腺苷钴胺对嗅鞘细胞治疗脑性瘫痪近期效果的影响

目的前瞻性随机对照研究腺苷钴胺对嗅鞘细胞移植近期疗效的影响。方法2007年1月～2008年7月间，18例脑性瘫痪患者随机分为2组（A组为腺苷钴胺＋嗅鞘细胞组，B组为单独嗅鞘细胞组），每组9人。两组性别、年龄、诊断分型、病程、智力情况、初始神经功能等分布无显著性差异。对嗅鞘细胞脑内移植术前术后患者的粗大运动功能评分（GMFM-66）、脑瘫调查问卷评分（caregiver questionnaire）及脑瘫日常生活活动能力（ADL）进行评价，其中GMFM～66和ADL分数越高代表功能状态越好、caregiverquestionnaire分数越低越好。结果GMFM－66评分A组增加3．0±2．0分，B组增加2．0±2．0分（t=0.935，P=0．368），caregiver questionnaire评分A组降低3．7±5．0分，B组降低2．0±2．8分（t=0．795，P=0．442），ADL评分A组增加0．9±0．9分，B组增加0．4±0．7分（t=1．098，p=0．294）。结论对于脑性瘫痪的治疗，腺苷钴胺似能提高嗅鞘细胞移植治疗的近期临床效果，但因病例数尚少，统计学上未显示出差异的显著性，有待增加样本量，并对中长期效果探讨。     

嗅粘膜嗅鞘细胞修复脊髓损伤研究进展

脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后功能的恢复一直是医学界的难题,自从1928年Cajal断言哺乳动物中枢神经没有再生能力以来,脊髓损伤功能重建方面的研究停滞不前。近年来研究发现：嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells,OECs）能够促进轴突再生,引导再生的轴突重新进入中枢神经系统,并与靶器官形成新的功能连接,促进神经功能的恢复。     

大鼠嗅鞘细胞的纯化及活性检测

目的采用改良差速贴壁联合胰酶限时消化法纯化大鼠嗅鞘细胞,并检测嗅鞘细胞的生物活性。方法分离新生7d的SD大鼠嗅球嗅鞘细胞,分组后采用改良的6h和18h两次差速贴壁法联合不同时段（1、3和5min）胰酶消化法纯化培养,观察不同时段纯化的嗅鞘细胞的形态特点及生长情况;应用FITC标记的神经生长因子受体p75抗体（兔抗鼠NGFRp75抗体）检测嗅鞘细胞并评估细胞纯度;应用CCK-8法和酶联免疫吸附法分别检测嗅鞘细胞在纯化后3～15d的增殖活性和分泌脑源性神经营养因子的含量。结果随着细胞的生长,梭形的嗅鞘细胞逐渐增多;改良差速贴壁联合胰酶限时消化1min、3min、5min法所得嗅鞘细胞纯度分别为（57.52±2.13）%、（78.95±2.60）%、（49.01±0.74）%,3min组最明显,组间两两比较差异有统计学意义（P〈0.05）;改良差速贴壁法联合胰酶限时消化1min、3min、5min法所得嗅鞘细胞在纯化后7、9、11d时增殖的细胞数目和脑源性神经营养因子分泌量显示3min组最优,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论改良差速贴壁（6h＋18h）联合胰酶限时消化3min的纯化方法能获得较高纯度的嗅鞘细胞。     

神经营养因子-3基因修饰的嗅鞘细胞移植治疗自身免疫性脑脊髓炎的实验研究

目的 研究神经营养因子-3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞移植对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的髓鞘及轴突的修复作用.方法 用逆转录病毒介导神经营养因子-3(NT-3)基因转染嗅鞘细胞(OEC),将其移植入EAE侧脑室,荧光标记后观察其在体内的迁徙、分布特点;运用皮质体感诱发电位监测(CSEP)、超微结构观察、功能评分;RT-PCR方法检测NT-3mRNA转录水平,并与对照组、OEC移植组相比较等方法对髓鞘及轴突修复进行评价.结果 (1)OEC-NT-3在EAE体内存活,可广泛迁徙至病灶远端且至少可以持续存活4周.(2)超微结构发现转基因治疗组4周后,轴索结构完整,周围髓鞘板层结构清楚,明显优于另外二组.(3)4周后,转基因组CSEP潜伏期明显缩短,波幅增加,明显优于其他二组,差异有统计学意义(P<0.05).(4)转基因组NT-3mRNA转录水平为(212.32±16.14)×10-2,明显高于OEC组(1.23±0.13)×10-2及对照组(1.98±0.19)×10-2,差异有统计学意义(P<0.01).结论 NT-3基因修饰的OEC在持续表达神经营养因子,且可促进EAE的神经修复.     

嗅鞘细胞的研究现状

嗅鞘细胞(OECs)直接起源于嗅基板,分布在嗅上皮、嗅神经和嗅球的第一、二层. 体外培养时,嗅鞘细胞按其形态可分为:梭形、多突起形、油煎蛋形.嗅球浅2层细胞存在以上三种形态,其中以梭形细胞最多.嗅黏膜细胞则以梭形细胞更为多见,并具更细长的突起.     

腺苷钴胺的光解研究

用HPLC和UV方法研究了腺苷钻胺在不同物理状态和不同pH溶剂中受不同光强度照射后的光解情况,结果表明在相同光强下本品固体状态较液体状态稳定得多,在酸性缓冲液中(pH2.0)降解较中性缓冲液(pH7.0)、水(pH5.5)慢、在相同物理状态下光强度越大则光解速度越快,提示本品原料应避光保存,而溶液由于降解较快,应避光操作并尽快测定。     

嗅鞘细胞与脊髓损伤再生修复

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后再生修复困难,而嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植被认为是治疗SCI最有潜力、最希望的方法.本文就近年来关于OECs的生物学特性、在SCI中的应用及其机制研究方面作一简要介绍.     

NT-3基因修饰的嗅鞘细胞移植对自身免疫性脑脊髓炎大鼠神经修复及功能恢复的影响

目的 探讨神经营养因子-3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞(OECs)对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠神经修复及运动功能恢复的促进作用.方法 构建Lewis大鼠EAE模型,采用完全随机化法分为对照组、OECs组及OECs-NT-3组,每组20只,分别将生理盐水、OECs、OECs-NT-3移植入大鼠侧脑室内,每日进行神经功能缺损评分(NDS)评估大鼠肢体功能恢复情况,应用免疫组织化学检测及辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪技术对EAE神经纤维修复进行形态学观察.结果 细胞移植后,OECs-NT-3组大鼠神经功能评分明显低于OECs组,差异有统计学意义(P＜0.05);第28天,大鼠体内OECs-NT-3存活数量较多,可向病灶远端扩散、迁徙;OECs-NT-3组单位面积内的神经纤维数目[第28天,(38.8±3.4)个]明显高于OECs组[第28天,(32.5±2.8)个](P＜0.05);OECs-NT-3组HRP标记的神经元数目多于OECs组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 NT-3基因修饰的OECs可在EAE大鼠体内存活、迁移,并可促进神经纤维再生,减轻皮质神经元的逆行性损伤,改善EAE大鼠的运动功能.     

嗅鞘细胞移植治疗帕金森病动物模型的相关研究

目的 利用大鼠同种异体嗅鞘细胞移植的方式对帕金森病模型大鼠进行治疗,初步探究在PD模型大鼠脑内移植嗅鞘细胞能否成为治疗帕金森病的一种有效手段。方法 提取和培养原代OECs,利用6-OHDA两点注射法建立帕金森病动物模型,通过APO诱导方式验证模型及检测治疗效果,通过HE染色进行大鼠黑质细胞形态学观察,利用抗TH荧光染色细胞计数对比治疗前后TH阳性神经元表达情况差异。结果 从嗅鞘细胞移植后的第4周开始,PD模型的行为学诱导旋转圈数明显减少。HE染色结果示:PD模型大鼠毁损侧的黑质致密部的神经元变性明显,且TH阳性神经元数量降低,经OECs治疗后的帕金森大鼠的患侧黑质部位神经元变性改善,且TH阳性神经元含量明显增高。结论 嗅鞘细胞能够改善帕金森模型大鼠的行为学变化。嗅鞘细胞能够提高帕金森模型大鼠患侧黑质部位多巴胺神经元含量。     

巴氯芬联合腺苷钴胺治疗三叉神经痛的效果

目的 观察巴氯芬联合腺苷钴胺治疗三叉神经痛的效果。方法 选取2019年1月至2020年1月我院就诊以三叉神经痛为诊断收治入院进行保守治疗(口服药物治疗)的患者200例,根据采取口服药物的选择不同分为联合组和单药组,每组各100例。联合组采用巴氯芬联合腺苷钴胺治疗,单药组采用腺苷钴胺治疗。比较两组患者治疗前后疼痛VAS评分、炎症反应指标、氧化应激指标、临床治疗效果及并发症发生率。结果 治疗前两组患者VAS评分、炎症反应指标、氧化应激指标比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后两组以上指标较治疗前均明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后联合组的VAS评分、IL-6、TNF-α、SOD、MDA均明显低于单药组,差异有统计学意义(P0.05)。联合组总有效率为92.00%,明显高于单药组的75.00%,差异有统计学意义(P0.05)。两组并发症发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 巴氯芬联合腺苷钴胺治疗三叉神经痛整体治疗效果强于单药治疗。     

嗅粘膜源性嗅鞘细胞移植联合NGF对脊髓损伤的修复

目的：探讨大鼠嗅粘膜嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells, OECs）移植联合神经生长因子(nerve growth factor, NGF)修复脊髓急性损伤的可行性和疗效,并观察二者的协同作用。方法：自成年Wistar大鼠嗅粘膜取材,采用差速贴壁和阿糖胞苷抑制纯化相结合的方法培养纯化嗅鞘细胞。建立大鼠脊髓半切模型,并随机分成对照组（A组）,OECs组（B组）和OECs＋NGF组（C组）,在不同时段进行肢体活动的BBB评分。8周后取脊髓标本进行组织学检查,评价对脊髓损伤的修复作用。结果：B组和C组2周后BBB评分高于A组（P＜0.05）,C组自4周后明显优于A组和B组（P＜0.01）。组织学检查表明,C组可明显促进轴突再生。结论:OECs联合NGF具有良好的脊髓损伤修复作用,且二者具有明显的协同作用。     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓炎后遗证的初步报告

目的：采用嗅鞘细胞移植的方法治疗脊髓炎后遗证，探讨其对损伤神经功能是否有恢复的作用。方法：取4个月以上胚胎嗅球，消化成单个嗅鞘细胞，培养7—12天，然后将其移植到损伤脊髓的上下方。共治疗12例0．5．7年的脊髓炎后遗证患者，患者此前均经过各种方法的治疗。结果：嗅鞘细胞移植后2周-2个月随访，12例患者的神经功能均有改善，且呈持续改善的趋势。结论：嗅鞘细胞移植能够有助于脊髓炎后遗证患者的神经功能恢复。     

嗅鞘细胞的研究进展

神经损伤与再生研究是当今神经科学领域的热点,在众多研究方法之中,细胞移植为一种理想的研究治疗手段.选择的移植材料是否理想,直接关系到神经再生及其功能恢复.近年来,对嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的研究呈现出如火如荼的局面,对于神经损伤的修复及病变的治疗显示出了广阔的临床应用前景.研究发现,OECs终身具有神经再生功能,还能够释放多种神经营养因子,神经粘附分子等,被认为是髓鞘化能力最强的胶质细胞,它具有星型胶质细胞和雪旺细胞的特点,并迁徙于周围神经和中枢神经,具有促进损伤神经轴突再生的能力,还能帮助神经轴突穿越损伤的瘢痕区域到达损伤的靶细胞,帮助加速神经功能的恢复.本文就近些年OECs的研究进行了综述.     

抗痉挛治疗对脑性瘫痪大运动功能的影响

目的:探讨抗痉挛治疗对脑性瘫痪肢体运动功能的影响。方法:将50例小儿脑性瘫痪患儿随机分为治疗组25例,对照组25例。治疗组接受以上田法为主的抗痉挛治疗并神经发育疗法;对照组只接受神经发育疗法,采用大运动评价表(GMFM)进行功能评定及修订的Ashworth量表(MAS)评定痉挛程度。结果:治疗组与对照组相比大运动功能评分及痉挛程度均有显著性差异(P<0.05)。结论:抗痉挛治疗是改善肢体运动功能及痉挛程度的有效手段。     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的进展

脊髓损伤的治疗一直是医学界的难题.脊髓损伤后神经元无法依靠自身再生修复,轴突再生困难,同时神经胶质瘢痕阻碍再生轴突的通过,因此脊髓损伤后减少神经细胞坏死,促进轴突再生,减少胶质瘢痕的形成是临床治疗的关键.许多研究发现嗅鞘细胞是神经系统中具有促进神经轴突再生,引导轴突正确生长的独特细胞,为脊髓损伤的修复带来了希望,但临床结果很不理想,为了提高其修复神经和正确引导轴突生长的能力,目前许多研究将基因工程技术和组织工程技术应用于其种植过程中,取得了一定的成果.     

嗅鞘细胞与神经修复支架材料的相互作用

目的：探讨一种提取高纯度和一定数量的嗅鞘细胞(OECs)的新方法,并研究其与神经支架修复材料PLGL的生物相容性。方法：从新生的 Wister 大鼠身上分离制备嗅鞘细胞并与PLGL共同培养。测量其接触角、吸附率、存活率等。结果：PDLLA的接触角（84.5°±1.5°）明显大于PLGL的接触角（52.6°±0.8°）。PLGL的吸附率（80%）明显高于PDLLA（57%）。PLGL的细胞存活率（88%）明显高于PDLLA（76%）。结论：PLGL比PDLLA具有更好的亲水性、存活率以及良好的细胞生长状况。     

嗅鞘细胞移植治疗神经损伤研究进展

正神经损伤修复的问题一直是创伤外科和康复医学中研究的重点和难点,神经损伤后由于局部生理环境的改变,神经连续性中断,常导致受损神经支配区功能部分或完全丧失,使患者丧失劳动能力[1]。组织工程技术是目前神经损伤治疗的一个重要手段,基本原理和方法是将体外培养有分化能力的种子细胞接种于具有良好组织相容性且易被机体降解吸收的生物     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

目的帮助广大神经外科医生系统地了解嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)和OECs移植治疗脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)的实验性研究和临床应用的最新进展,以提高对SCI治疗策略和技术的全新认识。方法结合近年来OECs的研究、OECs移植治疗SCI的相关文献资料,分别介绍了嗅鞘细胞的生物学特性、OECs移植治疗SCI的可能机制、嗅黏膜嗅鞘细胞的研究、OECs联合移植的研究、脊髓损伤OECs移植时机的选择和OECs移植治疗SCI的临床研究。结果 OECs能促进轴突再生、营养受损神经和血管并且使轴突再髓鞘化,OECs移植到损伤的脊髓会改善其功能。结论 OECs移植治疗SCI的实验研究和早期临床应用均已证实OECs移植治疗SCI的有效性,但临床应用长期随访机制尚不够健全,缺乏系统的、客观的远期疗效评价体系,其作用的具体机制有待进一步明了。     

嗅鞘细胞移植治疗脑出血的实验研究

目的研究OECs移植治疗大鼠脑出血的疗效。方法制作大鼠脑出血模型，3d后OECs移植，记录对照组和移植组的大鼠运动功能，及神经前体细胞及移植细胞在体内存活、分化和迁徙的情况。结果OECs组的神经前体细胞比对照组多，运动功能的改善显著好于对照组，免疫细胞化学方法证实OECs移植后能存活、迁徙。结论OECs移植后可以增加神经前体细胞的数量。改善脑出血运动功能。