外周血B细胞上糖肌醇磷脂连接蛋白的表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断中的应用

目的评价外周血B细胞上糖肌醇磷脂(glycosylphosphatidylinositol,GPI)连接蛋白之一CD59的表达能否作为诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmalnocturnalhemoglobinuria,PNH)的指标。方法采用流式细胞术双色免疫荧光分析法,结合B细胞特异性抗体CD20,分析92例外周血标本B细胞和中性粒细胞上CD59的表达,并通过临床指标评价方法,分析该指标临床应用的可行性。结果健康人B细胞上CD59均为完全阳性表达,表达率的参考范围为(96.3±1.2)%;PNH患者B细胞上CD59的表达率降低,均出现阴性或部分阳性病态细胞,病态细胞表达率为10.5%～92.3%;92.9%(26/28)非PNH贫血患者B细胞上CD59的表达均在正常参考范围内。该方法精密度的变异系数(coefficientvariation,CV)值小于4.4%,标本染色后无固定剂情况下可稳定保存24h,与常规检测CD59的方法(即中性粒细胞上CD59检测法)比较,PNH阳性和阴性检出符合率均高达100%。结论采用流式细胞术检测B细胞上CD59的表达具有简单、准确、重复性好的特点,可以成为诊断PNH的新指标。     

CD34、CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿中的表达及意义

目的研究阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者骨髓CD34^＋细胞比率及外周血粒、红细胞CD59表达阳性率并探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测20例PNH患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中CD34^＋细胞比率及外周血中粒、红细胞CD59表达阳性率。结果PNH患者CD34^＋细胞比率显著低于正常人（P〈0．01）;其中增生减低组CD34^＋细胞比率低于增生活跃、增生明显活跃组（P均〈0．05）,而后两组之间差异无显著性（P〉0．05）。正常人外周血粒、红细胞CD59表达阳性率均〉95％,其中粒细胞CD59表达稳定性较好;PNH患者外周血粒、红细胞CD59表达阳性率与正常对照组相比均显著减低（P〈0．01）;粒细胞CD59在不发、偶发、频发组中表达逐渐减低且差异均有显著性（P〈0．05）,红细胞CD59表达则在三组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论CD34^＋造血干细胞减少可能参与PNH发病;外周血粒、红细胞CD59检测是诊断PNH的特异性及敏感性方法,其中粒细胞CD59缺失程度对判断病情严重与否具参考价值。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓正常细胞及异常克隆分析

目的 分析阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者骨髓正常细胞（CD59^ )及异常克隆细胞（CD59^－）的细胞构成。方法 骨髓有核细胞免疫荧光标记后用流式细胞术分析。结果 （1）PNH患者骨髓正常及异常克隆的细胞组成在有核细胞水平是显著不均衡的，正常的CD59^ 细胞以淋巴细胞窗内细胞为主，异常的CD59^－细胞则以粒细胞窗及原始细胞窗内细胞为主。（2）PNH患者骨髓CD59^ 正常细胞群所含CD59^ 细胞总数较异常者显著减少，淋巴细胞窗及粒细胞窗内CD59^ 细胞均较异常者显著减少，前者减少更为显著。结论 PNH患者骨髓正常细胞及异常克隆的细胞构成在有核细胞水平及CD59^ 细胞水平都有显著差异，正常造血呈衰竭状态。因此，在考虑用患者自体骨髓体外净化去除异常克隆后回输给患者重建造血时，应对正常造血细胞作进一步处理，否则正常造血细胞可能不具备重建造血的能力。     

Reduction of CD55 and/or CD59 in red blood cells of patients with HIV infection.

BACKGROUND: Anemia is a common feature in HIV infection. An increased sensitivity of lymphocytes from HIV patients to lysis by complement has been correlated with a decreased expression of CD55 and CD59 in their surface. The aim of this study was to evaluate CD55/CD59 presence in red cells of HIV patients and explore possible correlations with clinical parameters. MATERIAL/METHODS: CD55/CD59 expression was evaluated in erythrocytes of 37 patients (30M/7F, median age: 39 years) with HIV infection (25 also having hemophilia), 121 controls, and 8 PNH patients using the sephacryl-gel microtyping system. Ham and sucrose tests were also performed. RESULTS: Anemia was present in 14/37 (37%) HIV patients. Interestingly, all HIV patients had deficient CD55 and/or CD59 erythrocytes: 8 (21%) for both CD55 andCD59 and 29 (78%) isolated CD55 and/or CD59 negativity. Deficient erythrocytes did not account for more than 10% of the total in the vast majority of patients. In controls, only 2 (1%) had red cells with double CD55/CD59 negativity and 3 (2%) had isolated deficiency. All PNH patients had a simultaneous CD55/CD59 deficiency. Positive Ham and sucrose tests were found only in PNH. There was no correlation between the presence of deficient CD55/CD59 erythrocytes and anemia, hemolysis, antiretroviral therapy, CD4+ counts, viral load, or concomitant hepatitis C infection in HIV patients. CONCLUSIONS: This study provides evidence supporting the presence of erythrocytes with CD55 and/or CD59 deficiency in HIV. Further studies using molecular techniques will be required to clarify the exact role of this deficiency in HIV patients.     

GPI锚定蛋白检测诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床价值

目的：探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者不同外周血细胞GPI锚定蛋白的表达情况,为PNH的诊断和鉴别诊断提供依据。方法：采用流式细胞术检测32例PNH患者外周血各类细胞膜上CD55、CD59、 CD16及CD14的表达百分率。结果： PNH患者外周血红细胞、粒细胞膜上CD55、CD59表达均明显减少,与正常对照组比较差异有显著性（P<0.001）,且粒细胞上CD55、CD59表达率低于红细胞（P<0.05）;血小板CD55、CD59表达率也较对照组减少（P<0.05）;有27例PNH患者的淋巴细胞CD55、CD59表达降低,其缺失率达30%,低于粒细胞和红细胞;CD16在粒细胞上表达量差异很大（34%～83%）,与对照组比较差异有显著性（P<0.001）;在单核细胞上可见CD14表达缺失的PNH克隆,CD14表达比例明显低于正常对照组（P<0.001）。结论： 检测外周各系血细胞CD55和CD59可以使典型PNH的诊断更加可靠,使部分缺乏典型临床表现的PNH明确诊断。检测CD16和CD14对排除PNH具有重要意义。     

再生障碍性贫血外周血CD55~-、CD59~-细胞表达的临床意义

检测慢性再生障碍性贫血(CAA)患者外周血中红细胞和粒细胞膜CD55、CD59表达情况,探讨其与环孢素A(CsA)疗效和预后的关系。方法采用荧光素标记CD55和CD59单克隆抗体,流氏细胞术检测30例正常人和67例CAA患者。根据CAA外周血红细胞和(或)中性粒细胞是否含有PNH样的CD55-、CD59-细胞分为A组和B组。均予CsA为主治疗大于6个月,并随访观察。结果正常人PNH样的细胞均<3.0%,CAA患者85.1%(57例)为3.0%～10.0%之间,A组与B组比较:对CsA为主的治疗起效时间早,分别为(5.18±2.53)个月与(10.67±1.15)个月,P<0.001;有效率高,分别为87.7%(50/57)、30.0%(3/10),P<0.001;中位随访时间是28.2个月(17.0～51.4个月),复发率低,分别为10.0%(5/50)、66.7%(2/3),P<0.05;3年总生存率高,分别为100.0%、44.4%,P<0.001;1年无病生存率高,分别为43.9%(25/57)、10.0%(1/10),P<0.05。结论 CAA患者红细胞和(或)中性粒细胞存在微量PNH样细胞,有PNH样细胞的CAA对CsA为主治疗敏感起效快,有效率高,复发率低,3年累积总生存率及1年累积无病生存率均高,有助指导临床用药及预测预后。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓CD34+CD59+细胞与正常人CD34+细胞生存、增殖、扩增性能的比较

目的探索阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者骨髓CD34CD59细胞体外扩增的方法,并对其与正常人CD34 细胞的生存、增殖及扩增性能进行比较,为PNH患者实现自体骨髓移植(ABMT)或自体外周血干细胞移植(APBSCT)提供重要的实验基础。方法应用免疫磁珠富集纯化CD34 细胞,然后用流式细胞仪分选出PNH患者的CD34 CD59 细胞及正常人CD34 细胞。对两种细胞在不同造血生长因子组合下,进行体外扩增液体培养2周。并对扩增前及扩增不同阶段的细胞进行体外半固体培养。结果(1)PNH患者CD34 CD59 细胞在体外能得到有效的扩增,在细胞因子合理组合作用下,第7天时CD34 CD59 细胞绝对数扩增约23.49倍。2PNH患者CD34 CD59 细胞与正常人CD34 细胞存在部分相同或相似的特性。在体外扩增过程中,对细胞因子的反应有相同的趋势,均为扩增第7天达到扩增高峰,均在SCF IL-3 IL-6 FL Tpo Epo组合条件下达到最大扩增能力。并且扩增后的细胞仍有形成CFU的能力,均能很好地保持CD59抗原,无GPI锚连蛋白的丢失。(3)正常人CD34 细胞在生存、增殖、形成CFU的能力及扩增能力上均明显强于PNH患者的CD34 CD59 细胞。结论(1)PNH患者CD34 CD59 细胞在体外能得到有效的扩增,临床上应用具有一定的可行性,能满足大多数PNH患者ABMT或APBSCT的需要。(2)PNH患者     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者3种GPI锚定蛋白表达的改变

目的 比较阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者血细胞表面3种糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白表达情况。方法 流式细胞术检测25例PNH患者粒细胞表面GPI锚定蛋白CD55、CD59和CD87的表达水平，并分析它们在不同疾病状态下的改变。结果 PNH患者粒细胞表面3种GPI锚定蛋白间具有较好的相关性(P均＜0．05)，红细胞表面CD55和CD59也表现出相关(P＜0．01)，但与粒细胞表面CD55和CD59的缺乏情况并不一致。结论 PNH患者同一系血细胞表面GPI锚定蛋白呈平行关系，这有助于对PNH发病机制的进一步了解。     

CD55CD59CD34对PNH早期诊断研究应用

目的:探讨CD55、CD59、CD34抗原在阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征(PNH)的早期诊断中的价值。方法:应用流式细胞仪测定PNH患者CD55、CD59、CD34抗原阳性表达变化,并与非PNH组以及正常对照组CD55、CD59、CD34抗原表达情况进行分析,同时做糖水试验、Ham试验、RC%、NAP积分检测。结果:PNH、AA-PNH患者CD55+、CD59+表达率较正常对照组及其它病组明显减少,差异有显著性(P<0.01);PNH患者CD34+表达率较正常对照组及其它病组明显增高(P<0.01),而AA患者CD34+表达率最低。结论:CD55、CD59、CD34抗原表达率可作为PNH综合征早期诊断最敏感指标,而基础检测对PNH的诊断及病情监控有重要意义,可达到早发现、早鉴别、早诊断、早治疗的目的。     

CD55,CD59抗原表达在PNH合并全血细胞减少症诊断中的应用

目的 探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)合并全血细胞减少症(PCP)诊断中的应用.方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法,检测PCP患者病因可疑为PNH的的外周血红细胞和粒细胞膜 CD55与CD59抗原的表达.结果 125例中,PNH32例,非PNH 93例(包括再生障碍性...     

近十年78例新发阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床分析

目的　研究九十年代阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)患者的临床特征 ,以增加对PNH新的认识 ,指导PNH的诊断及治疗。方法　对 1990年 1月至 1999年 11月我院诊断的 78例新发PNH患者的临床表现、实验室检查及治疗情况进行了回顾性分析。结果　①与八十年代的病例相比 ,新发PNH患者的发病年龄有所增大 (中位年龄由 2 7岁升至 34岁 ) ;女性病例增多 (由 18 5 %升至 38 5 % ) ;无血红蛋白尿发作病例增多 (由 2 4 2 %升至 38 5 % ) ;血栓形成发生率仍较低 (3 0 %对 6 4 % )。②所有患者均无家族遗传史。③部分患者表现类似骨髓增生异常综合征 :骨髓有 2 - 3系病态造血(19 2 % ) ,染色体核型异常 (12 2 % ) ,姊妹染色单体分染阴性 (8 9% ) ;部分患者表现类似再生障碍性贫血 :骨髓增生减低 (12 3% ) ,Ham’s试验阴性 (34 2 % )。但 10 0 0 % (2 5 / 2 5例 )患者外周血红细胞及粒细胞CD5 5或CD5 9表达异常 ,可作为鉴别诊断的特异性指标。④ 83 8%患者对肾上腺糖皮质激素为主的治疗有效 ,但易复发 ,1年复发率为 5 4 2 %。 8例对肾上腺糖皮质激素治疗效果差或有依赖的难治性、复发性PNH用低剂量化疗 (MP方案 :马法兰 2 - 6mg·d 1;强的松 0 5mg·kg 1·d 1)治疗有效率为 6 2 5 % ,而且均未出现严重的骨髓抑     

近十年78例新发阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床分析

目的　研究九十年代阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者的临床特征,以增加对PNH新的认识,指导PNH的诊断及治疗.方法　对1990年1月至1999年11月我院诊断的78例新发PNH患者的临床表现、实验室检查及治疗情况进行了回顾性分析.结果　①与八十年代的病例相比,新发PNH患者的发病年龄有所增大（中位年龄由27岁升至34岁）；女性病例增多（由18.5%升至38.5%）；无血红蛋白尿发作病例增多（由24.2%升至38.5%）；血栓形成发生率仍较低（3.0%对6.4%）. ②所有患者均无家族遗传史. ③部分患者表现类似骨髓增生异常综合征：骨髓有2-3系病态造血（19.2%）,染色体核型异常（12.2%）,姊妹染色单体分染阴性（8.9%）；部分患者表现类似再生障碍性贫血：骨髓增生减低（12.3%）,Ham's试验阴性（34.2%）.但100.0%（25/25例）患者外周血红细胞及粒细胞CD55或CD59表达异常,可作为鉴别诊断的特异性指标.④83.8%患者对肾上腺糖皮质激素为主的治疗有效,但易复发,1年复发率为54.2%.8例对肾上腺糖皮质激素治疗效果差或有依赖的难治性、复发性PNH用低剂量化疗（MP方案：马法兰2-6?mg*d-1；强的松0.5?mg*kg-1*d-1）治疗有效率为62.5%,而且均未出现严重的骨髓抑制及其它毒副反应.结论　PNH作为一种后天获得性疾病,更多见于成年男性.CD55、CD59的检测有助于提高PNH的检出率,大部分的PNH患者对肾上腺糖皮质激素为主的治疗反应良好,对难治性、复发性PNH患者可试用低剂量化疗.     

流式细胞术检测CD55、CD59对阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断价值的探讨

目的探讨患者外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmal nocturnalhemoglobinuria,PNH)的诊断价值。方法采用流式细胞术对CD55-PE及CD59-FITC标记的患者外周血中性粒细胞和红细胞进行检测。对2009年1月～2012年3月来我院就诊的13例PNH患者、13例再生障碍性贫血(aplasticanemia,AA)、21例骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者、12例缺铁性贫血(irondeficient anemia,IDA)患者与同期80例健康体检者进行回顾性分析。结果 PNH患者中性粒细胞及红细胞膜表面CD55、CD59较AA、MDS、IDA及健康体检者均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用流式细胞术检测贫血患者外周血红细胞及中性粒细胞膜上CD55和CD59缺陷,是临床鉴别诊断PNH与AA、IDA、MDS可靠而敏感的指标。     

体外转运富含GPI-蛋白的红细胞囊泡改善PNH溶血的探索

目的　在体外观察是否能将富含ＣＤ５９ 的红细胞囊泡转运到缺失ＣＤ５９的阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）红细胞膜上,以改善ＰＮＨ 溶血,为ＰＮＨ的治疗提供新的线索。方法　采用免疫亲和层析分离技术分离ＰＮＨ ＣＤ５９－ 红细胞,采用Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹分析、流式细胞仪及蛇毒因子溶血实验等检测和分析红细胞与囊泡的结合。结果　Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹分析显示,红细胞囊泡含有ＣＤ５９;流式细胞仪测定表明,ＰＮＨ ＣＤ５９－ 红细胞与囊泡结合后,ＣＤ５９ 的荧光标记率明显增高（Ｐ＜ ０００１）;蛇毒因子溶血实验显示,加入囊泡后ＰＮＨ ＣＤ５９－ 红细胞溶血度也显著下降（Ｐ＜ ００５）。结论　红细胞囊泡上的ＣＤ５９ 可以在体外转运到ＰＮＨ ＣＤ５９－ 红细胞上,并产生抑制补体溶血的作用,使ＰＮＨ ＣＤ５９－ 红细胞在体外受补体攻击时不易溶血     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者CD34+CD59-与CD34+CD59+细胞膜EPO、TPO受体后STAT5磷酸化水平的关系

目的 观察阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者骨髓CD34+CD59+和CD34+CD59-细胞膜促红细胞生成素(EPO)受体(EPOR)、血小板生成素(TPO)受体(TPOR)后信号转导通路中信号转导和转录激活因子(STAT)5磷酸化水平.方法 应用流式细胞术分别检测2010年4月至2011年2月天津医科大学总医院血液肿瘤科PNH患者23例及11名健康对照骨髓单个核细胞(BMMNC)经和不经10 U/ml EPO、50 U/ml TPO刺激后CD34+CD59-和CD34+CD59+细胞磷酸化STAT5(P-STAT5)的平均荧光强度(MFI).结果 (1)未加入细胞因子时,PNH患者CD34+CD59-细胞P-STAT5的MFI为31±15,明显低于 CD34+CD59+细胞(74±47,P<0.01)及健康对照组CD34+CD59+细胞(59±23,P<0.05);PNH患者CD34+CD59+细胞P-STAT5的MFI与健康对照组CD34+CD59+细胞比较差异无统计学意义(P>0.05).(2) EPO、TPO刺激后,PNH患者CD34+CD59-细胞P-STAT5的MFI分别为49±24、51±41,明显低于CD34+CD59+细胞(120±82、124±87,均P<0.01)及健康对照组CD34+CD59+细胞(79±47、98±53,均P<0.05),PNH患者CD34+CD59+细胞P-STAT5的MFI与健康对照组CD34+CD59+细胞比较差异无统计学意义,经EPO、TPO刺激后PNH患者CD34+CD59+细胞P-STAT5的增高值分别为49±11、54±43,明显高于CD34+CD59-细胞(17±4、16±6,均P<0.01).结论 体外予EPO、TPO刺激,PNH患者正常克隆造血干细胞(CD34+CD59+)EPO、TPO受体后信号转导通路中STAT5磷酸化水平明显优于异常克隆造血干细胞(CD34+CD59-).

Abstract：

Objective To study the STAT5 phosphorylation levels of erythropoietin receptor (EPOR) and thrombopoietin receptor (TPOR) in CD34+CD59- and CD34+CD59+ bone marrow cells of the patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH).Methods The bone marrow mononuclear cells (BMMNC) were extracted from 23 PNH patients treated at our department from April 2010 to February 2011 and 11 normal controls. The mean fluorescence intensity (MFI) of phosphorylated STAT5 (P-STAT5) in CD34+CD59+cells and CD34+CD59-cells with or without the stimulation of 10 U/ml EPO and 50 U/ml TPO were examined by flow cytometry.Results (1)Without stimulation, the P-STAT5 MFI in CD34+CD59- cells of PNH patients was significantly lower than that of CD34+CD59+cells (31±15 vs 74±47, P<0.01). And it was 59±23 in normal control CD34+CD59+cells (P<0.05). No statistic difference existed between the CD34+CD59+cells of PNH patients and the normal control CD34+CD59+cells. (2)Under the stimulations of EPO and TPO, the P-STAT5 MFI was significantly lower in CD34+CD59-cells of PNH patients than that of CD34+CD59+cells (49±24 and 51±41 vs 120±82 and 124±87, both P<0.01). For the normal control CD34+CD59+cells, they were 79±47 and 98±53 respectively (P<0.05).No statistic difference existed between the CD34+CD59+cells of PNH patients and the normal control CD34+CD59+cells. P-STAT5 MFI was elevated after the stimulations of EPO and TPO. The increments of CD34+CD59+cells in PNH patients were significantly higher than those of CD34+CD59-cells (49±11 and 54±43 vs 17±4 and 16±6, both P<0.01).Conclusion Under the in vitro stimulations of EPO and TPO, the STAT5 phosphorylation levels of EPO and TPO receptors in normally cloned hematopoietic stem cells in PNH patients are obviously superior to those in abnormally cloned counterparts.     

大鼠体内Pig-a基因突变试验的优化及ENU时-效关系和 量-效关系评估

目的 对大鼠Pig-a基因突变试验方法进行优化,并初步探讨阳性诱变剂N-乙基-N-亚硝基脲（ENU）在该实验中的时-效关系和量-效关系。方法 30只雄性SD大鼠随机平均分为5组,即溶剂对照组,ENU 10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg和80 mg/kg 4个剂量组,连续3 d经口灌胃染毒。分别于实验第0、15、30、45、60、75、90天尾静脉取血,分离红细胞,经Anti-CD59-APC和SYTO 13核酸染料标记后采用流式细胞仪分析CD59表型突变为成熟红细胞（RBCCD59-）率、CD59表型突变为网织红细胞（RETCD59-）率以及RET占总红细胞百分率。结果 ENU各组大鼠在染毒后第15~90天的RBCCD59-率呈现随时间和剂量反应性地增高。RETCD59-率随时间延长,ENU各组表现为先增后基本稳定伴小幅波动趋势,但均保持在较高水平,在染毒后30 d出现最高峰,在45 d时出现下降;同时,随着ENU剂量的增加,ENU各组RETCD59-率也随之增加。随时间延长,ENU各组大鼠RET百分率有所下降,30 d后呈现较为稳定的轻微波动,5组间RET%在各时间点处差异均无统计学意义。结论 本研究改良的大鼠Pig-a基因突变试验可进行快速检测,ENU短期（3 d）染毒诱导大鼠红细胞Pig-a基因突变具有时-效关系和量-效关系。     

成人隐匿性自身免疫糖尿病CD4+调节性T细胞研究

目的 观察成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)患者CD4+CD25+T细胞和CD4+ T细胞的FOXP3 mRNA表达,探讨其免疫学的发病机制.方法 LADA患者67例,2型糖尿病30例,正常对照30例,通过流式细胞术检测CD3+、CD4+、CD8+、CD4+ CD25+ T细胞阳性细胞百分率.采用磁珠分离CD4+T细胞,用实时-PCR方法,半定量检测CD4+T细胞的FOXP3 mRNA表达水平.结果 LADA患者比正常对照组,CD4+CD25+T细胞升高(4.1±1.9 vs 2.8±1.5,P＜0.01),CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例升高(11.9±5.0 vs 8.2±3.7,P＜0.01).LADA患者CD4+T细胞FOXP3 mRNA的表达水平明显降低(0.52-fold,P＜0.01,n=10).结论 LADA患者存在调节性T细胞抑制功能缺陷.     

地中海贫血红细胞系超微结构改变的研究

本文报道了6例地中海贫血红细胞系列的超微结构改变,包括中、晚幼红细胞,网织红细胞及部份成熟红细胞的胞浆及胞核内可见电子密度较高的包涵体(α或β肽链的沉积);核膜有缺失或重叠,核周间隙扩大;各期红细胞中易见自噬泡和空泡形成;红细胞外形变化显著,发现有特征性的棒形红细胞。此外,还观察到红细胞在狭窄的脾窦中被扣押、挤压、破坏的现象。上述变化提供了地中海贫血发病机理的形态学证据     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症CD34+CD59+细胞长期造血的动物实验

目的获得阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者正常克隆干细胞（CD34^＋CD59^＋）支持长期造血的证据。方法纯化、扩增PNH患者骨髓CD34^＋CD59^＋细胞并移植入联合免疫缺陷（SCm）小鼠体内,90d后以首次移植的小鼠骨髓细胞进行二次移植。结果分别移植了PNH患者和正常对照骨髓CD34^＋CD59^＋细胞的小鼠在移植后第90天,外周血细胞水平均恢复正常;两组小鼠的组织中均有CD45的表达,且差异无统计学意义。分别移植了由PNH患者和正常对照骨髓CD34^＋CD59^＋细胞重建造血的小鼠骨髓细胞的小鼠在移植后第30天,外周血细胞水平差异无统计学意义;两组小鼠的组织中均有C1M5的表达,且差异无统计学意义;移植后小鼠骨髓细胞里均可扩增出供者的SRY基因片段。结论经体外纯化、扩增后的PNH患者骨髓CD34^＋CD59^＋细胞具有与正常CD34^＋CD59^＋细胞同样的长期造血的能力。     

Immunophenotype of myeloid cells in myelodysplastic syndromes and its clinical implications.

OBJECTIVE: To explore the immunophenotype of myeloid cells in myelodysplastic syndyomes (MDS) and its clinical implications. METHODS: A panel of monoclonal antibody was used to detect CD13+, CD33+, CD15+ and CD14+ antigens on the membrane surfaces of myeloid cells in the bone marrow from 51 MDS, 21 aplastic anemia (AA), 21 paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH) patients. 10 acute myeloblastic leukemia (AML) patients and 15 normal subjects by immunoenzymatic assay. The morphology and chromosome karyotype of bone marrow cells of MDS patients were also examined. RESULTS: CD14+, CD13+ and CD33+ cells in the bone marrow were more in MDS patients than in normal controls, AA patients and PNH patients. CD15+ cells in the bone marrow were less in MDS patients than in normal controls. CONCLUSIONS: The percentages of CD14+, CD13+ and CD33+ positive cells in the bone marrow of MDS patients were related to the percentage of myeloblasts, the chromosomal aberrations and the response to treatment. It indicated that there is immunophenotypic misexpression of myeloid cells in MDS patients. Immunophenotype analysis of myeloid cells might be useful for the diagnosis and treatment of MDS patients.