凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1与动脉粥样硬化的研究进展

动脉粥样硬化（Artherosclerosis，AS）是以内膜粥样斑块或纤维斑块形成为病变特征的动脉疾病，主要累及大、中动脉，使其管腔狭窄和中膜弹性降低。AS可发生于心、脑、肾等重要脏器，导致血栓、栓塞及动脉瘤形成等多种严重并发症。AS的危险因素众多，包括高脂血症、高血压、吸烟、糖尿病、静态生活模式、饮食习惯、性别、年龄及遗传等因素。其中低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，LDL）可能是AS最主要的危险因素，尤其是氧化修饰的LDL（Oxidatively Modified LDL，ox—LDL）可使血管内皮细胞、平滑肌细胞、单核／巨噬细胞及成纤维细胞转化为致AS的表型。     

银杏叶提取物对TNF-α诱导的牛主动脉内皮细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体表达的影响及其机制

目的:研究银杏叶提取物(EGB)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的牛主动脉内皮细胞(BAECs)血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达的影响及其机制。方法:分离培养BAECs,应用TNF-α诱导BAECs表达LOX-1,给予EGB刺激,采用RT-PCR以及Westernblotting的方法检测BAECsLOX-1表达的改变,同时用Westernblotting检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达的变化,检测细胞培养液中亚硝酸盐(NO-2/NO-3)的含量。结果:TNF-α显著上调LOX-1的表达(P<0.05),EGB显著抑制TNF-α诱导的LOX-1的表达(P<0.05),而一氧化氮合酶抑制剂可显著抑制EGB的效应(P<0.05);TNF-α显著下调eNOS的表达(P<0.05),EGB显著促进eNOS蛋白的表达(P<0.05);TNF-α明显降低亚硝酸盐(NO-2/NO-3)的含量(P<0.05),EGB显著抑制TNF-α诱导的亚硝酸盐(NO-2/NO-3)含量的降低(P<0.05)。结论:EGB显著抑制TNF-α诱导的LOX-1的表达,其作用由EGB上调的NO介导。     

不同剪切力对内皮细胞表面凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1表达的影响

目的 研究不同剪切力对内皮细胞表面凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)表达的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,将其种植于载玻片上,放入流室系统分别施加以不同的剪切力.按施加剪切力的不同分为实验组和对照组:实验组分为低剪切力组(4.2 dyne/cm2,n=5)、中等剪切力组(8.4 dyne/cm2,n=5)和高剪切力组(15.0 dyne/cm2,n=5);对照组(n=5)静态条件下培养,不施加剪切力.剪切力加载1、2、4、8 h后RT-PCR测定各组内皮细胞LOX-1 mRNA的表达.结果 低剪切力(4.2 dyne/cm2)作用下,内皮细胞LOX-1表达随时间延长而增加.与对照组比较,中等剪切力(8.4dyne/cm2)作用2、4、8 h内皮细胞LOX-1的表达水平均降低[2 h:0.2346±0.0397比0.2948±0.0128,4 h:0.1747±0.0585比0.2985±0.0204,8 h:0.0256±0.0067比0.2968±0.0175,均P＜0.05].高剪切力(15.0dyne/cm2)作用下,血管内皮细胞LOX-1表达一直维持在极低水平.结论 不同剪切力可以影响内皮细胞的LOX-1表达水平.     

OLR1基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的相关性研究

目的探讨OLR1基因3′-UTR-C188T及G501C位点多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的相关性。方法用PCR-LDR方法检测219例动脉粥样硬化性脑梗死患者和386例健康对照者OLR1基因3'-UTR-C188T及G501C位点基因型。结果动脉粥样硬化性脑梗死组及对照组3′-UTR-C188T基因型和等位基因分布无统计学意义。病例组G501C位点的CC+GC基因型、GC基因型频率明显高于对照组(P=0.04,P=0.03)。病例组G501C位点的GC基因型频率,在校正传统危险因素后仍明显高于对照组,且差异有统计学意义(OR=1.535,95%CI=1.044-2.256,P=0.03)。结论 OLR1基因G501C位点多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的发病具有相关性,可能是动脉粥样硬化性脑梗死发病的危险因素。     

凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1在人巨细胞病毒感染致内皮细胞损伤中的作用

目的 初步探讨凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(lectin-like Ox-LDL receptor-1,LOX-1)在巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染致内皮细胞损伤的作用机制。 方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC),以人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)AD169株感染HUVEC,设置HCMV组、对照组、角叉菜胶组、HCMV＋角叉菜胶组,通过实时定量PCR(real-time PCR)方法检测LOX-1及粘附分子ICAM-1和VCAM-1 mRNA的表达情况,通过硝酸还原酶法检测细胞外一氧化氮(NO)含量的变化,然后比较各组上述指标的变化情况。 结果 HUVEC感染HCMV后24 h,HCMV组LOX-1、ICAM-1和VCAM-1 mRNA的表达水平较对照组明显增加,分别为1.649±0.078和1.000±0.086,1.751±0.041和1.000±0.048,1.634±0.072,1.000±0.102,两组间差异具有统计学意义( P<0.05);HCMV组细胞培养上清中NO含量也较对照组增加,为121.27±1.93和106.79± 2.266,两组间差异均具有统计学意义( P<0.01)。加入LOX-1抑制剂角叉菜胶后,ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达水平以及细胞培养上清中NO的含量均较HCMV组明显下降,各组间差异具有统计学意义( P<0.05)。 结论 HCMV感染能够上调HUVEC LOX-1及粘附分子的表达,同时也能促进细胞外NO生成,LOX-1可能在HCMV感染致内皮细胞氧化应激活动增强及血管内皮细胞损伤中起重要的介导作用。     

LOX-1在2型糖尿病下肢动脉硬化闭塞症中的表达及其作用

目的:观察2型糖尿病下肢动脉硬化闭塞症中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)mRNA和蛋白表达,并探讨其作用机制。方法:对9例2型糖尿病下肢动脉硬化闭塞症患者(糖尿病组)和7例正常肾移植供肾者(对照组)动脉标本行HE染色,应用RT-PCR和Western-blot检测动脉组织匀浆中LOX-1的mRNA和蛋白水平。结果:与对照组相比,糖尿病组LOX-1mRNA和蛋白水平表达明显升高(P0.05)。结论:2型糖尿病患者可能通过上调LOX-1表达而更容易合并下肢动脉硬化闭塞症,LOX-1可能是动脉硬化闭塞症发生发展的一个关键因素。     

LOX-1介导ox-LDL诱导的血管内皮细胞MCP-1的表达

目的：观察血凝素氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）对氧化LDL（ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞(humanunbilicalveinendothelialcells,HUVECs)表达单核细胞趋化蛋白（monocytechemoattractantprotein-1,MCP-1）基因及蛋白的影响。方法：用RT-PCR和Westernblot的方法观察ox-LDL对培养的HUVECs表达LOX-1和MCP-1基因及蛋白的影响,然后用LOX-1的受体阻滞剂爱兰苔胶（carrageenan）和聚肌苷酸［polyinosinicacid,poly(I)］与HUVECs预先作用后,再观察内皮细胞表达LOX-1和MCP-1基因和蛋白的变化。结果：用不同浓度的ox-LDL（0mg/L、10mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/L）与HUVECs培养24h后,LOX-1和MCP-1的mRNA和蛋白的表达明显增加,呈浓度依赖性;用Carrageenan和polyinosinicacid与HUVECs预先作用2h后,再加入50mg/L的ox-LDL培养24h,与未加Carrageenan和polyinosinicacid相比,HUVECsLOX-1和MCP-1的mRNA和蛋白的表达明显减少。结论：ox-LDL可以调节培养的HUVECsLOX-1和MCP-1基因和蛋白的表达,LOX-1作为ox-LDL的特异性受体,可能介导了ox-LDL诱导血管内皮细胞分泌MCP-1,从而在动脉粥样硬化的发生发展中起着重要的作用。     

TLR4介导氧化型低密度脂蛋白致动脉粥样硬化作用的研究

目的探讨氧化型低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein，ox-LDL）的致动脉粥样硬化作用与Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）表达的相关性。方法构建针对TLR4的小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）表达载体，转染人单核细胞株U937，于转染前后用不同浓度的ox-LDL刺激，用流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测TLR4蛋白和mRNA表达变化，同时用ELISA测定NF-κB活性改变以及细胞上清液中动脉粥样硬化相关细胞因子MCP-1和IL-8的浓度变化。结果ox-LDL刺激可导致单核细胞TLR4表达上调，同时NF-κB p65活性增强，MCP-1和IL-8在细胞上清液中的浓度显著高于对照组（P〈0．05），并且呈剂量依赖性；利用siRNA表达载体使TLR4表达抑制后，相同剂量的ox-LDL刺激，NF-κB p65相对活性以及MCP-1和IL-8的分泌显著低于TLR4未抑制组（P〈0．05）。结论ox-LDL的致动脉粥样硬化作用至少部分是由TLR4介导的；调节TLR4的表达，可以减弱ox-LDL刺激引起的包括NF-κB活化以及MCP-1和IL-8分泌等致动脉粥样硬化效应。     

髓样细胞表达的触发受体-1研究进展

髓样细胞表达的触发受体-1（TREM-1）具有激发和放大炎症反应的作用,最初发现于脓毒血症,一直以来被看作是诊断感染性疾病的标志物。但最近研究显示TREM-1在感染及非感染性炎症中表达均增高,而且认为TREM-1的阻断可成为治疗急、慢性炎症性疾病的一种新的方法。因而对TREM-1的结构功能、表达情况、信号转导机制、可溶性形式及与全身性炎症反应的关系和以其为靶点的治疗作用等进行研究有重大意义。     

氧化型低密度脂蛋白受体在动脉粥样硬化发病机制中的作用

<正>动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)引起的冠心病、脑梗死和外周血管病等疾病,已成为全世界范围内人口死亡的首要原因[1],同时也是以脂质代谢紊乱、内皮不完整、单核-巨噬细胞增生及斑块形成为主要病理特征的慢性疾病[2]。在AS病变演化历程中,氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox LDL)作为关键分子[3],与受体结合后,刺激单核-巨噬细胞摄取大量ox LDL,转变为泡沫细胞,产生大量炎性因子,启动一系列炎症反应,     

血管紧张素Ⅱ对人单核细胞源树突状细胞免疫功能的影响*

目的：探讨血管紧张素II（AngII）对人单核细胞源树突状细胞（DCs）免疫成熟进程及摄取氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）功能的影响。方法:采用密度梯度离心结合免疫磁珠法分离人外周血CD14+单核细胞,经含100μg/L重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）和50μg/L重组人IL-4（rhIL-4）的RPMI-1640培养液培养,诱导分化为未成熟DCs。经不同浓度的AngII干预24h,另用10μmol/L血管紧张素II受体1拮抗剂洛沙坦预处理后再加入AngII干预,采用流式细胞术检测细胞免疫表型（CD83和HLA-DR）,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞培养上清液中细胞因子（IL-12和IFN-γ）的浓度;通过加入10mg/L的荧光DiI标记的Ox-LDL,用流式细胞仪检测DiI-Ox-LDL的摄取分数;采用real-timePCR法检测清道夫受体A（SR-A）、CD36和凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1）mRNA的表达。结果:(1)AngII干预可上调DCs表面成熟标志物CD83和HLA-DR的表达,且分泌细胞因子IL-12和IFN-γ水平升高,10μmol/L洛沙坦预处理可明显抑制AngII诱导的DCs成熟。(2)AngII干预可促进DCs对DiI-Ox-LDL的摄取,洛沙坦预处理可部分抑制DCs对DiI-Ox-LDL的摄取。(3)AngII干预可上调LOX-1mRNA的表达,但对SR-A和CD36的表达无明显影响,洛沙坦预处理可明显抑制LOX-1mRNA的表达,但SR-A和CD36的表达无明显变化。结论:AngII可促进DCs的免疫成熟,并且可能通过上调LOX-1的表达,促进DCs对Ox-LDL的摄取,这可能是AngII促动脉粥样硬化的新机制。     

LOX-1在吡格列酮调节高脂血症大鼠主动脉凋亡蛋白表达中的作用

目的:观察吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉血凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)和凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的影响,探讨LOX-1在其中的变化和作用。方法:清洁级SD大鼠26只,随机分为正常组(n=9)、高脂饲料组(n=17),高脂饲料喂养12周后再随机分为高脂血症模型组(n=8)和吡格列酮组(n=9),分别给予生理盐水(正常组和模型组)和药物(吡格列酮组)干预4周后,常规方法检测各组血脂水平,免疫组织化学法检测各组主动脉LOX-1、Bax、Bcl-2蛋白表达,TUNEL染色法观察主动脉内膜细胞凋亡情况,并计算细胞凋亡指数(AI)。结果:高脂饲料喂养12周后,成功复制17只高脂血症模型大鼠。吡格列酮干预4周后,与模型组比较,吡格列酮组甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)水平明显降低(P<0.01)。与正常组相比,模型组大鼠主动脉LOX-1、Bax蛋白表达明显增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.01);与模型组相比,吡格列酮组主动脉LOX-1、Bax蛋白表达明显降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.01),且吡格列酮组主动脉内膜AI亦较模型组显著降低(P<0.01)。结论:吡格列酮可改善高脂血症大鼠血脂水平,调节凋亡蛋白表达,减少主动脉内皮细胞凋亡,其作用可能与其下调LOX-1蛋白表达有关。     

L—精氨酸对猪冠状动脉内皮功能的影响

以氧化低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄｌｏｗ－ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ｏｘ－ＬＤＬ）诱导猪冠状动脉内皮功能障碍，观察Ｌ－精氨酸（Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ，Ｌ－ａｒｇ）对正常及内皮功能障碍的冠脉的影响。结果显示ｏｘ－ＬＤＬ可使猪冠脉舒张功能下降而Ｌ－ａｒｇ可部分阻止这一作用。用逆转录ＰＣＲ技术检测了冠脉血管灌流后结构型一氧化氮合成酶（ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅｎｉｔｒｉｅｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｃＮＯＳ）ｍＲＮＡ表达，结果表明ｏｘ－ＬＤＬ可抑制血管ｃＮＯＳｍＲＮＡ表达而Ｌ－ａｒｇ可拮抗这一抑制作用。     

Low density lipoprotein promotes human naive T cell differentiation to Th1 cells

Oxidized LDL (oxLDL) in the arterial wall and its incorporation into foam cells leads to inflammation and nucleation of atherosclerotic plaque; this is opposed by HDL. OxLDL and HDL regulate activation of macrophages and endothelial cells, and study of T cell participation has been limited to mature, differentiated cells such as Th1 cells, which perpetuate atherogenesis by promoting cell-mediated responses and inflammation. Immature naïve T cells, just emerged from the thymus, have remained largely unstudied. We hypothesized that LDL and HDL provide selective modulation of immature naïve T cell differentiation and participation in plaque development. In our in vitro model, naïve cells become activated and differentiate to mature effector T cells that are Th1, Th2 or Treg cells. Addition of oxLDL favored differentiation to Th1 cells, reduced Th2 cell activity and prolonged cell survival. In contrast, HDL inhibited T cell proliferation and reduced cell survival. The data suggest a novel mechanism where oxLDL enhances differentiation of human naïve CD4+ T cells to Th1 cells capable of promoting inflammation and plaque progression, and this is opposed by HDL.     

Wellness in community living adults: the Weigh to Life program

Objective

To examine physiological and health-related quality of life (HRQOL) outcomes in community living adults attending a 12-week combined lifestyle wellness program.

Methods

A sample of overweight and obese adults (n = 319) and a subgroup who also had diabetes (n = 46 of 319) were studied. The program focuses on dietary, physical activity, and behavioral strategies to promote cardiovascular health. Baseline and 12-week measures were obtained.

Results

In the total sample, all physiological and HRQOL outcomes improved (p < .05), except HDL. High attendance was associated with the highest weight loss. In the diabetic subgroup, weight, steps/day, low density lipoprotein, and most aspects of HRQOL improved significantly.

Conclusion

Physiological and HRQOL benefits can be gained from a 12-week combined lifestyle program; greater benefits were obtained with higher attendance. Although the diabetic subgroup was not large, positive outcomes were realized.

Practice implications

The 12-week combined lifestyle program shows promise for improving outcomes in community living overweight and obese adults who may also be diabetic. By attending class, participants are reminded about strategies they are to apply during the 12-week program and, by program end, they are equipped with a tool kit of strategies for use in everyday life.     

氧化修饰低密度脂蛋白对人外周血单核细胞和THP-1细胞功能的影响

以天然低密度脂蛋白(nLDL) 为对照组, 探讨了氧化修饰低密度脂蛋白(oxLDL)对人外周血单核细胞(PBMs) 和人前单核白血病细胞株THP 1 粘附和分泌功能的影响。结果表明: oxLDL可上调单核细胞粘附分子CD11b 表达, 促进其与内皮的粘附, 并进一步诱导TNF α、IL 8 的分泌; 而nLDL无此作用。说明oxLDL是单核细胞粘附和激活的诱导剂, 经oxLDL诱导的THP 1 表现出与成熟单核 巨噬细胞相似的特征, 可作为体外动脉粥样硬化单核细胞分化激活的细胞模型