保健食品清除自由基作用的体外测定方法和原理

综述了抗氧化保健食品清除O2·、·OH、H2O2和DPPH·自由基作用的体外实验方法和原理。检测保健食品清除自由基的体外实验方法有多种,一般采用化学方法在体系中产生自由基,通过测定自由基与体系中的化学物质或离体组织成分反应所产生的颜色变化、发光现象等间接测定自由基含量或根据氧张力的变化等直接测定自由基含量。当体系中加入有清除自由基作用的保健食品功效成分后,体系中的自由基含量会减少,由此确定保健食品清除自由基能力的高低。体外实验的特点是快速、灵敏,可对保健食品清除自由基作用进行初步分析评价,适用于筛选抗氧化保健食品功能材料。     

沙棘酒清除自由基作用的研究

目的:研究沙棘酒对自由基的清除作用。方法:采用分光光度法测定沙棘酒对DPPH.自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用,还原力的测定采用Fe3+还原法。结果:不同陈酿时间的沙棘酒清除自由基的能力不同,随着陈酿时间的延长,其清除自由基的能力呈下降趋势。沙棘酒中维生素C含量与对DPPH.自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率之间呈正相关关系,但总黄酮含量与对上述自由基的清除率之间的相关性不显著。沙棘酒还原力与维生素C含量和总黄酮含量间均呈正相关关系。结论:沙棘酒清除DPPH.自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的能力较强,具有良好的抗氧化性和保健功能。     

用清除有机自由基法评价酸奶的抗氧化活性

采用1,1-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)法对市售酸牛奶、自制西藏灵菇酸牛奶进行了抗氧化活性的研究.绘制了酸牛奶清除有机自由基(DPPH·)的清除率曲线,EC50值显示.该方法清除DPPH·能力的大小顺序为:西藏灵菇酸牛奶(20℃)＞西藏灵菇酸牛奶(42℃)＞君乐宝酸牛奶＞蒙牛酸牛奶.同时对反应体系所需时间、温度进行了探讨.结果表明,反应需在常温下进行,最佳反应时间为30 min.     

麦麸膳食纤维抗氧化和·OH自由基清除活性的研究

从麦麸中分离得到的水溶性和水不溶性膳食纤维具有抗氧化活性和·ＯＨ自由基清除能力，两者对·ＯＨ的清除率分别为８０．２％和５８．３％。     

不同产地板蓝根多糖体外清除自由基活性的比较

采用邻二氮菲-Fe~(2+)氧化法测定板蓝根多糖对羟基自由基(·OH)的清除作用;采用邻苯三酚自氧化法检测超氧阴离子自由基(·O_2~-)的清除作用;采用DPPH孤电子配对法测定DPPH自由基的清除作用。结果表明,在羟基自由基体系中,菘蓝根多糖显示较强的清除作用,清除率为52.60%;草大青根和马蓝根多糖最高分别可达到41.29%,39.35%;在超氧阴离子自由基体系中,菘蓝根多糖、草大青根和马蓝根多糖的清除率最高分别可达到50.00%、39.75%、39.15%;在DPPH自由基体系中,3种多糖最高清除率为42.75%。     

枸杞子极性溶剂提取物的自由基淬灭性质

根据我国食用枸杞子的习惯,对其水、50%和95%乙醇提取物的自由基淬灭能力进行了比较。水提物和50%醇提物中总黄酮的含量相近,分别为1154±89mg/kg和1207±66mg/kg,95%醇提物中含有更多的黄酮物质(1497±70mg/kg)。黄酮物质高效液相色谱分析结果说明,水提物中主要是芦丁和绿原酸,50%醇提物中主要是芦丁和原儿茶酸,95%醇提物中主要是芦丁。在DPPH·自由基反应体系中,所有提取物都表现为慢反应动力学,提取物的自由基淬灭能力随溶剂极性降低而提高。     

白花败酱叶挥发物化学成分及其DPPH·自由基清除活性

研究福建德化产白花败酱叶的挥发物化学成分与自由基清除活性。采用水蒸气蒸馏法提取白花败酱干叶挥发物,运用GC-MS-DS联用技术分析其化学组成,同时运用二苯代苦肼自由基(DPPH·)体系体外评价其自由基清除活性。从38个峰中检识出白花败酱叶挥发物的20种化学成分,含量占总量的87.73%,化学类型主要为非萜类脂肪族化合物(含量约65.40%)、非萜类芳香族化合物(含量约13.74%)与萜类化合物(含量约5.17%),主要化学成分为异戊酸(含量53.288%)与3-甲基戊酸(含量12.107%)等有机酸。在浓度5～60mg/mL范围内,该挥发物对DPPH·自由基清除表现出极显著的量效相关(P<0.01),清除能力随样液浓度增加而显著增强,半效应浓度EC50约为26.74mg/mL。福建德化产白花败酱叶挥发物具有明显的自由基清除活性,含量较高的异戊酸与3-甲基戊酸是其主要特征成分,两者是白花败酱叶独特陈酱气的主要气味源。     

芝麻酚清除O2-·自由基的活性研究

通过改良邻苯三酚自氧化法(简称325 nm法)测定芝麻酚清除自由基能力.试验表明:在等质量浓度条件下,芝麻酚对超氧阴离子自由基(O2-·)的清除效率高于BHT及VE,当芝麻酚的质量浓度为0.8 g/L时,对O2-·自由基的清除率达到80.68%,高于BHT的77.12%及VE的55.65%.因此,芝麻酚具有较强的清除O2-·自由基的能力.     

野酸梅皮色素抗氧化活性研究

采用分光光度法测定了野酸梅皮色素对DPPH·自由基、OH·自由基的清除能力和抑制亚油酸氧化的能力。研究结果表明,野酸梅皮色素有良好的抗氧化活性,其对DPPH·自由基的清除能力相当于Vc的92.7%,对亚油酸抗氧化能力的抑制率相当于Vc的79.31%,相当于VE的88.53%。     

灵芝提取液清除自由基能力

采用氮蓝四唑(NBT)光化还原法、抗坏血酸—Cu2 —H2O2体系法和亚油酸体系法,对从野生灵芝中提取的有效活性物质,进行清除超氧自由基O2-·、羟基自由基·OH和脂过氧自由基ROO·的效果进行测定.结果表明,采用体积分数85%的丙酮,液固体积质量比为 15 mL∶1 g,超声20 min是灵芝有效成分提取的最佳工艺条件.灵芝提取物对自由基有较强的清除作用,在 3 种不同品种的灵芝提取物中,白灵芝的清除效果最佳,紫灵芝次之,而赤灵芝最差.     

动态监测三种儿茶素单体清除自由基能力

以Trolox为参照物,动态监测葡萄籽中所富含的儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)清除ABTS+·与DPPH·自由基的过程,比较三种儿茶素单体体外清除自由基的能力。结果显示在两种反应体系中,对于同一样品,随着浓度增大其自由基清除能力增强;Trolox与自由基反应达到平衡所需时间最短,但其自由基清除率低于ECG,两种反应体系中Trolox与EC、C清除自由基的能力大小顺序不同。总体来看,三种儿茶素单体清除自由基的能力ECGECC。     

菊花清除自由基动力学特性及对羟基自由基介导的2-脱氧核糖裂解的抑制作用

目的 研究不同因素对菊花清除自由基能力的影响,鉴定其功能性成分,探索菊花对羟基自由基引导的2-脱氧核糖裂解的抑制作用。方法 测定菊花提取液在不同浓度、温度和反应时间条件下对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical,DPPH·)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt cationic radical,ABTS⁺·]的清除率。采用高效液相色谱法,测定了菊花提取液与DPPH·和ABTS⁺·反应前后供试品溶液中木犀草苷、木犀草素葡萄糖醛酸苷、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的含量。采用体外Fenton反应实验体系,测定菊花提取液对2-脱氧核糖裂解的保护作用。结果 菊花样品浓度、温度和反应时间对DPPH·和ABTS⁺·的清除率均有影响。与DPPH·和ABTS⁺...     

南药五味子提取物清除自由基活性的研究

以南药五味子为原料,应用DPPH法、结晶紫法、邻苯三酚自氧化法,分别测定以蒸馏水和70%乙醇为溶剂的五味子提取物清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的能力,及其对脂质过氧化反应的抑制能力。结果表明,在试验条件下,五味子乙醇提取物对DPPH·、·OH、O2-·、脂质过氧化体系清除活性分别为93.83%,32.26%,18.22%,66.72%;蒸馏水提取物的清除率分别为86.16%,63.17%,13.37%,54.62%。可知,五味子的70%乙醇和水提取物具有较好的清除自由基能力,两者相比较,70%乙醇提取物清除的自由基的能力强于水提取物。     

青藏高原油菜蜂花粉醇提物体外清除自由基活性研究

为探计青藏高原油菜蜂花粉醇提物的体外清除自由基活性,研究了其对超氧阴离子(O2-·)体系、羟基自由基(·OH)体系和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)体系的清除效果,并以抗坏血酸(Vc)作为阳性对照.结果表明,油菜蜂花粉醇提物对·OH、O2-·和DPPH·均具有一定清除作用,且与浓度呈量效关系,并且对·OH和DPPH·清除效果相对较好,略优于Vc.     

天麻多糖提取与自由基清除作用研究

目的:研究活性天麻多糖的提取与自由基清除作用.方法:以水提醇沉法制备天麻粗多糖,CTAB季铵盐络合法、凝胶过滤柱层析进一步纯化;利用Feton体系和邻苯三酚自氧化反应,采用比色法测定天麻多糖对OH·及O2-·自由基的清除作用.结果:通过正交实验获得天麻多糖提取工艺为料水比1:40、浸提温度80℃、提取次数2次,75%乙醇沉淀;在相同的试验体系浓度下,天麻粗多糖及纯化多糖对OH·的IC50分别为1.18、1.62 mg/mL;对O2-·的IC50分别为0.81、1.03 mg/mL.结论:天麻多糖对氧自由基具有较佳清除能力.     

三种品牌酱油对自由基的清除作用

研究了三种品牌酱油对活性氧类自由基如超氧阴离子自由基(O_2·)和羟自由基(·OH)的清除作用。结果表明,三种品牌酱油对O_2·、·OH都有一定的清除自由基作用,高温加热对O_2·、·OH的清除作用有一定的影响,但浓度越低,影响越小。     

啤酒酵母中还原型谷胱甘肽清除自由基能力的研究

选用啤酒酵母为原料,采用热水浸提提取还原型谷胱甘肽(GSH),经过高速离心分离、阳离子交换树脂纯化、等电点沉淀及真空浓缩干燥制备还原型谷胱甘肽。采用1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基反应体系,抗氧化性物质抗坏血酸作为参照物,根据DPPH·体系吸光值的变化研究GSH清除自由基的能力,DPPH·反应体系为5mL0.0817mmol/L DPPH·溶液+5mL样品溶液,反应时间30min。考察了不同浓度GSH和抗坏血酸与DPPH·自由基清除率的关系。结果表明,GSH比抗坏血酸抗氧化能力差一些,但GSH清除DPPH自由基能力与其浓度呈明显的量效关系,因此,啤酒酵母GSH有重要的抗氧化开发价值。     

芹菜素对自由基致DNA损伤的保护作用及机制

运用DPPH自由基和 ·OH反应模型和酶标仪观察芹菜素(apigenin,API)对自由基的淬灭效应,以CuSO4-Phen-VC-H2O2-DNA化学发光体系测定API对 ·OH致DNA损伤的抑制作用,以探讨低剂量API对自由基致DNA损伤的保护效果及可能的作用机制,为以API为基础的膳食干预研究提供依据。结果表明：在30min时间内,API质量浓度为25、50、100、200μg/mL时,对DPPH自由基清除率分别为8.80%、28.4%、37.4%和62.8%。当质量浓度为200、100、50μg/mL时,API对 ·OH清除率分别为50.2%、35.4%和25.4%。在DNA化学发光体系中,25～100μg/mL API对DNA损伤产物发光抑制率为5.6%～16.9%,并使其受损时间延长35～50min。低剂量的API能有效清除DPPH自由基和 ·OH,抑制 ·OH引发的DNA损伤程度,并延迟其受损伤的时间。API清除自由基的效果及保护DNA损伤的能力与其质量浓度有关。     

橙皮苷磺酸钠对自由基清除能力的研究

用DPPH·自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、烷基自由基引发的亚油酸氧化体系对橙皮苷磺酸钠的清除自由基活性进行了研究,并同Vc进行了比较,结果表明:橙皮苷磺酸钠对这几种自由基均有不同程度的清除作用,其对DPPH自由基清除能力略低于Vc;对·OH自由基清除能力在较低浓度时显著强于Vc,在较高浓度差别不大;对O_2~-.自由基清除能力在较低浓度略高于Vc,在较高浓度略低于Vc;对烷基自由基清除能力在较低浓度时略低于Vc,较高浓度时略高于Vc。在橙皮苷磺酸钠浓度为1.0×10-2mg/mL时,对DPPH自由基,羟基自由基,超氧阴离子自由基,烷基自由基的清除率达到最高,分别达到了95.22%、94.74%、92.00%、83.95%。     

非洲山毛豆种子提取物清除自由基活性的研究

应用DPPH法、结晶紫法、邻苯三酚自氧化法,分别测定以无水乙醇和无水乙醚为溶剂的山毛豆种子提取物清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的能力,及抑制脂质过氧化反应的能力.结果表明:在试验条件下,山毛豆乙醇提取物对DPPH·、·OH、O2-·、脂质过氧化体系清除活性最高分别为94.73%、96.43%、5.17%、60.28%;乙醚提取物(油脂)的清除率分别为88.54%、82.04%、19.63%、37.19%.因此,山毛豆的乙醇和乙醚提取物具有比较好的清除自由基能力,两者相比较,乙醇提取物清除自由基的能力强于乙醚提取物.