大鼠不同类型臂丛根性损伤后脊髓运动神经元NOS的表达

目的 研究成年大鼠不同类型臂丛损伤后脊髓运动神经元一氧化氮合酶（NOS）表达与神经元死亡之间的关系。方法 选用76只健康成年SD大鼠，分别造成臂丛神经根性切断伤与根性撕脱伤，于损伤后不同时间观察脊髓前角运动神经元的存活率，以及NOS在脊髓前角运动神经元中的表达情况。结果 臂丛神经根性切断伤后，损伤侧脊髓前角运动神经元无明显死亡，且未见NOS表达。臂丛神经根性撕脱伤后1周，损伤侧脊髓前角运动神经元数目开始减少，并出现NOS阳性表达。之后随着NOS阳性神经元增多，神经元死亡率也增加，6周后神经元数目基本维持稳定而NOS阳性神经元逐渐减少消失。结论 臂丛神经根性撕脱伤后，NOS参与损伤后脊髓运动神经元死亡，或在运动神经元死亡中起重要作用。     

臂丛神经根性损伤后脊髓运动神经元死亡的实验研究

目的 研究臂丛神经根笥发断伤及根性撕脱后脊的前角运动神经元的死亡情况。方法 选用６０只健康成年ＳＤ大鼠,分别造成臂丛神经根笥切断僵和根性撕脱伤,于手术后不同时间点取髓标本,观察颈髓前角运动神经元数目的变化。结果 臂丛神经根笥切务后,脊髓前角运动神经元数目无明显变化,而根性撕脱伤１周后神经九目开始减少,２周时神经元数自己减少３０％,６周时达７０％,撕脱伤与切断伤之间差异有显著性（Ｐ〈０．０１）。结论     

臂丛神经根性撕脱伤后TGF—β、TNF-α、bFGF在脊髓中表达的变化

目的:通过观测大鼠臂丛神经根性撕脱伤后脊髓中运动及感觉神经元内转化生长因子β(TGF-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达变化,探讨臂丛神经撕脱伤后神经相关细胞因子TGF-β、TNF-α、bFGF可能对神经再生的影响.方法:清洁级大白鼠54只,随机分为正常对照组和损伤术后1、3、7、10 d和14 d 组,共6组.损伤组均从前路造成臂丛C-5～T-1神经根性撕脱伤.按各组所示时间取脊髓分别检测TGF-β、TNF-α及bFGF的蛋白表达.并通过观察阳性细胞数对组织切片中TGF-β、TNF-α及bFGF进行半定量分析及比较. 结果:臂丛神经根性撕脱伤后,脊髓TGF-β、TNF-α、bFGF表达均增高, 前两者3 d时达到高峰, 随后下降, 14 d时仍高于对照组.而bFGF 7 d时达到高峰,随后下降,14 d时下降到接近正常水平.结论:臂丛神经根性撕脱伤后神经因子在中枢神经元表达增高, 可能有保护神经元、促进神经再生的作用.     

高位臂丛神经撕脱伤大鼠血清及脑脊液中髓鞘碱性蛋白的动态变化

目的：通过臂丛神经高位撕脱伤大鼠血清及脑脊液中髓鞘碱性蛋白（MBP）的测定,探询其变化规律,可提供一种非影像学的诊断方法,用以鉴别臂丛神经的根性撕脱和非根性撕脱.方法：将Wistar雌性大鼠39只随机分为臂丛神经根性撕脱伤和高位非根性撕脱伤各6组及对照组,共13组.其中损伤12组分别以CarlstedtT法[1]颈椎后入路制成臂丛神经根性撕脱伤和高位非根性撕脱伤损伤动物模型,于规定时间处死,抽取脑脊液和血液,定量测定MBP.结果：（1）根性撕脱伤组：与对照组比较,血液和脑脊液中MBP含量于损伤后均出现显著增高（P＜o.01）,有统计学意义;（2）高位非根性撕脱伤组：与对照组比较,血液中MBP含量于损伤后出现显著增高（P＜0.01）,而脑脊蒗中MBP含量无显著差异.结论：高位臂丛神经损伤大鼠血液中MBP含量均可出现显著增高.而脑脊液中是否出现MBP含量变化,则可以作为一项判断该损伤是否累及神经根的参考指标,有诊断意义.     

护理干预对全臂丛神经撕脱伤患者康复的影响

全臂丛神经根性撕脱伤患者的神经移植重建一直是临床一大难题.2004年5月～2006年8月,我院为7例全臂丛神经撕脱伤患者成功地实施了健侧C,神经经椎体前通路移位与患侧下干直接缝合术,通过一套完整的术前术后护理方案,配合科学的康复指导练习,取得了满意的治疗效果.报告如下.     

热休克蛋白27对大鼠臂丛神经根撕脱伤后脊髓运动神经元细胞凋亡的影响

目的:观察热休克蛋白27(Hsp27)对大鼠臂丛神经根撕脱后脊髓前角运动神经元细胞凋亡的影响.方法:健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为实验组和对照组.实验组动物分别以45℃热休克预处理15min,42℃维持20min,室温恢复24h后,在手术显微镜下进行脊髓C5～T1节段神经根撕脱术,分别于术后12h及1,3,5,7d处死动物.对照组仅施行臂丛神经根撕脱术,并分别于术后12h及1,3,5,7d处死动物.各组分别进行Hsp27免疫组织化学染色和原位末端标记法(TUNEL)检测脊髓运动神经元细胞凋亡情况,结合图像对结果进行分析.结果:两组Hsp27表达高峰均在热休克后1d;实验组脊髓运动神经元细胞凋亡在1d达到高峰,而对照组出现在3d,且凋亡细胞数明显高于实验组.结论:Hsp27可抑制臂丛神经根撕脱伤后脊髓运动神经元凋亡.     

臂丛根部的解剖学研究及其临床意义

目的对臂丛根部及其周围组织进行解剖，为臂丛根性撕脱伤的诊治提供解剖学基础。方法在17例防腐成人尸体的颈胸段标本上，用显微外科解剖和HE染色方法对臂丛根部的形态特点及其与周围组织的关系进行观察、测量。结果臂丛神经各根之间在解剖结构上存在一定的差异，由于这种差异的存在，造成C5、C6神经根在受同等暴力作用下较C7、C8及T1神经根不易形成根性撕脱，即使C5、C6神经根根性撕脱，亦往往伴有节后损伤。结论熟悉臂丛根部的解剖学结构对临床上臂丛根性损伤的诊治具有积极的指导意义。     

神经干细胞在海人酸毁损大鼠海马中的迁移和分化

目的：观察胎鼠神经干细胞移植入海人酸毁损成年大鼠海马中的迁移和分化情况。方法：体外培养胎鼠海马源性神经干细胞。立体定位注射海人酸毁损大鼠海马CA1区锥体细胞。毁损1周后，将Hoechst33342标记的神经干细胞移植毁损区．分别于术后1、2,4、8周取材，利用荧光技术和免疫组织化学方法，追踪移植的神经干细胞在毁损侧海马中的存活、迁移和分化情况。结果：移植的神经干细胞在海马锥体层呈链状迁移，并分化为MAP2阳性细胞和GFAP阳性细胞。结论：移植的神经干细胞在海马锥体层呈链状迁移。大部分分化为胶质细胞。     

锥体前路的健侧颈7移位治疗臂丛神经上、中干根性撕脱伤

目的探讨椎体前路健侧颈7移位治疗臂丛神经上、中干根性撕脱伤的可行性.方法应用锥体前路的健侧颈7移位治疗臂丛神经上、中干根性撕脱伤.结果改良切口椎体前路健侧颈7移位成功治疗臂丛神经上、中干根性撕脱伤,未发生副损伤及并发症,切口Ⅰ期愈合.结论锥体前路的健侧颈7移位治疗臂丛神经上、中干根性撕脱伤可减小手术瘢痕,缩短神经再生的距离,具有临床可行性.     

选择性臂丛损伤后脊髓降钙素基因相关肽mRNA的表达

目的探讨选择性臂丛损伤后脊髓前角、后角降钙素基因相关肽（CGRP）表达变化对脊髓运动神经元轴索再生的影响。方法 29只SD大鼠随机分为4组：撕脱组（A组,n=8）,撕脱＋切断组（B组,n=8）和撕脱＋半横断组（C组,n=8）和对照组（n=5）。术后2周取脊髓第7颈节的前角和后角,用SYBRGreen荧光定量RT-PCR方法检测脊髓前角、后角中CGRPmRNA的表达。结果对照组脊髓前、后角CGRPmRNA呈低表达,前角表达略高于后角。A、B、C三组前角CGRPmRNA表达上调,C组上调幅度最显著,A、B、C三组后角CGRPmRNA表达均下调。结论脊髓CGRP表达改变是臂丛损伤再生中的特异性蛋白的重组反应,尤其是前角CGRP高表达对运动神经元轴突再生可能具有重要作用。脊髓前、后角的CGRP的功能可能不同。     

血管性痴呆大鼠海马神经干细胞移植

目的 探讨新生大鼠脊髓神经干细胞(NSC)移植至血管性痴呆(VD)大鼠海马后在体内的存活、迁移和分化。方法 用无血清培养和单克隆技术从新生大鼠脊髓分离具有单细胞克隆能力的细胞群并连续传代培养，鉴定为NSC后，将其用BrdU标记后移植入VD大鼠海马内，利用免疫荧光化学技术检测移植后细胞的生存、迁移和分化。结果 从脊髓分离的细胞群具有NSC的特性，这些细胞在移植入VD大鼠海马8周后能检测到其存在并向四周迁移，并且分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论 从脊髓分离的细胞是脊髓NSC，将其移植到VD大鼠海马内能生存、迁移和分化。     

SD胎鼠脊髓神经干细胞分离、培养及鉴定

目的 分离、培养和鉴定胎鼠脊髓神经干细胞,为建立稳定的脊髓神经干细胞系提供基础.方法 应用无血清培养技术从胎鼠脊髓分离、培养神经干细胞,用免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞.结果 分离培养的细胞具有不断增殖的能力,表达神经巢蛋白,并能经过诱导分化为神经元和神经胶质细胞.结论 分离到的细胞具有自我复制能力和多向分化潜能,是中枢神经系统的干细胞,为应用于中枢神经系统损伤治疗提供了基础.     

神经干细胞移植治疗损伤脊髓的实验研究

目的 探讨异体胚胎神经干细胞(neural stem cell，NSC：)移植修复治疗损伤脊髓的疗效。方法 由胚胎SD鼠大脑海马区脑组织培养出NSC，经传代、5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后植入按Allen法制成的SD鼠的损伤脊髓内，术后观察鼠的行为改变、斜板试验及改良运动功能Tarlov评分评价功能恢复；体感诱发电位(SEP)和磁刺激运动诱发电位(MEP)监测脊髓感觉及运动电位传递；光镜及电镜观察植入区组织结构；以示踪剂麦胚凝集素。辣根过氧化物酶(WGA-HRP)显色观察轴突的生长及功能恢复；以免疫组化方法检测神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和饱和硫蛋白(S100)阳性细胞。结果 NSC在损伤脊髓中能成活并分化为神经元及神经胶质细胞，有轴突形成，分化倾向于神经元，能迁移1cm距离。WGA—HRF，能被运输到挫伤以外区域，运动电位能传递到损伤区远端，行为学观察受试组优于对照组。结果 异体胚胎NSC能在损伤区替代受损的神经元及神经胶质细胞，形成神经轴突联系，使损伤的脊髓功能得到一定程度的恢复。     

胎鼠脊髓神经干细胞的分离、培养和鉴定

目的:分离、培养和鉴定胎鼠脊髓神经干细胞,为建立稳定的脊髓神经干细胞系提供基础.方法:应用无血清培养技术从胎鼠脊髓分离、培养神经干细胞,并应用神经干细胞特异性抗体对其进行标记;应用BrdU掺入培养检测其分裂增殖能力;应用神经元和星形胶质细胞特异性抗体分析其多向分化潜能.结果:分离到的细胞具有不断分裂增殖的能力,可被神经干细胞特异性抗体所标记,并在血清条件下分裂为神经系统多种细胞.结论:分离到的细胞具有自我复制能力和多向分化潜能,是中枢神经系统的干细胞,为应用于中枢神经系统损伤治疗提供了基础.     

人脐血干细胞移植促进大鼠脊髓损伤神经恢复

目的观察移植人脐血CD34 干细胞是否可以存活、分化、促进脊髓损伤的行为和功能恢复.方法26只Wister大鼠随机分成移植组和对照组.移植组行脊髓半切术并移植5-溴脱氧尿核苷(Brdu)标记的脐血CD34 细胞,对照组行脊髓半切术后注射PBS液.采用改良Tarlov评分标准对移植组和对照组所有大鼠在术前和术后24 h、1、2、3、4周进行运动功能评价.组织学和免疫组化分析移植细胞的定位和分化情况.结果移植后在脊髓病理切片中出现Brdu标记人脐血细胞,激光扫描共聚焦显微镜通过免疫荧光双标检测到7%Brdu阳性细胞表达神经胶质元纤维酸性蛋白(GFAP),2%Brdu阳性细胞表达神经元核抗原(NeuN).神经功能检测发现1周后移植组功能恢复较对照组具有显著性差异(P＜0.05).结论移植人脐血干细胞可以促进脊髓损伤的行为和功能恢复,为神经损伤治疗提供了有用的细胞源.     

家兔正中神经干内躯体传入传出纤维来源的节段分布——HRP法

<正> 我们过去在用Marchi方法对家兔正中神经干内结构进行的实验形态学研究中,曾观察到脊神经C_7、C_8和T_1腹支参与正中神经的组成,该文结果与杨安峰等编著的《兔的解剖》一书的叙述一致,但H Arakawa等以同一方法对家兔正中神经的研究指出,除脊神经C_7、C_8和T_1腹支以外,尚有C_6腹支参加其组成。为进一步探查家兔正中神经干内躯体传入传出纤维来源的节段分布,本文应用HRP直接触涂于周围神经断端追踪神经纤维来源的方法,作了以下研究。     

神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的活体示踪研究

目的:探索利用MR技术活体追踪干细胞的可行性及神经干细胞(NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后功能恢复的影响。方法:66只SD大鼠随机分为假损伤组(A组)、SCI对照组(B组)和细胞移植治疗组(C组)3组,应用已包被多聚左旋赖氨酸(PLL)的SPIO标记NSCs,对标记细胞进行普鲁士蓝染色,分别在细胞移植后第1、2、3、4、5周对各组动物进行BBB评分,细胞移植后1、3、5周行MRI检查。结果:(1)普鲁士蓝染色证实该方法标记NSCs的有效率为100%。(2)细胞移植后1~5周,B、C组动物运动功能均有不同程度恢复,但B组恢复较慢,BBB评分差异有统计学意义(P<0.05)。(3)1.5 T MRI检查见移植处在T2WI序列呈低信号改变,第3周时低信号向损伤区扩大,第5周时可在损伤区见到低信号改变。结论:MR技术可以活体追踪干细胞,NSCs移植治疗SCI有利于大鼠后肢功能的恢复。     

臂丛神经节前损伤的脊髓造影多层螺旋CT诊断

目的探讨脊髓造影多层螺旋CT(CTM)诊断臂丛神经节前损伤的可行性。方法 8例臂丛神经损伤患者术前行多层螺旋CTM检查。应用曲面重组获得冠状位图像和轴位图像观察神经根损伤情况,并与手术探查结果相对照.结果多层螺旋CTM能清晰显示正常神经根的前后支。臂丛神经损伤的主要征象包括椎管内脊髓神经前后支充盈缺损的缺失、创伤性脊膜囊肿、脊髓移位。CTM表现与手术探查所见一致。结论多层螺旋CTM可清晰显示臂丛神经椎管内的前后支,对椎管内根丝的损伤能进行准确的术前诊断。     

Functional recovery following traumatic spinal cord injury mediated by a unique polymer scaffold seeded with neural stem cells and Schwann cells

Background The most important objective of transplant studies in the injured spinal cord has been to provide a favorable environment for axonal growth. Moreover, the continuing discovery of new grafts is providing new potentially interesting transplant candidates. Our purpose was to observe the morphological and functional repair effects of the co-transplantation of neural stem cell （NSC）, Schwann ceils （SCs） and poly lactide-co-glycolide acid （PLGA） on the spinal cord injury of rats.Methods A scaffold of PLGA was fabricated. NSCs and SCs were cultured, with the NSCs labeled with 5-bromodeoxyuridine, and the complex of NSC/PLGA or NSC＋SCs/PLGA were constructed. Thirty-six Wistar rats were randomly divided into three groups： group A （transplantation of PLGA）, group B （transplantation of NSC/PLGA） and group C （transplantation of NSC＋SCs/PLGA）. The 3 mm length of the right hemicord was removed under the microscope in all rats. The PLGA or the complex of PLGA-celIs were implanted into the injury site. Basso-Beattie-Bresnahan （BBB）locomotion scores, motor and somatosensory evoked potential of lower limbs were examined to learn the rehabilitation of sensory and motor function at 4 weeks, 8 weeks, 12 weeks and 24 weeks after injury. All the recovered spinal cord injury （SCI） tissues were observed with HE staining, immunohistochemistry, and transelectronmicroscopy to identify the survival, migration and differentiation of the transplanted cells and the regeneration of neural fibres at 4 weeks, 8 weeks,12 weeks and 24 weeks after injury.Results （1） From 4 weeks to 24 weeks after injury, the BBB locomotion scores of cell-transplanted groups were better than those of the non-cell-transplanted group, especially group C （P 〈0.05）. The amplitudes of the somatosensory evoked potential （SEP） and motor-evoked potential （MEP） were improved after injury in groups B and C, but the amplitude of SEP and MEP at 4 weeks was lower than that at 12 weeks and 24 weeks after injury. Compared with group B, the amplitude of SEP and MEP in group C was improved. The amplitude of SEP and MEP was not improved after injury in group A. （2） HE staining revealed the volume of the scaffold decreased and the number of cells in the scaffold increased. Newly-grown capillaries also could be seen. Immunohistochemistry staining showed the transplanted NSCs could survive and migrate until 24 weeks and they could differentiate into neurons and oligodendrocytes. The regenerated axons were observed in the scaffold-cell complex with transelectronmicroscopy. The above manifestations were more extensive in group C.Conclusions The transplanted NSC can survive and migrate in the spinal cord of rats up to 24 weeks after injury, and they can differentiate into various neural cells. Co-transplantation of cells/PLGA can promote the functional recovery of the injured spinal cord. The effect of co-transplanting NSC＋SCs/PLGA is better than transplanting NSC/PLGA alone.     

神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤

目的：探讨神经干细胞移植治疗脊髓损伤的新方法，为治疗脊髓功能障碍性疾病打下基础，方法：制作脊髓横断大鼠模型，造成大鼠下肢瘫痪，分别在损伤急性期和损伤3周后移植胎鼠组织神经干细胞，观察移植后的动物行为变化，脊髓神经电生理变化和脊髓组织形态学变化，结果：细胞移植后第8d即可见瘫痪大鼠的后肢肌力开始恢复，2－3周后可出现爬行，4周后后肢活动沃跃；对照组瘫痪的肢体无任何恢复。脊髓诱发电位部分出现，动作电位波幅较高，对照组未出现诱发电位，且动作电位波幅明显减低，脊髓移植肉眼可见有增生的组织充填，镜下有大量新生的细胞，表现为神经元和神经胶质细胞阳性染色，结论：神经干细胞移植可使脊髓横断大鼠运动功能恢复，有望成为治疗脊髓损的有效手段。