I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生

目的　观察 型内皮素受体 (ETA)反义寡核苷酸(ODN)对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和内膜增生的抑制作用 .方法　 1细胞培养 :取家兔主动脉中膜消化后培养传代 ,经抗 α- actin鉴定后使用第 4～ 6代传代细胞 ;2人工合成ODN:经 Genbank检索筛选 ,合成含 18bp ETA- ODN片段 ,再对 5 端硫代修饰以增加稳定性 ,同时行地高辛标记以检测反义片段的细胞膜穿透性 ;3 MTT分光光度法检测 ETA-ODN对 VSMC增殖的抑制作用 ;4运用放射受体结合分析法 (1 2 5I- ET- 1)了解 ODN对 ETA蛋白表达的抑制作用 ,以探讨其反义作用 ;5兔颈动脉空气干燥模型在体研究 ODN对血管内膜增生的抑制作用 :应用 F- 12 7凝胶载体携带 ETA-ODN(3.0μmol· L- 1 )导入血管周围 ,术后不同时间观察增生内膜相对厚度 .结果　 ODN于培养后 12 h进入细胞内 ,并逐渐增加 ;15 μmol· L- 1 ETA- ODN对 VSMC增殖具有抑制作用 ,2 4h后即有显著作用 ;ETA- ODN对 ETA表达亦有明显的抑制作用 ,表现为 CPM于 2 4h逐渐减少 ;ETA- ODN导入后 ,血管增生内膜相对厚度减少 .结论　 ETA- ODN以浓度和时间依赖方式抑制 ETA蛋白表达以及 VSMC的增殖 ;反义寡核苷酸是通过反义机制实现对 ETA蛋白和 VSMC增殖的抑制作用     

反义IGF-IR基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的流式细胞术分析

目的　利用流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM)探讨反义IGF IR基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的作用。方法　根据IGF IRcDNA序列设计其正义、反义基因片段 ,并对部分碱基进行硫代磷酸修饰。实验分为空白对照组、正义核酸组和反义核酸组 ,应用流式细胞技术检测DNA含量 ,根据DNA直方图分析凋亡细胞情况。应用透射电镜观察了凋亡细胞的形态学变化。结果　经反义寡核苷酸 5、10、15、2 0μmol·L-1处理的胶质瘤细胞其凋亡率分别为 16 0 6 %±3 86 %、2 4 5 2 %± 4 84%、36 6 9%± 5 5 3%和 43 85 %±5 72 % ,而用正义寡核苷酸 5、10、15、2 0 μmol·L-1处理的胶质瘤细胞其凋亡率分别为 3 76 %± 1 2 2 %、3 14%±1 15 %、2 5 1%± 0 93%和 3 2 6 %± 1 15 % ,空白对照组(野生型 )自然凋亡率为 1 0 1%± 0 89%。反义核酸组与对照组相比有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,而正义核酸组与空白对照组无明显差异 (P >0 0 5 )。凋亡细胞形态上表现为细胞体积缩小 ,染色质凝聚 ,并聚集于核膜下成新月状或块状 ,胞膜内馅形成膜包裹的核碎片或细胞器 ,最后出泡形成凋亡小体。结论　反义IGF IR基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡是其抑制细胞增殖机制之一。通过FCM分析可较准确地判定肿瘤细胞凋亡情况     

HPV16 E6基因反义寡核苷酸诱导SiHa细胞凋亡的研究

目的　探讨 HPV16 E6反义寡核苷酸 (AE6 )对宫颈癌细胞 Si Ha细胞凋亡的诱导作用 .方法　应用细胞生长抑制实验 (MTT)、透射电子显微镜 (TEM)、DNA电泳及流式细胞术 (FCM)研究 AE6对 Si Ha细胞生长抑制、超微结构改变、核酸及细胞增殖周期的影响 .结果　 AE6 1～ 40μmol· L- 1对 Si Ha细胞抑制率为 9.9%～ 6 0 .3% ,相互间有显著性差异(P<0 .0 5 ) .AE6 2 0 μmol· L- 1作用 72 h,Si Ha出现凋亡形态学改变 ,DNA电泳呈梯状带型 .AE6 5 ,10 ,2 0和 40μmol· L- 1 作用 72 h后 ,Si Ha细胞凋亡率分别为 1.9% ,7.9% ,8.1%和 19.7% .结论　 HPV16 E6基因与 HPV16阳性宫颈癌细胞的增殖和细胞凋亡密切相关 ,AE6可通过诱导 Si Ha细胞凋亡而抑制其生长 ,它的分子克隆有助于阐明宫颈癌发生的分子机制     

氧化低密度脂蛋白致血管平滑肌细胞损伤和阿司匹林的干预

目的 :探讨阿司匹林 (aspirin)对氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)致血管平滑肌细胞 (VSMC)损伤的保护作用及其机制。方法 :硝酸酶还原法测定VSMC培养液中一氧化氮 (NO)水平 ;MTT比色法测VSMC增殖活度 ;比色底物法检测VSMC培养液中的组织纤溶酶原激活剂 (t PA)和纤溶酶原激活剂抑制剂 1(PAI 1)的活性。结果 :5 0mg·L- 1 的oxLDL作用 2 4h可使VSMC培养液NO水平由 (82 .0 4± 7.89) μmol·L- 1 降低到 (4 8.11± 6 .4 3) μmol·L- 1 ,并明显刺激VSMC增殖 ,使其增殖活度 (MTT OD值 )明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;同时培养液中PAI 1活性显著升高 ,t PA活性显著降低。治疗剂量 (3,6mmol·L- 1 )Aspirin可显著提高VSMC培养液中NO水平 ,明显抑制oxLDL对VSMC增殖的刺激作用 ,并显著降低培养液中PAI 1活性 ,升高t PA活性。结论 :Aspirin能抑制oxLDL刺激的VSMC增殖 ,逆转oxLDL致VSMC损伤     

胰岛素对大鼠血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨胰岛素对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响 .方法　体外进行大鼠血管平滑肌细胞的培养 ,以 5～ 10代细胞为实验对象 ,随机分成空白对照组和胰岛素组 ,胰岛素组又按浓度 1× 10 - 9、1× 10 - 8、1× 10 - 7和 1× 10 - 6 mol· L- 1分为 4小组 ,在加药后 2 4 h、4 8h和 72 h用 MTT法分析细胞增殖活力 ,免疫细胞化学观察细胞核增殖抗原 (PCNA)的表达 ,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的 d UTP缺口末端标记法检测 H2 O2 诱导的细胞凋亡 .结果　加药 4 8h后 ,1× 10 - 9mol· L- 1胰岛素组的 MMT A值 (0 .4 2± 0 .0 4 )高于空白组(0 .30± 0 .0 2 ) ,P<0 .0 5 ,低于 1× 10 - 6 mol· L- 1 胰岛素组(0 .5 2± 0 .0 5 ) ,P<0 .0 5 ;1× 10 - 9mol·L- 1胰岛素作用 4 8h后细胞的 MMT A值比空白组增加 4 0 % ,高于 2 4 h细胞的MMT A值增加率 (2 7% ) ,P<0 . 0 5 ;1× 10 - 9～ 1× 10 - 6mol· L- 1 胰岛素作用 4 8h后细胞 PCNA的表达率 (5 0 %～80 % )均高于空白对照组的 (30 % ) P<0 .0 5 ;加药 2 4 h后 ,1× 10 - 6 mol· L- 1胰岛素组细胞凋亡率 (30 % )低于空白组(70 % ) P<0 .0 5 .结论　胰岛素有明显促 VSMC(vascularsmooth m uscle cells)增殖的作用 ,并且这种作用时间和浓度依赖性 ;同时胰岛素     

鼠心肌成纤维细胞NOS活性的变化和AVP对NO合成的影响

目的　探讨在基础状态和精氨酸升压素 (AVP)干预下 ,心肌成纤维细胞 (CFs)一氧化氮合酶 -一氧化氮 (NOS-NO)系统活性的变化 .方法　胰酶消化法分离、培养新生 SD大鼠 CFs,采用硝酸还原酶法和分光光度法分别测定基础状态和 AVP干预下 CFs的 NOS活性和 NO含量 .结果　 1基础状态下 CFs的 36 h组 NO含量 (4 2± 5 ) μm ol· L- 1 和 NOS活性 (6 17± 83)μkat· L- 1 ,显著高于 6 h组 (14± 3)μmol·L- 1 ,(16 7± 6 7)μkat· L- 1 . 2 AVP干预下 36 h组 NO含量(6 2± 1) μm ol· L- 1和 NOS活性 (115 0± 10 0 ) μkat· L- 1也显著高于 6 h组 (34± 4) μmol· L- 1 ,(6 0 0± 33) μkat· L- 1 ,且AVP干预组的 NO含量和 NOS活性均高于同时间点基础状态组(P<0 .0 5 ) . 3CFs的 NO含量和 NOS活性随 AVP浓度的增高而增加 ,其中 10 - 6mol· L- 1 AVP组 (6 3± 6 ) μmol· L- 1 ,(110 0± 5 0 )μkat· L- 1 和 10 - 7mol· L- 1 AVP组 (6 9± 6 )μmol· L- 1 ,(12 0 0± 5 0 )μkat· L- 1 都显著高于对照组 (2 9± 5 )μmol· L- 1 ,(4 5 0± 83) μkat· L- 1 ,10 - 9mol· L- 1 AVP组(32± 2 )μmol· L- 1 ,(5 0 0± 133)μkat· L- 1 和 10 - 8mol·L- 1 AVP组 (37± 2 ) μmol· L- 1 ,(6 0 0     

皮肤局部外涂IL-20,K16反义寡核苷酸乳剂对银屑病样皮损的影响

目的 :研究白细胞介素 2 0 (IL 2 0 ) ,K16反义寡核苷酸乳剂皮肤局部外涂对豚鼠银屑病样皮损的影响 .方法 :用5 0g·L-1心得安乳剂外涂豚鼠耳背部皮肤成功诱导银屑病样动物模型 ,然后分别以IL 2 0和K16反义寡核苷酸、正义寡核苷酸乳剂及单纯乳剂基质作用于皮损 ,进而通过HE染色观察皮损的变化和原位杂交检测其表达的水平 .结果 :IL 2 0反义寡核苷酸治疗组较正义寡核苷酸组及单纯乳剂基质对照组皮损评分显著降低 (4 0± 1 0vs 7 0± 0 9,7 6± 1 2 ,P <0 0 1) ;K16反义寡核苷酸治疗组较正义寡核苷酸组及单纯乳剂基质对照组皮损评分也有降低 (5 2± 1 0vs 7 2± 1 0 ,7 6± 1 2 ,P <0 0 5 ) .治疗组IL 2 0和K16的表达与对照组相比均有不同程度的降低 ,具有阳性杂交信号的细胞数量减少 ,信号强度减弱 .结论 :IL 2 0和K16反义寡核苷酸能够抑制豚鼠银屑病样皮损的发展 ,甚至使其逆转 ;IL 2 0和K16反义寡核苷酸乳剂外涂可以抑制靶mRNA的水平及表达 .     

β-胡萝卜素对病毒转化细胞的影响

目的　探讨β-胡萝卜素 (β- C)对病毒转化细胞的抑制作用 .方法　体外培养人腺病毒转化的 2 93细胞和 EB病毒转化的 Raji细胞 ,培养时添加 0 ,10 ,5 0和 10 0 μmol· L- 1的β- C作用 2 4,48和 72 h后 ,进行细胞计数 ,测定细胞生长抑制率 ;EL ISA-结晶紫方法测定 A值 ,计算细胞存活量 ;采用快速 CPE(细胞病变 )方法测定复制缺陷型腺病毒在 2 93细胞上的病毒滴度 .结果　 10～ 10 0μmol· L- 1 的β- C对 2 93细胞和 Raji细胞均有抑制作用 ,细胞存活量减少 ,抑制率分别是15 .6 % ,10 .1% (10 μm ol· L- 1 ) ;19.7% ,2 2 .4% (5 0 μmol· L- 1 )和 33.6 % ,2 9.3% (10 0μmol· L- 1 ) ,P<0 .0 5 .快速CPE结果显示加入 β- C后 ,复制缺陷型腺病毒在其辅助细胞 -2 93细胞上的复制增殖能力明显下降 ,病毒滴度降低 ,空斑形成单位 (× 10 9pfu· L- 1 )分别为 98± 41(10μmol· L- 1 ) ,75± 2 9(5 0 μmol· L- 1 )和 6 3± 31(10 0 μmol· L- 1 ) ,与对照组 185±2 5 (0 μmol· L- 1 )相比 ,P<0 .0 5 .结论　 β- C对病毒转化的2 93细胞和 Raji细胞的生长增殖具有明显的抑制作用 ,对 2 93细胞内整合的腺病毒早期基因 E1的表达具有下调作用     

韧粘素反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的探讨韧粘素 (TN)反义寡核苷酸 (ODN)对培养大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的抑制作用。方法采用细胞计数及快速竞争性逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)等方法 ,观察不同剂量 ( 5、10、2 0 μg/ml)TN反义ODN和正义ODN对体外培养大鼠VSMC的增殖以及TNmRNA表达水平的影响。　结果TN反义ODN可有效抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖 ,作用呈剂量依赖性 (反义组 5、10、2 0 μg/ml剂量细胞计数分别为 10 5/ml× ( 4 .99± 0 .2 1)、( 4 .0 8± 0 .14 )、( 2 .85± 0 .39) ,对照组为 10 5/ml× ( 5 .95± 0 .41) ,(P <0 .0 5 ) ;TN反义ODN亦可下调TNmRNA表达水平 (反义组 0 .32± 0 .0 5 ,对照组为 0 .5 2± 0 .0 8;P <0 .0 1) ;而TN正义ODN则无上述作用。　结论TN反义ODN可能通过下调TNmRNA表达水平而抑制血管平滑肌细胞的增殖。     

脂质体介导的99mTc标记c-myc mRNA反义寡核苷酸的反义作用效果的研究

目的探讨脂质体介导的99mTc标记癌基因c-myc mRNA的反义寡核苷酸能否抑制癌细胞的生长和癌蛋白的表达.方法合成15 bp的癌基因c-myc mRNA的反义、正义及无义寡核苷酸,用99mTc标记后(简称99mTc-DNA),一部分用脂质体包裹,以不同放射性强度的99mTc-DNA及脂质体包裹的99mTc-DNA转染细胞,于转染后不同时间测定细胞摄取率,在转染后18 h测定细胞返流比率,用四唑盐比色实验检测反义抑制细胞的生长状况,用流式细胞术测定癌蛋白的表达.结果在1～5 h内,细胞的摄取率随时间的延长而增加,脂质体包裹的99mTc-DNA的细胞摄取率明显高于未用脂质体包裹的99mTc-DNA.四唑盐比色实验,随着脂质体介导的99mTc-反义DNA剂量的增加,细胞数量逐渐减少,而正义、无义寡聚核苷酸组,细胞数量则没有减少的趋势.细胞的返流比率,反义、正义、无义寡核苷酸分别为39.51%、44.12%、63.92%.测定癌蛋白的荧光强度,反义寡核苷酸组2.9860±0.3733、正义寡核苷酸组4.2600±0.2218、无义寡核苷酸组5.2620±0.8562,反义寡聚核苷酸组的荧光强度明显低于正义和无义寡聚核苷酸组.结论脂质体介导的99mTc标记的反义寡核苷酸能抑制癌细胞的生长和癌蛋白的表达.     

survivin反义寡核苷酸对K562细胞增殖的抑制作用

目的:采用反义寡核苷酸技术研究凋亡抑制基因survivin对白血病细胞增殖的影响.方法:1.细胞抑制率实验分5组:111nmol/L反义寡核苷酸组、333nmol/L反义寡核苷酸组、555nmol/L反义寡核苷酸组、777nmol/L反义寡核苷酸组、空白组.转染后24、48、72h收集细胞进行检测:用台盼蓝染色进行活细胞计数,计算细胞抑制率.2.细胞周期及survivin蛋白表达实验分4组:555 nmol/L寡核苷酸组、544nmol/L无义组、脂质体组、空白组,转染后24、48h流式细胞仪检测细胞周期;免疫组织化学方法检测survivin蛋白水平.结果:不同浓度的反义寡核苷酸对K562细胞的细胞抑制率均高于空白组(P<0.05),并随反义寡核苷酸的浓度增大抑制率增加;随作用时间延长,抑制作用越明显,抑制率与浓度及时间呈正相关;555nmol/L反义寡核苷酸作用后,K562细胞被阻滞在G0/G1期,细胞周期进程受到明显阻滞,而无义、脂质体、空白组细胞周期进程无明显变化(P<0.05);反义寡核苷酸作用48h后survivin蛋白表达水平明显降低,与各对照组比较有显著性差异(P<0.05).结论:survivin反义寡核苷酸能抑制K562细胞的增殖.     

韧粘素反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的探讨韧粘素(TN)反义寡核苷酸(ODN)对培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用. 方法采用细胞计数及快速竞争性逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,观察不同剂量(5、10、20μg/ml)TN反义ODN和正义ODN对体外培养大鼠VSMC的增殖以及TNmRNA表达水平的影响. 结果TN反义ODN可有效抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖,作用呈剂量依赖性(反义组5、10、20μg/ml剂量细胞计数分别为105/ml×(4.99± 0.21)、(4.08±0.14)、(2.85±0.39),对照组为105/ml×(5.95±0.41),(P＜0.05);TN反义ODN亦可下调TN mRNA表达水平(反义组0.32±0.05,对照组为0.52±0.08;P＜0.01);而TN正义ODN则无上述作用. 结论TN反义ODN可能通过下调TNmRNA表达水平而抑制血管平滑肌细胞的增殖.     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸治疗肺癌的实验研究

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)反义寡核苷酸对C57BL 6小鼠肺癌的抑制作用。方法　制作C57BL 6小鼠皮下肺癌模型 30只 ,分为VEGF反义寡核苷酸 (ASODN)治疗组、VEGF正义寡核苷酸 (SODN)治疗组及对照组。接种Lewis肺癌细胞后 2 4h内 ,用ASODN及SODN皮下注射治疗 ,对照组只注射生理盐水 ,观察小鼠肿瘤的生长情况以及组织形态学改变。标本常规石蜡切片 ,HE染色。结果　对照组、VEGF反义寡核苷酸治疗组、VEGF正义寡核苷酸治疗组平均瘤重分别为 (7.83± 0 .78)g、(4 .4 9± 0 .4 3)g和 (7.73± 0 .6 9)g。VEGF反义寡核苷酸治疗组、VEGF正义寡核苷酸治疗组抑瘤率分别为 4 2 .7%、5 .9%。结论　原位注射VEGF反义寡核苷酸能抑制小鼠肺癌生长。     

电针在应激大鼠胃粘膜保护作用中对氧自由基和前列腺素的影响

目的　观察电针对应激大鼠血浆超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛 (MDA)和前列腺素 E2 (PGE2 )的影响 ,以探讨电针对胃粘膜保护作用的机制 .方法　将 72只大鼠平均分为空白对照组 ,应激组和电针组 ,每组再按实验时间 1,3和 5d平均分为 3小组 (每小组 8只 ) .利用生化法和放免分析法测定各组大鼠血浆 SOD,MDA和 PGE2 含量并计算各组溃疡指数 (UI) .结果　应激组较空白对照组大鼠血浆 SOD明显下降 (17.0± 2 .9)μmol· L- 1 → (11.9± 3.4)μmol· L- 1 ,MDA明显上升 (4 .85± 2 .38) μmol· L- 1→ (7.5 6± 2 .48)μmol· L- 1 ,PGE2 明显下降 (2 .74± 0 .77) ng· L- 1 → (1.5 4± 0 .2 5 ) ng· L- 1 ,P<0 .0 5 .UI明显上升 (1.1± 0 .4)→ (2 8.0± 4.1) ,P<0 .0 1.电针组较应激组血浆 SOD明显上升 (11.9± 3.4) μmol· L- 1→ (17.7± 4.8) μm ol· L- 1 ,MDA明显下降 (7.5 6± 2 .48) μmol· L- 1→ (4 .14± 1.78) μm ol· L- 1 ;PGE2 明显上升 (1.5 4± 0 .2 5 ) ng· L- 1 → (3.2 1± 0 .38) ng·L- 1 ;UI明显下降 (2 8.0± 4.1)→ (19.0± 2 .3) ,P<0 .0 1.电针组 PGE2 实验 5 d组较实验 1d组明显上升 (3.2 1± 0 .38) ng· L- 1 → (4 .5 2± 1.0 6 ) ng· L- 1 ,P<0 .0 5 .结论　电针对     

全反式维甲酸对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖及细胞周期素E表达的影响

目的　研究全反式维甲酸 (ATRA)对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖及细胞周期素E(Cy clinE)蛋白表达水平的影响。方法　血管平滑肌细胞采用组织贴块法培养。ATRA(2 .5× 10 - 6 mol·L- 1 )作用于经 2 0 %胎牛血清刺激后的VSMC ,2 4h后分别行3H TdR掺入实验测定和蛋白印迹检测CyclinE蛋白表达。 结果　ATRA明显抑制ATRA的DNA合成 (P <0 .0 1)和CyclinE蛋白的表达 (P <0 .0 5 )。结论　ATRA抑制CyclinE蛋白的表达是抑制VSMC增殖的原因之一。     

丙泊酚对缺氧/复氧培养大鼠心肌细胞c-Fos表达及LDH的影响

目的 :研究丙泊酚对缺氧 /复氧培养大鼠心肌细胞 c- Fos表达和培养基乳酸脱氢酶 (L DH)含量的影响。方法 :建立 S D大鼠心肌细胞原代培养及缺氧 /复氧模型。将培养细胞按孔随机分为 6组 : 组为对照组 , 组为缺氧 /复氧组 ; 、 、 和 组为在缺氧前 10 min开始分别加入脂肪乳、丙泊酚 2 5μmol· L- 1 、5 0μmol· L- 1 和 10 0μmol· L- 1。用免疫组化法和灰度分析观察 3种剂量的丙泊酚对复氧 2 h c- Fos表达的影响。用生化比色法测定复氧3h时培养基中 L DH含量。结果 :缺氧 /复氧使心肌细胞 L DH漏出量明显增加 (P<0 .0 5 ) ,3种浓度的丙泊酚均能明显抑制细胞 L DH释放 (P<0 .0 5 )。 组与 组相比平均灰度值明显降低 (P<0 .0 5 ) ; 、 组与 组比较平均灰度值均显著增高 (P<0 .0 5 )。结论 :3种浓度的丙泊酚均有心肌保护作用且 5 0μmol· L- 1 和 10 0μmol· L- 1 浓度的丙泊酚能明显抑制缺氧 /复氧培养大鼠心肌细胞 c- Fos表达     

神经节苷脂对PC-12细胞的抗凋亡作用

目的　探讨神经节苷脂 (ganglioside GM1)对帕金森病 (Parkinson's disease,PD)的治疗机制 .方法　以左旋多巴(L - dopa)处理的 PC12 (大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 )细胞为多巴胺 (Dopam ine,DA)神经元的细胞凋亡模型 ,应用透射电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪及免疫组化等技术 ,观察GM1对凋亡中的 PC12细胞的影响 .结果　 2 4h后空白对照组凋亡率为 2 .5 % ,2 0 0μm ol· L- 1 L - dopa处理组的凋亡率为 6 1.6 % ;10 0 ,5 0和 10μmol· L- 1 的 GM1各加 2 0 0μmol· L- 1L - dopa处理组 2 4h的凋亡率分别为 2 9.7% ,5 2 .3% ,5 5 .7% ,与 L - dopa处理组比较有显著差异 (P<0 .0 5 ) .结论　在一定浓度范围内的 GM1可抗 L- dopa诱导的 PC12细胞的凋亡 ,并提示 GM1抗凋亡作用可能在于其对神经细胞膜的保护     

端粒酶正义寡核苷酸对鼻咽癌细胞生长的作用

目的：探讨端粒酶正义寡核苷酸对鼻咽癌细胞生长的作用。方法：脂质体介导端粒酶正义，反义及无义寡核苷酸转染鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞，MTT法检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期。结果：端粒酶正义寡核苷酸与反义寡核苷酸一样中抑制鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞的生长，且呈剂量和时间依赖性。1.5μmol.L^-1正义寡核苷酸与CNE1细胞共培养6，12，24和48h时抑制率分别为16．3％，15．6％，20．2％和26．3％，浓度为4．5μmol.L^-1时抑制率分别为22．5％，21．5％，32．4％和39．9％；在CNE2Z细胞，浓度为1．5μmol.L^-1时抑制率分别为7．7％，25．2％，27．0％和28．8％，浓度为4．5μmol.L^-1时抑制率分别为18．1％，30．1％，32．8％和32．9％；同时流式细胞仪检测到凋亡峰，含量分别为25．3％和19．3％，无义寡核苷酸无此作用。结论：端粒酶正义寡核苷酸可抑制鼻咽癌细胞的生长。     

米非司酮合并应用皮质醇对大鼠性腺性激素合成酶的影响

目的 :研究米非司酮和皮质醇对大鼠性腺性激素合成酶 3 β HSD和 17β HSD的影响。 方法 :将雌性假孕大鼠处死 ,取黄体化孵巢匀浆 ,加孕烯醇酮后加药温孵 3h ;雄性大鼠处死 ,取睾丸间质细胞加入雄烯二酮后加药培养 ;用放射免疫分析方法分别测定孕酮和睾酮的生成量。结果 :10 μmol·L-1和 1μmol·L-1米非司酮分别使孕酮量增加 90 %和 62 % (P <0 0 5 ) ,而 10 0 μmol·L-1和 10 μmol·L-1皮质醇使孕酮量增加 146%和 97% (P<0 0 5 ) ,且两者合用时孕酮的生成量也有所增加。雄烯二酮存在时间质细胞睾酮分泌量增加 9倍 ,但米非司酮和皮质醇单用或合用均对睾酮的生成量无影响。结论 :本研究表明米非司酮和皮质醇均能提高卵巢 3 β HSD的活性 ,且两者合用时呈现协同作用 ,但对睾丸 17β HSD活性无直接影响     

短程全反式维甲酸对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨短程全反式维甲酸(ATRA)对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测ATRA对LoVo细胞的生长抑制率并筛选合适的药物用量,流式细胞仪检测ATRA诱导的肿瘤细胞周期和凋亡率变化。结果选择1.0μmol·L-1ATRA作为进一步实验的工作浓度。1.0μmol·L-1ATRA作用12 h后G1期细胞开始增多,48 h后G1期细胞明显增多并伴S期、G2/M期细胞减少(P<0.05)。1.0μmol·L-1ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率的组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论短程1.0μmol·L-1ATRA主要通过阻滞LoVo细胞于G1期并诱导其细胞发生早期凋亡,可明显抑制肿瘤细胞的增殖。