2株鲤鱼源乳酸菌体外抗逆性研究

对2株鲤鱼源乳酸菌作为益生菌候选菌株进行体外抗逆性试验.通过耐受胆盐、耐受pH值、耐受蛋白酶和耐高温等试验,对这2株乳酸菌进行研究.其中在胆盐耐受性试验中,YL-1和YL-7在胆盐浓度0.4%、培养4 h时仍有30%以上的存活率;在pH值耐受性试验时,2株乳酸菌均可在一定的酸性和碱性条件下存活;胰蛋白酶对2株菌的存活率没有影响;在70℃的高温中,2株乳酸菌均有一定的耐受性.     

团头鲂肠黏膜益生乳酸菌的分离及体外抗逆性研究

从团头鲂肠黏膜上分离筛选出2株对嗜水气单胞菌有较强的抑制作用的乳酸菌菌株JK-1和JK-2,通过耐受胆盐、耐受pH值、耐受蛋白酶和耐高温等试验对这2株乳酸菌进行体外抗逆性试验研究.其中在胆盐耐受性试验中,JK-1和JK-2在胆盐浓度0.4%、培养4 h时仍有35%以上的存活率;在pH值耐受性试验时,2株乳酸菌均可在一定的酸性和碱性条件下存活;胰蛋白酶对2株菌的存活率没有影响;在70 ℃的高温中,2株乳酸菌均有一定的耐受性.     

2株鲤鱼源乳酸菌体外抗逆性研究

对2株鲤鱼源乳酸菌作为益生菌候选菌株进行体外抗逆性试验。通过耐受胆盐、耐受pH 值、耐受蛋白酶和耐高温等试验, 对这2株乳酸菌进行研究。其中在胆盐耐受性试验中, YL- 1和YL- 7在胆盐浓度0. 4%、培养4 h时仍有30%以上的存活率; 在pH 值耐受性试验时, 2株乳酸菌均可在一定的酸性和碱性条件下存活; 胰蛋白酶对2株菌的存活率没有影响; 在70e 的高温中, 2株乳酸菌均有一定的耐受性。     

枯草芽孢杆菌HAINUP40水质净化作用的研究

在筛选得到适宜枯草芽孢杆菌HAINUP40生长的最佳液体培养基基础上,探讨枯草芽孢杆菌HAINUP40对2种模拟废水及养殖废水的水质净化作用。生长曲线测定结果显示,枯草芽孢杆菌HAINUP40在不同培养基中的生长速度不同,由快到慢依次为普通淡水培养基细菌基础培养基2216E培养基普通海水培养基;氨氮降解筛选培养基试验表明,枯草芽孢杆菌HAINUP40对氨氮的降解效果显著,在试验的第4d时氨氮去除率达到最高值(57.58%);8.64×105cfu/mL、8.64×10~6 cfu/mL、8.64×10~7 cfu/mL 3种密度的枯草芽孢杆菌HAINUP40对模拟废水的净化试验结果显示,枯草芽孢杆菌HAINUP40均可显著降低模拟废水中的化学需氧量和pH值,在第24h,试验组化学需氧量去除率均超69%,而且pH均降至6.7~6.9(对照组为8.0);8.64×106 cfu/mL枯草芽孢杆菌HAINUP40对高含量氨氮和化学需氧量模拟废水的净化效果试验表明,该菌株在第7d时对化学需氧量的去除率达到90.37%。8.64×10~6cfu/mL枯草芽孢杆菌HAINUP40对养殖废水的净化效果试验表明,该菌株在第12h时对亚硝酸盐的去除率达到94.12%,在72h时对化学需氧量的去除率达到72.13%。试验结果显示,枯草芽孢杆菌HAINUP40可显著降低水体中的亚硝酸盐、氨氮和化学需氧量,具有较好水质净化效果。本试验为枯草芽孢杆菌HAINUP40在罗非鱼生产中作为潜在的水质改良剂提供了数据资料和科学依据。     

罗非鱼无乳链球菌拮抗株的筛选及特性研究

自吉富罗非鱼养殖池塘水体、底泥和鱼体肠道中筛选无乳链球菌拮抗株。对其中1株抑菌能力最强的菌株LT3-1进行溶血性、形态、生理生化、16S rRNA基因序列测定,并进一步对其抑菌活性与发酵时间的关系、抑菌物质对温度的耐受性、产酶性能、降解亚硝酸盐性能、药物敏感性、安全性试验、攻毒试验进行研究。鉴定结果表明,菌株LT3-1为枯草芽孢杆菌,无溶血性。液体发酵16 h时,抑菌活性最强,抑菌圈平均直径为(25.30±0.57) mm。随温度的升高抑菌活性下降,但仍然存在,说明抑菌物质有耐高温特性。枯草芽孢杆菌LT3-1具有水解蛋白、淀粉和纤维素的能力。亚硝酸盐降解试验表明,枯草芽孢杆菌LT3-1菌液密度为10^5 cfu/mL时,6 h即可将亚硝酸盐质量浓度由2.5 mg/L降至0.03 mg/L,降解率达98.8%( P <0.05)。枯草芽孢杆菌LT3-1对检测的9种抗生素均敏感,罗非鱼接种密度为10^7 cfu/mL的枯草芽孢杆菌LT3-1菌液200 μL后,仍然存活且未有异常表现。动物攻毒试验表明,添加0.05%枯草芽孢杆菌LT3-1菌粉的试验组罗非鱼存活率提高20%,显著高于对照组( P < 0.05 )。综上所述,筛选自吉富罗非鱼肠道的枯草芽孢杆菌LT3-1能有效拮抗罗非鱼无乳链球菌,可以作为防治当地罗非鱼无乳链球菌病的良好菌种资源。     

枯草芽孢杆菌和猪源乳酸杆菌混合饲喂对仔猪肠绒毛发育的影响

<正>本研究主要探讨混合饲喂枯草芽孢杆菌RJGP16和猪源乳酸杆菌B1对仔猪肠道肠绒毛发育的影响,以及这两种益生菌在体内拮抗大肠埃希氏菌K88的能力。试验选取8窝新生仔猪为研究对象,分别于0、7、11和26日龄经口腔灌服枯草芽孢杆菌菌液(活菌数1.0×109CFU/mL)、猪源乳酸杆菌菌液(活菌数1.0×109CFU/mL)、枯草芽孢杆菌和猪源乳酸杆菌混合菌液(体积比1∶1),以及对饲喂混合     

枯草芽孢杆菌培养基配方优化的研究

枯草芽孢杆菌培养基的组分是由葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、磷酸二氢钾、碳酸钙等5种原料构成,采用L1（4^5）正交表,将5种原料作为枯草芽孢杆菌培养有影响的因素,通过试验数理统计的直观和理论分析,对其配方进行优化：试验结果表明,当培养基的配方为无水葡萄糖3．50g／L、蛋白胨0．83g／L、酵母膏0．50g／L、磷酸二氢钾0．35g／L和碳酸钙0．25g／L,温度（34&#177;2）℃时,培养16h即可达到生长峰值。由于枯草芽孢杆菌光学密度（optical density,OD）与活菌数量的关系：Y=0．5182x^2＋1．4462x＋1．9714（r=0．996343）,接种的枯草芽孢杆菌由1．9714&#215;10^8cfu／mL提高到3．3124&#215;10^8cfu／mL。优化的枯草芽孢杆菌培养基条件能有效促进枯草芽孢杆菌生长。     

海带抗菌活性的研究

研究了海带提取物对4种微生物:枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、黑曲霉、酵母菌的抗菌作用,并对海带提取物的提取条件进行研究.试验结果表明:海带提取物仅对枯草芽孢杆菌具有抗菌作用;较好的提取溶剂为95%甲醇.最佳提取条件为:温度为30 ℃,时间为8 h,pH 7.     

一株水产用益生枯草芽孢杆菌液体发酵初步研究

为解决工业化生产中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)活菌数量低、成本高的问题,通过正交试验、单因素试验和100 L发酵罐中试,确定了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HJ02工业生产用的优化液体培养基和发酵工艺条件。最佳培养基配方为:葡萄糖10 g/L、玉米粉8 g/L、豆粕粉25 g/L、硫酸锰30.8 mg/L、硫酸镁5 g/L、磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L;最优发酵工艺条件为:培养温度30℃,初始pH 7.0;最佳接种菌龄是18 h。优化后培养基成本降低了50%以上,细菌浓度达到了7.19×109个/mL。     

菊苣根提取物对枯草芽孢杆菌生长的影响

试验采用在培养基中添加不同浓度菊苣根提取物和在培养基表面覆盖不同浓度菊苣根提取物溶液浸泡的滤纸片,进行枯草芽孢杆菌培养,通过菌落计数法和测量菌圈直径的方法,以研究菊苣根提取物对枯草芽孢杆菌生长的影响。结果表明:在一定浓度范围内,菊苣根提取物对枯草芽孢杆菌的生长具有促进作用,且随菊苣根提取物浓度升高,促进作用增强。当菊苣根提取物超过一定浓度时,对枯草芽孢杆菌的生长促进作用出现减弱趋势。     

4种微生物制剂对凡纳滨对虾育苗水质及仔虾存活的影响

采用平板法测定标注为地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、粪肠球菌和植物乳杆菌制剂的活菌密度,通过16S rRNA基因测序分析对其进行菌种鉴定。在盛水250 L的玻璃钢桶中投放凡纳滨对虾无特定病原的无节3期幼体5×10~4尾,各组由溞状Ⅰ初期至仔虾Ⅰ期,连续10 d,每日分别投菌制剂1次,地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌组每次投菌5×10~8 cfu/L,粪肠球菌和植物乳杆菌组每次投菌1×10~8 cfu/L,同时投放饵料,对照组始终不投菌制剂,定期测定水质并分析仔虾存活情况。试验结果显示,4种制剂均由密度高的单一菌种构成;地衣芽孢杆菌组水体氨氮、无机磷和化学需氧量均显著高于对照组,而在育苗早期粪肠球菌和植物乳杆菌组亚硝态氮含量显著降低(P0.05);除地衣芽孢杆菌组仔虾Ⅲ期存活率显著低于枯草芽孢杆菌组外,各组存活率间差异不显著(P0.05),但枯草芽孢杆菌组仔虾存活率和活力均表现最佳,而地衣芽孢杆菌组表现最差。可见,无明显胁迫条件下,连续投放微生物制剂对凡纳滨对虾育苗水质及仔虾存活率总体上无显著提高作用,但两种芽孢杆菌制剂的作用效果存在明显差异。     

凝结芽孢杆菌生物学特性、益生机制及其生物学功能

"饲料禁抗,养殖减抗"是当今畜牧行业的重要议题。凝结芽孢杆菌具有耐高温、耐胃酸和耐胆盐等高抗逆性特点,并且代谢产L-乳酸、抗菌肽及多种消化酶,有助于营养物质消化吸收和维护畜禽肠道健康,已成为替抗热点。对凝结芽孢杆菌的生物学特性、益生机制以及在养殖应用方面具有的生物学功能进行阐述,为凝结芽孢杆菌的应用提供依据。     

不同配比复合益生菌对灰海马幼苗存活、生长及免疫的影响

以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和粪肠球菌(Enterococcus faecalis)为菌源,研究了不同配比复合益生菌对灰海马(Hippocampus erectus)幼苗养殖效果的影响。实验包括3个单菌处理和6个复合菌处理(3种菌1∶2∶3比例的随机组合),共9个加菌处理,另设无菌处理作为对照。用于评估养殖效果的指标包括:养殖水体菌群、幼苗特定存活率和生长率、幼苗肠道免疫指标(免疫球蛋白Ig M、白介素IL-1β、干扰素IFN-α和肿瘤坏死因子TNF-α)和肠道菌群。结果发现:加菌处理组中,其养殖水体均含有大量的目标益生菌,并且养殖水体的弧菌含量均显著低于对照组。幼苗存活率方面,除了D组(芽孢∶乳杆∶粪肠=1∶2∶3)、E组(芽孢∶乳杆∶粪肠=1∶3∶2)和F组(芽孢∶乳杆∶粪肠=2∶1∶3)的存活率显著低于对照组外,其他组存活率均显著高于对照组,其中G组(芽孢∶乳杆∶粪肠=2∶3∶1)和I组(芽孢∶乳杆∶粪肠=3∶2∶1)的存活率最高,均超过了65%。特定生长率除了B组(植物乳杆菌单菌处理)与E组外,其余各组之间均无显著性差异(P>0.05)。肠道免疫指标和菌群方面,存活率高的组别Ig M含量就高(通常指示免疫力水平),肠道内亦含丰富的枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、植物乳杆菌和约氏乳杆菌(L.johnsonii);而存活率低的组别则Ig M含量低,而IL-1β、IFN-α和TNF-α含量高(往往是炎症的征兆),另外肠道内菌群比例失衡,益生菌丰度低。结果表明:复合益生菌的使用需要有一个特定的配比,配比合适益生效果优于单菌,配比失衡则不如单菌,甚至不及无菌,枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和粪肠球菌按2∶3∶1或3∶2∶1配比混合使用效果最佳。     

一株刺参益生菌的发酵配方及其发酵条件优化

以健康刺参肠道的益生茵——枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为研究对象,以豆粕、葡萄糖和氯化钠为基础发酵培养基,通过单因素和正交试验,确定该菌株适用于工业生产的最佳发酵培养基配方;通过单因素试验,确定最佳发酵条件;同时在生物反应器中进行扩大培养试验,得到其最佳种龄和发酵时间.试验确立该茵株的最佳培养基配方为:氯化钠10g/L,葡萄糖2.5g/L,豆粕20g/L;最佳发酵条件为:培养温度28℃,初始pH 7.5,转速170r/min,菌种接种量5％.以最佳发酵条件和培养基,在10L生物反应器中进行扩大培养试验,得到最佳种龄为24h、最佳发酵时间为32h,菌体细胞浓度最高达到8.5×109cfu/mL,芽孢生成率达到91％.研究结果为刺参微生态制剂的工业化生产提供基础数据,为海水养殖专用微生态制剂的开发提供参考.     

枯草芽孢杆菌WB600芽孢和营养体耐受凡纳滨对虾胃肠道环境及定殖存活的研究

采用体外模拟胃肠道环境与体内芽孢存活计数相结合方法,考察枯草芽孢杆菌WB600耐受凡纳滨对虾胃、肠道环境及其在凡纳滨对虾肠道内的定殖存活情况。试验结果表明,枯草芽孢杆菌WB600芽孢在不同的pH环境中均表现出很强的耐受性和良好的生长增殖趋势,而营养体的耐受性较差;在含不同浓度胰蛋白酶的模拟肠液中芽孢和营养体均能表现出良好的耐受性,其中芽孢的耐受能力更为显著;当温度高达80℃时,仍有93.9%的芽孢存活,而营养体基本失活;在虾的肠道内容物中能检测到大量的活芽孢,说明芽孢在进入虾肠道内是可以在其内存活并生长定殖的。表明枯草杆菌WB600芽孢比营养体对胃肠道环境和高温具有更强的耐受能力,且能顺利在虾肠道内定殖存活,有望在水产养殖领域发挥益生作用的同时成为新型的口服疫苗载体。     

枯草芽孢杆菌固态发酵工艺研究

对枯草芽孢杆菌（Bacillus Subtilis）的固态发酵工艺进行了研究,包括碳源、氮源、含水量、初始pH、接种时间、接种量等影响因素,并通过单因子试验和正交试验优化,确定了枯草芽孢杆菌的固态发酵工艺为：（1）培养基：麸皮19．5g,稻谷壳0．5g,豆粕1．0g,水22mL;（2）发酵条件：初始pH为7．0、接种时间20h,接种量为0．9mL。照此工艺发酵,枯草芽孢杆菌的活茵数高达435亿个／g。     

4株凡纳滨对虾肠道益生菌分离、鉴定及应用研究

为将凡纳滨对虾肠道分离的益生菌用于对虾的养殖,利用乳酸菌培养基分离对虾肠道中的益生菌并对菌株进行初步分类鉴定,利用体外抑菌方法筛选有抗菌活性的菌株,用于考察对虾实验室养殖过程中抗有关致病菌的效果。试验结果显示,自虾肠道分离得到W7、W25、W27、W31菌株,分别属于啤酒酵母、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌沙漠亚种和暹罗芽孢杆菌,它们对致病菌副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌有一定的抗菌活性,其中暹罗芽孢杆菌W31抗菌效果最好。将啤酒酵母W7和暹罗芽孢杆菌W31菌体与饲料混合用于对虾的养殖,能够明显增强凡纳滨对虾抵抗弧菌侵染的能力,提高存活率。     

纳豆芽孢杆菌对鱼类非特异性免疫功能的影响

采用豆芽汁为培养基,按10%的接种量,在30℃1、20 r/min的培养条件下,纳豆芽孢杆菌培养8 h后便进入对数生长期,14 h达到生长顶峰,按一定的剂量每日投饵饲喂的方式摄入纳豆芽孢杆菌及其发酵产物,可促进受试鱼类血液NBT阳性细胞数量和血清溶菌酶活力显著上升(P<0.05),所不同的是培养时间短的纳豆芽孢杆菌培养液的作用效果要差一些。试验结果表明:纳豆芽孢杆菌及其发酵产物可明显提高鱼类的非特异性免疫功能。     

两种芽孢杆菌体外体内拮抗气单胞菌的试验

将蜡样芽孢杆菌Y1和巨大芽孢杆菌BM1259混合培养,结合平板活菌计数、抑菌活性测定及体内拮抗试验,研究其对水产动物气单胞菌的抑菌效果。体外拮抗试验结果表明,这两种芽孢杆菌均能明显抑制嗜水气单胞菌NQ的增殖,抑制率分别为53.74%和56.12%。不同温度下的抑菌活性试验显示,2种芽孢杆菌的抑菌活性温度分别为32℃和29℃。体内拮抗试验结果表明,巨大芽孢杆菌能显著降低异育银鲫肠道气单胞菌的数量。提示巨大芽孢杆菌可作为潜在的水产专用微生态制剂。     

饲料中添加枯草芽孢杆菌对彭泽鲫生长、免疫的影响

为探讨饲料中添加枯草芽孢杆菌对彭泽鲫生长、免疫及抗氧化能力的影响及其最适添加量,在室内循环水养殖系统中进行了饲养试验,以未添加枯草芽孢杆菌的饲料和分别添加0.06 %、0.12 %、0.18 %和0.24 %枯草芽孢杆菌的饲料饲喂彭泽鲫。试验结果显示:饲料中添加枯草芽孢杆菌可提高彭泽鲫的增重率和饲料转化效率,当添加量达0.12 %时,试验鱼的增重率和饲料系数与对照组相比差异显著,继续增大添加量,增重率和饲料系数的变化不显著;枯草芽孢杆菌添加量为0.24 %的试验组,试验鱼的血清总蛋白和白蛋白水平显著高于对照组;饲料中添加枯草芽孢杆菌能显著提高彭泽鲫肝胰脏和肠道内蛋白酶的含量,但对肝胰脏脂肪酶和淀粉酶活性的影响不显著;添加枯草芽孢杆菌能显著提高试验鱼血清中碱性磷酸酶、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活性。结果表明,在饲料中添加枯草芽孢杆菌能显著提高彭泽鲫的增重率,降低饲料系数,增强其消化酶的活性和抗氧化功能,其最适添加量为0.12 %。