莪术炮制品的抗血小板聚集及抗凝血作用

采用血小板聚集功能测定法、小鼠凝血时间测定法对莪术不同炮制品进行抗血小板聚集及抗凝血作用研究。结果表明莪术不同炮制品均具较强的抗血小板聚集及抗凝血作用,醋制后化瘀作用明显增强,其中以醋炙莪术作用最强。     

GC测定莪术残油中莪术醇、吉马酮和莪术二酮的含量

目的:建立以毛细管气相色谱法测定莪术残油中莪术醇、吉马酮和莪术二酮含量的方法.方法:采用气相色谱法:HP-5(0.32 mm×30 m)石英弹性毛细管柱,进样口温度250 ℃,氢火焰检测器(FID)280 ℃,进样量4μL,不分流进样,柱流量1 mL/min;程序升温:柱初始温度为100℃,以4℃/min升至140 ℃,以13 ℃/min升至170 ℃,保持8 min,以5℃/min升至200 ℃;以水杨酸甲酯为内标物.结果:莪术醇进样量在0.549 0～2.745μg内与峰面积比值(莪术醇/水杨酸甲酯)呈良好的线性关系Y=0.421 2X-0.076 6,r=0.999 7,平均回收率99.0%(RSD为1.0%);吉马酮进样量在0.1145～0.572 5μg内与峰面积比值(吉马酮/水杨酸甲酯)呈良好的线性关系Y=0.209 5X-0.014 1,r=0.999 3,平均回收率100.3%(RSD为1.4%);莪术二酮进样量在0.2715～1.357 5 μg内与峰面积比值(莪术二酮/水杨酸甲酯)呈良好的线性关系Y=0.250 8X-0.028 1,r=0.999 5,平均回收率99.2%(RSD为2.2%).结论:不同批号的莪术残油中3种成分的含最差异不显著.     

HPLC波长切换法测定莪术残油中莪术二酮莪术醇和吉马酮的含量

目的：建立用HPLC波长切换法同时测定莪术残油中莪术二酮、莪术醇和吉马酮含量的测定方法。方法：采用Kromasil 5μm C18（4.6mm×150mm）;流动相为乙腈-1%磷酸溶液;流速1.0 mL.min-1;检测波长213 nm,236nm;柱温35℃。结果：莪术二酮在0.1215～0.6076μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.0%,RSD为2.4%;莪术醇在0.5760～2.880μg范围内线性关系良好,平均回收率为99.9%,RSD为2.1%;吉马酮在2.014～10.07μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%,RSD为2.3%。结论：不同批号的莪术残油中3种成分的含量差异不显著。     

基于网络药理学探讨莪术抗血栓作用机制

目的基于网络药理学探讨莪术抗血栓作用机制。方法利用TCMSP数据库获取莪术活性成分,从TCMSP和BATMAN-TCM数据库获取莪术活性成分靶点,利用Drug Bank等数据库收集血栓疾病基因,利用String工具构建蛋白互作网络,并运用Cytoscape软件构建莪术活性成分-靶点-疾病网络,借助DAVID工具进行关键靶点KEGG通路富集分析,使用Cytoscape Clue Go插件进行生物学功能分析。结果经条件筛选,莪术活性成分共29个,抗血栓靶点20个,包括F2、F10、PTGS1等。莪术抗血栓机制可能涉及凝血信号通路、血小板激活通路。结论莪术可能通过多成分、多靶点等相互作用方式,干预多条信号通路,进而调控血栓形成和发展。     

HPLC法测定不同主产地莪术饮片中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和β-榄香烯

目的 采用HPLC法同时测定不同产地莪术饮片中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和β-榄香烯的量,为临床合理用药提供科学依据.方法 固定相为依利特Hypersil ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-水为流动相,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温25℃;检测波长214 nm;进样量10 μL.结果 在上述色谱条件下测得莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯分别在8～264、7～214、2～52、8～253 μg/mL时与色谱峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.3％、98.0％、98.2％、97.3％,RSD分别为2.9％、1.5％、2.0％、2.7％.结论 该方法准确、灵敏,可作为不同产地莪术饮片的质量控制方法;测定结果表明,不同主产地莪术饮片中4种成分的量差异较大,临床应用时应注意区分.     

不同产地醋莪术饮片中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和β-榄香烯含量的比较

目的:建立1种同时测定不同产地醋莪术饮片中4种成分含量的高效液相色谱法。方法:固定相为依利特Hy-persil ODS2柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;流速1 mL.min-1;柱温25℃;紫外检测器;检测波长214nm;进样量10μL。结果:在上述条件下测得莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的质量浓度分别在0.008 3~0.264 0,0.006 7~0.213 6,0.001 6~0.052 0,0.002 9~0.253 1 g.L-1与色谱峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.27%,97.96%,98.20%,97.27%,各自RSD分别为2.9%,1.5%,2.0%,2.7%。结论:该方法准确、灵敏,可作为不同产地醋莪术饮片的质量控制方法,测定结果表明浙江产醋温莪术饮片中的4种成分含量相对较高。     

九香虫抗凝血作用的研究

目的研究九香虫的抗凝血作用。方法采用毛细玻管法观察九香虫水煎液对正常小鼠及"寒凝血瘀"模型小鼠凝血时间的影响,研究其体内抗凝血作用;通过二磷酸腺苷(ADP)诱导的家兔血小板聚集试验,考察九香虫水煎液的体外抗凝作用。结果九香虫水煎液灌胃给药可显著提高正常小鼠及"寒凝血瘀"模型小鼠的凝血时间,九香虫低(0.03g/Kg)、中(0.05g/Kg)、高(0.1g/Kg)剂量组的药效作用呈现量效关系,但当剂量升高至1g/Kg及以上时,发现作用效果反成下降趋势,提示小剂量优于高剂量;九香虫水煎液体外可抑制家兔血小板聚集。结论九香虫水煎液具有明显的抗凝血作用。     

高效液相色谱法测定莪术油中莪术二酮和牦牛儿酮的含量

目的:建立莪术油中莪术二酮和牦牛儿酮的含量测定方法。方法:采用Kromasil-CN柱(150 mm×4.6 mm),乙腈-水(32∶68)为流动相,检测波长为220 nm。结果:莪术二酮的回收率为100.4%,RSD=1.5%(n=5);牦牛儿酮的回收率为97.8%,RSD=1.6%(n=5)。结论:该法简便、快速、重复性好,可作为莪术油及其制剂的定量分析方法。     

莪术油中莪术二酮的分离和鉴定

目的：分离鉴定莪术油中莪术二酮成分。方法：采用硅胶柱色谱的方法对莪术油的化学成分进行分离；并采用红外、气相色谱／质谱和核磁共振波谱法进行结构鉴定。结果：从莪术油中分离得到3个化合物C1，C2和C3，其中C1为莪术二酮，其在莪术油中的相对含量为11．31％。结论：该分离方法简单易行，为大量分离莪术二酮进行药理学研究提供了依据。     

水蛭免加热提取物抗凝血及抗血栓作用

目的观察水蛭免加热提取物的抗凝血、抗血栓作用,并与水蛭煎煮浓缩物进行比较.方法小鼠灌胃给水蛭两种提取物5.72g生药/kg,2.86g生药/kg,1.43g生药/kg,采用玻片法测定小鼠凝血时间;剪尾法测定小鼠出血时间.大鼠灌胃给水蛭两种提取物4g生药/kg,2g生药/kg,1g生药/kg,观察对大鼠下腔静脉结扎后静脉血栓湿重及干重的影响、对电刺激颈总动脉闭塞性血栓形成时间的影响、对大鼠动-静脉旁路血小板血栓湿重的影响.结果水蛭免加热提取物延长正常小鼠凝血时间和出血时间,减轻大鼠静脉血栓的湿重和干重,延长大鼠颈总动脉血栓形成时间、减轻大鼠血小板血栓的湿重.结论水蛭免加热提取物具有强大的抗凝血作用,抑制大鼠静脉血栓、动脉血栓及血小板血栓的形成.水蛭免加热提取物在抑制大鼠静脉血栓形成、延长小鼠凝血时间等方面优于传统的煎煮提取物.     

毛细管气相色谱法同时测定保妇康凝胶中莪术二酮和莪术醇的含量

目的:建立保妇康凝胶中莪术二酮和莪术醇的含量测定方法。方法:采用气相色谱法,以聚乙二醇(PEG-20M)为固定相的毛细管柱(柱长为30m,内径为0.32mm,膜厚度为0.25μm);柱温为程序升温,初始温度140℃,保持35min,以每min10℃的速率升温至200℃,保持3min;进样量1μL,分流比:10∶1。结果:莪术二酮在0.3004~4.506μg范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系,相关系数:r=0.9998(n=6);莪术醇在0.2076~3.114μg范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系,相关系数:r=0.9999(n=6);莪术二酮和莪术醇平均回收率分别为95.6%和100.6%,RSD分别为0.5%和1.4%。结论:所建立的方法简单、灵敏、重复性好,可作为保妇康凝胶中莪术二酮和莪术醇的含量测定方法。     

RP-HPLC同时测定莪术中莪术二酮、莪术醇、吉马酮、莪术烯、呋喃二烯和β-榄香烯的含量

目的: 用RP-HPLC同时测定莪术中莪术二酮、莪术醇、吉马酮、莪术烯、呋喃二烯和β-榄香烯的含量,对不同产 地莪术的莪术二酮、莪术醇、吉马酮、莪术烯、呋喃二烯和β-榄香烯成分进行研究。 方法: 采用依利特 Hypersil ODS (4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.1% 磷酸水(B),梯度洗脱,检测波长215 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温25 ℃。 结果: 莪术二酮、莪术醇、吉马酮、莪术烯、呋喃二烯和β-榄香烯分别在0.544~5.44 μg (r=0.999 6),0.414~4.14 μg (r=0.999 8), 0.122~1.22 μg (r=0.999 5),1.78~17.8 μg (r=0.999 3),0.318~3.18 μg (r=0.999 4),0.506~5.06 μg (r=0.999 5)呈良线性关系,平均回收率分别为99.60% (RSD 2.71%),101.48% (RSD 1.37%),99.50% (RSD 2.47%),100.29% (RSD 2.52%),99.87% (RSD 1.51%),100.58% (RSD 1.33%)。 结论: 方法灵敏、准确,分离效果较好,无干扰,可为莪术质量标准评价提供依据,为临床合理用药提供科学依据。     

复方血栓通胶囊抗血栓作用的实验研究

目的：研究复方血栓通胶囊的抗血栓作用。方法：将大鼠随机分为模型对照组、复方血栓通胶囊低、中、高剂量组（0.375,0.75,1.5 g·kg^-1·d^-1）、阿司匹林肠溶片组（50 mg·kg^-1·d^-1）,灌胃给药,每天1次,连续7 d。末次给药1 h后,建立大鼠下腔静脉血栓模型和动-静脉旁路血栓模型,观察复方血栓通胶囊对血栓湿重、干重及血栓形成抑制率的影响;将大鼠按上述方法分组,建立颈总动脉血栓溶栓模型,从造模当天开始灌胃给药,每天1次,连续5 d,末次1 h后取大鼠血栓,观察复方血栓通胶囊对血栓湿重及溶栓率的影响;将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、复方血栓通胶囊低、中、高剂量组、阿司匹林肠溶片组,采用皮下注射盐酸肾上腺素联合冰浴、减少喂食的方法建立大鼠急性血瘀模型,造模期间同时灌胃给药,每天1次,连续7 d,第8 d造模成功,灌胃给药1 h后,观察复方血栓通胶囊对大鼠凝血时间（CT）、凝血酶时间（TT）及血小板聚集功能的影响。结果：与正常组比较,模型组CT,TT显著缩短（P<0.01）,血小板聚集能力显著提高（P<0.01）;与模型组比较,复方血栓通胶囊组大鼠下腔静脉、动-静脉旁路血栓的湿重和干重减轻（P<0.05~P<0.01）,颈总动脉血栓的湿重减轻（P<0.05）,CT和TT延长 （P<0.05~P<0.01）,血小板聚集能力降低（P<0.05）。结论：复方血栓通胶囊具有抗血栓作用,其机制可能与改善凝血功能、血小板聚集功能有关。     

CGC法同时测定两种莪术油在大鼠血浆中莪术醇和莪术二酮的含量

目的:研究比较莪术油、莪术残油(莪术油提取出β-榄香烯的残余物)在大鼠血浆中莪术醇和莪术二酮的含量。方法:采取大鼠灌胃给药,以对羟基苯甲酸乙酯为内标物,采用毛细管气相色谱法同时测定,内标法计算莪术油、莪术残油中标志性成分莪术醇和莪术二酮的血浆药物浓度,运用DAS2.0分析计算药代动力学参数。结果:莪术醇和莪术二酮分别在0.001028～0.6580mg/mL和0.04064～1.300mg/mL范围内呈现良好的线性关系,精密度、稳定性及融冻次数考察均符合有关要求,测定方法的绝对回收率莪术醇为72.3%～85.3%,莪术二酮为70.1%～87.0%;内标物对羟基苯甲酸乙酯的绝对回收率为74.9%～96.5%;方法回收率莪术醇为55.8%～69.0%,莪术二酮为61.6%～68.3%,均符合有关要求。通过药时曲线和药代动力学参数分析,莪术油、莪术残油中莪术醇、莪术二酮在大鼠的体内代谢过程基本符合二房室模型。结论:在莪术油和莪术残油中莪术醇的血药浓度变化相似,而莪术二酮血药浓度存在较大差异。     

姜黄素类化合物体外抗凝血与抗血栓作用研究

目的研究姜黄素类化合物体外抗凝血与抗血栓活性,为探寻姜黄活血化瘀药效物质提供参考。方法采用家兔血浆复钙时间法、凝血酶时间法及体外血栓法、全血血块法,分别对3个天然姜黄素类化合物姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的体外抗凝血与抗血栓活性进行测定。结果姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素均能延长家兔血浆复钙时间(P<0.01)及凝血酶时间(P<0.01),且均能加快体外血栓(P<0.01)及全血凝块的溶解(P<0.01),其中去甲氧基姜黄素的作用最强。结论姜黄素类化合物具有较好的体外抗凝血与抗血栓作用,空间不对称结构能加强姜黄素类化合物结构母核的抗凝活性。     

束花石斛抗凝血作用的初步研究

目的：初步研究束花石斛Dendrobium chrysanthum Wall.ex Lindl.的抗凝血作用。方法：在研究比较束花石斛、金钗石斛Dendrobium nobile Lindl、球花石斛Dendrobium thyrsiflorum Rchb.f.和鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxum Lindl.的乙醇提取物对小鼠全血凝血时间的影响基础上，观察束花石斛乙酸乙酯部位、生物碱部位和正丁醇部位对小鼠全血凝血时间和小鼠出血时间的影响，进一步对束花石斛乙酸乙酯部位用小鼠凝血因子和大鼠颈总动脉．颈外静脉血流旁路实验性血栓法进行测定研究。结果：在全血凝血时间实验中束花石斛乙醇提取物与其他三种石斛乙醇提取物相比对凝血时间的延长作用最为显著；而束花石斛乙酸乙酯部位与其他两个部位相比，对全血凝血时间和出血时间的延长作用最为显著，并能抑制大鼠颈总动脉．颈外静脉血流旁路实验性血栓的形成，但对凝血因子没有显著作用。结论：束花石斛乙酸乙酯部位可能主要通过抑制血小板聚集来发挥抗凝血作用的。     

一氧化氮供体偶联的阿司匹林衍生物抗血栓作用研究

 目的观察一氧化氮供体偶联的阿司匹林衍生物对血栓形成的影响。方法利用体外抗血小板聚集实验和大鼠动静脉旁路模型、小鼠肺动脉血栓模型观察一氧化氮供体偶联的阿司匹林衍生物对血栓形成的影响。结果在体外抗血小板聚集实验中目标化合物内的Ⅰ₁,Ⅰ₂,Ⅰ₃,Ⅰ₉,Ⅰ₁₄,Ⅱ₂,Ⅱ₅,Ⅱ₆,Ⅱ₇和Ⅱ₈与阴性对照组相比有显著差异,Ⅱ₆与阿司匹林和NCX-4016相比有极显著差异。在大鼠动静脉旁路血栓形成实验和小鼠肺动脉血栓实验中,受试药Ⅱ₆组的血栓湿重与CMC-Na组相比有极显著差异,且Ⅱ₆对凝血系统也有明显影响。结论一氧化氮供体偶联的阿司匹林衍生物Ⅱ₆具有抗血栓形成作用。     

三棱总黄酮抗血小板聚集及抗血栓作用研究

采用血以聚集功能测定法、小鼠体内血栓形成法对三棱总黄酮进行抗血小板聚集及抗血栓作用研究。结果表明：三棱总黄酮具较强的抗血小板聚集及抗血栓作用,提示三棱中总黄酮为其活血化瘀的有效活性部位。     

三棱炮制品提取物抗血小板聚集及抗血栓作用研究

采用血小板聚集功能测定法,小鼠本内血栓形成对三棱总黄酮进行抗血小板聚集及血栓作用研究。结果表明,三棱总黄酮具较强的抗血小板聚集及抗血栓作用,以此筛选出三棱中总黄酮破血化瘀的活性部位;同时比较炮制对其影响。结果显示,醋制后化瘀作用明显增强,其中以醋灸三棱作用最强。