胰岛素样生长因子-2对大鼠坐骨神经横断性损伤后再生修复的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子-2(IGF-2)对大鼠坐骨神经横断性损伤后再生修复的影响.方法 构建大鼠右侧坐骨神经横断损伤模型,并行手术修复损伤.将40只Wistar雄性成年大鼠随机分为空白组、生理盐水组、IGF-2组、地塞米松组,术后2、4、6、8、12周分别采用足印实验检测坐骨神经功能指数;术后12周进行大鼠手术侧肌肉湿质量比检测,截取缝合端坐骨神经,进行HE染色及组织形态学观察.结果 术后IGF-2组SFI值明显高于空白组和生理盐水组(P<0.05);术后2、4、6周,3个测定时间点IGF-2组SFI值低于地塞米松组(P<0.05),8、12周,两个测定时间点IGF-2组与地塞米松组SFI值差异无统计学意义(P>0.05).IGF-2组较空白组与生理盐水组肌湿质量比明显增高(P<0.05),IGF-2组与地塞米松组肌湿质量比差异无统计学意义(P>0.05).HE染色显示:IGF-2组较空白组及生理盐水组损伤修复后瘢痕组织少,神经鞘修复良好.结论 IGF-2对于大鼠坐骨神经横断性损伤后的再生与修复有一定的促进作用.     

绒毛膜促性腺激素刺激对多囊卵巢综合征患者血管活性因子的影响

探讨促排卵治疗对多囊卵巢综合症(PCOS)患者血管活性因子血管紧张素-Ⅱ(AT-Ⅱ)、白介素-6(IL-6)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的影响.21例PCOS患者与8例正常女性在自然或人工月经周期的第2 d卵泡期进行绒毛膜促性腺激素(HCG)促排卵,于试验前及试验后3、6、12、18、24 h静脉取血,放免法测定血清AT-ⅡI、L-6I、GF-1浓度.HCG刺激后PCOS组的血清AI-Ⅱ水平在各取血时点均升高,但只有3 h取血点是显著升高(P<0.05).PCOS组HCG刺激后各时点的血清AI-Ⅱ水平均高于对照组,也只有3 h取血点是显著高于对照组.血清IL-6及IGF-1水平在试验前后各时间点间差异均无显著性.结果提示HCG刺激促进PCOS患者外周血AT-Ⅱ水平升高.     

1～4岁脑瘫患儿血清GH,IGF-1水平与身心发育的相关性分析

目的探讨1~4岁脑瘫患儿血清生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与身心发育的相关性.方法选取1~4岁脑瘫患儿142例,按体格发育情况分为脑瘫伴发育迟缓组(Cp-R)100例、脑瘫发育正常组(Cp-N)42例;按粗大运动功能分类系统分为运动功能轻度障碍Ⅰ~Ⅱ级组(Cp-GⅠ~Ⅱ)40例、中重度障碍Ⅲ~Ⅴ级组(Cp-GⅢ~Ⅴ)102例;根据美国婴幼儿发展评估量表-Ⅲ中的智力发育评估指数分为脑瘫伴智力低下组112例、脑瘫不伴智力低下组30例,选取同期健康体检的同年龄段儿童30例为对照组.检测各组儿童GH、IGF-1、胰岛素样生长因子结合蛋白-3水平.结果 Cp-R组GH峰值和IGF-1均明显低于Cp-N组,差异具有统计学意义(P0.05);Cp-N组和Cp-R组GH峰值、IGF-1均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05).GH基础值和胰岛素样生长因子结合蛋白-3在各组间差异无统计学意义(P0.05).Cp-GⅢ~Ⅴ组GH峰值、IGF-1值均明显低于Cp-GⅠ~Ⅱ组,差异具有统计学意义(P0.05);Cp-GⅢ~Ⅴ组和Cp-GⅢ~Ⅴ组GH峰值、IGF-1值均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05).脑瘫伴智力低下组IGF-1值明显低于脑瘫不伴智力低下组和对照组,差异具有统计学意义(P0.05);脑瘫伴智力低下组和脑瘫不伴智力低下组GH峰值明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05).结论 GH,IGF-1水平低下会导致脑瘫患儿运动伴认知功能发育迟缓,GH/IGF-1轴受损是其可能机制.     

TGF-β1在人前列腺上皮细胞炎症过程中的表达机制及意义

目的:探讨炎症刺激诱导人前列腺上皮细胞中转化生长因子(TGF-β1)的表达水平,分析其影响机制及意义.方法:采用脂多糖诱导处理人前列腺上皮P69细胞构建炎症细胞模型,体外培养正常P69细胞(对照组)和炎症细胞(实验组)至对数生长期,运用酶联免疫法检测两组细胞中白细胞介素-6(IL-6)、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的质量浓度.分别利用qPCR法和Western Blot法检测两组细胞中c-Myb和TGF-β1的mRNA表达和蛋白定量水平;应用Real time PCR测定两组细胞中hsa-miR-150的表达;采用hsa-miR-150-mimic和hsa-miR-150-inhibitor分别处理两组细胞,qPCR法和免疫荧光法观察c-Myb及TGF-β1的表达水平改变;采用c-Myb抑制剂处理后,观察两组细胞中TGF-β1的表达程度.结果:实验组IL-6、IL-10和TNF-α水平均较对照组明显升高(P0.05),表明P69炎症细胞模型构建成功.实验组c-Myb和TGF-β1的蛋白表达水平较对照组增强;基线状态下实验组细胞hsa-miR-150、c-Myb和TGF-β1的mRNA表达水平均高于对照组(P0.05);hsa-miR-150-mimic处理后,实验组hsa-miR-150、c-Myb和TGF-β1的mRNA表达水平与处理前比较无统计学差异(P0.05),对照组hsa-miR-150、c-Myb和TGF-β1的mRNA表达水平较处理前水平升高(P0.05),免疫荧光显示对照组c-Myb和TGF-β1的蛋白表达水平均高于实验组;hsa-miR-150-inhibitor处理后,实验组hsa-miR-150、c-Myb和TGF-β1水平较处理前明显降低(P0.05),对照组hsa-miR-150、c-Myb和TGF-β1的mRNA表达水平与处理前比较无统计学差异(P0.05),处理后两组间hsa-miR-150的mRNA表达结果比较无统计学差异(P0.05),而两组间c-Myb和TGF-β1的mRNA表达水平分别比较均具有统计学差异(P0.05),免疫荧光显示对照组c-Myb和TGF-β1的蛋白表达水平均低于实验组;c-Myb-inhibitor抑制处理前,两组细胞TGF-β1的mRNA表达水平存在显著性统计学差异(P0.05);处理后,实验组TGF-β1的mRNA表达水平较处理前出现降低,对照组表达水平与处理前比较无统计学差异;两组间表达水平存在统计学差异(P0.05),实验组较对照组表达水平高.结论:人前列腺上皮细胞在炎症刺激下可引起hsa-miR-150表达升高,进而激活下游靶向因子c-Myb,最终诱导TGF-β1表达升高.     

维生素D受体蛋白及其mRNA在人输卵管黏膜上皮的表达

目的:探讨人输卵管黏膜上皮维生素D受体(VDR)蛋白及其mRNA的表达.方法:30例输卵管标本取自具有正常妊娠生育史,因子宫肌瘤、子宫腺肌病等行腹式子宫切除术,一并切除输卵管的妇女.输卵管取材包括峡部、壶腹部和伞部,按子宫内膜组织学分期分为增生早期组6例、增生中晚期组9例、分泌早期组7例、分泌中晚期组8例.应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应法检测人输卵管黏膜上皮VDR的表达.结果:人输卵管黏膜上皮中检测到VDR蛋白及其mRNA表达.VDR蛋白主要表达于输卵管上皮细胞的细胞核中,部分间质平滑肌细胞核内亦有表达.相同时期各不同部位输卵管上皮细胞VDR蛋白表达无明显差别(P＞0.05),随月经周期变化,各不同部位输卵管上皮细胞VDB蛋白表达发生改变,在增生早期和分泌中晚期较低,与之比较,在增生中晚期和分泌早期其表达明显增高(P＜0.01),至分泌早期达最高值;壶腹部输卵管黏膜上皮组织VDR mRNA表达在增生早期和分泌中晚期较低,在增生中晚期和分泌早期明显增高(P＜0.01).结论:人输卵管黏膜上皮组织存在VDR蛋白及其mRNA表达,在增生中晚期和分泌早期其表达明显增高,且具有周期性变化.     

2型糖尿病患者胰岛素样生长因子1水平及相关影响因素

为了探讨2型糖尿病(T2D)患者外周血血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平与糖脂代谢水平的关系,分析T2D患者血清IGF-1的相关影响因素。通过选取2010年5月～2012年1月就诊于内蒙古医科大学附属医院、内蒙古中医院内分泌科的179例T2D住院患者作为病例组(T2D组),另选取30例内蒙古医科大学体检中心正常健康体检者作为对照组(CK组)。采集研究对象空腹外周血,应用ELISA法检测血清IGF-1水平;检测T2D患者生化血脂指标和糖代谢指标水平,利用调查问卷收集研究对象的一般资料、行为习惯和体格检查,计算体质指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感性指数(HOMA-IS)。将T2D组患者IGF-1水平按照第25、75百分位数分为低IGF-1水平组(B组)、中IGF-1水平组(C组)和高IGF-1水平组(D组),CK组为对照组(A组)进行比较的方法,研究IGF-1水平与以上指标的相关性。结果表明:T2D组与CK组IGF-1水平差异显著(P 0. 01)。A组、B组、C组和D组比较中,年龄、性别、吸烟史、饮酒史、运动情况及BMI差异显著(P 0. 05);空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2PPBS)和糖化血红蛋白(Hb Alc)差异有统计学意义;三组载脂蛋白A(Apoal)均与对照组差异显著,D组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与A组相比差异有统计学意义。相关性分析显示,血清IGF-1水平与运动情况(Spearman铁相关系数为0. 23,P=0. 001)存在关联。以IGF-1浓度为因变量的多因素Logistic回归分析中,血清IGF-1水平与胰岛素敏感性、年龄、BMI和Apoal、FPG、空腹胰岛素(FINS)及Hb Alc的交互作用正相关,与HDL-C负相关。可见胰岛素敏感性、年龄、BMI及Apoal、FPG、FINS与Hb Alc的交互作用可能为IGF-1水平的独立危险因素,HDL-C可能为独立保护因素。     

脑组织特异性表达胰岛素样生长因子-1转基因小鼠制备

目的制备脑组织特异性表达胰岛素样生长因子-1(Insulin-Like Growth Factors 1,IGF-1)转基因小鼠。方法采用精子为载体法进行基因转导,出生后小鼠PCR检测,建立转基因小鼠系,用Western blot和免疫荧光法分别检测转基因小鼠海马齿状回亚粒状区(subgranular zone,SGZ)IGF-1表达量和报告基因EGFP阳性细胞数。结果获得3只阳性小鼠,2只外源基因能稳定遗传,并建立了转基因小鼠系,转基因鼠SGZ区域IGF-1表达量显著高于正常鼠,EGFP也在此区域表达。结论成功制备IGF-1转基因小鼠。     

围产窒息儿血清类胰岛素样生长因子－1水平变化及意义

目的 :了解围产窒息存活儿血清类胰岛素样生长因子 - 1(IGF - 1)水平变化规律 ,探讨其与缺氧缺血性脑病的关系。方法 :以围产窒息的足月存活儿为对象 ,根据缺氧缺血性脑病程度分为轻度组和中重度组 ,并以正常足月儿为对照 ,于生后 3d内 (急性期 )和 (14± 3)d(恢复期 )采外周静脉血 ,采取双抗体不平衡的放射免疫分析法进行测定。结果 :围产窒息 (轻、中重度 )存活儿生后 3d内 (急性期 )IGF - 1的含量水平与正常对照组差异无显著性 ,而生后 (14± 3)d(恢复期 )IGF -1明显升高 ,显著高于正常对照组 ,且中重度缺氧缺血性脑病组较轻度组升高更加显著。结论 :IGF- 1在围产期窒息脑损伤修复过程中起重要作用。     

人胃癌组织中FAP-1的表达及意义

为了探讨FAP-1在胃癌中的表达与细胞增殖和凋亡的关系及其临床意义,采用免疫组化SP法检测40例胃癌、20例胃良性肿瘤及10例正常胃粘膜组织中:FAP-1蛋白的表达水平。结果表明FAP-1蛋白的阳性表达主要定位在细胞浆内,少数也可见于核周。FAP-1蛋白在正常胃粘膜组织中呈阴性表达,胃良性肿瘤中的表达率为20%(4/20),胃癌中的阳性表达率70%(28/40),与前两者相比差异有显著性(P<0.01),而对照组与胃良性肿瘤组无显著性差异(P>0.05)。FAP-1的表达与胃癌的病理分化相关,而与年龄、性别、肿块大小、转移性无明显相关性。     

胰岛素样生长因子及其受体在绵羊早期胚胎的表达

旨在研究IGFs及其受体（IGFR）在绵羊卵母细胞和早期胚胎中的表达．对绵羊进行超数排卵处理，手术法采卵得到卵母细胞和着床前早期胚胎，结合荧光免疫染色方法和激光共聚焦成像系统，研究了绵羊未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞和着床前各期胚胎中IGF—Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGF—ⅠR、IGF—ⅡR的表达情况．结果表明，IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ在未成熟卵母细胞和成熟卵母细胞中均有表达;受精后，直到囊胚的整个早期发育阶段也检测到了这两个因子的表达，且胚胎免疫染色在各卵裂球之间呈现不均匀的分布．IGF—ⅠR和IGF—ⅡR在未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞和早期胚胎均有表达，在胚胎期主要分布于卵裂球细胞的顶端（apical surface），而在囊胚阶段主要在滋胚层细胞中表达，内细胞团没有表达．     

IGF-1对绵羊皮肤中GHR、IGF-1、IGF-1R、kAP3.2和KAP6-1基因表达的影响

选取36只健康、体况一致的新疆细毛羊随机分成6组。在每只羊的左侧肩胛部皮下局部注射0．5mL（10ng／mL）的IGF-1,右侧肩胛部皮肤为未注射IGF-1的对照组,然后分别于第0、3、6、9、12、50d采集各皮肤样品,用反转录多聚酶链式反应（RT-PCR）方法,定量分析绵羊皮肤中生长激素受体（GHR）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）和胰岛素样生长因子1型受体（IGF-1R）、角蛋白关联蛋白KAP3．2和KAP6-1mRNA的相对丰度。试验结果表明,IGF-1对GHR基因的表达有下调的作用,对IGF-1、IGF-1R基因的表达没有显著的影响,而对KAP3．2、KAP6—1基因的表达具有显著的促进作用。说明IGF-1促进绵羊角蛋白关联蛋白基因的表达可能是通过生长轴以外的其他途径实现的。     

IGF-1 receptor regulates lifespan and resistance to oxidative stress in mice

Studies in invertebrates have led to the identification of a number of genes that regulate lifespan, some of which encode components of the insulin or insulin-like signalling pathways. Examples include the related tyrosine kinase receptors InR (Drosophila melanogaster) and DAF-2 (Caenorhabditis elegans) that are homologues of the mammalian insulin-like growth factor type 1 receptor (IGF-1R). To investigate whether IGF-1R also controls longevity in mammals, we inactivated the IGF-1R gene in mice (Igf1r). Here, using heterozygous knockout mice because null mutants are not viable, we report that Igf1r(+/-) mice live on average 26% longer than their wild-type littermates (P < 0.02). Female Igf1r(+/-) mice live 33% longer than wild-type females (P < 0.001), whereas the equivalent male mice show an increase in lifespan of 16%, which is not statistically significant. Long-lived Igf1r(+/-) mice do not develop dwarfism, their energy metabolism is normal, and their nutrient uptake, physical activity, fertility and reproduction are unaffected. The Igf1r(+/-) mice display greater resistance to oxidative stress, a known determinant of ageing. These results indicate that the IGF-1 receptor may be a central regulator of mammalian lifespan.     

玫瑰冠鸡IGF-1基因多态性与早期生长速度关系研究

以玫瑰冠类群鸡(玫瑰冠鸡)为材料,采用PCR-RFLP法检测了IGF-1基因5’调控区DNA序列多态性,并运用线性模型统计方法分析了多态性与初生重和12周龄体重的关系。结果显示:玫瑰冠鸡IGF-1基因5’调控区自然存在两种不同DNA序列,经PstI酶切后出现3种基因型("-/-"、"-/ "、" / "),基因型分布符合哈代-温伯格定律。各基因型个体的初生重、12周龄体重的最小二乘均存在"-/-">" /-">" / "的趋势,且"-/-"型个体的12周龄体重显著高于" / "型个体(P<0.05)。     

Alternative splicing and expression of the insulin-like growth factor （IGF-1） gene in osteoblasts under mechanical stretch

Insulin-like growth factor 1 (IGF-1) promotes osteoblasts differentiation and bone formation, and its expression is induced by mechanical stretch, thus IGF-1 has been considered an effector molecule that links mechanical stimulation and local tissue responses. In this study, a mechanical stretching device was designed to apply physiological level static or cyclic stretching stimulation to osteoblasts. Different isoforms of IGF-1 mRNA were amplified by RT-PCR from the cells using respective primers and these amplified products were sequenced. An iso-form of IGF-1 splicing product was found to be selectively produced by osteoblasts under stretching stimulation. This IGF-1 isoform had identical sequence with the mechano growth factor (MGF) which was originally identified in muscle cells. Regulations of the expression of the liver-type IGF (L.IGF-1) and MGF in osteoblasts under stretch stimulation were further studied using semi-quantitative RT-PCR. Stretch stimulation was found to promot the expression of IGF-1 (L.IGF-1 and MGF), and for both isoforms expression was more effectively stimulated by cyclic stretch than static stretch. MGF was detected only in osteoblasts subjected to mechanical stretch, suggesting MGF was a stretch sensitive growth factor. Expression of MGF peaked earlier than that of L.IGF-1, which was similar to their regulation in muscle and suggested similar roles of MGF and L.IGF-1 in bone as in muscle cells. The functions of MGF and LIGF-1 in osteoblasts shall be established by further experimental studies.     

缺氧缺血性脑损伤新生猪血清IGF-1和IGFBP-3的改变以及脑皮质细胞凋亡的研究

研究缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生猪血清IGF－1和IGFBP－3的变化趋势和脑皮质细胞凋亡的程度，探讨缺氧缺血性脑损伤的发病机理，将3日龄新生猪随机分为对照组和HIBD组，在HIBD后1，24，48和72h采集静脉血，采用免疫放射法测定IGF－1和IGFBP－3血清水平，应用流式细胞术对新生猪HIBD脑皮质细胞凋亡进行定量分析，HIBD后72h血清IGF－1和IGFBP－3水平明显低于对照组，HIBD后72h血清IGF－1值显著低于HIBD后1，24和48h组，HIBD后72h血清IGFBP－3水平明显低于HIBD后48h组，而脑皮质细胞凋亡百分率在HIBD后72h血清IGFBP－3水平明显低于HIBD后48h组，而被皮质细胞凋亡百分经在HIBD后72h明显高于对照组、HIBD后1，24和48h组，应用Logistic回归分析可知HIBD脑损伤后IGF－1和IGFBP－3与脑细胞凋亡百分率具有非线性相关关系，HIBD后72hIGF-1少IGFBP－3明显下降，这可能与组织对IGF－1的需求增加，IGF－1的重新分布，生长激素轴的中枢性抑制以及神经元的凋亡有关。