长链非编码RNA HOTAIR对甲状腺癌TPC-1细胞增殖和侵袭的影响及机制的研究

目的 探讨长链非编码RNA HOTAIR对甲状腺癌TPC-1细胞增殖和侵袭的影响及可能机制.方法 体外培养甲状腺癌TPC-1细胞,转染lncRNA HOTAIR干扰序列,应用实时定量PCR检测lncRNA HOTAIR和miR-20b的表达,生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA HOTAIR和miR-20b的靶向关系,MTT法检测各组TPC-1细胞增殖能力,Transwell实验检测各组TPC-1细胞的侵袭能力.结果 转染lncRNA HOTAIR干扰序列能够降低TPC-1细胞lncRNA HOTAIR的表达后,上调miR-20b的表达(P＜0.05);沉默lncRNA HOTAIR表达后,TPC-1细胞的增殖与侵袭能力下降(P＜0.05);生物信息学分析及双荧光素酶实验结果显示,lncRNA HOTAIR可以靶向调控miR-20b.结论 沉默lncRNA HOTAIR可以抑制甲状腺癌细胞TPC-1的增殖和侵袭,其机制可能与靶向调控miR-20b表达有关.     

长链非编码RNA HOTAIR在宫颈癌患者组织及HeLa细胞中的表达和影响

目的探讨长链非编码RNA HOTAIR在宫颈癌患者组织中的表达及对宫颈癌细胞系He La细胞增殖和凋亡的影响。方法 66例宫颈癌手术切除标本(包括癌组织和癌旁组织),实时荧光定量PCR检测HOTAIR的表达,分析其与临床病理特征的关系;用慢病毒介导shRNA干扰人宫颈癌细胞He La HOTAIR表达后,分别用CCK-8法、流式细胞术检测细胞增殖、周期和凋亡。结果 HOTAIR在宫颈癌组织中的相对表达量为8.25±0.46,高于癌旁组织的3.60±0.26(P0.001);HOTAIR的表达水平与临床病理分期(P0.05)、肿瘤大小(P0.05)、淋巴结转移(P0.05)密切相关;HOTAIR的表达被干扰后,He La细胞增殖明显减慢,48、72和96 h的抑制率分别为20%、24.6%和33.1%;细胞周期被阻滞于G0/G1期;HOTAIR干扰组细胞凋亡比例为12.37%±2.74%,高于对照组的5.94%±1.27%(P0.01)。结论 HOTAIR在宫颈癌组织中显著高表达,可以作为宫颈癌预测、判断预后的分子标志物和潜在的治疗靶点。     

长链非编码RNA HOTAIR对急性淋巴细胞白血病细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究长链非编码RNA HOTAIR调控糖皮质激素受体的表达对急性淋巴细胞白血病细胞增殖及凋亡的作用。方法:采用RT-qPCR法检测人正常骨髓基质细胞系HS-5及急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT-4、CCRF-CEM和CEM-C1中HOTAIR和糖皮质激素受体的表达。用si RNA沉默CEM-C1细胞中HOTAIR的表达,CCK-8法检测si-HOTAIR对CEM-C1细胞活力的影响; Brd U法检测si-HOTAIR对CEM-C1细胞增殖的影响以及对地塞米松抑制CEM-C1细胞增殖的增效作用; Hoechst 33342染色法和caspase 3/7活性检测法研究si-HOTAIR对CEM-C1细胞凋亡的影响;并采用Western blot法检测糖皮质激素受体的蛋白表达水平。结果:人急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT-4、CCRF-CEM和CEM-C1中HOTAIR的表达显著高于人正常骨髓基质HS-5细胞(P 0. 01)。在CEM-C1细胞中干扰HOTAIR表达后,细胞活力降低,细胞增殖被抑制并发生凋亡,地塞米松抑制CEM-C1增殖的作用被增强,糖皮质激素受体表达上调(P 0. 01)。结论:长链非编码RNA HOTAIR增强急性淋巴细胞白血病的活力,促进其增殖并抑制其凋亡,该作用可能与其抑制糖皮质激素受体的表达有关。     

干扰长链非编码RNA TUG1上调miR-26a缓解LPS诱导的脓毒症大鼠线粒体损伤和免疫紊乱

目的脓毒症(sepsis)是由感染引起的全身炎症反应综合征。本文主要研究干扰长链非编码RNA TUG1对LPS诱导的脓毒症大鼠线粒体损伤和免疫紊乱影响。方法体内实验选取SD大鼠分为Control组、LPS组、LPS+shRNA-NC组和LPS+sh-TUG1组,LPS+shRNA-NC组和LPS+sh-TUG1组大鼠每周分别尾静脉注射shRNA腺病毒和特异靶向TUG1的shRNA腺病毒1次,连续2周,Control组、LPS组注射等量生理盐水,2周后,LPS组、LPS+shRNA-NC组和LPS+sh-TUG1组大鼠腹腔注射5 mg/kg LPS;体外实验选取10 ng/ml LPS诱导的THP-1细胞分为Control组、sh-TUG1组、miR-26a inhibitor组和sh-TUG1+inhibitor组,分别用sh-TUG1和miR-26a inhibitor单独或联合转染;RT-PCR检测TUG1和miR-26a mRNA表达水平,HE染色观察肺组织纤维化情况,Western blotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3和caspase-9蛋白表达,ELIS...     

长链非编码RNA PVT1通过靶向miR-190对宫颈癌HeLa细胞生存及转移的影响

目的探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)PVT1通过靶向miR-190对宫颈癌细胞生存及转移的影响。方法 qRT-PCR鉴定宫颈癌细胞与正常宫颈细胞中lncRNA PVT1和miR-190的表达水平;生物信息学软件预测lncRNA PVT1和miR-190之间的靶向关系。MTT检测细胞增殖,克隆形成实验检测细胞生长,Hoechst染色和流式细胞术鉴定细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移;Western Blot验证体系中增殖、凋亡和上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)相关分子表达。宫颈癌HeLa细胞经过sh-PVT1处理后进行裸鼠皮下移植瘤接种,检测肿瘤体积及肿瘤组织中增殖和凋亡相关分子表达。结果与正常宫颈细胞相比,lncRNA PVT1在各宫颈癌细胞中高表达,干扰PVT1后,miR-190表达量显著上调,经生物信息学和荧光素酶报告系统验证lncRNA PVT1和miR-190有较强结合性。sh-PVT1可有效抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移,促进凋亡发生(P0.01);lncRNA PVT1可有效抑制EMT相关分子表达,降低宫颈癌细胞向EMT转化;miR-190抑制后可有效逆转上述现象(P0.01)。体内实验证实PVT1敲降可以有效降低肿瘤细胞增殖,促进细胞凋亡(P0.01)。结论 lncRNA PVT1在宫颈癌中高表达,PVT1敲降后可有效解除PVT1对miR-190的抑制效果,从而降低宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移,并促进细胞凋亡。     

长链非编码RNA对神经干细胞的调控作用及其机制

正长链非编码RNA(LncRNA)作为一种重要的细胞功能调控因子引起越来越多广泛的关注。它是一种长度在200-100000 nt之间的RNA分子,位于细胞核或细胞质内,不编码蛋白质。在基因组转录产物中,lncRNA所占数量比例远远超过编码RNA的比例,与DNA、RNA、蛋白质相互作用参与细胞内多种调控过程,在生命活动调控网络中有极其重要的作用。lncRNA目前是遗传学研究的热点之一。近年来许多研究表明,lncRNA在神经干细胞的自我更新、增殖和分化中     

长链非编码RNA调控巨噬细胞功能的作用机制研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类本身不编码蛋白、转录本长度超过200 bp的RNA。lncRNA最初被认为是RNA聚合酶Ⅱ转录的副产物,是一种“噪音”,不具有生物学功能。但近年研究证实,lncRNA参与X染色体沉默、染色体修饰和基因组修饰、转录激活、转录干扰、核内运输等过程,其调控作用被越来越多研究者关注。多个研究表明lncRNA在机体炎症反应过程中发挥重要作用。作为免疫细胞的巨噬细胞在机体免疫功能发挥和炎症反应过程中居主导地位,本文就lncRNA对巨噬细胞的调控作用及机制进行综述。     

长链非编码RNA在骨关节炎中作用机制的研究进展

骨性关节炎(OA)是危害老年人健康的常见肌肉骨骼系统疾病,主要特征为软骨退化和骨赘形成.OA发病机制复杂,机械负荷重及细胞外基质分解代谢和合成代谢之间不平衡为其主要机制.长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸由RNA聚合酶Ⅱ合成的非编码RNA调控分子,在表观遗传水平、转录水平和转录后水平多层次调控...     

间充质干细胞相关长链非编码RNA对细胞增殖和凋亡的作用及机制

背景:间充质干细胞已广泛用于医学再生领域,如何提高其应用疗效是目前的研究热点。长链非编码RNA参与了多种疾病的发生发展,有研究表明间充质干细胞相关长链非编码RNA参与调控细胞增殖和凋亡,但其具体的作用及机制尚不清楚,了解其作用及机制可能为提高间充质干细胞的应用效果提供新的策略。目的:综述间充质干细胞相关长链非编码RNA在细胞增殖和凋亡中的作用及机制。方法:检索中国知网数据库、PubMed数据库,以"间充质干细胞,长非编码RNA,增殖,凋亡"为中文检索词,以"mesenchymal stem cells,long non-coding RNA,proliferation,apoptosis"为英文检索词进行检索,排除陈旧以及重复的观点,将检索到的文献进行整理,选取74篇文章进行综述。结果与结论:(1)长链非编码RNA参与调控间充质干细胞的增殖与凋亡;(2)间充质干细胞相关长链非编码RNA可调控宿主细胞的增殖与凋亡;(3)长链非编码RNA的作用机制主要有作为微小RNA的竞争性内源性RNA、直接影响关键转录因子、增强相关信号通路;(4)间充质干细胞相关长链非编码RNA可能成为提高间充质干细胞...     

坐骨神经损伤后长链非编码RNA的聚类分析及长链非编码RNA MX1对大鼠雪旺细胞迁移、增殖能力的影响

目的 探讨坐骨神经损伤后长链非编码RNA（LncRNA）差异表达的基因,以及LncRNA MX1对大鼠雪旺细胞迁移、增殖能力的影响。方法 选取10周龄无特定病原体级雄性SD大鼠24只,随机分为0 d（T0）、3 d（T1）、7 d（T2）和14 d（T3）4组,每组6只,建立坐骨神经损伤动物模型。分别于模型建立后第0、3、7、14天取相应组大鼠坐骨神经损伤处的残端组织提取RNA,制备RNA基因芯片进行Heatmap聚类分析,筛选出各个时间点发生差异表达的基因,并选择其中差异表达显著的基因LncRNA MX1。培养iCell-r030大鼠雪旺细胞,分为对照组、Control siRNA组（siRNA组）和LncRNA MX1 siRNA组（siRNA-MX1组）,使用相应试剂进行转染。转染后采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测3组雪旺细胞的LncRNA MX1mRNA表达情况,采用Transwell小室检测雪旺细胞的迁移能力,采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷（EDU）实验检测雪旺细胞的增殖能力。结果 各组大鼠均造模成功,实验过程中无大鼠死亡。大鼠损伤坐骨神经组织LncRNA差异基因Heatmap聚类分析的热图显示,与T0组比：T1组共3 066个LncRNA基因发生差异性表达,其中1 634个LncRNA基因表达上调,1 432个LncRNA基因表达下调;T2组共2 498个LncRNA基因发生差异性表达,其中1 634个LncRNA基因表达上调,864个LncRNA基因表达下调;T3组3 567个LncRNA基因发生差异性表达,其中有1 643个LncRNA基因表达上调,1 924个 LncRNA基因表达下调。各组差异表达的LncRNA基因中LncRNA MX1的差异倍数数值较大,差异表达显著。大鼠雪旺细胞qRT-PCR结果显示,转染LncRNA MX1 siRNA后,siRNA-MX1组LncRNA MX1的相对表达量为1.0±0.2,低于对照组的2.3±0.2和siRNA组的2.2±0.2,差异有统计学意义（F=78.47,P<0.001）;而对照组和siRNA组组间差异无统计学意义（P>0.05）。迁移、增殖试验结果显示,siRNA-MX1组细胞迁移数量为（24.1±4.2）个、EDU阳性细胞与DAPI阳性细胞的比率为27.5%±2.8%,低于对照组的（50.3±7.8）个、44.1%±7.2%和siRNA组的（49.2±6.2）个、41.8%±7.0%,差异均有统计学意义（F=93.15、121.26,P值均<0.001）;而对照组和siRNA组间差异均无统计学意义（P值均>0.05）。结论 大鼠坐骨神经损伤后LncRNA MX1差异表达显著,下调LncRNA MX1在大鼠雪旺细胞中的表达可显著降低细胞的迁移、增殖能力。     

长链非编码RNA H19 靶向miR-141 调控卵巢癌细胞的迁移和侵袭行为

目的：探讨长链非编码RNA-H19靶向miR-141调控卵巢癌细胞的迁移和侵袭行为及其机制。方法：qPCR检测H19和miR-141在卵巢癌组织中的表达情况及H19在不同卵巢癌细胞株中的表达;分析H19和卵巢癌患者的临床病理资料之间的关联;双荧光素酶报告基因检测H19与miR-141之间的相互作用;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测抑制H19后卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力的变化情况,qPCR检测H19和miR-141之间的相互调控的关系;Western blot检测抑制H19后ZEB1蛋白的表达情况。结果：与正常卵巢组织相比,H19在卵巢癌组织中表达上调,miR-141在卵巢癌中的表达水平下调,与其他卵巢癌细胞株相比,ES-2细胞中H19表达最高;H19的表达与卵巢癌的病理分期相关以及淋巴结转移情况有关,随着分期越高,H19在卵巢癌组织中表达越高,淋巴结转移的患者中H19的表达也相对较高;双荧光素酶实验证实H19能与miR-141的3′ UTR特异性结合,可以调控miR-141的表达与活性;抑制H19的表达后可以抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力;miR-141可以负反馈调节H19的表达,抑制H19和miR-141的表达后,ZEB1蛋白的表达水平受到相应的抑制。结论：H19调控miR-141的表达通过影响ZEB1蛋白的表达参与卵巢癌细胞迁移和侵袭能力的调控。     

长链非编码RNA ATB靶向miR-144对人黑色素瘤细胞A375增殖与侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA ATB对人黑色素瘤细胞A375增殖与侵袭的影响及可能机制。方法将A375细胞分为untreated组(对照组)、si-NC组(阴性对照组)与si-ATB组(实验组),转染小干扰RNA沉默A375细胞中lncRNA ATB的表达,实时定量PCR方法检测lncRNA ATB与miR-144的表达,双荧光素酶分析验证二者的靶向关系;MTT方法检测A375细胞增殖能力的变化,Tanswell实验检测A375细胞侵袭能力的变化。结果转染小干扰RNA能够显著降低A375细胞中lncRNAATB的表达水平,上调miR-144的表达水平(P0.01),荧光素实验表明lncRNA ATB直接靶向miR-144。沉默lncRNAATB后,A375细胞的增殖与侵袭能力显著降低(P0.01)。结论 lncRNA ATB通过靶向调控miR-144的表达促进人黑色素瘤细胞A375增殖与侵袭。     

长链非编码RNA在癫痫中的作用及研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是人类基因组中不能编码蛋白质,分子长度大于200nt的RNA,lncRNA是非编码RNA(nc RNA)中的一种,占nc RNA的80%,仅以分子的形式发挥作用,在过去的研究中lncRNA被认为是不重要的"噪音",但是近年来对lncRNA的功能研究显示其同样具有重要作用,lncRNA能在转录、转录后和表观遗传学上进行调控,参与个体发育中重要的生理和病理生命发育过程,lncRNA异常的表达对人类多种疾病的发生有密切的关系,本综述就癫痫发生发展密切相关的lncRNA进行阐述。     

长链非编码RNA与病毒和微小非编码RNA关系的研究进展

非编码RNA,包括以miRNA、siRNA和piRNA等为代表的短小RNA和长链非编码RNA.长链非编码RNA,有别于其他小分子非编码RNA,是目前非编码RNA研究的热点.随着研究的不断推进,人们发现lncRNA与物种进化、胚胎发育、物质代谢以及肿瘤发生等都有着密切的联系.microRNA是一类长度为19～ 23个核苷酸的内源性非编码RNA,可以在转录水平或转录后水平调节基因的表达.     

长链非编码RNA BANCR对鼻咽癌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA BANCR对鼻咽癌细胞增殖、迁移的影响。方法鼻咽癌细胞(5-8F、C666-1与HNE1)和鼻咽上皮细胞NP-69取自中国科学院上海细胞研究所。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测正常鼻咽上皮细胞NP-69与鼻咽癌细胞5-8F、HNE1、C666-1中BANCR的表达水平;在转染有si-BANCR或si-NC的5-8F和C666-1细胞中,分别采用CCK-8试剂盒与Transwell小室评估si-BANCR对5-8F和C666-1细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响;Western blot用于检测转染有si-BANCR或si-NC的5-8F和C666-1细胞中上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、Ncadherin和Vimentin)表达水平。结果与鼻咽上皮细胞NP-69相比,鼻咽癌细胞中BANCR表达水平显著提升。与转染有si-NC的5-8F或C666-1细胞相比,转染有si-BANCR的5-8F和C666-1细胞生长、迁移与侵袭显著降低,N-cadherin和Vimentin的表达水平降低,E-cadherin的表达水平增加。结论 BANCR与鼻咽癌细胞增殖、迁移相关,干扰其表达可抑制鼻咽癌细胞的生长、迁移和侵袭,逆转鼻咽癌细胞上皮间质转化,这表明其可作为鼻咽癌诊断与治疗的一个潜在靶点。     

不同放射敏感性食管癌细胞株长链非编码RNA HOTAIR表达水平的分析

目的分析放射敏感性不同食管癌细胞株长链非编码RNA HOTAIR的表达水平及其与放射敏感性之间的关系。方法以3种食管癌细胞(KYSE510、ECA109、KYSE410细胞)为研究对象。采用RT-qPCR检测细胞中HOTAIR mRNA表达水平,采用平板克隆形成实验检测不同剂量X射线照射下的存活分数(survival fraction, SF)。采用t检验或方差分析差异,Pearson法进行相关性分析。结果 3种食管癌细胞(KYSE510、ECA109、KYSE410)2 Gy照射细胞SF2分别为0.38±0.04、0.63±0.03、0.67±0.05,KYSE410的放射敏感性最低,KYSE510放射敏感性最高。HOTAIR mRNA表达水平与SF2呈正相关(r=0.790,P0.05)。KYSE510细胞HOTAIR表达水平放疗前比放疗后高2.30倍,KYSE410细胞HOTAIR表达水平放疗后比放疗前高2.81倍。结论 HOTAIR可能成为食管癌细胞放疗敏感性的预测分子,其高表达提示放疗抵抗。     

槲皮素对脓毒症大鼠急性肺损伤及炎症和氧化应激的影响

目的：探究槲皮素（QUE）对脓毒症急性肺损伤（ALI）大鼠的保护作用。方法：60只SD雄性大鼠随机分为6组（n=10）：假手术组（Sham）、模型组（CLP）、QUE 25 mg/kg组、QUE 50 mg/kg组、QUE 100 mg/kg组及阳性药物地塞米松（DEX）组。各组连续处理7 d,计算各组大鼠生存率;HE染色和肺湿干重比（W/D）评估肺损伤严重程度;TUNEL染色检测肺组织凋亡;试剂盒检测炎症因子、SOD和MDA水平;Western blot检测大鼠肺组织中凋亡相关蛋白表达及PTEN、β连环蛋白（β-catenin）、蛋白激酶B(AKT)和糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)的磷酸化水平。结果：与CLP组比较,QUE 50 mg/kg和100 mg/kg处理后,大鼠生存率显著升高（P<0.05）,肺组织炎症细胞浸润程度减轻,肺损伤评分和W/D降低（P<0.05）,肺组织细胞凋亡率和凋亡相关蛋白表达显著降低（P<0.05）,炎症因子水平下降,抗氧化能力增强（P<0.05）,PTEN和β-catenin磷酸化水平降低,AKT和GSK-3β磷酸化水平升高（...     

长链非编码RNA UCA1 靶向miR-582-5p 对膀胱癌UM-UC-3细胞生存和运动能力的调节作用及机制研究

目的：探究长链非编码RNA-UCA1通过靶向miR-582-5p对膀胱癌细胞生存和运动能力的作用及作用机制。方法：用UCA1-shRNA(sh-UCA1)和(或)miR-582-5p inhibitor转染细胞,荧光定量检测转染效率及miR-582-5p的表达水平;荧光素酶报告实验确定UCA1和miR-582-5p的靶向关系;CCK8检测细胞活性,流式检测细胞凋亡情况,侵袭及划痕实验检测细胞侵袭迁移能力,免疫印迹检测细胞增殖、凋亡及迁移相关蛋白的表达。结果：sh-UCA1能显著降低膀胱癌细胞UCA1表达水平(P<0.05),促进miR-582-5p表达(P<0.05);miR-582-5p-inhibitor能明显减弱sh-UCA1对miR-582-5p表达的促进作用(P<0.05);荧光素酶报告实验表明UCA1上有miR-582-5p的结合位点;沉默UCA1可显著抑制膀胱癌细胞增殖及Ki67的表达,促进细胞凋亡及cleaved caspase-3的表达(P<0.05);同时,sh-UCA1还能显著抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移及VEGF的表达(P<0.05);此外,miR-582-5p inhibitor可显著减弱sh-UCA1对细胞增殖、凋亡及侵袭迁移能力的作用(P<0.05)。结论：UCA1可通过靶向miR-582-5p增强膀胱癌UM-UC-3细胞的生存及运动能力。