外源性SOD对兔急性高眼压致视网膜损伤保护作用的研究

目的探讨高眼压后活性氧自由基对视网膜组织的损伤情况及外源性超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ,ＳＯＤ）对高眼压致视网膜损伤的保护作用。方法观察６．６７ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）、维持１．５ｈ的高眼压解除２４ｈ内兔视网膜组织中脂质过氧化产物丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ,ＭＤＡ）含量、ＳＯＤ活性、谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ,ＧＳＨ－Ｐｘ）活性和还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量的变化情况及球后注射Ｃｕ－Ｚｎ－ＳＯＤ对高眼压解除后１２ｈ时兔视网膜组织中ＭＤＡ含量和ＳＯＤ活性的影响。结果ＭＤＡ在高眼压解除后０～１２ｈ逐渐增加,１２～２４ｈ维持较高水平。ＳＯＤ活性和ＧＳＨ－Ｐｘ活性在高眼压解除即刻均低于正常水平,以后有不同程度增高,其中ＳＯＤ活性在高眼压解除４ｈ后又开始下降。ＧＳＨ在高眼压解除后２４ｈ内无明显变化。球后注射Ｃｕ－Ｚｎ－ＳＯＤ能减少兔视网膜组织中ＭＤＡ生成,增加ＳＯＤ活性。结论活性氧自由基参与了高眼压致视网膜损伤,球后注射大剂量ＳＯＤ对提高视网膜抗氧化损伤能力有积极意义。     

不同放射剂量下大鼠视网膜组织形态与氧化应激因子的变化

目的　通过直线加速器照射大鼠眼部制作放射性视网膜病变大鼠模型,观察大鼠视网膜组织形态与氧化应激因子的变化。方法　选取４５只２个月龄ＳＤ大鼠,随机分为正常对照组、１０Ｇｙ组、３０Ｇｙ组,每组１５只。直线加速器照射眼部,单次剂量１０Ｇｙ。１０Ｇｙ组放射１次。３０Ｇｙ组每周放射１次,连续３周,合计剂量３０Ｇｙ。放射后正常饲养３个月,处死各组大鼠并取眼球。采用ＨＥ染色观察视网膜组织形态,黄嘌呤法测视网膜超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ,ＳＯＤ）活性、丙二醛（ｍａｌｏｎａｌｄｅｈｙｄｅ,ＭＤＡ）含量以及ＥＬＩＳＡ法测定活性氧自由基（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ,ＲＯＳ）含量。结果　造模后３个月,３０Ｇｙ组视网膜各层组织结构松散,神经节细胞层及内核层水肿,１０Ｇｙ组模型大鼠视网膜仅神经节细胞层轻微水肿。与正常对照组相比,１０Ｇｙ组ＳＯＤ活性、ＭＤＡ及ＲＯＳ含量分别为（８８．８０±１６．４４）Ｕ·ｍｇｐｒｏｔ－１（Ｐ＜０．０５）、（１１．０２±４．０２）ｎｍｏｌ·ｍｇｐｒｏｔ－１（Ｐ＜０．０１）、（１６．８９±６．０２）Ｕ·ｍＬ－１（Ｐ＜０．０５）,差异均有统计学意义;３０Ｇｙ组ＳＯＤ活性、ＭＤＡ及ＲＯＳ含量分别为（７８．５０±１８．０９）Ｕ·ｍｇｐｒｏｔ－１、（１５．２６±５．３４）ｎｍｏｌ·ｍｇｐｒｏｔ－１、（２８．６６±８．８２）Ｕ·ｍＬ－１,三者差异均有显著统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。与１０Ｇｙ组比较,３０Ｇｙ组ＭＤＡ含量和ＲＯＳ含量均升高（均为Ｐ＜０．０５）。结论　直线加速器放射造模时,３０Ｇｙ为最佳放射造模剂量,造模后大鼠视网膜ＳＯＤ活性降低,ＭＡＤ及ＲＯＳ含量均升高,可能是放射性视网膜病变的发病基础。     

白藜芦醇对青光眼视网膜氧化损伤的保护作用

目的　探讨白藜芦醇对青光眼视网膜氧化损伤的保护作用。方法　３０只健康雄性成年家兔随机分为对照组、模型组和白藜芦醇治疗组,每组１０只。模型组和白藜芦醇治疗组用２５ｇ?Ｌ－１羟丙基甲基纤维素溶液０．２ｍＬ注入家兔前房内,制作青光眼模型。白藜芦醇治疗组按每日３００ｍｇ?ｋｇ－１体质量给予白藜芦醇灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃。给药２８ｄ后测定视网膜抗氧化酶超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ,ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ,ＧＰＸ）和过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ,ＣＡＴ）的活性,抗氧化物质还原型谷胱甘肽（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ,ＧＳＨ）和还原型抗坏血酸（ａｓｃｏｒｂｉｃａｃｉｄ,ＡｓＡ）含量及一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ,ＮＯ）和丙二醛（ｍｅｔｈａｎｅｄｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃａｌｄｅｈｙｄｅ,ＭＤＡ）的含量。结果　模型组视网膜抗氧化酶ＳＯＤ、ＧＰＸ、ＣＡＴ活性及抗氧化物质ＧＳＨ、ＡｓＡ含量分别为（４２．０±３．３）Ｕ?ｍｇ－１、（１８．３±１．７）Ｕ?ｍｇ－１、（１．９±０．２）Ｕ?ｍｇ－１、（３３．３±２．７）ｍｇ?ｍｇ－１和（９７．０±７．６）ｍｇ?ｍｇ－１,均低于对照组（均为Ｐ＜０．０５）;ＮＯ和ＭＤＡ含量分别为（３７．０±２．９）μｍｏｌ?ｍｇ－１和（１８．０±１．７）μｍｏｌ?ｍｇ－１,均高于对照组（均为Ｐ＜０．０５）。白藜芦醇治疗组视网膜上述抗氧化酶活性、ＧＳＨ和ＡｓＡ含量分别为（４９．２±２．９）Ｕ?ｍｇ－１、（２４．１±３．２）Ｕ?ｍｇ－１、（２．８±０．２）Ｕ?ｍｇ－１、（４３．０±３．５）ｍｇ?ｍｇ－１和（１０８．４±８．１）ｍｇ?ｍｇ－１,均高于模型组,但低于对照组（均为Ｐ＜０．０５）;ＮＯ和ＭＤＡ含量分别为（３０．１±２．４）μｍｏｌ?ｍｇ－１和（１２．４±１．０）μｍｏｌ?ｍｇ－１,低于模型组,但高于对照组（均为Ｐ＜０．０５）。结论　白藜芦醇能够增加视网膜抗氧化酶活性和抗氧化物质ＧＳＨ和ＡｓＡ含量,从而可以减青光眼视网膜的氧化应激损伤。     

糖尿病大鼠视网膜抗氧化酶类变化的研究

目的观察糖尿病大鼠视网膜组织中抗氧化酶类的变化。方法对糖尿病大鼠发病后４、６、１２和１６周视网膜组织中超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕ－ｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｇｅ，ＧＳＨ－Ｐｘ）的活性以及脂质过氧化物（ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄｅ，ＬＰＯ）水平进行了检测。结果在各实验时点，糖尿病大鼠视网膜组织中ＳＯＤ和ＣＡＴ活性明显低于对照组，ＬＰＯ水平则显著高于对照组。结论糖尿病大鼠视网膜中抗氧化机能显著降低，这种变化可能在糖尿病视网膜病变的发生发展中起重要作用。     

香烟烟雾对大鼠晶状体脂质过氧化与抗氧化作用的影响

目的观察香烟烟雾对大鼠晶状体的脂质过氧化作用以及对抗氧化酶活性和非蛋白质巯基的影响。方法将大鼠造成香烟烟雾损伤模型并测定晶状体中脂质过氧化产物丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）和非蛋白质巯基（ｎｏｎ－ｐｒｏｔｅｉｎｓｕｌｐｈｙｄｒｙｌｇｒｏｕｐ，ＮＰ－ＳＨ）的水平以及超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕ－ｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＳＨ－Ｐｘ）的活性。结果吸烟组大鼠晶状体中ＭＤＡ含量明显增加（Ｐ＜０．０１），ＮＰ－ＳＨ的含量、ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ的活性均显著降低（Ｐ＜０．０１）。结论香烟烟雾可能是导致白内障形成的重要原因之一。     

SnoN蛋白及TGF-β在早期糖尿病大鼠视网膜组织中表达及意义

目的　观察ＳｎｏＮ蛋白及ＴＧＦ-β在糖尿病大鼠视网膜上的表达,探讨ＳｎｏＮ蛋白及ＴＧＦ-β与糖尿病视网膜病变（ｄｉａ-ｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＤＲ）的关系,为ＤＲ发病机制的研究提供新的理论依据。方法　选择健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只,随机分为正常对照组与糖尿病（ＤＭ）组,每组各１０只。采用一次性腹腔注射５０ｍｇ?ｋｇ－１链脲佐菌素（ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ,ＳＴＺ）的方法建立ＤＭ大鼠模型,正常对照组一次性给予等体积柠檬酸三钠-柠檬酸缓冲液腹腔注射。分别于造模后８周和１２周处死各组大鼠,均完整摘除各组大鼠的左眼球制成眼杯,采用免疫组织化学方法检测各组大鼠视网膜上ＳｎｏＮ蛋白及ＴＧＦ-β蛋白的表达。结果　造模后８周和１２周,ＤＭ组大鼠血糖值分别为（２２．６４±３．５７）ｍｍｏｌ?Ｌ－１、（２４．０８±１．６０）ｍｍｏｌ?Ｌ－１,均明显高于正常对照组的（４．６４±０．９１）ｍｍｏｌ?Ｌ－１、（４．５０±０．６６）ｍｍｏｌ?Ｌ－１,差异均有显著统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。正常对照组大鼠视网膜上ＴＧＦ-β无表达或弱表达,在造模后８周和１２周时,ＤＭ组大鼠视网膜上ＴＧＦ-β的ＯＤ值分别为０．１２１０±０．００５６、０．１５５０±０．００７０,均较正常对照组（０．０２２０±０．００７９、０．０２５０±０．００７０）明显增加（均为Ｐ＜０．０１）。正常对照组大鼠视网膜上ＳｎｏＮ蛋白高表达,在造模后８周和１２周时,ＤＭ组大鼠视网膜上ＳｎｏＮ的ＯＤ值分别为０．４１２０±０．０１１３、０．２１４０±０．００６９,均较正常对照组（０．９４５０±０．００７０、０．９４４０±０．００５１）明显降低（均为Ｐ＜０．０１）,且随着病程的延长,降低更明显。结论　ＳｎｏＮ蛋白对ＴＧＦ-β信号通路起负反馈抑制作用,能降低ＴＧＦ-β信号的强度和持续时间,因此对ＤＲ的防治具有重要意义。     

老年黄斑变性血浆过氧化脂质和红细胞超氧化物歧化酶测定的临床意义

对４２例ＡＭＤ和３６例正常对照组血浆过氧化脂质（ＬＰＯ）和红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性的测定。结果发现，ＡＭＤ患者血浆ＬＰＯ浓度显著高于，红细胞ＳＯＤ活性显著低于正常对照组（Ｐ〈０．００１）；湿性ＡＭＤ患者血浆ＬＰＯ浓度高于干性ＡＭＤ患者，差异有统计显著性（Ｐ〈０．０５）。揭示ＡＭＤ患者清除自由基（ＦＲ）的能力降低，测定血浆ＬＰＯ和红细胞ＳＯＤ对诊断和治疗ＡＭＤ具有重要意义。     

岩茶提取物对大鼠视网膜光损伤的保护作用

目的　探讨岩茶提取物对大鼠视网膜光损伤的保护作用。方法　４０只ＳＤ大鼠随机分为４组:正常对照组、光损伤组、高剂量组（０．２０ｇ?Ｌ－１）和低剂量组（０．０５ｇ?Ｌ－１）。除正常对照组外,其余三组置于光照强度为（４０００±２００）Ｌｕｘ的光照箱内照射１２ｈ。高、低剂量组光照前３ｄ给予岩茶提取物尾静脉注射,每天一次,光照结束后继续给药７ｄ后处死。光镜下观察４组视网膜病理变化,检测视网膜组织外核层厚度、超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ,ＳＯＤ）活力及丙二醛（ｍａｌｏｎａｌｄｅｈｙｄｅ,ＭＤＡ）含量。结果　光损伤组光镜下视网膜各层结构疏松,外核层厚度变薄,见大量空泡细胞;感光细胞内外节排列紊乱,染色不均。高、低剂量组损伤均较光损伤组轻,其中高剂量组损伤更轻。与正常对照组（４１．０６±１．０１）μｍ比较,其余三组视网膜外核层厚度变薄（均为Ｐ＜０．０５）,高、低剂量组较光损伤组（１５．１０±１．９２）μｍ厚,其中高剂量组（２５．７７±１．０８）μｍ较低剂量组（１９．２４±０．５５）μｍ厚（Ｐ＜０．０５）。与正常对照组相比,其余三组视网膜组织ＳＯＤ活力下降（Ｐ＜０．０５）,ＭＤＡ含量升高（Ｐ＜０．０５）;与光损伤组比较,高、低剂量组视网膜ＳＯＤ活力升高（Ｐ＜０．０５）,ＭＤＡ含量下降（Ｐ＜０．０５）,高剂量组表现更明显（Ｐ＜０．０５）。结论　岩茶提取物对大鼠视网膜光损伤有一定的保护作用,且具有剂量依赖性。     

脂多糖诱导炎症对大鼠氧诱导视网膜病变的影响

目的　观察不同剂量脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ＬＰＳ）诱导炎症对大鼠氧诱导视网膜病变（ｏｘｙｇｅｎ-ｉｎｄｕｃｅｄｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＯＩＲ）的影响,以探讨炎症在早产儿视网膜病变（ｒｅｔｉ-ｎｏｐａｔｈｙｏｆｐｒｅｍａｔｕｒｉｔｙ,ＲＯＰ）中的作用。方法　将新生ＳＤ大鼠随机分组,实验组依据ＬＰＳ注射剂量的不同分为ＬＰＳ-５０、ＬＰＳ-１００和ＬＰＳ-５００组,并分别设立正常对照组（Ｎ组）和氧诱导对照组（ＯＩＲ组）。Ｎ组幼鼠喂养于空气中,实验组和ＯＩＲ组幼鼠饲养于氧气体积分数为８０％／２１％（２４ｈ交替一次）的氧箱中至出生后１４ｄ（Ｐ１４）,随后移至空气中继续饲养。实验组幼鼠行ＯＩＲ处理过程中,于Ｐ７行ＬＰＳ腹腔注射,ＬＰＳ-５０、ＬＰＳ-１００和ＬＰＳ-５００组注射剂量分别为５０μｇ?ｋｇ－１、１００μｇ?ｋｇ－１和５００μｇ?ｋｇ－１。检测各组幼鼠在Ｐ７（注射前）、Ｐ８、Ｐ１１和Ｐ１４等不同时间点的体质量变化;并分别于Ｐ１４和Ｐ１８制作全视网膜铺片,通过ＧＳ-ｉｓｏｌｅｃｔｉｎＢ４染色观察各组视网膜血管化及病理性新生血管情况。结果　在各检测时间点,各实验组和ＯＩＲ组幼鼠的体质量均低于Ｎ组（Ｐ＜０．０５）。Ｐ７时,各实验组和ＯＩＲ组体质量无差别（Ｐ＞０．０５）;至Ｐ８、Ｐ１１和Ｐ１４时,ＬＰＳ-５００组幼鼠体质量明显低于ＯＩＲ组和其他实验组（Ｐ＜０．０５）。Ｐ１４时,Ｎ组幼鼠的浅层视网膜血管已覆盖整个视网膜;而ＯＩＲ组和实验组幼鼠的视网膜均存在无血管区,且ＬＰＳ-５００组无血管区面积最大（２７．３２％ ±３．５８％,Ｐ＜０．０１）。Ｐ１８时,Ｎ组视网膜血管网层次结构清晰;ＯＩＲ组和实验组幼鼠的视网膜均出现病理性新生血管,且ＬＰＳ-５００组新生血管累及视网膜的范围最广（累及钟点数为６．８３±１.７２,Ｐ＜０．０１）。结论　ＬＰＳ诱导炎症可加重大鼠ＯＩＲ,且在一定范围内呈剂量依赖性,提示炎症可能参与ＲＯＰ病理过程。     

热休克蛋白A12B在大鼠角膜、晶状体和视网膜组织中的表达

目的　观察大鼠角膜、晶状体、视网膜中热休克蛋白Ａ１２Ｂ（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎＡ１２Ｂ,ＨＳＰＡ１２Ｂ）的表达。方法　取ＳＰＦ级ＳＤ大鼠９只,用水合氯醛处死后立即摘取眼球,采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＲＴ-ＰＣＲ分别检测大鼠角膜、晶状体和视网膜组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ蛋白和ｍＲＮＡ的表达情况;免疫荧光化学法观察ＨＳＰＡ１２Ｂ在角膜、晶状体和视网膜组织中的表达及定位。结果　Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＲＴ-ＰＣＲ检测结果显示:ＨＳＰＡ１２Ｂ在大鼠角膜、晶状体、视网膜均有少量表达,其中角膜组织（０．２８０±０.０３４、０．３７４±０.０３１）中表达强度相对最低,晶状体（０．３３１±０．０３６、０．４５３±０．０４０）次之,视网膜组织（０．４５３±０．０２９、０．６８０±０．０４５）中表达强度最高。免疫荧光化学法结果表明,在角膜组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ主要表达于上皮层,其中基底细胞染色最强,而角膜基质细胞上仅有弱表达;在晶状体组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ主要表达于上皮细胞和皮质;在视网膜组织中ＨＳＰＡ１２Ｂ主要表达于视网膜神经纤维层、神经节细胞层和内核层,并与ＮｅｕＮ标记的神经元及ＧＳ标记的Ｍüｌｌｅｒ细胞存在共定位。结论　ＨＳＰＡ１２Ｂ在大鼠角膜、晶状体、视网膜组织中均有表达,且呈特异性表达。