缺氧条件下鼠胚软骨c-Fos和巢蛋白表达及当归的保护作用

目的：探讨宫内缺氧对胚胎大鼠软骨组织内c—Fos和巢蛋白表达的影响，以及中药当归注射液对缺氧状态下其表达的调节。 方法：于2004-06／12在四川省泸州医学院动物科将成年发情期雌性Wistar大鼠（220-250g）12只，分别与1只雄鼠合笼饲养，于次13上午8：00发现阴栓记孕鼠怀孕0d，饲养雌鼠至孕15d。将12只孕鼠随机分为对照组、缺氧组和当归组各4只（每只孕鼠产胎鼠5～8只）。当归组孕鼠经尾静脉注入当归注射液，然后用低张性缺氧模型致鼠胚宫内缺氧；缺氧组用生理盐水代替当归注射液，其余同当归组；对照组不缺氧，其余同缺氧组。然后麻醉状态下处死孕鼠，快速剖腹取胎，每组中随机选取20个鼠胚，将各组胎鼠头部软骨组织作c—Fos和巢蛋白免疫组化双标染色后，进行观察分析。结果分析与判断：每张切片用DPl2数码相机在400倍下照相，并随机选择1个软骨组织视野观察计数。c—Fos免疫组化反应阳性细胞为胞核着蓝色，巢蛋白免疫组化反应阳性细胞胞质染红色。将凡是胞质染红色的细胞根据红色深浅分为3个等级：深红色计为＋＋、红色计为＋＋、淡红色计为＋，分别对其记数，然后将同一组内20个鼠胚3个等级的阳性细胞数分别相加，得出该组的巢蛋白免疫组化结果。既有胞核染蓝色，又有胞质染红色的为c—Fos／巢蛋白免疫组化双染阳性细胞．计数每例鼠胚软骨组织双染阳性细胞的数量。 结果：60个鼠胚头部软骨组织进入结果分析。①对照组软骨组织c—Fos和巢蛋白有弱表达；与对照组相比，缺氧组软骨组织c—Fos和巢蛋白表达增强[c—Fos：（5．35&;#177;1．42），（14．55&;#177;3．37）个／视野，q=16．48，P〈0．05；巢蛋白：193，427个／20个鼠胚，｜R^-A-R^-B｜=66．78，P〈0．051。②与缺氧组相比，当归组软骨组织c—Fos和巢蛋白表达减弱[c—Fos：（8．00&;#177;2．31）个／视野，q=11．73，P〈0．05；巢蛋白：250个／20个鼠胚，{R^-A-R^-B}=51．83，P〈0．05]。 结论：①缺氧可刺激鼠胚软骨组织巢蛋白的表达，c—Fos可能是缺氧刺激巢蛋白表达的机制之一。②当归注射液对缺氧鼠胚软骨组织可能有保护作用。’     

鼠胚神经干细胞增殖对缺氧的反应及当归的保护作用

目的:探讨宫内缺氧对胚胎大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液对缺氧神经干细胞的保护作用。方法:实验于2003-09/2004-06在四川省泸州医学院动物科将12只孕鼠随机分为对照组、缺氧组和当归组,每组4只(每只孕鼠产胎鼠5～8只)。当归组孕鼠经尾静脉注入当归注射液,然后用低张性缺氧模型致胎鼠宫内缺氧;缺氧组用生理盐水代替当归注射液,其余同当归组;对照组不缺氧,其余同缺氧组。然后在麻醉状态下处死孕鼠,快速剖腹取胎鼠,每组随机选取20个胚鼠,将各组胎鼠脑组织作神经巢蛋白免疫组化染色,并进行图像分析。结果:60个胎鼠脑室周围脑组织进入结果分析。①缺氧组胎鼠巢蛋白免疫组化反应阳性细胞的吸光度较对照组强(0.262±0.043,0.173±0.021,P<0.05);阳性细胞数量较对照组多[(101.4±15.76),(42.7±6.25)个/视野,P<0.05]。②与缺氧组相比较,当归组胎鼠的巢蛋白免疫组化反应阳性细胞的吸光度减弱(0.222±0.035,P<0.05);阳性细胞数量减少[(58.5±12.53)个/视野,P<0.05]。结论:缺氧后神经干细胞表达巢蛋白增加,当归注射液减弱了缺氧刺激引起的神经干细胞的增殖和分裂,提示当归对缺氧有保护作用。     

鼠胚神经干细胞增殖对缺氧的反应及当归的保护作用

目的：探讨宫内缺氧对胚胎大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液对缺氧神经干细胞的保护作用。方法：实验于2003-09／2004-06在四川省泸州医学院动物科将12只孕鼠随机分为对照组、缺氧组和当归组，每组4只（每只孕鼠产胎鼠5～8只）。当归组孕鼠经尾静脉注入当归注射液，然后用低张性缺氧模型致胎鼠宫内缺氧；缺氧组用生理盐水代替当归注射液，其余同当归组；对照组不缺氧，其余同缺氧组。然后在麻醉状态下处死孕鼠，快速剖腹取胎鼠，每组随机选取20个胚鼠，将各组胎鼠脑组织作神经巢蛋白免疫组化染色，并进行图像分析。结果：60个胎鼠脑室周围脑组织进入结果分析。①缺氧组胎鼠巢蛋白免疫组化反应阳性细胞的吸光度较对照组强（0．262&;#177;0．043，0．173&;#177;0．021，P〈0．05）；阳性细胞数量较对照组多[（101．4&;#177;15．76），（42．7&;#177;6．25）个／视野，P〈0．05]。②与缺氧组相比较，当归组胎鼠的巢蛋白免疫组化反应阳性细胞的吸光度减弱（0．222&;#177;0．035，P〈0．05）；阳性细胞数量减少[（58．5&;#177;12．53）个／视野，P〈0．05]。结论：缺氧后神经干细胞表达巢蛋白增加，当归注射液减弱了缺氧刺激引起的神经干细胞的增殖和分裂，提示当归对缺氧有保护作用。     

当归对宫内缺氧新生大鼠神经干细胞增殖、分化的影响

背景:实验小组前期研究发现孕鼠宫内缺氧可刺激胎鼠神经干细胞的增殖,缺氧6 h时增殖达高峰,在9 h也表现增殖,但能力开始下降.而缺氧达12 h时即表现为坏死或凋亡,但随缺氧天数的延长及时段的不同,对神经干细胞的影响又如何?目的:进一步探讨宫内缺氧对新生大鼠神经干细胞增殖、分化的影响及当归注射液的保护作用.方法:孕SD大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.孕14 d开始将当归组与缺氧组孕鼠置于三气培养箱中,制作缺氧性脑损伤新生鼠模型,此前1 h分别给于当归注射液和生理盐水尾静脉注射,对照组不缺氧,余同缺氧组.孕鼠分娩后立即取新生鼠大脑组织,经胶质纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学染色后行图像分析.结果与结论:①缺氧组新生鼠海马胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学阳性细胞的表达较相应对照组增加;而神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学阳性细胞的表达较对照组减小.②当归治疗组新生鼠海马胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学阳性细胞的表达较相应缺氧组减少;而神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学阳性细胞的表达较对照组增大.结果表明,一定程度的缺氧可刺激神经干细胞增殖,并可刺激神经干细胞向神经胶质细胞分化,以及导致神经元的减少;当归注射液可减弱由于缺氧导致的神经干细胞的增殖和向胶质细胞分化的能力,并可缓解神经元的减少,提示当归可能对缺氧大鼠神经系统有一定的保护作用.     

促红细胞生成素干预缺氧缺血性脑损伤新生鼠神经干细胞巢蛋白的表达

背景:巢蛋白是一种存在于神经干细胞的特异性抗原,在神经系统发生病变或损伤引起再生时广泛表达,因此巢蛋白表达常用作判定神经系统发生病变或损伤后能否促进神经再生的一种手段.目的:从神经再生和神经干细胞激活的角度,探讨外源性促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后神经干细胞巢蛋白表达的影响.方法:结扎大鼠右侧颈总动脉和8%低氧暴露2 h制备新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型.对照组仅游离右侧颈总动脉,不予结扎和缺氧处理.干预组大鼠缺氧缺血后立即腹腔注射重组人促红细胞生成素5 000 IU/kg,1次/d,连用3 d.缺氧缺血性脑损伤组大鼠缺氧缺血后连续腹腔注射等量生理盐水溶液3d.每组随机取8只分别于术后4,7,14d处死.应用免疫组化方法和计算机图像分析技术检测不同时点海马齿状回巢蛋白标记阳性细胞的变化.结果与结论:各时点缺氧缺血性脑损伤组巢蛋白阳性细胞数较对照组增加(P<0.05);各时点干预组巢蛋白阳性细胞较对照组和缺氧缺血性脑损伤组均增加(P<0.05).3组大鼠海马齿状回区巢蛋白阳性细胞数均于术后7 d达高峰.结果提示早期给予重组入促红细胞生成素可促使新生鼠缺氧缺血性脑损伤后海马齿状回区巢蛋白表达增加,促进神经干细胞的增殖再生,在缺氧缺血性脑损伤后神经再生、修复中发挥一定的保护作用.     

当归注射液影响辐射损伤小鼠骨髓基质细胞血管内皮生长因子及其受体flt-1的表达

目的:观察当归注射液对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞血管内皮生长因子及其受体Flt-1表达的影响。方法:实验于2005-08/2005-11在武汉大学人民医院儿科研究所进行。将56只健康BALB/c小鼠随机分为3组:正常组:8只小鼠不做处理;照射组:24只小鼠经60Coγ射线6.0Gy全身照射;当归注射液组:24只小鼠经60Coγ射线照射后给予腹腔注射当归注射液2.5g/(kg·d)。在照射后第3,7,14天采用免疫组化法检测小鼠骨髓基质细胞血管内皮生长因子及其受体Flt-1的表达,并用流式细胞术检测相应时间的骨髓基质细胞凋亡率。结果:56只小鼠均进入结果分析。①当归注射液组及照射组骨髓有核细胞计数均低于正常组,当归注射液组照射后7,14d骨髓有核细胞计数高于照射组[正常组:(7.9±0.9)×106/根股骨;照射组:(1.3±1.0)×106/根股骨,(1.8±1.1)×106/根股骨,(2.1±0.7)×106/根股骨;当归注射液组:(1.6±0.9)×106/根股骨,(4.6±1.2)×106/根股骨,(5.6±0.9)×106/根股骨,P<0.05或P<0.01];当归注射液组照射后7,14d血管内皮生长因子及其Flt-1受体表达明显高于照射组[当归注射液组:(122.5±1.0),(128.0±0.9),(139.2±0.8),(146.8±0.8)μm3;照射组:(112.6±1.0),(108.4±0.9),(124.4±1.3),(132.5±1.1)μm3,P<0.05或P<0.01]。②照射组和当归注射液组骨髓基质细胞凋亡率明显高于正常组,当归注射液组照射后3,7,14d骨髓基质细胞凋亡率均明显低于照射组[正常组:(2.2±1.0)%;照射组:(18.6±3.4)%,(17.6±1.5)%,(11.4±3.7)%;当归注射液组:(13.8±1.3)%,(11.6±4.7)%,(6.3±2.7)%,P<0.05或P<0.01]。结论:当归注射液可能通过促进骨髓基质细胞血管内皮生长因子及其受体表达,修复骨髓微环境。     

彩色多普勒超声与Fos蛋白的表达

目的:探讨诊断剂量彩超对胎鼠中枢神经系统是否有刺激。方法:用诊断剂量彩超(探头频率2.5MHz,Ispta=92mW?蛐cm2,Isppa=154W?蛐cm2,Im=266W?蛐cm2)照射孕18天大鼠子宫体表投影区,分为照射10min、20min、30min和对照组共4组。应用免疫组化方法检测胎鼠脑中Fos蛋白的表达,采用方差分析比较各组间差异。结果:照射10min组于胎鼠脑海马及皮层出现散在分布的淡染Fos弱阳性细胞,而照射20min及30min组于海马、皮层及基底节均有密集分布的深染Fos强阳性细胞,该两组分别与10min组有显著性差异(P<0.01)。对照组未观察到着色的Fos阳性细胞。结论:诊断剂量的彩超辐照孕鼠20min以上可诱导胎鼠脑组织Fos蛋白高表达。     

牛磺酸对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞巢蛋白表达的影响

【目的】研究牛磺酸治疗对成年大鼠脑缺血后缺血侧神经干细胞巢蛋白(nestin)表达的影响,探讨牛磺酸治疗缺血性脑损伤的作用机制。【方法】采用开颅热凝闭法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,随机分为正常组、假手术组、模型组与牛磺酸组,采用腹腔注射每天给予牛磺酸,采用巢蛋白免疫组化法观察脑缺血后3d,7d,14d与21d四个不同时相巢蛋白表达阳性细胞的数量。【结果】脑缺血后不同时相缺血侧皮质、海马齿状回和纹状体均有巢蛋白表达阳性细胞,其中7d时各区的阳性细胞数量明显增加(均P<0.05);而牛磺酸组在不同时相的巢蛋白阳性细胞数量均较同时相模型组有明显的增加(P<0.05)。【结论】牛磺酸可促进缺血后相关脑区巢蛋白阳性细胞数量的增加,提示这种作用可能是牛磺酸治疗脑缺血的重要作用机制之一。     

当归补血汤对骨髓抑制小鼠骨髓细胞增殖的影响

实验于2005-03/2006-03在成都中医药大学中西医结合基础实验室完成。选择6～8周龄BALB/C雄性小鼠40只,随机分为4组:bcl-2对照组,bcl-2实验组,cmy-c对照组和cmy-c实验组,每组10只。所有小鼠于实验第1天起,连续5d腹腔注射5g/L环磷酰胺溶液,剂量为6mL/(kg·d)。实验第11￣20天,bcl-2实验组和cmy-c实验组每日当归补血汤煎液灌胃,剂量为6mL/(kg·d),共计10d。对照组等量生理盐水灌胃。实验第20天,所有小鼠全部处死,取小鼠一侧股骨骨髓细胞,bcl-2对照组,bcl-2实验组离心洗涤后涂片做bcl-2原位杂交免疫组化染色。cmy-c对照组,cmy-c实验组离心洗涤后涂片cmy-c原位杂交免疫组化染色。将每张切片5个视野摄入图像分析仪,分析各视野阳性细胞面积总和和积分吸光度总和。实验结果bcl-2实验组阳性细胞面积总和为(16.11±3.01)×102μm2,积分吸光度总和为(19.9±2.42)×105,与bcl-2对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。cmy-c实验组阳性细胞面积总和(7.86±0.49)×102μm2,积分吸光度总和为(13.66±70.00)×105,与cmy-c对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。证明当归补血汤能促进骨髓有核细胞抗凋亡作用基因bcl-2和促细胞增殖基因cmy-cmRNA表达显著增加,从而推断当归补血汤能够促进骨髓细胞增殖并抑制其凋亡。     

脑组织S100B蛋白、BDNF、NSE对胎鼠宫内脑损伤的预测意义

目的探讨脑组织星形胶质原性蛋白(S100B)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)对胎鼠宫内脑损伤的预测意义。方法选取2017年孕鼠随机分为两组,A组为正常妊娠大鼠,B组为宫内缺氧妊娠大鼠,各10只。孕第21天时进行剖腹取胎,随机选其每只孕鼠的胎鼠中的5只,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定脑组织匀浆中S100B蛋白、BDNF、NSE的含量。对比两组脑组织形态学变化、S100B蛋白、BDNF、NSE的含量。结果两组大脑皮质区和海马区脑细胞形态学改变:A组细胞形态结构完整清晰,层次清楚,排列整齐;B组细胞数目减少,结构模糊或消失,排列紊乱,组织间质水肿疏松,细胞核部分深染。两组脑组织S100B蛋白、BDNF、NSE免疫组织化结果:A组S100B蛋白、BDNF、NSE呈微弱表达,B组S100B蛋白、BDNF、NSE阳性表达较明显。免疫组化染色后,B组S100B蛋白、BDNF阳性细胞平均灰度值高于A组(P0.05);ELISA测定后,S100B蛋白、BDNF、NSE含量B组明显高于A组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论脑组织S100B蛋白、BDNF、NSE对胎鼠宫内脑损伤具有预测意义,可作为预测指标。     

The characteristics of interpretation of results of analysis of protein amount in urine of pregnant women

The adequacy of implementation of present proteinuria diagnostic thresholds under examination of pregnant women was examined. The analysis was applied to all urine samples of pregnant women from December 2009 to March 20010. The amount of protein in urine was concurrently evaluated by turbidimetric analysis with sulfosalicylic acid, colorimetric analysis with pyrogallol red, "dry chemistry" technology (the diagnostic strips). It is established that the mentioned techniques of analysis of protein in urine provide independent results. The results of colorimetric analysis are characterized by better precision and adequacy. However, in case of pregnant women the diagnostic threshold of protein concentration should be shifted from 0.120 to 0.150 g/l.     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。     

《中国内镜杂志》主编雷光华教授简介

雷光华男,1970年12月生,骨科学博士,一级主任医师,二级教授,博士生/后导师。国家"万人计划"领军人才,教育部"长江学者"特聘教授,科技部"中青年科技创新领军人才",国家卫生计生突出贡献中青年专家,享受国务院政府特殊津贴专家,国家临床重点专科骨科和运动医学学科带头人,全国青年岗位能手,湖南省"芙蓉学者"特聘教授,湖南省科技领军人才和骨科学科领军人才,湖南省普通高校学科带头人,湖南省首届"优秀科技工作者",中南大学"湘雅名医"。     

超声诊断主动脉窦瘤

本文报告31例主动脉窦瘤患者,全部用二维超声(2DE)和多普勒超声检查。其中手术治疗24例,超声符合22例,符合率为92％。误诊2例,误诊率为8％。故超声实际诊断主动脉窦瘤29例中右冠窦瘤18例(62％),无冠窦瘤7例(24％),二叶瓣型主动脉窦瘤4例(14％)。窦瘤破入/膨入右室和右房内的例数分别为16例和13例。本病主要的合并症为主动脉瓣关闭不全和室缺。通过分析我们认为二维加多普勒超声是诊断主动脉窦瘤最有价值的无创技术。