山羊捻转血矛线虫ITS基因序列分析

为了解不同年份山羊源捻转血矛线虫内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)基因的遗传变异情况,提取2015年-2020年间陕西省咸阳地区44株山羊源捻转血矛线虫的核糖体DNA(rDNA),对其ITS基因进行扩增、测序与分析.结果显示,44株捻转血矛线虫的ITS-1序列长度为400 b...     

捻转血矛线虫HSP60原核表达及特性分析

根据Gen Bank公布的捻转血矛线虫热休克蛋白60(HSP60)基因序列,设计一对特异性引物,以捻转血矛线虫总RNA为模板,通过RTPCR技术扩增出一条约为1 700 bp的DNA片段,将该片段克隆到p MD19-T载体上进行序列分析,结果显示该片段长1 710 bp,编码569个氨基酸。将该基因片段亚克隆到p ET32a(+)载体上,转化大肠杆菌BL21,用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE显示,该基因成功表达,其融合蛋白分子量为80.7 ku,主要分布于菌体上清中。Western blot结果显示该重组蛋白可被人工感染捻转血矛线虫山羊血清所识别。Real-time PCR分析显示,HSP60基因在第三期幼虫和活化第三期幼虫中的相对表达量分别为1.0和0.88。本文探讨捻转血矛线虫HSP60功能奠定了基础。     

羊捻转血矛线虫形态观察

正利用临床收集的山羊和绵羊真胃内捻转血矛线虫标本,通过肉眼及显微镜观察成虫及虫卵形态,鉴别雌雄虫体。捻转血矛线虫属于毛圆科血矛属,常寄生于反刍动物的真胃而引起动物发病,是危害养羊业的重要寄生虫疾病之一。承德地区属于山区,养羊有利于山区经济发展,有利于提高农民经济收入。但是由于养殖户养羊水平较     

捻转血矛线虫冷冻保藏研究

用人工感染捻转血矛线虫单一种试验羊粪便培养收集感染性幼虫。经０．０６％和０．０８％次氯酸钠脱鞘，脱鞘率可达９０％以上，慢速致冷后幼虫的存活率为６４．５％。加入冷冻保护剂不能提高冷冻感染性幼虫的存活率。用正常的感染性幼虫感染试验羊后第１７ｄ即可查到虫卵，剖杀后成虫的回收率为２．６％，而相同数量的冷冻保藏的感染性幼虫感染后第２１ｄ才查到虫卵，成虫回收率为０．８％。表明冷冻保藏后的感染性幼虫发育受阻，成     

捻转血矛线虫中肠超微结构

捻转血矛线虫中肠由单层上皮细胞所组成，未见明确的细胞界限，并向肠腔内伸出相互平行、排列整齐的微绒毛，长约6.5μm，微绒毛中心由纵贯微绒毛并相互平行的微丝构成；细胞核位于细胞中部，核膜清楚，体形大，形状不规则，有一较大的核仁，异染色质凝集成块状，电子致密度甚高。分散于核质中；上皮细胞中部细胞器丰富，有粗面内质网、线粒体、高尔基体及溶酶体；基部为胶原纤维样，并含有丰富的内质网。     

山羊捻转血矛线虫的诊断与治疗

捻转血矛线虫病是一种在山羊养殖过程中经常发生的寄生虫疾病,能引起山羊贫血与胃肠黏膜炎症性病变。发病后如果未及时采取有效的防控措施,会造成严重的经济损失。     

林麝捻转血矛线虫的分子鉴定

为鉴定林麝粪样中疑似血矛属线虫虫卵的虫种,本研究提取四川和陕西地区林麝粪样中疑似血矛属线虫的虫卵DNA,对其核糖体内转录间隔区(ITS)全序列进行PCR扩增与序列分析。结果显示14个疑似血矛属线虫的虫卵DNA样品ITS全序列片段大小为786 bp~788 bp,序列相似性为99.0%~100%;经序列BLAST比对和系统发育分析,所有疑似血矛属线虫的虫卵样品均为捻转血矛线虫,与NCBI基因库中多株捻转血矛线虫的ITS序列相似性为97.0%~99.5%。研究结果表明,寄生于林麝的血矛属线虫为捻转血矛线虫,从而为控制林麝捻转血矛线虫病提供了重要依据。     

捻转血矛线虫的肠道抗原研究进展

捻转血矛线虫（H.contortus）的成虫或感染期幼虫是靠吸收反刍动物皱胃的血来生存的，在农业生产中造成了很大损失。同时由于虫体的抗药性及药物残留对人身体健康和环境产生的影响，已经迫使人们将注意力转移到寻找免疫学方法尤其是疫苗的开发上。这些研究主要集中在宿主的抗寄生虫免     

西藏牦牛捻转血矛线虫的鉴别

捻转血矛线虫属毛圆科血矛属线虫,是危害反刍动物最严重的消化道寄生虫之一,常引起反刍动物的贫血、生产繁殖性能及抗病力下降,给畜牧业带来较大的经济损失。本文报道了西藏林芝地区某农牧户被宰牦牛真胃线虫的分离鉴别,经对虫体形态观察和PCR检测,确认为捻转血矛线虫。     

捻转血矛线虫ES24抗原基因的克隆与表达特性分析

根据捻转血矛线虫ES24抗原基因序列(U64793.1)设计1对特异性引物,用RT-PCR方法扩增出大小约为670 bp的DNA片段。将该DNA片段克隆到pMD18-T载体后进行序列测定和分析,结果发现该基因与GenBank中已知的捻转血矛线虫24 ku ES抗原基因的相似性达96%～98%。将该基因的开放阅读框插入pET28a(+)载体中,获得原核表达质粒pET28/ES24,并转化大肠杆菌BL21。重组细菌用IPTG诱导,经SDS-PAGE分析,结果表明该基因获得了表达,重组蛋白分子量大小约为25 ku。用实时荧光定量PCR技术对该基因在捻转血矛线虫的虫卵、第3期幼虫、雌虫和雄虫等不同发育阶段、不同性别虫体内的表达情况进行了定量分析,结果显示ES24基因在雄性成虫中表达量最高,雌虫和虫卵其次,在第3期幼虫中表达最低。     

捻转血矛线虫与胃癌细胞共培养系统建立

为研究宿主感染捻转血矛线虫的早期免疫应答,本试验使用细胞小室建立了捻转血矛线虫-胃癌细胞气液界面共培养系统。捻转血矛线虫在共培养系统中以弦运动和圆运动的方式生活。细胞远红外荧光染色结果显示,线虫以细胞蛋白为食维持基本营养,进食的方式可能为叮咬胃癌细胞后吸食。脱鞘幼虫在体外培养系统中生长发育速度缓慢,共培养0,4,7 d时的虫体长度分别为(981.5±24.3),(1 113.9±24.4),(1 157.0±47.6)μm,其中7 d时与宿主感染4 d体内的虫体大小相似。捻转血矛线虫和细胞在共培养系统中互相胁迫,随着共培养时间的增加,线虫呈现活力下降和蜷缩状的生理状态,同时贴壁细胞逐渐从胶原板脱落并进入坏死状态。相较于共培养0 d时,共培养4 d时胃癌细胞(MGC)坏死的比例由12.91%增加到53.25%,胃腺癌细胞(BGC)坏死的比例由2.63%增加到24.81%。线虫还能诱导细胞表达大量的IL-33,MGC与线虫共培养4,7 d时IL-33的表达量分别上升至共培养0 d时的2.520,4.180倍;BGC与线虫共培养4,7 d时IL-33的表达量分别上升至共培养0 d时的1.732,5.150倍,这与宿主早期感染时IL-33的高表达一致。本试验为阐明捻转血矛线虫早期感染时宿主的免疫应答分子机制提供了新方法。     

绵羊捻转血矛线虫感染的失血测量

绵羊捻转血矛线虫[Haemonchus conforfus(Rudolphi,1803)Cobb,1898]在印度是绵羊的一种常见的寄生虫。这种寄生虫吸血量大,引起贫血,并损伤粘膜,导致羔羊大批死亡。本文报道用Cr~(51)标记红细胞,观察羔羊实验感染捻转血矛线虫的失血情况。这种方法由 Gray     

北京郊区羊感染捻转血矛线虫情况调查报告

通过粪便检测法和幼虫培养法,对北京地区5个区县的5个不同规模的羊场(423只羊)进行了捻转血矛线虫的感染情况调查。结果显示,检测230只羊的粪样,感染40只,捻转血矛线虫的感染率为17.4%。其中通县感染率为100%,其它4个郊区(县)均无感染。     

羊捻转血矛线虫幼虫的培养试验

培养捻转血矛线虫卵及幼虫的常用方法是以粪便为培养基,孵化的第三期幼虫含在粪便内。这种方法在培养中途不易观察培养情况,收获第三期幼虫必须经过特殊处理才能获得较洁净的虫体,费时费力。据Ko-     

捻转血矛线虫虫卵的大量分离纯化

笔者采用虫体取卵和孵化后感染性幼虫直接在培养瓶瓶盖内收集的方法,获得了大量纯净单一的感染性幼虫,并且感染绵羊成功。再对感染绵羊直肠采粪收集虫卵,就可收集到大量纯种单一虫卵,进行三期幼虫的大量孵化。该试验解决了在寄生性线虫分子生物学研究中需要大量单一虫种的纯化分离问题。     

捻转血矛线虫离体培养的研究

本实验研究了:(1)三种人工合成培养基:M199、NCTC109、F_(12);(2)小牛脱纤维蛋白血(以下简称小牛脱纤血)、Filde’s试剂,Bovine hemin;(3)pH值等几种因素对离体培养中捻转血矛线虫(Haemonchou contortus)L_3发育至L_4的影响。结果表明:(1)在相同条件下,NCTC109和M199培养系中的L_3可发育至L_4晚期,F_(12)中L_3只发育至L_4早期;三种培养系中L_3发育至L_4的虫体数占存活虫体数的90％以上,以NCTC109中的发育率为最高,达100％。(2)小牛脱纤血、Filde’s试剂和Bovine hemin对L_3发育至L_4均有促进作用,虫体的存活率明显提高,晚四期幼虫的存活时间延长;小牛脱纤血和Filde’s试剂可使L_3至晚L_4的时间缩短。(3)pH 5.8～6.2时,L_3发育至L_4;速度明显减慢,发育率不到50％;pH 6.6～6.8时,L_3发育至L_4的同步性及发育率明显提高,以pH6.6为最佳。