漏出液培养淋巴细胞制备染色体方法研究

人类染色体的制备技术已广泛应用于多种疾病的检测与诊断、多种物质的毒性检测及环境监测等各个领域.以往培养外周血淋巴细胞制备染色体多采用M199、F10等合成培养基,这些培养基由国外进口,价格昂贵,不利于遗传技术工作的普及.我们试用漏出液培养淋巴细胞制备染色体获得了成功,现介绍如下:     

判别胸腔渗出液和漏出液的4种标准比较

判别胸腔渗出液和漏出液的４种标准比较魏为利马丽＊附属甘泉医院内科＊检验科（上海，２０００６５）关键词胸腔积液；漏出液；渗出液；统计分析分类号Ｒ５６０．４胸腔积液是不同疾病的并发症，分为渗出性和漏出性两种。目前国内外各医院普遍采用Ｌｉｇｈｔ标准判别胸腔...     

以胸腹水/血清胆红素比值区别渗出液和漏出液

目的　将胸腹水 /血清胆红素比值用于区别胸腹水性质。方法　本文通过 86例胸腹水和血清胆红素的测定来判断胸腹水性质是可行的。结果　若以胸腹水 /血清≥ 0 .6判定为渗出液 ,比值≤ 0 .6为漏出液 ,其敏感度 97.1% ,特异度 96 .2 %。结论　与以多项指标检查判定基本相符且操作简单 ,可做为区别漏出液与渗出液的一项可靠指标用于临床。     

用漏出液代替标准培养基培养人体外周血淋巴细胞

用漏出液代替标准培养基培养人体外周血淋巴细胞生物学教研室肖桂芝，刘朝晖，冯立新关键词培养基，淋巴细胞，有丝分裂指数培养人体外周血淋巴细胞一般是用Ｍ１９９、ＲＰＭＩ１６４０、ＨａｍＦ１０等标准培养基，但标准培养基均由国外购进，价格比较昂贵，不利于基层及...     

胸腹水中TC、TG、HDL－C、LDL－C及载脂蛋白测定对渗出液与漏出液鉴别诊断的价值探讨

检测８９例住院患者胸腹水中总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）及载脂蛋白Ｂ－１００（ａｐｏＢ_（１００））含量，结果表明渗出液中ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ及ａｐｏＢ_（１００）含量显著增高，以载脂蛋白ａｐｏＢ_（１００）最敏感并与ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ呈正相关而与ＨＤＬ－Ｃ不相关。用ａｐｏＢ_（１００）鉴别渗出液、漏出液结果与临床的符合率可达８９．９％，优于常规检测。同时探讨了应用ＴＣ、ＬＤＬ－ＣａｐｏＢ_（１００）三项指标测定能提高鉴别诊断的符合率。     

胸腹水中TP、LDH、IgG、IgA测定对渗出液和漏出液的鉴别价值

目的 :探讨胸腹水中和血液中TP、LDH、IgG、IgA含量的比值对渗出液和漏出液的鉴别价值。方法 :利用日立 70 6 0全自动生化分析仪和美国BN - 10 0全自动特种蛋白仪检测积液和血中TP、LDH、IgG、IgA ,且对所得数据进行统计分析。结果 :渗出液中TP、LDH、IgG、IgA均值分别为 4 2 .6 0g/L、4 2 4 .0 0U/L、9.2 1g/L、1.6 2g/L ;漏出液中TP、LDH、IgG、IgA均值分别为 8.76g/L、71.4U/L、2 .5 6g/L、0 .5 5g/L ;同时渗出液中各指标与血中的比值分别为 0 .6 1、0 .94、0 .5 1;漏出液中各指标与血中的比值分别为 0 .14、0 .2 3、0 .15、0 .17。且经t检验均具有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :渗出液中TP、LDH、IgG、IgA含量或者是与血中的比值明显高于漏出液 ,其检测对积液性质的判断具有十分重要的意义。     

人芽囊原虫在RPMI1640培养基中培养条件的优化

目的优化人芽囊原虫(Blastocystishominis)在RPMI1640培养基中的培养条件。方法将B.hominis接种至RPMI1640培养基中,观察酸碱度、接种量、血清种类、浓度、温度、空气中氧与粪便标本的选择对B.hominis生长的影响。结果在RPMI1640培养基中,pH7.5、接种量200000细胞/管、20%小牛血清,37℃,加入青霉素、链霉素为最佳培养条件。结论在RPMI1640中,接种以B.hominis阳性(颗粒型为主)的血粘液便,加入20%小牛血清,青霉素、链霉素,在pH7.5于37℃条件下厌氧培养,每6d转种一次,可达到长期培养B.hominis的目的。     

外周血T淋巴细胞的培养、纯化及鉴定

目的:建立外周血T淋巴细胞初步纯化方法。方法:取健康人外周血单个核细胞(PBMCs),在低剂量IL2维持下,利用细胞培养淘汰法筛选纯化T淋巴细胞,用流式细胞术检测淋巴细胞培养过程中细胞表面标志的改变。结果:用流式细胞术检测发现:B淋巴细胞于第1周时基本死亡,第3周时完全消失;NK细胞于第1周时明显增加,第4周时大部分死亡;第4周时,所培养的细胞绝大多数为T淋巴细胞。T淋巴细胞亚群的整体变化趋势为:随着培养时间的延长,CD4 百分数稍增加,CD8 百分数明显增加,CD4 /CD8 比值明显降低,CD3 CD16 CD56 百分数明显增加。结论:在IL2维持下,人PBMCs培养4周时,收获培养细胞为初步纯化的T淋巴细胞。     

外周血内皮祖细胞培养的实验研究

目的为梗死心肌促血管新生的实验研究提供方法和移植细胞的来源。方法利用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,在内皮环境中培养并鉴定。CD31+/vWF+细胞被认为是所需要的内皮祖细胞。MTT实验观察贴壁细胞的增殖活性。结果培养的细胞符合EPC的形态学特征、细胞表面标志和功能特征。培养3d和5d,CD133+细胞分别占贴壁细胞的2.6%和9.3%。培养7d每毫升外周血可获得(2.7±1.2)×105个贴壁细胞,其中CD31+/vWF+细胞占54.2%。培养第5天到第7天以及第9天传代后2d与第3天的贴壁细胞相比,细胞增殖活性有显著的统计学意义(P<0.001)。结论利用外周血能够培养出以内皮祖细胞为主的细胞群。     

人类免疫缺陷病毒-1感染者外周血单个核细胞体外培养的免疫学及病毒学特点

目的观察人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者外周血单个核细胞(PBMC)体外培养过程中免疫学及病毒学的动态变化特点,并评价培养的细胞体系抗病毒活性。方法采集14例HIV感染者和6名健康人的PBMC,体外经多种细胞因子诱导培养,每3天观察细胞增殖情况,同时检测细胞表型、上清中细胞因子浓度和病毒载量。结果培养的健康人PBMC在(35±5)d最大增殖(61±8)倍;7例培养成功的HIV感染者PBMC在(21±6)d最大增殖(17±13)倍,另7例HIV感染者PBMC培养失败;同时发现HIV感染者PBMC体外培养最大增殖时间与其培养前外周血基础CD4/CD8比值呈明显正相关(P<0.05)。表型分析发现,培养的PBMC为优先CD8细胞增殖的异质T细胞群,主要由CD4、CD8及CD3CD56细胞组成;部分HIV感染者PBMC培养期间分泌白细胞介素(IL)1α、IL12、肿瘤坏死因子(TNF)α和IL10等细胞因子能力较高;而11/12例HIV感染者PBMC体外培养初期可扩增出大量病毒,但随着培养时间的延长,病毒载量逐渐降低甚至低于检测限。结论体外大量扩增基础CD4/CD8比值较高的HIV感染者外周血PBMC是可行的,扩增的细胞具备较强的Th1细胞免疫反应能力,为进一步开展艾滋病的免疫细胞治疗提供必要的实验数据。     

高通量与常规血液透析治疗尿毒症60例对比观察

目的:探讨高通量与常规血液透析治疗尿毒症的临床疗效及相关机制。方法:选择我院血液透析科尿毒症患者60例,随机分为观察组和对照组,每组30例。分别比较两组患者透析前、后的各项检测值。结果:观察组β2-MG,iPTH大分子物质下降率明显高于对照组(P<0.05);而SCr,BUN、血磷等小分子物质下降率与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:采用高通量血液透析治疗尿毒症临床疗效满意,经济方便,不良反应少。     

计算机模拟病例考试与其他考试形式的比较研究

计算机模拟病例(computer-based case simulation, CCS)考试是测量学生解决临床问题能力,尤其是临床决策思维和处理病人问题能力的重要方法 之一.本文介绍了计算机模拟病例考试的概念、国外发展状态、与其他考试形式的比较,阐述了计算机模拟病例的优越性,为大范围地推广应用提供了依据.     

腹腔镜子宫肌瘤剔除术和开腹肌瘤剔除术的对比研究

目的:对比开腹子宫肌瘤剔除术和腹腔镜下子宫肌瘤剔除术的临床效果。方法:选择行子宫肌瘤剔除术患者64例,随机分为开腹组(34例)和腹腔镜组(30例),比较两组手术时间、术中出血量及术后剔除肌瘤直径、术后排气时间、住院时间等围术期情况。结果:开腹组手术时间低于腹腔镜组(P<0.05);而腹腔镜组术中出血量少于开腹组(P<0.05),术后剔除肌瘤直径、术后排气时间、住院时间均少于开腹组(P<0.05)。结论:腹腔镜下子宫肌瘤剔除术的临床效果优于传统的开腹手术,是子宫肌瘤剔除术中更具前景的微创技术。     

腔镜下与开放手术行会师术治疗后尿道断裂临床疗效对照研究

目的:探讨腔镜下与开放手术行会师术在后尿道断裂患者中的应用效果。方法:选择我院泌尿外科后尿道断裂患者86例,随机分为观察组和对照组,对照组43例开放手术行会师术,而观察组43例则腔镜下行会师术,分析对比两组患者术中出血量、手术时间、住院时间、住院费用及术后性功能障碍发生率等。结果 :观察组患者在术中出血量、手术时间、住院时间及术后性功能障碍发生率均低于对照组(P<0.05),而观察组患者住院费用明显高于对照组(P<0.05),但两组手术成功率无显著性差异(P>0.05)。结论:腔镜下行会师术治疗后尿道断裂具有术中出血量少、手术时间短、住院时间及术后性功能障碍发生率少等优点。     

三种培养液进行海马神经元原代培养的对比研究

目的 使用3种培养液对海马神经元进行培养,遴选出一种使神经元存活率较高、存活时间较长的培养液。方法 分离SD大鼠胎鼠的海马神经元,分别用DMEM、DMEM／F12和Neurobasal培养液进行培养,应用倒置相差显微镜、台盼蓝排斥实验、MTT法和LDH释放率法进行细胞形态和细胞活力分析。结果 Neurobasal培养液培养的神经元细胞活力,与另二组培养液培养的神经元活力相比差异有显著性（P〈0．05）。结论 Neurobasal培养液可作为海马神经元体外培养的良好培养液。     

左旋布比卡因、布比卡因与罗哌卡因硬膜外麻醉效应的比较

目的:比较0.75%左旋布比卡因、布比卡因和罗哌卡因硬膜外阻滞效应,并观察手术期间血流动力学变化。方法:将90例ASA~级,拟在硬膜外麻醉下行腰椎手术病人随机分成左旋布比卡因组(LB组)、布比卡因组(B组)和罗哌卡因组(R组),每组30例,分别观察各组药物对机体运动、感觉阻滞效应和血流动力学变化。结果:感觉阻滞起效时间,总感觉阻滞持续时间,运动阻滞起效时间和最大运动阻滞程度,LB组与B组无显著性差异,而LB组与R组有显著性差异;运动阻滞完全时间LB组明显短于B组(P<0.05);感觉阻滞完善时间3组间无显著性差异;血流动力学指标各组间无显著性差异(P>0.05)。结论:0.75%左旋布比卡因可为硬膜外麻醉下腰椎手术提供良好的麻醉效果,且其麻醉作用与布比卡因相似,而较相同浓度罗哌卡因强。     

人眼结膜上皮细胞体外培养治疗翼状胬肉

目的 探讨体外分离培养结膜上皮细胞治疗翼状胬肉的方法.方法 将126例翼状胬肉患者(均为单眼患者)随机分为2组.治疗组58例,术前2周取其穹隆部结膜(1mm×1mm)剪成0．5mm×O．5mm大小后种植于羊膜上体外培养,术中逆行切除胬肉组织,再将培养好的结膜上皮植片移植于结膜创口,缝合固定.对照组68例,单纯切除翼状胬肉,暴露角巩膜缘.两组术后均行妥布霉素眼膏及滴眼液治疗,预防感染.结果 接种在羊膜上的结膜组织,8d左右融合成膜状,细胞为复层上皮细胞.植片3d后开始呈透明或半透明状,1周时可见新生血管长入,植片与周围结膜逐渐融合,2周左右植片与周围结膜完全融合.术后随访1～2年.治疗组复发2例(3．45％),对照组复发23例(33．82％),两组问复发率差异显著,有统计学意义(x2=16．3．P<0．01).所有患者眼球活动自如,未发生睑球粘连、疤痕增生等并发症.结论 体外分离培养结膜上皮细胞治疗翼状胬肉是一种理想的方法.     

膈下肋骨骨折的X线摄影方法对比研究

目的：探讨膈下肋骨骨折的X线摄影方法,以提高膈下肋骨骨折的X线诊断准确性。方法：对150例临床拟诊肋骨骨折的外伤患者进行双能量减影（dual—energy subtraction,DES）、常规胸片、常规腹平片摄影检查。比较三种方法对膈下肋骨骨折的显示能力。分别计算三种方法的敏感性。结果：对于所有膈下肋骨骨折,常规腹平片摄影法显示膈下肋骨骨折73处,DES显示41处,常规胸片显示22处,常规腹平片摄影法与另两种方法之间的差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：常规腹平片摄影能明显提高膈下肋骨骨折的检出率,从而提高了放射诊断质量。     

高温对人外周血淋巴细胞DNA、RNA及蛋白质合成的影响

高温作为辐射增敏技术,与放疗相结合,用于临床治疗肿瘤已取得显著的进展。我们应用同位素标记的方法,对人外周血淋巴细胞进行高温处理(43℃),结果提示高温能影响淋巴细胞DNA、RNA及蛋白质的合成,其热敏感性顺序与辐射相同,即DNA>RNA>蛋白质,并就其作用机制进行了详细的讨论。