Fgl2在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤中的作用及机制研究

目的 研究纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein 2,Fgl2)在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤(cisplatin-induced acute kidney injury,Cis-AKI)中的作用及其机制.方法 选取8～10周,雄性,体质量(20±2)g,C57BL/6背景的野生型的Fgl2+/...     

BMP-7与PDGF-B在肾纤维化中的作用机制研究

目的观察骨形态发生蛋白-7(BMP-7)及血小板源性生长因子(PDGF-B)在肾间质纤维化大鼠模型中的表达变化及意义。方法清洁级Wister雄性成年大鼠60只随机分为三组:正常对照组、假手术组、单侧输尿管梗阻组(UUO)。分别在术后1、3、7、14天,每组取5只大鼠处死,取左侧肾脏行免疫组织化学方法检测肾组织中BMP-7、PDGF-B的表达水平。结果免疫组化光镜下,正常对照组BMP-7呈高度表达,在UUO组术后随梗阻时间延长BMP-7表达逐渐减少,术后14天表达量最弱;正常对照组及假手术组PDGF-B仅有少量表达,UUO术后随梗阻时间延长肾间质内PDGF-B表达逐渐增多,但各时相点肾小球均无明显表达。结论 (1)在正常肾脏中有着丰富的BMP-7表达,主要表达在肾小管间质,随着梗阻时间的逐渐延长表达呈进行性的下降。(2)在正常肾脏中PDGF-B仅见微量的表达,且随梗阻时间逐渐延长表达呈进行性上调。     

Pyk2在糖尿病小鼠的表达和肾小管上皮细胞的作用及ALM调控Pyk2延缓肾纤维化的研究

目的：探讨富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase 2, Pyk2)在糖尿病(diabetes mellitus, DM)小鼠中的表达和在肾小管上皮细胞的作用,以及α-硫辛酰胺(alpha-lipoamide, ALM)是否通过调控Pyk2延缓糖尿病肾病(diabetic kidney disease, DKD)肾纤维化。方法：选取8周龄野生型(wild-type, WT)小鼠和db/db小鼠各5只,正常饮食饲养至16周,Western blot检测肾组织纤维连接蛋白(fibronectin, FN)、III型胶原α1链(collagen type III alpha 1 chain, COL3A1)、Pyk2和p-Pyk2(Y402)的蛋白水平,免疫组织化学染色观察Pyk2和p-Pyk2(Y402)蛋白分布及表达情况,RT-qPCR检测Pyk2的mRNA水平。体外培养大鼠肾小管上皮细胞系NRK-52E,取对数生长期细胞予以高糖高脂(high glucose and high palmitic acid, HP)、Pyk2抑制剂PF-56227...     

巨噬细胞在肾纤维化发病机制和治疗中的研究进展

肾纤维化是肾脏组织受损后瘢痕修复的过程, 是各种慢性肾脏病(chronic renal diseases, CKD)的最终结果。巨噬细胞参与炎症性肾脏疾病的发病过程并与CKD的纤维化进展密切相关。巨噬细胞表型和功能在整个病程中变化复杂, 多种信号通路参与其中并介导纤维化的进程。文章概述了巨噬细胞表型和功能、在肾纤维化发病中的作用及靶向巨噬细胞对肾纤维化的治疗作用。     

巨噬细胞在肾脏损伤中的作用

Macrophages have been identified to play an important role in acute and chronic renal injury through exerting multiple biological effects. This review focus on the origin of macrophages in kidney, mechanism of renal injury and strategy of inhibiting macrophage infiltration.     

细胞焦亡在肾间质纤维化中的作用机制北大核心CSCD

细胞焦亡是由caspase蛋白酶介导,经GSDMD切割细胞膜成孔,引起细胞破裂死亡、活性促炎因子释放的一种新型的细胞促炎性程序性死亡方式。细胞焦亡分为caspace-1相关的经典途径与caspase-4/5/11相关的非经典途径。细胞焦亡是肾间质纤维化的重要参与者,多种信号刺激激活炎性小体,诱发细胞焦亡,引起炎症反应和免疫细胞、肾固有细胞的相关应答,三者串联形成“焦亡-炎症-纤维化”轴,共同参与肾间质纤维化的发生;细胞焦亡还与自噬相互作用,影响纤维化进程。本文就细胞焦亡的分子机制及其在肾间质纤维化中的作用机制进行概述。     

附子抑制M1型巨噬细胞极化缓解肾纤维化北大核心CSCD

目的探讨附子治疗肾纤维化的作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分成5组,分别为假手术组(Sham组)、单侧输尿管梗阻组(UUO组)、附子低剂量组、附子中剂量组、附子高剂量组,每组6只小鼠。在UUO手术后每天采用灌胃给药方式给予附子溶液或PBS溶液,Sham组与UUO组灌胃给予PBS溶液,其余组给予相应剂量的附子溶液。连续给药7 d,在第7天时脱颈处死小鼠,取其肾脏,采用组织化学与免疫荧光染色观察纤维化程度,流式细胞术检测浸润的巨噬细胞及其亚群,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测肾脏中炎症因子表达。结果附子能显著减少UUO肾脏纤维蛋白沉积,减少Fibronectin和COL1A1的表达与沉积,减少UUO肾脏巨噬细胞浸润,减少巨噬细胞向M1型极化,并显著降低肾脏组织内炎症因子的表达。结论附子通过抑制M1型巨噬细胞极化缓解肾纤维化。     

肾小管上皮细胞在肾间质纤维化中的作用

肾小管是连接肾小球与肾间质的枢纽 ,肾小管上皮细胞可通过产生趋化因子、致纤维化细胞因子、表型转化为成纤维 /肌成纤维细胞以及细胞凋亡等方式 ,主动参与肾间质纤维化的发生与发展。干预肾小管上皮细胞的表型转化及凋亡 ,可能会为抗纤维化治疗提供新的思路和手段     

p-Smad2/3、Smad7在大鼠实验性肾间质纤维化模型中的表达

目的观察TGF-β1/Sm ads信号传导途径在大鼠肾间质纤维化中的表达。方法W istar大鼠分为对照组、假手术组及模型组。行单侧输尿管结扎术(UUO)建立肾梗阻模型,分别于术后第3、6、14和28天处死动物。MASSON染色观察肾间质病变程度,免疫组化检测TGF-β1、p-Sm ad2/3、I型胶原以及α-SMA的改变,W estern b lot和RT-PCR方法分别检测TGF-β1、p-Sm ad2/3、Sm ad7蛋白及其mRNA表达水平。结果与对照组、假手术组相比,模型组于术后3天肾TGF-β1蛋白及mRNA、p-Sm ad2/3蛋白水平开始升高,Sm ad7蛋白表达开始减少而mRNA水平却升高,同时I型胶原、α-SMA水平升高。第14天TGF-β1、Sm ad7的变化达到峰值(P<0.01),在第28天有所回落。结论TGF-β1/Sm ads信号传导途径在肾间质纤维化形成中可能起着重要促细胞外基质沉积的作用。     

Hippo/YAP通路在大鼠脑动脉瘤形成过程中的作用及机制研究

目的:探究Hippo/Yes相关蛋白(YAP)通路在脑动脉瘤(CA)形成过程中的作用及机制.方法:SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=30)和YAP抑制剂组(n=10),模型组和YAP抑制剂组大鼠采用结扎左颈总动脉和双侧肾动脉联合高盐饮食建立CA模型.根据样本采样时间(造模后1周、造模后1个月、...     

肾纤维化手术动物模型构建及相关机制研究进展

慢性肾疾病发展到一定阶段可引起肾纤维化。肾纤维化可由多种因素诱导产生,包括肾受到严重创伤和感染,肾血液循环阻塞或者免疫反应等。各种因素引起肾组织受损后,大量胶原纤维在间质沉积,瘢痕形成,导致肾结构和功能发生改变,从而引起肾纤维化。迄今关于肾纤维化的发生机制尚不完全明确,而理想的肾纤维化模型对于肾纤维化的机制研究具有重要意义。目前很多关于肾纤维化的研究是通过手术的方式建立肾纤维化的动物模型。因此本文主要总结了近年来关于肾纤维化手术模型的构建方法及肾纤维化的发病机制。     

IL-17在肾间质纤维化中的作用初探

探讨白细胞介素17(IL-17)在肾间质纤维化发生发展中的作用。采用的体内实验为,以单侧输尿管梗阻(unilateral ureteric obstruction,UUO)启动纤维化病理过程。将C57BL/6小鼠分为假手术组(Sham)和单侧输尿管梗阻(unilateral ureteric obstruction,UUO)组,分别于术后第1、3、7天处死,留取手术侧肾组织。采用HE、PAS、PASM、Masson染色评价肾间质组织病理变化。以免疫组化、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-17在肾组织中的表达情况。体外实验为,分离培养C57BL/6小鼠肾成纤维细胞,转化生长因子β1(TGF-β1)刺激使其转化为肌成纤维细胞,继而用蛋白免疫印迹法(western blotting)检测IL-17的刺激下α-SMA表达水平。结果显示,组织病理学检查显示随着梗阻时间延长,炎性细胞浸润明显,肾小管萎缩,间质面积增大,Ⅰ型胶原和α-SMA增多。PCR检测显示α-SMA mRNA表达增多。但ELISA结果显示肾组织中IL-17含量呈下降趋势。Western blot结果表明肌成纤维细胞在IL-17的刺激下,α-SMA蛋白水平显著下降。实验说明,单侧输尿管梗阻手术可导致相应侧肾组织发生纤维化病变,但肾组织中IL-17含量与纤维化病变并不一致,在体外实验中IL-17可下调肌成纤维细胞表达的α-SMA。     

IL-33/ST2信号通路在纤维化疾病中的作用

Interleukin (IL)-33 is a member of IL-1 family. It is identified as a functional ligand for ST2 which is an IL-1 receptor-like protein. IL-33/ST2 signaling is involved in T-cell-mediated immune responses. Increasing evidence indicates that IL-33 has different roles in different diseases. Recently, some studies have demonstrated that IL-33 may be related to the genesis and development of fibrosis diseases. We review current knowledge of the biological characteristics of IL-33 and the role of IL-33/ST2 signaling pathway in fibrosis diseases.     

gp73在小鼠肝纤维化肝组织中的表达及机制

目的在小鼠肝组织中探讨高尔基体跨膜糖蛋白73(gp73)在肝纤维化进程中的变化及机制。方法腹腔注射CCl4构建C57BL/6J小鼠肝纤维化模型;用ELISA检测小鼠血清中gp73的水平;用免疫组织化学染色检测肝组织内gp73的表达;用密度梯度离心法分离肝星状细胞(HSC)并检测其中gp73的表达;用免疫组织化学染色法检测肝组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)的表达;接下来分别转染IGF2BP3过表达与敲低的质粒,用RT-PCR检测GP73蛋白的编码基因GOLM1的表达变化;流式细胞计量术检测基因敲除鼠肝纤维化模型中HSC内gp73的表达。结果在肝纤维化模型的小鼠血清(P<0.01)、肝组织(P<0.05)及原代HSC(P<0.001)中gp73蛋白表达水平均升高,同时组织中的IGF2BP3蛋白表达也升高(P<0.05)。细胞系中转入IGF2BP3的过表达及敲低质粒后,成功过表达IGF2BP3(P<0.001)和敲低(P<0.01),GOLM1的表达也随之上调(P<0.001)和下调(P<0.01)。随后在IGF2BP3敲除鼠的肝纤维化模型的HSC中检测发现gp73表达降低(P<0.01)。结论在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中,由HSC表达的gp73蛋白水平升高,而RNA结合蛋白IGF2BP3是促进其表达的潜在调控因素。     

Fgl2凝血酶原酶在小鼠免疫器官中的表达

目的探讨小鼠免疫器官胸腺、脾脏及淋巴结组织中Fgl2凝血酶原酶基因转录及蛋白表达水平。方法使用RT-PCR分析Fgl2凝血酶原酶基因转录水平;免疫组化检测淋巴器官标本Fgl2凝血酶原酶表达;双色免疫荧光分析Fgl2凝血酶原酶与Foxp3表达的关系。结果RT-PCR结果证实正常的胸腺、脾脏及淋巴结有Fgl2凝血酶原酶基因转录。免疫组化的结果则表明,这些淋巴器官中有大量的Fgl2凝血酶原酶表达。免疫荧光分析结果显示胸腺及脾脏内的Fgl2~+细胞为Foxp3~-细胞。结论免疫器官内Fgl2凝血酶原酶的表达可能参与了T细胞发育及功能。此外,Fgl2不直接参与Foxp3~+调节性T细胞的抑制功能。     

肾纤维化发生的细胞及分子生物学机制研究进展

肾纤维化是在慢性肾脏病(CKD)进展过程中多种细胞外基质广泛沉积的结果,是CKD发展的终末阶段,患者常常需要透析或者进行肾脏移植来维持生命.肾纤维化发生的细胞及分子生物学机制目前尚不十分明确,可能与细胞内一系列细胞增殖相关的信号通路的活化、microRNA的作用、细胞的凋亡和继发性坏死、肾脏中的肌成纤维细胞的异常分化与重构有关.因而研究肾纤维化发病机制的研究进展,特别是调控细胞增殖及纤维化发生分子生物学机制及肾肌成纤维细胞的重构和异常分化对肾纤维化的影响很有意义.     

丹参酮ⅡA磺酸钠对小鼠肾间质纤维化及CTGF的影响

目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对UUO小鼠肾间质纤维化(RIF)的影响及其作用机制。方法清洁级雄性CD1小鼠20只,随机分为:A组(单纯对照组)、B组(UUO造模组)、C组(STS低剂量组)、D组(STS高剂量组)。每组各5只,行右侧输尿管结扎术,单纯对照组只找到输尿管并不结扎,STS组小鼠在手术前3天开始腹腔内注射STS,低、高剂量组STS浓度分别为15 mg/kg.d、30 mg/kg.d,其他2组予同等剂量的生理盐水。UUO 7天后处死小鼠提取肾组织,Masson染色观察肾小管间质胶原纤维分布,Realtime PCR观察肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原、α-SMA的mRNA表达,Western blot观察肾组织中α-SMA蛋白质表达。结果与对照组相比,UUO小鼠Ⅰ型胶原、α-SMA、CTGF的表达增加,RIF明显(P<0.01),STS可明显抑制UUO小鼠肾组织Ⅰ型胶原、α-SMA、CTGF的表达(P<0.05),减轻RIF。结论 STS具有抑制UUO小鼠肾间质纤维化的作用,且这种作用可能与其对CTGF的抑制有关。