miR-146b-5p对脑缺血再灌注损伤细胞的影响北大核心CSCD

目的研究miR-146b-5p在脑缺血再灌注损伤(CIRI)中的作用和调控机制。方法建立神经元细胞PC12的糖-氧剥夺/再氧合(OGD/R)体外模型,并将细胞随机分为NC mimic组和miR-146b-5p mimic组。以细胞计数法检测细胞存活率;以酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-β(IL-β)含量;以试剂盒法检测活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;以双荧光素酶报告实验验证miR-146b-5p和硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的结合关系;以蛋白质印迹法检测TXNIP蛋白表达。结果72 h时,NC mimic组和miR-146b-5p mimic组细胞存活率分别为(61.32±8.11)%和(81.45±9.34)%,TNF-α含量分别为(125.17±11.03)和(81.14±9.83)pg·m L^(-1),IL^(-1)β含量分别为(98.33±8.17)和(63.22±7.91)pg·m L^(-1),ROS含量分别为(45.67±3.98)和(35.20±3.01)U·m L^(-1),SOD含量分别为(30.11±2.99)和(51.08±6.75)U·m L^(-1),差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在脑缺血再灌注损伤中,miR-146b-5p靶向TXNIP促进细胞存活,抑制炎症反应和氧化应激改善脑缺血再灌注损伤。     

丹参素通过抑制miR-199a-5p对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的评估丹参素对心肌缺血/再灌注(MI/R)损伤的保护作用及其可能机制。方法 32只大鼠随机分为假手术组、模型组组、丹参素30 mg/kg组和丹参素60 mg/kg组,丹参素组在再灌注开始后5 min内iv相应剂量丹参素,假手术组和模型组注射等量生理盐水;再灌注3 h后,向冠状动脉中注入2 mL的3%伊文思蓝染料;取大鼠动脉血和心脏,通过组织化学测定心肌梗死面积大小,通过ELISA测定血清中的肌酸激酶-同工酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白(c TnI)水平。通过氧糖剥夺/恢复(OGD/R)H9c2心肌细胞模型评估丹参素预处理对细胞的直接作用,使用MTT、ELISA和流式细胞术分别测定丹参素对细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放和细胞凋亡的影响,使用RT-PCR和Western blotting免疫印迹测定miR-199a-5p及其下游蛋白Akt和ERK1/2的表达。结果丹参素治疗可显著降低心肌梗死面积以及血清中CK-MB和cTnI的水平(P0.05);丹参素预处理显著改善OGD/R心肌细胞活力恢复能力,减少细胞凋亡水平,显著提高Akt和ERK1/2的m RNA和蛋白表达水平,降低miR-199a-5p的m RNA表达水平(P0.05);上调miR-199a-5p显著降低Akt和ERK1/2的m RNA和蛋白表达水平(P0.05),而下调miR-199a-5p可显著提高Akt和ERK1/2的m RNA和蛋白表达水平(P0.05)。结论丹参素可以通过抑制miR-199a-5p增加Akt和ERK1/2表达来发挥心脏保护作用。     

舒芬太尼对心肌细胞缺血/再灌注细胞损伤的影响

目的 研究舒芬太尼通过miR-199a-3p调节线粒体自噬减轻心肌细胞缺血/再灌注损伤的机制。方法 以缺氧/复氧处理体外构建缺血/再灌注心肌细胞H9c2模型,实验分成对照组、模型组、实验组(0.4 ng·mL^-1舒芬太尼)、实验+anti-miR-NC组(0.4 ng·mL^-1舒芬太尼、inhibitor control)、实验+anti-miR-199a-3p组(0.4 ng·mL^-1舒芬太尼、miR-199a-3p inhibitor)。以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测miR-199a-3p表达,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,以蛋白质印迹法检测自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达,以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯法检测活性氧（ROS）,以JC-1法检测线粒体膜电位。结果 对照组、模型组、实验组、实验+anti-miR-NC组、实验+anti-miR-199a-3p组心肌细胞中miR-199a-3p表达水平为1.00±0.09,0.56±0.05,0.92±0.06,0.90±0.07,0.42±0.02,细胞凋...     

金丝桃苷通过调控微RNA-125a-5p/信号传导和转录激活因子3轴减轻脑缺血/再灌注损伤

目的 探讨金丝桃苷调控微RNA-125a-5p(miR-125a-5p)/信号传导和转录激活因子3(STAT3)轴对脑缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）损伤的影响。方法 通过GEO数据库筛选脑I/R损伤的差异表达基因。于2021年6月至2022年1月建立大鼠I/R模型并将其分为假手术组、模型组、金丝桃苷低剂量组（20 mg/kg）、金丝桃苷高剂量组（50 mg/kg）。通过氧-葡萄糖剥夺/复氧（OGD/R）法建立I/R细胞模型。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测组织与细胞中miR-125a-5p、STAT3的表达的情况。酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒检测细胞上清液中炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。乳酸脱氢酶（LDH）和超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒分别检测细胞的抗氧化能力。结果 金丝桃苷在脑I/R损伤大鼠中起保护作用。相对于假手术组（1±0.09、1±0.08、0.67±0.06）,模型组大鼠脑组织中miR-125a-5p表达（0.21±0.03）降低、STAT3的mRNA(4.89±0.52)和蛋白表达...     

表没食子儿茶素没食子酸酯对缺血再灌注损伤诱导的大鼠神经细胞凋亡的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对缺血再灌注损伤诱导的大鼠神经细胞凋亡、氧化应激的影响及其对长链非编码RNA MALAT1(lncRNA MALAT1)/微小RNA-2115-3p(miR-2115-3p)分子轴的调控作用。方法体外培养大鼠神经元细胞HT22,建立氧糖剥夺/复氧损伤(OGD/R)神经细胞模型,随机分为Con组、OGD/R组、EGCG-L组、EGCG-M组、EGCG-H组、EGCG-H+pcDNA组、EGCG-H+pcDNA-MALAT1组。检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测MALAT1、miR-2115-3p的表达量;双荧光素酶报告实验验证MALAT1、miR-2115-3p的靶向关系;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达量。结果与Con组比较,OGD/R组SOD含量降低(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),Bax蛋白水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),MALAT1表达水平升高(P<0.05),miR-2115-3p表达水平降低(P<0.05);与OGD/R组比较,EGCG-L组、EGCG-M组、EGCG-H组SOD含量升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Bax蛋白水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平升高(P<0.05),MALAT1表达水平降低(P<0.05),miR-2115-3p表达水平升高(P<0.05),且EGCG-L组、EGCG-M组、EGCG-H组各指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实MALAT1可靶向结合miR-2115-3p;MALAT1过表达可减弱EGCG对OGD/R诱导的神经细胞氧化应激及凋亡的作用。结论EGCG可通过调控MALAT1/miR-2115-3p分子轴,从而抑制缺血再灌注损伤诱导的大鼠神经细胞凋亡及减轻其氧化损伤。     

IL-33通过miR-19a-3p/MAPK6通路影响心肌缺氧/复氧损伤的机制研究

目的 探讨白细胞介素-33(IL-33)通过miR-19a-3p/MAPK6通路对心肌缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及可能的分子机制。方法 建立H/R诱导的新生小鼠心肌细胞体外模型,使用IL-33进行预处理,向心肌细胞中转入miR-19a-3p mimic,以上调miR-19a-3p表达,转入miR-19a-3p inhibitor,以抑制miR-19a-3p表达,转入pc DNA-MAPK6以上调MAPK6表达。通过Caspase-3活性、细胞凋亡ELISA法和原位细胞凋亡染色检测心肌细胞凋亡。Target Scan数据库预测miR-19a-3p的潜在靶点,双荧光素酶检测报告显示miR-19a-3p与MAPK6之间关系;RT-qPCR法检测心肌细胞miR-19a-3p和MAPK6 mRNA表达,Western blot法检测MAPK6蛋白表达。结果 IL-33预处理可以抑制H/R诱导的miR-19a-3p表达下调和细胞凋亡。双荧光素酶测定报告显示,miR-19a-3p靶向调控MAPK6。IL-33抑制了H/R诱导的MAPK6表达上调,过表达MAPK6减弱了IL-33对H/R的抗凋亡作...     

血脑屏障氧糖剥夺再灌体外模型小鼠脑内皮细胞 bEnd.3中微小 RNA-290b-3p的作用及机制研究

目的 探讨氧糖剥夺再灌(OGD/R)条件下,小鼠脑内皮细胞bEnd.3中微小RNA-290b-3p(miR-290b-3p)在体外血脑屏障模型的作用与机制.方法 培养小鼠脑内皮细胞bEnd.3,建立OGD/R模型与体外血脑屏障模型,Transwell法检测氧糖剥夺后体外血脑屏障模型通透性的变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-PCR,RT-PCR)检测OGD/R后miR-290b-3p表达水平;Targetscan网站预测miR-290b-3p与紧密连接蛋白5(Claudin-5)结合;荧光素酶报告实验验证miR-290b-3p与Claudin-5结合;转染bEnd.3细胞miR-290b-3p抑制剂,应用蛋白质印迹法(Western Blot)检测Claudin-5的表达,Transwell法检测抑制miR-290b-3p后氧糖剥夺后体外血脑屏障模型通透性变化.结果 OGD/R后体外血脑屏障破坏,1、2、3、4、6 h荧光素异硫氰酸酯(FITC)-葡聚糖扩散速率分别为(0.04±0.00)、(0.04±0.01)、(0.05±0.01)、(0.07±0.01)、(0.12±0.01)pmol·mm-2·min-1,通透性增加;miR-290b-3p在OGD/R后1、2、3、4、6 h表达量分别为(1.18±0.12)、(1.27±0.12)、(1.55±0.18)、(2.13±0.18)、(2.53±0.15),表达增加;miR-290b-3p与Claudin-5结合;抑制miR-290b-3p可以缓解OGD/R后Claudin-5的降低,减轻血脑屏障的损伤.结论 氧糖剥夺后bEnd3细胞中miR-290b-3p表达增加抑制miR-290b-3p可通过调节Claudin-5表达减轻氧糖剥夺模型中血脑屏障的损伤.     

艳山姜总黄酮改善无水乙醇致胃黏膜细胞损伤的作用及机制

目的 探讨艳山姜总黄酮通过微RNA-146a-5p(miR-146a-5p)对无水乙醇诱导的胃黏膜细胞损伤的改善作用及潜在机制。方法 以人胃黏膜细胞GES-1为对象，以无水乙醇诱导建立急性胃溃疡细胞模型，在考察不同质量浓度艳山姜总黄酮对细胞活力影响及筛选作用浓度的基础上，检测细胞中miR-146a-5p的相对表达量，细胞中肿瘤坏死因子受体关联因子6(TRAF6)、核因子κB p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达水平，以及细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、前列腺素E2(PEG2)水平；验证miR-146a-5p与TRAF6的靶向关系，并观察过表达miR-146a-5p、敲减TRAF6对模型细胞上清液中IL-1β、IL-6、PEG2水平的影响，以及敲减miR-146a-5p对艳山姜总黄酮抗胃溃疡作用的影响。结果 与空白组比较，模型组细胞中miR-146a-5p的相对表达量和上清液中PGE2水平均显著降低（P<0.01），细胞中TRAF6、NF-κB p65、TNF-α蛋白的表达水平和上清液中IL-1β、IL-6水平均显著升高（P<...     

微小RNA-182-5p调控焦亡参与肝缺血再灌注损伤

摘要：目的 探讨微小RNA-182-5p（miR-182-5p）靶向调控叉形头转录因子O亚型3a（FoxO3a）调节焦亡对肝 缺血再灌注损伤的影响。方法 建立小鼠肝脏缺血再灌注模型。按随机数字表法将40只小鼠分为5组,每组8只, 分别为假手术（sham）组,缺血再灌注（IR）各组（缺血1.5 h,按再灌注时间分为IR 2 h组、IR 6 h组、IR 12 h组和IR 24 h 组）。细胞实验分组分为两部分,（1）缺氧模型建立,分为 control 组和 IR 组。（2）缺氧/复氧模型建立,分为对照组、 mimic组,inhibitor组和inhibitor+siRNA组。HE染色观察肝组织病理变化;免疫细胞化学染色检测FoxO3a表达分布 情况;荧光实时定量PCR（qRT-PCR）和Western blot 分别从mRNA和蛋白水平检测miR-182-5p、FoxO3a、半胱天冬 酶-1（Caspase1）、白细胞介素（IL）-1β、IL-18 表达情况;分析 miR-182-5p 与 FoxO3a 基因相关性;免疫荧光检测 Caspase1表达情况;ELISA检测IL-1β和IL-18表达情况;CCK-8试剂盒检测细胞活性变化情况。结果 IR处理后小 鼠肝组织损伤增加,再灌注12 h时损伤最重,同时FoxO3a、Caspase1、IL-1β、IL-18表达增加（P＜0.05）,诱导焦亡产 生;IR处理后小鼠肝组织内miR-182-5p表达水平较sham组升高（P＜0.05）。体外培养小鼠肝细胞AML12,IR处理 后miR-182-5p表达上调,FoxO3a表达下调,同时Caspase1表达升高（P＜0.05）。过表达miR-182-5p能降低FoxO3a 表达水平;反之能增加FoxO3a表达量,进而降低Caspase1、IL-1β、IL-18的表达,增加肝细胞活性（P＜0.05）。结论 激活miR-182-5p能加重肝缺血再灌注损伤,而抑制miR-182-5p能减轻肝缺血再灌注损伤,其机制可能与miR-182- 5p通过靶向调控FoxO3a激活肝细胞焦亡、影响Caspase1、IL-1β、IL-18表达有关。     

LncRNA MIAT靶向 miR-204对氧糖剥夺 /复氧诱导 PC12细胞损伤的保护作用

目的 探究氧糖剥夺/复氧（OGD/R）诱导大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株PC12细胞损伤的分子调控机制,以期为临床上靶向治疗缺血性卒中提供新的思路。方法 该研究于2021年6—12月进行,购买PC12细胞后对其进行OGD/R诱导,在诱导后的细胞中分别转染长链非编码RNA(LncRNA)心肌梗死相关转录本（MIAT）过表达载体及微RNA-204模拟物（miR-204mimic）,以对应的载体阴性对照（pcDNA3.1-NC）或模拟物阴性对照（mimic-NC）作为阴性对照,以未转染PC12细胞作为空白对照。使用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测LncRNA MIAT与miR-204的表达;CCK-8与流式细胞术分别检测细胞活力与凋亡;Elisa试剂盒检测炎性因子白细胞介素（IL）-6、IL-1β,抗炎性因子IL-10的表达。RNA下拉检测MIAT在miR-204上的富集;通过starbase预测LncRNA MIAT与miR-204的结合位点,随后采取双萤光素酶报告实验验证LncRNA MIAT与miR-204的靶向结合。结果 与空白对照组[1.011±0.113,1.00...     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。     

片剂溶出度影响因素分析

目的:考察片剂溶出度的影响因素,提高片剂溶出度,从而提高产品质量。方法:通过实验,研究各种参数对片剂溶出度的影响,选择出最佳工艺条件,如改进处方、控制颗粒硬度和大小、控制压力等工艺参数,用于指导大型生产,提高片剂溶出度。结论:崩解剂及润滑剂的用量对片剂溶出度影响较大,颗粒的硬度及大小、粘合剂的温度,压片压力对片剂的溶出度亦有影响;片剂直径大小对片剂溶出度影响不大。     

槲皮素代谢产物定性检出条件研究

目的:研究给予大鼠槲皮素后血浆中代谢产物的定性检出条件。方法:给予大鼠槲皮素单体(100mg.kg-1)后腹腔静脉取血,血浆样品经2mol.L-1盐酸(甲醇-水溶液)水解,采用高效液相色谱法对血浆样品中代谢产物进行定性分析。结果:大鼠给药后3h内取血、血浆样品经盐酸水解处理4h,可稳定检测槲皮素和异鼠李素,样品在—20℃条件下贮存稳定。结论:血浆样品采集时间、盐酸水解时间及贮存方式等不同均可影响代谢产物的有效检出。     

甲泼尼龙佐治毛细支气管炎疗效观察

目的探讨甲泼尼龙与布地奈德治疗毛细支气管炎的疗效。方法将182例毛细支气管炎患儿随机分成三组,三组均采用综合治疗,A组62例用甲泼尼龙静脉滴注,B组60例雾化吸入布地奈德,C组60例用静滴氢化可的松,观察三组喘憋、哮鸣音消失和住院时间。结果A组喘憋、哮鸣音消失时间及住院时间均比B,C组缩短（P〈0.05）。结论甲泼尼龙静滴治疗毛细支气管炎有效、安全、方便,明显加快治愈过程,优于布地奈德与氢化可的松。     

新疆维吾尔自治区基层医院平均住院日调查分析

目的 通过对新疆维吾尔自治区14个县乡级医疗机构住院患者平均住院日及影响因素进行分析,为县乡级医疗机构进一步提高医疗管理质量提供依据.方法 将2009-2010年1504例县乡级医院住院患者平均住院天数,按性别、年龄、院别、付费方式、疾病分类进行描述性统计和秩和检验分析.结果 不同性别间及院别间平均住院日差异均有统计学意义(均P＜0.05),男性平均住院日为10.39 d,女性为8.69d,乡级医院为9.27d,县级医院为9.50 d.不同年龄间平均住院日差异有统计学意义(P＜0.05),小于15岁组、15 ～24岁组、25～44岁组、45 ～65岁组、大干65岁组平均住院日分别为8.10 d、7.66d、8.83 d、10.26 d和11.33 d.自费患者平均住院日为8.39 d,新农合组为9.10 d,商业保险组10.17 d,社会基本医疗保险患者则为11.08 d.不同疾病分类间平均住院日差异明显,妊娠类平均住院日最短,为6.73 d,而肿瘤患者则为14.26 d.结论 不同性别、不同年龄段、不同疾病分类及不同付费方式间平均住院日存在差异,县级医疗机构和乡级医疗机构住院患者平均住院日也存在差异.     

原发性十二指肠恶性肿瘤76例临床分析

目的分析原发性十二指肠恶性肿瘤临床表现、病理类型,探讨如何进行辅助检查的选择与减少病例的误诊。方法回顾性分析1997年3月至2008年3月收治的76例确诊为原发性十二指肠恶性肿瘤患者的临床资料。结果临床表现无特异性,可有腹痛、腹胀、黄疸、呕吐以及消化道出血等表现。从起病到入院确诊平均病程6.5个月。肿瘤好发于十二指肠降部,共64例,另外球部6例,水平部6例,升部0例,病理类型以腺癌为主,占90.8%。辅助检查以胃镜加十二指肠镜检出率最高91.2%,造影检查为87.1%,CT83.3%,B超70.4%,CA-19973.6%。结论提高原发性十二指肠恶性肿瘤预后的关键是早期诊断,对上述临床表现不能用常见疾病解释者应提高警惕,结合RECP、Gl、胃镜、CT、B超等多项辅助检查,可望达到早期诊断的目的。     

合理用药监测系统应用体会

目的:提高医院合理用药水平。方法:对“合理用药监测系统”在我院的应用情况进行总结。结果:我院不合理用药主要表现在注射剂的配伍禁忌、药物相互作用、重复用药、药物剂量大于极限量、特殊人群用药警示5个方面。结论:我院通过应用“合理用药监测系统”,减少了药源性疾病的发生,提高了合理用药的整体水平。