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比较不同中国株丁型肝炎病毒(HDV)重组抗原检测抗HDV抗体的差异 总被引:1,自引:0,他引:1
我国属于乙型肝炎病毒(HBV)感染高发区和丁型肝炎病毒(HDV)感染低发区。为了弄清我国HDV感染率低是否是由于我国存在不同血清型HDV所致。我们在原核细胞上表达了我国HDV基因IA亚株型(河南株)和IB亚型株(四川株)抗原编码区基因,并应用这些基因重组丁肝抗原检测了四川,河南,内蒙三省(区)的252份HBsAg阳性携带者血清,并与美国提供的重组丁肝抗原做了比较,结果证明,对以上三种抗原均阳性者8 相似文献
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丁型肝炎病毒(HDV)核酶是DHV前体RNA分子中一段能自我切割的RNA序列,具有独特的二级结构,为HDV双滚环复制所必需,通过抑制其活性可以控制HDV感染。它又存在分子间切割活性,即反式切割作用,因而有可能应用于切割异源RNA分子。本文就这些方面的研究进展作一综述。 相似文献
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丁型肝炎病毒(Hepatitis delta virus,HDV)是一种缺陷病毒,必须在嗜肝DNA病毒的辅助下才能复制并组装成有感染性的病毒颗粒。其毒粒为直径35~37nm,大小介于HBV的Dane颗粒和HBsAg颗粒之间的球形颗粒。病毒颗粒外层由脂双层和HBsAg组成,内包含由HDAg和HDV RNA基因组结合组成的核蛋白体。HDV是目前所知唯一具有 相似文献
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人丁型肝炎病毒核酶的结构与功能韩金祥靳大川(山东省医药生物技术研究中心,济南250062)(山东医科大学附属医院)关键词人丁型肝炎病毒核酶本文为山东省重点攻关项目和山东省自然基金资助项目人丁型肝炎病毒(HDV)是一种缺陷性负链RNA病毒,是目前已知的... 相似文献
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最近,新发现的猪丁型冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCo V)可导致仔猪腹泻,亟待建立有效准确的核酸及血清学检测方法并调查猪场的PDCo V感染情况。本研究采用针对病毒M基因的探针荧光定量RT-PCR检测方法,对2014-2015年间收集的河南、湖南、浙江、江西、安徽、河北、黑龙江、江苏、山东和上海等10个省市收集的共254份腹泻仔猪小肠匀浆或粪便样本进行检测,共检出11份PDCo V阳性样本,总阳性率为4.33%。采用在昆虫细胞表达纯化的PDCo V囊膜S1蛋白为包被抗原,建立间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测2015-2016年间收集的来自江苏、湖南、浙江等7个省份的609份具有腹泻症状的猪血清样品,抗PDCo V S1抗体检出率为44.17%(269/609)。上述建立的两种方法分别针对病毒的RNA或抗体对PDCo V进行特异性检测,可以应用于PDCo V流行情况的监控。 相似文献
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利用PCR技术行反义寡核苷酸体外抗丁型肝炎病毒基因组RNA中核酶的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
设计一对PCR引物,其中上游引物的5’端除目的基因外,还加T7RNA聚合酶启动子序列,以质粒(pSVLD3)为模板,通过PCR扩增出带有T7RNA聚合酶启动子序列的139bp的cDNA片段,它含有丁型肝炎病毒(HDV)基因组RNA中核酶(Ribozyme)区的cDNA该核酶具有自身裂解功能,经测序发现该cDNA有2个碱基变异,以此PCR产物为模板,通过T7RNA聚合酶,转录出核酶的前体,并观察到其 相似文献
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中国不同临床型来源的丁型肝炎病毒部分基因组序列的分析比较 总被引:2,自引:0,他引:2
从我国河南,内蒙。北京等地的HDV健康携带者,慢性丁肝病人与重症肝炎病人中,筛选获得4份HDV-RNA阳性血清。经逆转录-聚合酶链反应交叉扩增获得HDV-cDNA片段,并克隆到PGEM-2zf(-)或PGEM-T载体上。经序列分析研究其结构特点,结果表明,同属基因I型的4株中国丁型肝炎病毒,在基因序列上具有相似的保守区域,但与同亚型HDV健康携带者相比,重症肝炎病人与慢性丁肝病人来源的HDV毒株。 相似文献
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用人工合成的丁型肝炎病毒抗原(HDV-Ag)肽建立了检测抗HDV-IgM抗体的ELISA方法。本法操作简便、快速、重复性好、特异性强,与抗HAV-IgM'抗HBc-IgM、抗HBs-IgM、抗HCV-IgM、抗CMV-IgM、抗RV-IgM、类风湿因子(RF)及抗核抗体(ANA)阳性血清均不起反应,且可被2-巯基乙醇阻断而不起反应。经初步临床应用,31例正常人血清抗HDV-IgM全部阴性,28例慢 相似文献
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双抗体夹心ELISA法检测养殖对虾病毒的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
用纯化的长毛对虾球状病毒(PPSV)和日本对虾中肠腺坏死杆状病毒(BMNV)制备新西兰兔抗BMNV和抗PPSV抗血清及Balb/c小鼠抗BMNV和抗PPSV抗血清,建立检测PSV和BMNV的双抗体夹心ELISA检测法,结果表明,双抗体夹心ELISA法具有较高的灵敏度,可以从100μl待测组织匀浆液中检测到50ng的PPSV蛋白,以及100ng的BMNV蛋白。不同病毒抗血清无交叉反应性,用该ELISA技术检测养殖对虾和多种采自养殖虾池及其附近的近海岸生物,发现相当比例的外观正常的对虾和近海岸生物已呈阳性反应 相似文献
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应用ELISA直接双抗体夹心法检查轮状病毒抗原,24份仔猪和29份犊牛的腹泻粪样,分别有12和16份阳性。用病毒RNA电泳分析检查阳性粪样,各出现两种病毒RNA电泳型,用中和试验检查17份成年牛和16份成年猪血清,分别有16和15份病毒抗体阳性。将其与ELISA间接法和结合法进行了比较。 相似文献
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目的:利用基因工程技术体外表达高效HEV多价复合抗原,建立一套敏感和特异的抗HEV检测体系,方法:将前期构建的基因重组戊肝病毒多价复合抗原表达质粒转化大肠埃希菌JM109。筛选鉴定阳性克隆并进行诱导表达,表达产物经分子筛层析纯化后,利用western blot作抗原特异性鉴定,以此抗原建立ELISA检测卫生部生物药品检定所HEV血清参比品及临床血清标本,同时以Genelab公司抗HEVELISA试剂盒作为对照进行对比研究。结果:重组质粒转化大肠埃希菌JM109株后的阳性克隆,经诱导在SDS-PAGE中出现一条分子量大小约为31.5kD的蛋白条带,该蛋白纯化后经Western Blotting检测证实为HEV特异性抗原,以此抗原包被酶联板建立ELISA检测53份国家卫生部标准HEV参比血清,灵敏度达100%(38/38),特异度达93.3%(14/15)。用此方法检测68份临床标本,并与Gene4labELISA试剂盒结果比较,两者阴阳性相符的有64份,总符合率为94.1%。结论:本实验克隆表达的基因重组戊肝病毒多价复合抗原具有良好抗原性,以此抗原建立的抗HEVELISA具有灵敏度高,特异性强的特点,可望为戊型肝炎的血清学诊断和流行病学调查提供一种更为有效的检测手段。 相似文献
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RT套式PCR检测血浆HCV RNA及与抗HCV检测的比较 总被引:7,自引:0,他引:7
应用微量血清热变性法提取核酸,逆转录套式聚合酶链反应(RT-nest PCR)检测血浆HCV RNA,并与抗HCV ELISA检测结果比较,对HCV RNA阳性标本进行HGV RNA的筛查.结果在32例抗HCV阳性和20例抗HCV阴性血浆中,HCV RNA分别检出18例和2例,总符合率为70%,20例HCV RNA阳性者中有2例合并感染HBV,1例合并感染HGV.证明血浆样本中抗HCV与HCV RNA间存在很大的相关性. 相似文献
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成人腹泻轮状病毒ELISA方法的建立和应用 总被引:1,自引:0,他引:1
本文通过特异性试验、阻断试验、交叉试验、敏感度试验和重复性试验,建立了成人腹泻轮状病毒一酶联免疫吸附试验法(ADRV—ELISA)。应用此法检测了全国20多个省区202份病人腹泻标本,检出率为91%。采用本ELISA、核酸电泳、电镜三种方法对48份病人腹泻标本进行了双盲法检测比较,结果三种方法的阳性检出率分别为100%、85.4%、56.25%(P<0.05)。实验结果表明,本ELISA应用于检测成人腹泻轮状病毒(ADRV),具有敏感度高。特异性强等优点。 相似文献
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建立了检测呼吸道合胞病毒(RSV)和副流感病毒(PFV)血清特异性IgM和IgA抗体的间接ELISA方法。在方法统一的基础上比较了检测IgG、IgM和IgA抗体的结果,证明检测血清IgM和IgA可以作为RSV和PFV感染的早期诊断指标。检测了120份临床急性下呼吸道感染患儿的血清,RSV-IgM检出率为33.3%,RSV-IgA为36.7%;PFV-IgM为27.5%,PFV-IgA为31.6%。提出了对RSV和PFV感染以检测特异性IgA替代IgM或两者互补的设想。 相似文献