Preparation of adriamycin magnetic albumin microspheres and their experimental antitumor effectsin vitro andin vivo

Summary The adriamycin magnetic microspheres (ADM-MAMs) were prepared by the heat-stabilized protein methods. Their physico-chemical properties were examined; their cytotoxicities against tumor cellsin vitro were assayed by a modified MTT method, and their effects were observed on the implanted gastric tumor in Wistar rats given ADM-MAMs via alimentary canal at the presence of the external magnetic fields. The results showed that the ADM-MAMs were successfully prepared and had cytotoxic effect on tumor cellsin vitro similar to the free ADM (P>0. 05). The inhibitory effects of ADM-MAMs on the implanted gastric tumorin vivo were significantly increased as compared with the controls (P<0. 01). Our results suggested that ADM-MAMs were a new type of adriamycin (ADM) preparation and its form alteration did not affect its anticancer effects. This Project was supported by a grant from foundation of “Ninth-five Plan” National Key Medical Scientific and Technic Special Subjects of China (No. 969060116).     

细胞图像分析优选阿霉素磁性蛋白微球

改良法自行制备载附抗肿瘤药物阿霉素磁性蛋白微球 ,经细胞图像分析仪进行图像数字化处理 ,测量形态参数 ,从而优选最佳磁性微球。结果表明 ,优选的阿霉素磁性蛋白微球理想 ,符合静脉用药。平均直径为 :(0 .910±0 .330 ) μm;形态因子为 :0 .770± 0 .0 30。改良方法可行可靠 ,从而为阿霉素磁性蛋白微球在动物实验和临床应用上奠定了良好的基础     

载附阿霉素磁性蛋白微球的物理形态分析

用 6种方法制备载附抗肿瘤药物阿霉素的磁性白蛋白微球 (ADM- MAM)。采用先进的细胞图像分析仪对其进行物理形态分析 ,优选出最佳的制备方法和最佳的物理性状 ,使微球具有最佳的物理性状和良好的应用前景     

抗癌药阿霉素磁性蛋白微球的制备及其细胞毒试验

利用加热固化蛋白质原理制备出阿霉素磁性蛋白微球，比色法分析其细胞毒作用。结果显示阿霉素磁性蛋白微球具有磁性药物微球的形态学特征， 体外抑制肿瘤细胞生长的能力与阿霉素相似 （Ｐ＞ ０．０５）， 提示阿霉素磁性蛋白微球是抗癌药物阿霉素的一种新剂型，该药物剂型的改变未影响其体外药理作用，与磁场联用发挥靶向高效低毒的抗癌作用     

阿霉素磁性白蛋白纳米微粒介入治疗兔VX2肝肿瘤

目的　研究阿霉素磁性白蛋白纳米微粒对兔VX2肝肿瘤的介入治疗作用。方法　将成功接种VX2肝脏肿瘤的新西兰大白兔随机分成 4组 ,每组 6只 :A组为生理盐水对照组 ,肝动脉注射生理盐水 2 0mL ;B组为游离阿霉素组 ,肝动脉注入阿霉素 ( 1mg/kg) ;C组为阿霉素磁性白蛋白纳米微粒组 ,肝动脉注入阿霉素磁性白蛋白纳米微粒 32 .8mg/kg(含阿霉素 1mg) ;D组为阿霉素磁性白蛋白纳米微粒并在瘤区外加磁场组 ,肝动脉注入阿霉素磁性白蛋白纳米微粒 32 .8mg/kg(含阿霉素 1mg)。 4组实验动物于介入术后 7、14d行SCT肝脏扫描、术后 2 1d行胸腹联合扫描 ,测量肿瘤大小 ,检查肺部转移灶 ;各组实验动物均记录生存天数 ,生存满 90d则处死 ,全部实验动物均取肿瘤、肝和肺作组织病理学检查。结果　术后 7、14、2 1dA组平均肿瘤体积分别为( 4 .84± 0 .84 )cm3 、( 12 .6 7± 2 .18)cm3 和 ( 6 1.4 0± 7.87)cm3 ;B组为 ( 1.88± 0 .17)cm3 、( 7.0 8± 1.5 2 )cm3 和( 2 0 .0 7± 4 .4 8)cm3 ;C组为 ( 1.4 3± 0 .13)cm3 、( 3.6 9± 0 .77)cm3 和 ( 9.5 1± 2 .0 9)cm3 ;D组为 ( 1.18± 0 .2 6 )cm3 、( 1.94± 0 .4 7)cm3 和 ( 4 .2 3± 0 .92 )cm3 。B、C、D 3组肿瘤体积均小于同期对照组 ,以阿霉素磁性白蛋白纳米微粒并在瘤     

附子多糖与阿霉素蛋白磁微球靶向治疗的抗肿瘤协同作用

目的：观察附子多糖和阿霉素蛋白磁微球联合外磁场对S-180荷瘤小鼠的抗肿瘤协同作用,探讨其抗肿瘤机理。方法：以荷瘤小鼠的瘤重为指标观察药物的抗肿瘤活性;以乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞活性,MTT法测定淋巴细胞转化率,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡、肿瘤细胞的增殖指数及p53、Fas、FasL表达,RTPCR法测定IL-2及IL-12的表达,探讨抗肿瘤机理。结果：阿霉素蛋白磁微球靶向治疗或与附子多糖共同作用,均可显著减小荷瘤小鼠的瘤重;提高NK细胞活性和淋巴细胞转化率,减小肿瘤细胞的增殖指数,提高肿瘤细胞凋亡率及FAS、FASL的表达;增加脾脏淋巴细胞IL-2及IL-12的表达。结论：阿霉素蛋白磁微球联合磁场靶向治疗可以增强抗肿瘤作用,降低副作用;附子多糖能增强阿霉素蛋白磁微球靶向治疗的抗肿瘤作用,其抗肿瘤协同作用主要是通过提高机体的免疫功能实现的。     

鼠种植性胃肿瘤模型的制作方法及抗癌药物的治疗作用

利用 Walker- 2 5 6细胞株可成功地复制出种植性胃肿瘤模型 ,病理组织学证实该肿瘤与皮下实体瘤同源 ;皮下注射阿霉素可明显改善荷瘤鼠的生存质量 ,延长其生存时间 ,抑制肿瘤的生长 (P<0 . 0 1) ,提示该动物模型的制作及初步实验为胃癌的实验研究提供了较为理想的动物模型     

阿霉素明胶微球的制备及体外释药特性

目的对阿霉素明胶微球(ADM-GMS)的制备工艺及体外释药特性进行研究.方法用乳化交联法制备阿霉素明胶微球,采用正交试验设计法考察影响制备工艺的各因素.用扫描电镜观察微球表面形态.并对阿霉素明胶微球的粒径大小及其分布、载药量、包封率、体外释药、稳定性等进行了测定.结果微球形态圆整,大小均匀、表面光滑,平均粒径为69.154μm,87.32%的微球粒径分布在50～120μm.微球平均载药量为2.13%,包封率为42.62%.微球体外降解和释药特性满足要求,且37℃下性质稳定.结论该制备工艺稳定,制得的阿霉素明胶微球有望成为临床用动脉栓塞术治疗癌症的新制剂.     

阿霉素磁性蛋白微球靶向治疗胃癌的病理改变观察

目的 探讨术前应用阿霉素磁性蛋白微球联合外磁场靶向疗法后胃癌组织的病理组织学改变。方法 对30例术前应用靶向疗法的胃癌手术标本和30例对照标本进行组织切片，观察癌组织的病理变化，根据标准判煌病理改变分级。结果 靶向治疗组的细胞变性坏死分级高于对照组。靶向组中组织学类型不同的癌细胞改变分级也不同，中-低分化腺癌改变分级较高，中重度改变达57.9%,而粘液细胞型腺癌无数为0级改变.结论 靶向疗法可加重癌组织的变性坏死，阿霉素磁性蛋白微球联合外磁场作为胃癌的术前辅助性化疗具有一定的应用价值，但不宜用于粘液细胞型腺癌。     

肿瘤坏死因子壳聚糖微球的制备及抗癌活性

采用Ｂｅｒｔｈｏｌｄ法制备肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）壳聚糖微球，并测定微球的一些基本特征参数。结果表明，微球粒径主要分布在 １． ２～３． ５ μｍ内，载药量为 ４５００ Ｕ／ｍｇ，包封率为 ９５． ４％。体外释放实验表明，壳聚糖微球具有显著的缓释作用，是生物大分子药物很好的载体。ＴＮＦα壳聚糖微球能显著减轻小鼠瘤重，延长小鼠存活期，降低药物的毒副作用，与空白组及ＴＮＦα组比较，均有极显著意义（均为产Ｐ＜０．０１）。     

阿霉素磁微球的制备及在家兔肺内的靶向定位

根据Ｗｉｄｄｅｒ改良法自行制作了阿霉素磁性白蛋白微球，并测量微球的大小，载药量及磁反应性，在家兔左肺前后加有双极磁场（场强４９０ｍＴ）作为靶部位，并在用药后持续作用１ｈ，分别从家兔右耳缘静脉注射含有同等剂量阿霉素的磁微球及阿霉素溶液，肺病理切片色及阿霉素浓度检测结果表明，磁微球组家兔左肺铁染色较右肺浓重，左肺药物浓度明显高于右肺（Ｐ〈０．０１），阿霉素溶液组家兔左，右肺铁染色阴性，左，右肺阿霉素浓     

异十三基二胺体内外抗肿瘤作用

目的 观察异十三基二胺（D-79）的体内外抗肿瘤作用.方法 应用锥虫蓝排染法、MTT法检测D-79对多种体外培养肿瘤细胞的细胞毒作用;Bliss法观察D-79急性毒性实验;在可耐受剂量下观察D-79对小鼠移植性实体瘤U14、腹水瘤EAC、HAC的抑制率.结果 D-79显著杀伤多种体外肿瘤细胞,药物作用48 h,IC501.24～3.36 μg/mL;D-79的LD50为36.49 mg/kg（静脉注射）.D-79抑制小鼠移植性实体瘤U14体内生长、提高移植性腹水瘤EAC、HAC小鼠生存时间的作用呈剂量依赖性.结论 D-79有较强的体内外抗肿瘤作用.     

磁性聚合物微球的制备及其热重曲线的特征分析

采用改进的种子乳液聚合法制得了微米尺度表面羧基功能化的超顺磁性复合微球。通过动态光散射粒度仪（DLS）、透射电子显微镜(TEM)、振动样品磁强计(VSM)对所制备的磁性功能聚合物微球的各项性能进行了表征。通过热失重分析(TGA)、热质联用分析(TGAMS)、拉曼光谱(RS)、X射线光电子能谱（XPS）对磁性功能聚合物微球的热重曲线特征和热失重测试过程中的组分变化进行了系统分析。研究表明：在氮气气氛测试条件下,磁性功能聚合物微球在800 °C后仍发生高温再失重,通过分析提出了更为精确的计算微球中磁性物质质     

新藤黄酸体内外抗肿瘤作用研究

目的 初步探讨新藤黄酸的体内外抗肿瘤作用.方法 采用MTT方法观察新藤黄酸对多种肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用4、8、16、32 mg/kg剂量新藤黄酸作用于人肿瘤裸小鼠(BALB/c-nude)模型,观察新藤黄酸的体内抗肿瘤作用.结果 MTT法显示新藤黄酸对培养的人肿瘤细胞(人结肠癌细胞HCT-8、人肝癌细胞Bel-7402、人胃癌细胞BGC-823、人非小细胞肺癌细胞A549、人卵巢癌细胞A2780)增殖有一定的抑制作用,作用72 h的IC50在1.75～3 μmol/L;8、16、32 mg/kg新藤黄酸iv给药,对人非小细胞肺癌A549细胞肿瘤移植的模型小鼠有一定的抑制肿瘤增长作用(P＜0.05).但4～16 mg/kg剂量的新藤黄酸iv给药,对人肝癌Bel-7402肿瘤模型的抑制生长作用不明显.结论 新藤黄酸能够抑制培养的肿瘤细胞生长;iv给药时对A549细胞肿瘤移植的模型小鼠肿瘤增殖有明显的抑制作用.     

平阳霉素磁性微球的制备及特性检测

目的 :制备平阳霉素磁性微球 ,对其特性进行检测并评价其靶向性。方法 :采用冷冻凝聚法制备包裹超微Fe3O4 和平阳霉素的明胶微球 ,测定微球的直径 ;应用液相高效色谱仪、原子吸收分光光度仪、药物溶出仪等测定微球各成分含量、释放率及在外加磁场作用下微球在大鼠体内的分布情况。结果 :微球呈球形 ,平均直径 32 .2 3μm各成分含量为 (W/W ) :Fe3O4 11.7%,PYM3 .8%,明胶 84.5 %。 3h内平阳霉素释放率 6 3 .1%。Fe3O4 在大鼠靶向部位分布明显高于非靶向部位。结论 :平阳霉素磁性微球具有较好的靶向性和缓释性 ,是治疗海绵状血管瘤较为理想的剂型。     

葡萄球菌A蛋白体内抗肿瘤效应及某些机理的实验研究

本研究通过~(125)I-udR标记肿瘤细胞DNA释放试验和扫描电镜,观察了SPA和SAC直接体内注射对带瘤小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒及其超微结构和脾脏NK细胞细胞毒的影响;SPA和SAC对瘤细胞的直接毒效应。结果表明,SAC治疗后巨噬细胞明显活化,其体积可达对照组的2—3倍,表面皱褶增多、增厚,有许多粗大的伪足;SPA和SAC均能使巨噬细胞、NK细胞、细胞毒活性显著增强,与抗肿瘤效应的强弱似呈一致关系;二者无直接瘤细胞毒效应。这些结果提示,葡萄球菌A蛋白体内注射的抗肿瘤机制与其增强巨噬细胞和NK细胞活性有关,而与直接瘤细胞毒作用无关。     

平阳霉素白蛋白微球栓塞动脉和体内降解的动态观察

目的 研究平阳霉素白蛋白微球(PYM-AMS)诱导小动脉栓塞的作用和体内降解的过程.方法 选择健康成年日本大耳白兔24只,采用区组随机法,在每只兔双耳的中央动脉分别注射入PYM水剂、PYM油剂、PYM-AMS油剂各0.26 mL,PYM浓度为5 mg/mL.分别于注射后第2 d、7 d、14 d、21 d处死动物,动态观察注射药物后的动静脉改变和PYM-AMS的形态变化.结果 PYM水剂组,血管壁和血管内皮细胞无明显改变;PYM油剂组,约14 d时,出现血管充盈略下降,21 d有血管内膜及血管内皮细胞增生;PYM-AMS油剂组,7 d后血管出现缩窄,远心端有小血栓,血管逐渐机化,约21 d时,血管闭锁,血流中断.微球在注射后14 d,有吸收改变,逐渐有炎细胞浸润、组织侵入而降解.结论 PYM-AMS通过栓塞和缓释PYM的作用,诱导小动脉闭锁,在体内2周后出现降解,未引起剧烈的炎性反应.PYM-AMS可作为动静脉血管畸形治疗或恶性肿瘤的局部化学治疗的选择性药物参考.     

5-氟脲嘧啶壳聚糖微球的制备及体外释放特性

目的:以壳聚糖为载体材料,5-氟脲嘧啶为模型药物,制备鼻腔给药脑靶向微球并考察其体外释放.方法:采用乳化化学交联法制备氟脲嘧啶鼻用微球,正交实验设计中引入理想函数优化制备工艺,扫描电镜观察微球表面形态,动态透析法检测微球的体外释放特性及其影响因素.用微球吸水能力表示微球的溶胀度.结果:所得微球形态良好,粒径分布窄,平均粒径为43.20±4.17 μm,载药量为(38.48±1.03)%,包封率为(78.96±1.77)%.体外释放符合Higuichi方程Q=0.1035t1/2 0.0284,r=0.9965.体外释放初始阶段释药快,遵守溶胀控制机理,释放后期释药减慢,遵守扩散控制机理.结论:所优化的制备工艺稳定,包封率较高,适于鼻粘膜用氟脲嘧啶壳聚糖微球的制备.     

抗癌丝裂霉素白蛋白微球的制备及体外释药性能

以人血清白蛋白为载体材料,精制棉籽油为油相,采用乳化热固法制备了抗癌丝裂霉素C白蛋白微球,对丝裂霉素C白蛋白微球的粒径、载药量、包封率以及药物的体外释药等特性进行了研究。结果表明,采用乳化热固法制备的白蛋白微球平均粒径为500 nm;丝裂霉素C白蛋白微球的平均载药量为2.98μg/m g,包封率为61.2%,在体外具有明显的药物缓释效果。     

磁性热敏阿霉素脂质体聚集及释药特性的体外观察

目的：探讨磁场和加热作用下磁性热敏阿霉素脂质体在体外的聚集及释药情况。方法：实验按水浴加热温度分为6组,分别为21、33、39、42和45℃组以及对照组,同时每一组又分为施加磁场组与未施加磁场组2个亚组。利用LY荧光标记阿霉素后,制备成磁性热敏阿霉素脂质体。采用外加磁场定位对磁性热敏阿霉素脂质体进行聚集引导,水浴加热使其释放阿霉素,通过荧光分析仪观察其聚集、释放药物及与腺癌细胞（腺癌细胞株HT-29）结合情况。结果：在体外强磁场作用下磁性热敏阿霉素脂质体出现定向聚集,在水浴加热至33℃时阿霉素开始释放,并可与腺癌细胞结合,42℃时药物释放量可达到90％以上。其中21、 33和 39℃时释放药物与腺瘤细胞结合率均低于对照组（P<0.01）,在39、42和45℃药物释放率施加磁场亚组与未施加磁场亚组比较差异有显著性(P<0.01)。结论：磁场可以明显提高磁性热敏阿霉素脂质体的体外定向聚集性,温度可以控制磁性热敏阿霉素脂质体对阿霉素的释放及其与腺癌细胞的结合。