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相似文献
 共查询到18条相似文献,搜索用时 109 毫秒
1.
乌头基因组DNA提取与RAPD反应体系优化   总被引:5,自引:0,他引:5  
采用改进方法提取乌头基因组DNA,建立乌头RAPD分析的PCR反应体系,成功地进行了RAPD扩增,筛选出乌头RAPD的最佳方案为:25μl反应体系中包括dNTPs 0.06 mmol·L-1,引物0.2μmol.μL-1,模板DNA40 ng,Taq酶1U,Mg2+ 4 mmol·L-1,10×buffer缓冲液2.5μl,其余部分为无菌超纯水。PCR扩增循环为95℃3 min,38 ℃1 min,72 ℃2min 1次循环;94 ℃=1 min,38℃1 min,72 ℃2 min,45次循环,最后72℃延伸10 min。  相似文献   

2.
果蝇基因组DNA的大规模提取及其RAPD-PCR反应条件的优化   总被引:14,自引:0,他引:14  
介绍了一种大规模提取高质量果蝇基因组DNA的方法,该法不需液氮研磨,不需匀浆转移,不需高速离心,全部操作在3个1.5μL离心管中完成,所以特别适用于对不同果蝇品系等多样本的大规模提取,以本法提取的DNA为模板建立了RAPD-PCR分析的最佳反应体系,获得了稳定而理想的扩增效果,特别适用于小型昆虫的群体遗传多样性研究。  相似文献   

3.
核桃DNA的提取及RAPD体系的优化   总被引:12,自引:0,他引:12  
采用CTAB法和改进的CTAB法,从叶片中提取核桃基因组DNA,比较其分离效果,结果表明:改进的CTAB法可有效去除细胞内多糖和多酚等杂质对模板DNA的污染,并以此为模板进行RAPD反应,对RAPD反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立适合于核桃的RAPD-PCR反应体系,以进行该树种的分子标记研究。  相似文献   

4.
葡萄属植物的基因组DNA提取及RAPD体系优化   总被引:8,自引:0,他引:8  
采用CTAB改良法提取葡萄属7种植物的基因组DNA,对其完整性进行了测定,并以此为模板进行RAPD反应,对RAPD反应体系的5个主要影响因子进行系统的初选与复选,获得了葡萄属植物的RAPD最优反应体系及扩增程序。  相似文献   

5.
大黄鱼基因组DNA的不同提取方法及RAPD扩增比较   总被引:3,自引:0,他引:3  
采用三种方法提取大黄鱼肌肉基因组DNA,并以所提取的DNA为模板进行RAPD分析比较。结果表明,与传统方法、高盐抽提法相比,星普法具有快速简便、所需样品量少,所提取的DNA质量高等特点。三种方法所得的DNA分子量大小都在20kb以上,且RAPD扩增条带基本一致。  相似文献   

6.
龙眼基因组DNA提取及RAPD反应体系优化的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
采用改良CTAB法提取龙眼幼叶基因组DNA,并以其为模板对影响RAPD扩增反应的主要因子采用单因素递进分析方法进行优化,建立了龙眼基因组DNA最佳RAPD反应体系,即在25μL的反应体积中,含20 ng模板, 1.0 U Taq DNA聚合酶,2.0 mmol/L MgCl2,各0.20 mmol/L dNTP,0.20μmol/L引物.  相似文献   

7.
玉米种子基因组DNA提取及RAPD分析   总被引:9,自引:0,他引:9  
采用了两种不同DNA提取方法(常规法及改进法)从玉米Zea mays种子的胚和胚乳中分别提取基因组。结果表明,在两种不同的提取方法中,改进法比常规法有提取的DNA纯度高、RNA含量少、DNA降解少等优点。无论从胚和胚乳中提取的DNA都可以满足RAPD的要求。为玉米RAPD,分子标记,品质鉴定等研究提供可行的依据。  相似文献   

8.
山药基因组DNA的提取和RAPD反应条件的优化   总被引:5,自引:0,他引:5  
研究了山药基因组DNA的提取方法;对Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶用量进行了优化,建立了最佳的RAPD反应体系:在25μL反应体系中Mg2+浓度为2.0 mmol.L-1,dNTPs浓度为0.25 mmol.L-1,引物浓度为20 pmol.L-1,Taq酶1.5 U,模板DNA为200 ng.扩增程序为:95℃预变性7 min;94℃变性30 s,36℃退火45 s,72℃延伸2 min,共35个循环;72℃终延伸10 min.  相似文献   

9.
适于RAPD分析的三种基因组DNA提取方法比较   总被引:7,自引:0,他引:7  
通过对 3种基因组DNA提取方法的实验比较 ,找到了一种既能够满足RAPD实验要求 ,又简便快捷、经济的基因组DNA提取方法 ,经RAPD试验检测与电泳结果分析表明 :DNA扩增效果良好  相似文献   

10.
青檀基因组DNA提取方法的优化   总被引:1,自引:0,他引:1  
以青檀(Pteroceltis tatarinowii Maxim.)的叶片为材料,采用改良高盐低pH值法、改良SDS法、改良CTAB法和试剂盒法4种不同方法提取其基因组DNA,并进行电泳分析、质量检测及ISSR引物扩增检测.结果表明,改良CTAB法优于其它方法,提取的DNA质量较好,纯度较高,能满足进一步的实验要求.  相似文献   

11.
外源植物激素对黄连种子后熟与萌发的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用正交设计及方差分析方法研宄外源植物激素CA3、NAA、6-BA对黄连种子胚率、裂口率、发芽率影响;结果表明胚率受三种激素共同影响,裂口率受到CA,和NAA的显著影响,发芽率受到NAA的显著影响。其中5号处理组合(CA3 5mg/L,NAA0.5mg/L,6-BA0.1mg/L)能显著提高胚率、裂口率及发芽率,是促进黄连种子后熟与萌发的最优激素组合。  相似文献   

12.
六种蝗虫基因组DNA多态性的RAPD标记研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
运用随机扩增多态 DNA技术对斑翅蝗科 Oedipodidae中三属六种蝗虫基因组DNA进行了多态性比较 ,共扩增出 2 2条特异性片断 ,分子量大小为 650~ 1 990 bp之间 ,并根据各种间片段共享度构建了 UPG聚类关系图 .研究结果表明 ,大垫尖翅蝗和甘蒙尖翅蝗的片段共享度为 0 .375;红翅皱膝蝗和鼓翅皱膝蝗的片段共享度为 0 .2 86;亚洲小车蝗和黄胫小车蝗的片段共享度也为 0 .2 86  相似文献   

13.
几种动物RAPD指纹图谱反应条件的分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
用随机排列碱基顺序的寡核苷酸引物,对蚕、鱼、蛇、家猪等动物的基因组DNA扩增,获得了这些动物的随机扩增多态DNA指纹图谱,对影响扩增结果的几个因素进行了分析,对动物随机扩增多态DNA反应的适宜条件进行了讨论。  相似文献   

14.
柳树RAPD反应体系均匀设计试验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
从柳树幼苗的嫩叶中提取基因组DNA作为模板,运用均匀设计方法,获得;柳树RAPD扩增反应的优化体系:25μL反应体系中,DNA模板用量70 ng,引物浓度0.5mmol.L-1,Mg2+浓度3mmol.L-1,TaqDNA聚合酶用量1.0 U,dNTP浓度0.3mmol.L-1.用16条引物进行验证,证实该体系重复性好、结果稳定.  相似文献   

15.
笼养蓝孔雀两个种群的随机扩增多态DNA分析   总被引:4,自引:0,他引:4  
利用随机扩增多态DNA技术对英吉利孔雀场和广州动物园两个蓝孔雀Pavocristatus种群进行了分析。用 2 3个随机引物 ,共获得 173和 15 7个扩增片段 ,多态率分别为 47 40 %和 9 5 5 %  相似文献   

16.
渗漉法提取黄连中小檗碱的工艺研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的考察渗漉法提取黄连中小檗碱的主要影响因素。方法通过正交实验法确立试验体系.采用紫外分光光度法测定盐酸小檗碱含量。结果选择不同的提取条件盐酸小檗碱提取率有显著差异。结论最优提取工艺是:粉碎度为最粗粉、溶媒量为12倍、渗漉速度为5mL·min^-1。  相似文献   

17.
文章通过传统CTAB法、改良CTAB法、SDS法、高盐低pH法和试剂盒法等5种方法,对菊叶香藜进行基因组DNA提取,旨在筛选一种菊叶香藜基因组DNA的适宜提取方法。同时用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳对5种方法所提DNA进行检测,并对改良CTAB法提取的DNA进行RAPD-PCR扩增检测。结果表明:改良CTAB法提取速度较快,便于操作,提取的DNA质量较好,进行的RAPD-PCR扩增条带清晰,能满足分子标记的要求。因此,改良CTAB法为菊叶香藜基因组DNA可靠并合适的提取方法。  相似文献   

18.
本试验利用RAPD技术对临床上重要的致病菌金黄色葡萄球菌28株和铜绿假单胞菌2l株,用10bp引物进行扩增,结果铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的DNA带谱均出现了多态性;根据带谱的不同可将铜绿假单胞菌分成8个型,金葡菌分成3个型;根据铜绿假单胞菌的带型计算各菌间的相似系数,依此系数绘制了系统树,从系统树中清晰可见各菌间的亲缘关系。  相似文献   

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