠头总蛋白质,用不同饱和度硫酸铵盐析沉淀,检测饱和硫酸铵盐析后藠头蛋白质对小鼠B16黑色素瘤细胞和Meth-A细胞的抑制作用。结果表明:20%～80%饱和硫酸铵盐析制备的藠头蛋白质对白色念球菌、小鼠黑色素瘤细胞的生长均有明显的细胞毒效应,其中80%饱和硫酸铵盐析制备藠头总蛋白质抗菌抗肿瘤活性最为明显。藠头蛋白质经液相色谱-质谱(LC-MS)检测,其主要成分为凝集素、热休克蛋白、蒜氨酸酶、半胱氨酸合酶和肿瘤坏死因子受体蛋白等物质。     

雪梨果肉多酚氧化酶的活性研究与纯化

以雪梨果实为试材,通过以邻苯二酚为底物测定氧化产物的方法,测定温度、pH值、抑制剂、不同成熟期及不同部位对PPO活性的影响。结果表明:最适pH值为6.4;最适温度为25℃;不同成熟期PPO的活性不同;1mol/L的亚硫酸钠为较好的抑制剂;果肉内部PPO活性最高,果肉中部的PPO活性最低。粗提液又经30%硫酸铵沉淀去杂和80%饱和度硫酸铵析出、Sephadex-G200柱层析及HiPrepTM16/10QXL离子柱层析,得到电泳均一的PPO,分子量43kD。     

氯化钠盐析分离发酵液中的乳链菌肽工艺研究

盐析是从发酵液中分离乳链菌肽过程中的重要单元操作.本文研究了影响氯化钠盐析分离发酵液中的乳链菌肽的因素,根据乳链菌肽的生物活性单位效价,确定的最佳工艺为:加氯化钠盐量为60%的饱和度,pH3.5,温度40℃,盐析时间1.5h,乳链菌肽的收率达到94.75%.     

盐析法提取柚子皮果胶工艺的研究

研究了用盐析法从柚皮中提取果胶的工艺条件。结果表明,盐析法提取柚皮果胶的最佳工艺条件为提取液pH值1.5,提取温度90℃,提取时间50min,料液比1∶25（g∶mL）,饱和明矾溶液与水解液体积比1∶1,盐析温度60℃,盐析时间50min,盐析pH值4.0。在此工艺条件下,果胶得率为18%。     

硫酸铵盐析法分步分离大蒜500和蒜氨酸酶的研究

为从大蒜中获得SOD和蒜氨酸酶两种产品,以酶活力和蛋白质含量为指标,确定分步盐析法提取SOD和蒜氨酸酶的硫酸铵饱和度.以40%和90%为分步盐析的最佳硫酸铵饱和点,结果表明,分步盐析法可以从大蒜中获得SOD和蒜氨酸酶两种产品.     

植物胆碱酯酶提取纯化方法研究

比较了几个小麦品种中胆碱酯酶的活性，筛选出“辽春10号”小麦品种为胆碱酯酶制备适宜的酶源。以“辽春10号”小麦为试材，测试分析了提取液种类、用量及其pH值，过滤方式和离心分离条件等对粗酶液胆碱酯酶活性的影响；研究了胆碱酯酶的硫酸铵最大盐溶、盐析饱和度，以及硫酸铵分段盐析、透析和凝胶柱层析对胆碱酯酶纯化效果的影响，确定了胆碱酯酶提取纯化方法。     

猪血蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)的提取、纯化

以猪血为原料,采用丙酮沉淀、硫酸铵分级盐溶盐析、透析及反渗透等方法使之部分纯化,并对其性质进行研究。结果表明,硫酸铵分级盐溶盐析和透析相结合的方法纯化后的PTP1B酶活力明显提高,其中70%透析酶的比活力为434.5 U/mg,高于60%(402.1 U/mg)和80%(154.7 U/mg)时的比活力,是粗酶比活力的3.36倍,可作为试验用酶。纯化后的蛋白酪氨酸磷酸酶K_m为4.25 mmol/L。在35～42℃温度范围内保持较高的活力,其最适温度为37℃;在pH 5.50～7.67范围内保持较高的活力,其最适pH为7.20。反应速度与酶量、底物浓度的关系均符合酶促反应动力学。     

不同沉淀方法分离甘薯β-淀粉酶的研究

研究盐析法、有机溶剂沉淀法分离甘薯β- 淀粉酶的工艺条件,分析盐析饱和度、有机溶剂体积比和溶液pH 值对回收率及提纯倍数的影响。结果表明：硫酸铵饱和度在70% 时,酶活性回收率达到78.1%,提纯1.56倍;乙醇体积比4:1 时,酶活性回收率达到76.8%,提纯2.61 倍;当溶液pH4.5～5.0、丙酮体积比3:1 时,酶活性回收率可达到90.66%,提纯了3.29 倍,此条件下β- 淀粉酶分离效果最佳。     

法尔凯干酵母乙醛脱氢酶的提取和纯化研究

应用硫酸铵分级盐析、热沉淀及双水相萃取方法提取并纯化了法尔凯干酵母胞浆内的乙醛脱氢酶(ALDH).结果表明,粗酶液经过硫酸铵分级盐析、热沉淀和2次双水相萃取后得到的ALDH酶液,比活性为0.14,纯化倍数为3.5,回收率为58 %;酶的最适pH为7.5,最适反应温度为35～40 ℃,以乙醛为底物的Km值为6.9×10-3 mol/L, K+离子为激活剂,Zn2+离子为抑制剂.     

利用猪血粉制备多肽的工艺研究

以猪血粉为原料,探讨了脱色、脱盐和超滤工艺对制备猪血多肽的影响。结果表明,猪血粉酶解液脱色处理的优化工艺参数为:粉末活性炭用量2.0%,pH5.0,脱色温度50℃,脱色时间1.5 h。脱色后的猪血粉酶解液经离子交换树脂层析除盐的最佳流速为10倍柱体积/h。经过超滤分离,得到了4个分子质量段的猪血多肽,74.76%的肽集中于1～5 ku。