肝细胞癌中microRNA的表达水平与早期复发的相关性分析

目的:探讨肝细胞癌组织中microRNA(miRNA)的表达水平与肝细胞癌早期复发的相关性.方法:下载公共数据库TCGA的肝细胞癌患者临床信息、随访结果及miRNA表达情况,根据复发时间将患者分为早期复发组(≤2年复发)和晚期复发组(＞2年复发),连续变量资料采用独立样本t检验评估2组之间是否存在差异,分类变量资料采用...     

AFP-L3在肝细胞癌早期诊断中的应用价值研究

目的探讨AFP异质体作为肝癌早期诊断标志物在临床上的应用价值。方法利用微量离心柱法分离得到AFP—L3,采用化学发光法分别检测总AFP与AFP—L3含量,进而计算AFP—L3与总AFP的比值。结果AFP—L3与总AFP比值大于10％时与HCC呈明显相关性（P＜0．01）。应用微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体AFP—L3对肝癌的早期诊断、预后有重要临床应用价值。     

基于生物信息调控网络的肝细胞癌核心标志物筛选

目的 通过生物信息学分析,探索肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）诊断中潜在的miRNA标志物。方法 收集GEO数据库中诊断为HCC患者的临床资料并进行筛选,通过R软件识别差异表达的miRNA、mRNA,运用MiRWalk数据库预测筛选出来的差异miRNA的下游靶mRNA。利用网络生物信息分析工具进行gene ontology(GO)功能注释分析和kyoto encyclopedia of genes and genomes (KEGG)通路富集分析,建立蛋白互作网络（protein-protein interaction network,PPI),并通过Cytoscape软件分析出关键基因,进而构建mRNA-miRNA的调控网络。结果 共筛选出了152个高表达和109个低表达的差异表达基因,其中上调的关键基因为BUB1B、AURKA、CCNA2、TOP2A、RACGAP1、MKI67、RRM2、KIF4A、NCAPG、FOXM1;下调的关键基因为IGF1、HGF、PDGFRA、CXCL12、DCN、TGFA、NRG1、FOXO1、AR、NAMPT。通过...     

新型生物学标志物外泌体mircoRNAs在肝细胞癌中的研究进展

肝细胞癌( hepatocellular carcinoma , HCC )是最常见的恶性肿瘤之一,全世界每年新发HCC患者约78.3万例,我国新发HCC患者及死亡例数占全球的50％左右[ 1 ].目前缺乏早期诊断HCC的特异性生物标志物.     

外泌体miRNA在肝细胞癌中的研究进展

外泌体是一种由不同细胞分泌的囊泡小体,它通过多种机制促进肝癌的发生发展,目前对于外泌体miRNA在肝癌中作用的研究引起了广泛关注;并根据外泌体miRNA的特性,从而更好地了解肝癌的发生机制,这对肝癌的诊断、治疗有重要意义。对外泌体miRNA在肝细胞癌发展过程中的相关研究进展作一综述。     

miRNA与肝细胞癌的研究进展

近年来的研究提示,miRNA在肝细胞癌(HCC)发生、发展中起重要作用。miRNA通过参与各种肝炎病毒感染,影响各种癌基因与原癌基因的表达,影响细胞间的相互作用,作用于各种细胞周期蛋白及相关激酶,调节各种凋亡因子和转录因子,生长因子及生长因子受体的表达,在HCC的发生中起重要的作用。一些特异性表达的miRNA可以作为诊断HCC的标准,同时也是预后和治疗的靶点。     

肿瘤标志物在原发性肝细胞癌诊断中的价值

肝细胞癌(HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,与肝硬化密切相关,通常由于诊断较晚而预后很差,当病变进展时,已失去了任何有效的治疗.因此,早期诊断对这种疾病的处理很重要.肿瘤标志物(tumor marker)是指示体内肿瘤存在并反映其一定的生物学特性的生化物质.甲胎蛋白(AFP)、血清铁蛋白(SF)、糖抗原CA199、CA125、CA50、CA153,是临床上常用的几项肿瘤标志物.本文旨在探讨其在原发性HCC诊断中的价值.     

肝细胞癌的CT诊断价值

肝细胞癌,又称原发性肝癌,多由乙型肝炎经肝硬化发展而来.临床表现为肝区疼痛,消瘦,乏力,黄疸.早期CT表现肝内单发或多发的圆形或类圆形低密度肿块影.增强扫描以动脉期强化为主要特征.做好早期诊断对患者意义很大,可以尽早的为患者实施手术治疗或动脉栓塞治疗.     

miR-24-3p在肺结核病患者血清中的表达及其临床意义

目的 探讨miR-24-3p在肺结核病患者血清中的表达及其作为分子标志物的诊断价值.方法 选取在新疆喀什地区第一人民医院就诊的肺结核病患者50例为病例组(肺结核病组),其中活动性肺结核30例,非活动性肺结核20例;其他肺部疾病患者30例及健康体检者30例为健康对照组,采用qRT-PCR法测定血清中miR-24-3p的相...     

血清microRNA-21在食管鳞状细胞癌中表达的临床意义

目的 探讨食管鳞状细胞癌（ESCC）患者血清中外核体microRNA-21（miRNA-21）表达水平的临床意义.方法 从51例ESCC患者（ESCC组）血清中分离出外核体,提取总RNA,通过实时定量PCR技术检测miRNA-21的表达情况.以良性病变且无全身性炎性反应的41例患者作为对照组.结果 ESCC组患者血清中外核体miRNA-21表达水平明显高于对照组患者（P〈0.01）,而在已去除外核体的剩余血清中检测不到miRNA-21.ESCC患者血清外核体能在体外诱导食管鳞状细胞癌细胞增殖.外核体miRNA-21高表达亚组中年龄≥68岁患者比例、T3/T4型比例、III/IV期患者比例明显高于低表达亚组,而发生癌症转移患者的比例明显降低（P〈0.05,P〈0.01）.结论 ESCC患者血清中外核体miRNA-21表达明显上调,外核体miRNA-21表达水平与肿瘤进展和侵袭性密切相关,提示外核体miRNA-21可能是肿瘤治疗的一个有效靶标.     

Anti-miRNA-21增加肝细胞癌Huh 7细胞对吉非替尼的敏感性

为了探讨anti-miRNA-21与肝细胞癌Huh 7细胞对吉非替尼敏感性之间的关系,通过MTT法和流式细胞术检测anti-miRNA-21联合吉非替尼对Huh 7细胞增殖和凋亡的影响。用Western blot检测anti-miRNA-21对同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)表达的影响,以及联合吉非替尼对ERK/Akt信号通路相关蛋白表达的影响。结果显示,anti-miRNA-21联合吉非替尼可显著抑制Huh 7细胞增殖(P<0.05),并促进其凋亡;anti-miRNA-21可以上调Huh 7细胞中PTEN的表达;miRNA-21联合吉非替尼对ERK/Akt信号通路的抑制高于吉非替尼组。结果表明,anti-miRNA-21可以增加肝细胞癌Huh 7细胞对吉非替尼的敏感性。     

microRNA-224在肝细胞癌组织和血浆中表达的相关性

目的 探讨microRNA-224(miR-224)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者癌组织与血浆中表达的相关性.方法 采用qRT-PCR检测20例HCC患者的癌组织、癌旁组织、术前血浆及20例健康人血浆的miR-224表达量,比较癌组织与癌旁组织、HCC患者与健康人血浆miR-224的表达差异,分析miR-224在HCC血浆与癌组织中表达的相关性.结果 ①miR-224在HCC癌组织、癌旁组织、血浆及健康人血浆中的平均表达量分别为(0.14±0.04)、(0.02±0.01)、(1.15±0.26)和(0.11±0.03).癌组织miR-224表达量高于癌旁组织(P＜0.01),HCC患者血浆miR-224表达量高于健康人血浆(P＜0.01);②miR-224在HCC血浆及相应癌组织中的相对表达量呈正相关(P＜0.001).结论 HCC血浆miR-224表达量高于健康人群,并与肝癌组织表达量呈正相关,血浆miR-224有可能成为一种新的血清学指标用于肝癌诊断.     

microRNA-21对人甲状腺乳头状癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨microRNA-21(miR-21)在人甲状腺乳头状癌中的表达及其对人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖和凋亡能力的影响?方法:通过qRT-PCR检测12对甲状腺乳头状癌组织(PTC)与癌旁正常组织中miR-21的表达差异;将miR-21抑制试剂(Anti-miR-21)?过表达试剂(miR-21 mimic)分别转染入K1细胞,并各自设立阴性对照组,运用qRT-PCR验证K1细胞中miR-21的表达;MTT实验检测miR-21对K1细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测转染后K1细胞凋亡的变化,Western blot检测细胞凋亡增殖相关蛋白的表达情况?结果:miR-21在PTC组织中的表达明显高于癌旁正常甲状腺组织(P < 0.05);与阴性对照组相比,瞬时转染Anti-miR-21的K1细胞miR-21的表达明显减弱(P < 0.01);MTT实验结果显示抑制miR-21表达后,K1细胞的增殖能力明显下降(P < 0.05);流式细胞仪检测显示转染Anti-miR-21后的K1细胞凋亡明显增加,凋亡率为19.5%,阴性对照组的凋亡率为9.4%;Western blot结果显示转染Anti-miR-21组K1细胞Bcl-2表达降低,Bax表达升高?转染miR-21mimic的K1细胞增殖和凋亡无明显改动?结论:miR-21在人甲状腺乳头状癌中呈高表达,抑制miR-21的表达能显著降低K1细胞的增殖能力,增加K1细胞凋亡率?     

miR-21在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的探讨微小RNA-21(miR-21)在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与临床病理特征间的关系。方法采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)检测48例上皮性卵巢癌组织、24例良性上皮性卵巢肿瘤及15例正常卵巢组织标本中miR-21表达。结果茎环real-timeRT-PCR检测miR-21表达的敏感性和特异性良好;miR-21在卵巢癌组织中的相对表达量(4.849±1.813)显著高于良性卵巢肿瘤(1.133±0.291)及正常卵巢组织(P<0.01),后两组间miR-21表达无明显差异。miR-21表达随卵巢癌的临床分期和组织分级的进展呈上升趋势,而且在有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P均<0.01)。结论miR-21在上皮性卵巢癌组织中的表达升高,提示其可能在卵巢癌的发生发展中发挥致癌基因的作用,并且与卵巢癌的演进及不良预后密切相关。     

血清miR-148a检测作为肝癌标志物的临床价值研究

目的:探讨血清miR-148a作为肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)标志物的临床应用价值?方法:实时荧光定量PCR法(quantitative real time-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测HCC患者血清miR-148a水平,并与良性肝病组以及健康对照组进行比较分析?结果:HCC患者血清miR-148a水平明显低于良性肝病组及健康体检组 (P < 0.001)?ROC曲线(receiver operating characteristic curve)结果显示HCC组 vs. 良性肝病组的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.666,95%置信区间(Confidence interval,CI)为0.581~0.744,诊断灵敏度为67.7%,特异性为59.2%(P < 0.001);HCC组 vs. 健康对照组的AUC为0.746,95%CI为0.663~0.818,诊断灵敏度为43.6%,特异性为96.1%(P < 0.001)?血清miR-148a与HCC患者肿瘤大小(P=0.011)及TNM分期(P < 0.001)有关,而与其他临床参数无明显相关性(P > 0.05)?HCC患者术后血清miR-148a水平与术前相比明显升高(P=0.023);而术后出现复发或转移的HCC患者其血清miR-148a水平明显下降,并且低于术前水平(P < 0.05)?生存曲线分析显示血清miR-148a低表达的HCC患者其总生存率明显低于血清miR-148a高表达的HCC患者(P < 0.001),Cox回归分析进一步显示血清miR-148a可作为HCC预后评估的一个独立决定因子?结论:HCC患者血清miR-148a明显降低,并与HCC病情?恶性进展及预后相关,可作为HCC诊断与鉴别诊断?病情评估?疗效观察及预后判断的指标?     

肝细胞癌患者CNTN1检测的临床意义

检测肝细胞癌（HCC）患者肿瘤组织中接触蛋白1（CNTN1）的表达水平,及其对患者疾病预后价值的分析。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和Western blot 检测25 例新鲜HCC 样本,以及邻近非肿瘤组织中CNTN1 mRNA 和蛋白的表达,同时采用免疫组织化学法检测135 例石蜡包埋HCC样本与邻近非肿瘤组织中CNTN1 的蛋白表达,统计分析其表达与HCC患者临床病理特征的关系,采用RNAi技术干扰肝癌细胞系HepG2 CNTN1的表达,对其进行肿瘤细胞侵袭和转移能力检测。结果25例新鲜HCC样本qRT-PCR和Western blot检测结果表明,与邻近非肿瘤组织相比,HCC 组织中CNTN1 mRNA 和蛋白表达均上调（ p<0.05）。免疫组织化学法结果证实62.22%（84/135）HCC 样本为CNTN1 阳性,高于邻近非肿瘤组织17.78%（24/135）（ p<0.05）。Kaplan–Meier 生存分析表明,CNTN1 阳性HCC 患者无疾病生存率和总生存率低于阴性患者。CNTN1 表达与HCC患者肿瘤转移、乙型肝炎病毒感染、淋巴结肿瘤转移分期及肿瘤直径相关（ p<0.05）。RNAi 实验表明,干扰CNTN1 表达后HepG2 细胞活力下降（ p<0.05）。多重变量分析表明,CNTN1 表达是HCC 患者无疾病生存期和总生存期的独立标志物（ p<0.05）。结论HCC 患者肿瘤组织中CNTN1 蛋白表达上调,且其表达与肿瘤恶性状态密切相关,参与肝细胞癌的侵袭和转移,可以作为HCC 患者疾病预后的独立标志物。     

一种新的肝细胞癌生物标志物——血浆microRNA-21

3背景 肝细胞癌是一种常见的癌症．特别是在日本和其他的东亚国家，是世界第三大的肿瘤相关死亡原因。肝细胞癌高死亡率的原因是因为肿瘤发现时，肝内或肝外转移已经无法行切除术。     

注重肝癌诊断模式研究——肝纤维化诊断模式带来的启发和思考

原发性肝细胞癌(HCC)的早期诊断目前仍然是临床一大难题,以甲胎蛋白(AFP)为代表的肿瘤标志物及多种肝脏酶学、细胞因子、糖蛋白等的检测对HCC诊断具有一定价值, 但实际应用中存在敏感性、特异性不高等诸多问题.多种肝纤维化(硬化)实验诊断模型的成功建立和运用提示,大样本临床研究是建立多参数数学诊断模型的前提条件,所建立的模型在临床大样本及随访病例中经过验证,具有较高的敏感性、特异性及可行性.因此,在HCC实验诊断中,建议重视合理、综合利用现有的多种实验室指标,这样既能提高早期诊断率,又能有效节约有限的医疗资源,是现阶段切实可行的提高原发性HCC诊断的有效手段.     

肝细胞癌组织中P16、P21蛋白表达的临床病理意义

目的　探讨P16和P2 1蛋白表达与肝细胞癌 (HCC)临床病理的关系。方法　应用免疫组织化学SABC法检测 4 6例HCC癌及其配对 38例癌旁肝组织P16和P2 1蛋白的表达 ,结合临床病理资料分析其意义。结果　P16蛋白的表达缺失率 ,在HCC癌组织 (5 8.7% )明显高于癌旁肝组织 (34.2 % ) (P <0 .0 5 ) ;在EdmondsonⅢ～Ⅳ级HCC(78.9% )显著高于EdmondsonⅠ～Ⅱ级HCC(4 4 .4 % ) (P <0 .0 5 ) ,在直径 >3cmHCC(6 5 .0 % )显著高于直径≤ 3cm早期HCC(16 .7% ) (P <0 .0 1) ,但在有无门脉癌栓组间比较则无明显差别。P2 1蛋白的表达缺失率 ,在HCC(80 .4 % )也显著高于癌旁组织 (4 7.4 % ) (P <0 .0 1) ,但在不同分化程度、肿瘤大小及有无门脉癌栓形成组间比较则无统计学差别。结论　P16蛋白的表达缺失与HCC分化程度及侵袭进展密切相关。