川芎嗪对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的 观察川芎嗪对缺血再灌注损伤时心肌细胞凋亡的保护及初步机制.方法 采用在体结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血再灌注模型.以TUNEL法检测心肌凋亡细胞,免疫组化法分析心肌细胞Fas/FasL、Caspase-8及Caspase-3蛋白表达变化.荧光分析法测定Caspase-3活性.结果 凋亡组(心肌缺血1h,再灌注24 h)心肌细胞凋亡指数为16.3±4.52,较对照组(0.43±0.04)有显著性升高,Fas/ FasL及Caspase-3蛋白水平也均显著高于正常对照组(P＜0.05).川芎嗪保护组的心肌细胞凋亡指数、Fas/ FasL、Caspase-3蛋白水平及Caspase-3活性均显著性低于凋亡组.结论 川芎嗪对缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡有较好的保护作用, 其机制可能与降低Fas死亡受体通路中相关蛋白酶水平及其活性有关.     

川芎嗪对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的观测川芎嗪对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响及可能机制。方法结扎冠状动脉左前降支45min,再灌注180min复制大鼠心肌缺血再灌注(IR)模型,川芎嗪保护组(IR TMP)在结扎冠状动脉前30min腹腔注射川芎嗪(20mg/kg)。以TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫组化法分析Fas/FasL、Caspase-8及Caspase-3蛋白表达,荧光分析法测定Caspase-3活性。结果缺血再灌注(IR)组心肌细胞凋亡指数(23.47±3.88)较对照组(0.41±0.03)有显著性升高(P<0.01),Fas/Fasl,Caspase-8和Caspase-3蛋白表达及Caspase-3活性也显著高于对照组。川芎嗪保护组(IR TMP)心肌细胞凋亡指数(1.8±0.25)较IR组有显著性降低(P<0.05),Fas/FasL、Caspase-8、Caspase-3蛋白及Caspase-3活性也均显著性低于IR组。结论川芎嗪对缺血再灌注心肌细胞凋亡有较好的拮抗作用,其机制可能与降低Fas死亡受体通路的信号转导有关。     

川芎嗪对缺血再灌注后心肌细胞凋亡的影响

目的观察缺血再灌注后大鼠心肌细胞凋亡的特点及川芎嗪对其的影响。方法结扎冠状动脉左前降支45 min,再灌注180 min复制大鼠心肌缺血再灌注(IR)模型,川芎嗪保护组(IR+TMP)在结扎冠脉前30 min腹腔注射川芎嗪(20 mg/kg)。以TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫组化法分析Fas、FasL、Capase-8及Capase-3蛋白表达,荧光分析法测定Capase-3活性。结果缺血再灌注组(IR)心肌细胞凋亡指数23.47±3.88较对照组0.41±0.03有显著性升高(P<0.01),Fas、FasL、Capase-8、Capase-3蛋白及Capase-3活性均显著高于对照组(P均<0.05)。川芎嗪保护组(IR+TMP)心肌细胞凋亡指数1.81±0.25较IR组23.47±3.882有显著性降低(P<0.05),Fas、FasL、Capase-8、Capase-3蛋白及Capase-3活性均显著性低于IR组(P均<0.01)。结论缺血再灌注后心肌细胞凋亡数有明显的增多;川芎嗪对缺血再灌注后心肌细胞凋亡有较好的拮抗作用,其机制可能与降低Fas死亡受体通路的信号转导有关。     

丹参对大鼠急性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的　探讨丹参对大鼠急性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法　采用结扎大鼠左冠状动脉法制备心肌缺血 +再灌注模型 ,2 4只大鼠随机均分为 :①缺血再灌注 (IR)组 :缺血45min ,再灌注 1h ,滴注生理盐水 ;②丹参治疗 (DS)组 :缺血 45min ,再灌注 1h ,滴注丹参注射液 (5mg/kg ,制药厂生产 ) ;③假手术 (Sham)组 :行假手术 ,滴注生理盐水 ,分别采用地高辛随机引物法及免疫组织化学法检测心肌凋亡细胞、心肌细胞bax和bcl 2基因的蛋白表达情况。结果　缺血再灌注心肌细胞凋亡数量显著高于Sham组 (P <0 .0 1) ,DS组心肌细胞凋亡明显受到抑制 (P <0 .0 5 )。IR组和DS组bax、bcl 2基因蛋白表达均明显增加(P值均 <0 .0 1) ;丹参明显抑制bax基因表达 (P <0 .0 5 ) ,但对bcl 2基因表达无明显影响。结论　急性心肌缺血再灌注时心肌细胞调亡加剧 ,bax和bcl 2参与调控缺血再灌注时心肌细胞调亡 ,丹参可抑制调亡加速基因bax的表达 ,因而在缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的保护方面有一定价值。     

川芎嗪对严重烧伤大鼠早期血浆CGRP/ET比值和cTnI含量变化的影响

目的研究严重烫伤大鼠早期心肌细胞损伤特异性指标cTnI与血浆CGRP/ET的比值变化之间的关系及川芎嗪对它们的调节作用。方法清洁级成年雄性Wistar大鼠104只,随机分为假烫组(A组),烫伤组(B组)和烫伤+川芎嗪治疗组(C组),A组8只;B、C两组各48只,B、C组又分为伤后1、3、6、12、24、48 h六个时相点,观察和检测血中CGRP、ET含量并计算CGRP/ET比值变化以及血浆cTnI含量变化。结果血液中CGRP/ET比值与A组比较B组伤后1 h即有下降,C组伤后3 h开始下降,两组比值在12 h达最低,以后逐渐有所回升,到48小时仍然明显低于正常(P< 0.05),但C组比值下降幅度低于B组(P<0.05)。与A组比较cTnI在B、C两组伤后1 h即有异常升高,到伤后6 h升高幅度明显加大,12 h达峰值分别为伤前的63和81倍,以后逐渐下降,到48 h两组尚未恢复到正常值(P<0.05),但C 组cTnI升高幅度低于B组(P<0.05)。结论烧伤早期血中CGRP/ET比值的降低与反映心肌细胞损伤指标cTnI的异常升高呈现明显的时间一致性,CGRP/ET引起的血管舒缩功能异常可能是导致心肌细胞损伤原因之一。川芎嗪可以通过改变CGRP/ET比值调节血管舒缩功能从而改善心肌供血起到保护严重烧伤早期心肌细胞功能的作用。     

Exendin-4对严重烫伤大鼠早期心肌细胞凋亡的影响

目的了解exendin-4对烫伤大鼠早期心肌细胞凋亡的作用和机制。方法 54只健康成年SD大鼠,随机分为正常对照组(N组,n=6)、单纯烫伤组(S组,n=24)和烫伤加exendin-4组(E组,n=24)。S组和N组大鼠采用30%TBSAⅢ°烫伤模型,伤后按Parkland公式补液抗休克。E组伤后给予exendin-4。采用DNA切口末端标记法(TUNEL)检测左室心肌细胞凋亡;免疫荧光法检测心肌组织caspase-3活性。结果 S组大鼠于伤后6h,心肌细胞凋亡指数即升高,12h达高峰,48h仍显著高于正常对照组;心肌组织caspase-3活性于伤后6h开始增强,12h达高峰,伤后24h仍显著高于N组。E组较S组,在伤后6、12、24、48h大鼠心肌细胞凋亡指数显著降低(P<0.05),心肌组织caspase-3活性在伤后6、12、24h也显著降低(P<0.05)。统计学分析表明心肌细胞凋亡指数与心肌组织caspase-3活性呈显著正相关(P<0.05)。结论 Exdendin-4可抑制烫伤大鼠早期心肌细胞凋亡,其机制可能是通过抑制心肌组织caspase-3活性,从而抑制心肌细胞凋亡。     

生脉注射液对大鼠烧伤后心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨生脉注射液对大鼠烧伤后心肌细胞凋亡的影响.方法 SD(Sprague-Dawley)大鼠72只,随机分成单纯烫伤组(B组,n=36)和烫伤并应用生脉注射液治疗组(S组,n=36),制成30%TBSA Ⅲ度烫伤模型,伤后B组按Parkland公式补液,S组在B组的基础上伤后即刻按4 ml/kg给予生脉注射液,并相应减少补液量,两组均于不同时相点,取左室心肌组织切片,做病理形态学观察,并采用DNA切口末端标记法(TUNEL)和心肌组织caspase-3活性双指标联合检测细胞凋亡.结果 病理切片显示S组较B组心肌组织损伤有所减轻;两组心肌细胞TUNEL显示烫伤后6 h呈阳性,伤后12 h达高峰;caspase-3活性变化早于凋亡形态学变化,于伤后3、6 h达峰值;S组较B组在伤后6、12、24 h心肌细胞凋亡指数显著降低(P＜0.01),左心室心肌组织caspase-3活性在伤后3、6、12 h也显著降低(P＜0.05).结论 烧伤后早期心肌细胞凋亡参与了烧伤病理损伤过程.早期应用生脉注射液治疗可以有效地减少心肌细胞的凋亡,进而减轻心肌的损伤,起到保护心肌的作用.     

牛磺酸对烧伤后早期心肌细胞Fas信号通路的影响

目的 观察牛磺酸对大鼠严重烧伤后早期心肌细胞Fas系统活性的影响。方法 用健康Wistar大鼠，随机分为对照组、烧伤组（造成30％TBSAⅢ度烫伤）、牛磺酸治疗组（烧伤后腹腔注射牛磺酸，剂量300mg／kg）和牛磺酸加SB202190治疗组。于伤后1、3、6、12和24h检测血浆cTnT含量和免疫组化法分析心肌细胞Fas、Caspase-8及Caspase-3蛋白表达变化，荧光分析法测定Caspase-3活性。结果 大鼠烧伤后3h心肌中Fas、Caspase-8及Caspase-3蛋白及其活性即呈显著性升高，伤后24h仍高于对照组（P〈0．05）；牛磺酸治疗组大鼠心肌中各时相点的Fas、Caspasc-8、Caspase-3蛋白水平及Caspase-3活性较烧伤组均有显著性降低（P〈0．05）。结论 牛磺酸对严重烧伤大鼠心肌中Fas、Caspase-8、Caspase-3蛋白的表达及Caspase-3活性升高均有较好的拮抗作用。     

大鼠严重烧伤后心肌细胞GRP94表达变化及其意义

目的观察严重烧伤大鼠心肌细胞内质网应激蛋白表达的改变及其意义，以探讨严重烧伤后心肌损伤与内质网应激的关系。方法建立大鼠30％Ⅲ度烫伤模型，酶联免疫法检测血浆中心肌肌钙蛋白T（cTnT）含量，放射免疫法检测血浆中TNFα的含量，RT-PCR和免疫组化分析GRP94的表达。结果烧伤组大鼠伤后3h血浆中cTnT含量即呈显著升高（P〈0．01），心肌中GRP94 mRNA和蛋白表达于烧伤后3h显著性升高，12h达峰值，24h还呈显著升高；大鼠烧伤后3h心肌中Caspase-3活性开始升高，12h达高峰，48h后仍显著高于对照组。牛磺酸治疗组GRP94的表达和Caspase-3活性较烧伤组均有显著性降低（P〈0．05）。结论严重烧伤可引起心肌细胞内质网应激，牛磺酸对烧伤后早期心肌损害有保护作用。     

甘氨酸对烧伤大鼠心肌细胞能量代谢的影响

目的探讨甘氨酸对烧伤后大鼠心肌细胞能量代谢的影响。方法将72只Wistar大鼠随机分成正常对照组(C组)、烧伤对照组(B组)、甘氨酸组(Gly组)。B、Gly组建立30%体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型,观察伤前及烧伤后12、24、48、72h大鼠心肌细胞能量代谢的变化,同时检测伤后高能磷酸化合物(AMP、ADP和ATP)、血浆乳酸和谷胱甘肽(GSH)的水平。结果烧伤大鼠心肌能量代谢发生障碍,与C组相比,B组和Gly组大鼠心肌ATP及GSH水平大幅下降(P<0.01),而AMP、ADP、血乳酸水平则大幅上升(P<0.01);Gly组大鼠心肌ATP、GSH下降以及AMP、ADP、血乳酸上升幅度均明显低于B组(P<0.01)。结论甘氨酸能改善烧伤后心肌有氧代谢,减少乳酸生成,有效降低烧伤后心肌受损程度,具有很好的心肌保护作用。     

葛根素对重度烧伤大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 观察葛根素（Puerarin）对重度烧伤大鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 取实验用大鼠120只随机分为正常对照组、模型组、葛根素（50、100、200mg/kg）组和地塞米松（5mg/kg）组;除正常对照组外,其余各组大鼠均采用脱毛后于92℃水浴18s的方法制备30% TBSA Ⅲ度烧伤模型大鼠;造模完成后,各组大鼠均立即腹腔注射乳酸林格液（40mg/kg）进行复苏;各治疗组在复苏同时腹腔注射给药进行治疗,正常对照组和模型组分别给予等体积生理盐水。24h后,通过末端标记法（Tunel）检测心肌细胞凋亡状况并计算凋亡指数（AI）,通过免疫组织化学法（IHC）检测心肌组织中bcl-2和Bax蛋白表达并进行半定量分析、计算bcl-2/Bax表达比值,通过Western blot法检测心肌组织中caspase-3、NF-κB蛋白表达并进行半定量分析;测定心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、髓过氧化物酶（MPO）活性和丙二醛（MDA）含量。结果 与模型组比较,葛根素各组心肌细胞凋亡数量呈不同程度减少,葛根素（100、200mg/kg）组AI显著降低（P<0.05,P<0.01）,心肌组织中bcl-2表达显著上调、Bax表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高（P<0.01）,caspase-3蛋白和NF-κB蛋白表达量显著下调（P<0.05,P<0.01）,心肌组织中SOD、GSH-Px活性显著升高且MDA含量显著降低（P<0.05,P<0.01）,其中葛根素200mg/kg组MPO活性显著升高（P<0.01）。结论 葛根素具有抑制重度烧伤大鼠心肌细胞凋亡的作用,表现出对烧伤大鼠心肌组织较好的保护作用,作用机制可能与葛根素能够调节凋亡相关基因和蛋白表达以及降低氧化应激损伤有关。     

牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响

目的　探讨牛磺酸对缺血再灌注损伤时心肌细胞凋亡的保护及初步机制。方法　采用在体结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血再灌注模型。以TUNEL法检测心肌凋亡细胞 ,免疫组化法分析心肌细胞Fas/FasL、Caspase 8及Caspase 3蛋白表达变化。荧光分析法测定Caspase 3活性。结果　凋亡组 (心肌缺血 1h ,再灌注 2 4h)心肌细胞凋亡指数为 (16 .3± 4 .5 2 ) ,较对照组 (0 .4 3± 0 .0 4 )有显著性升高 ,Fas/FasL及Caspase 3蛋白水平也均显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。牛磺酸保护组的心肌细胞凋亡指数、Fas/FasL、Caspase 3蛋白水平及Caspase 3活性均显著性低于凋亡组。结论　牛磺酸对缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡有较好的拮抗作用 ,其机制可能与降低Fas死亡受体通路中相关蛋白酶水平及其活性有关。     

心肌细胞凋亡与Fas/FasL基因表达变化及牛磺酸的影响

目的 观察大鼠缺血心肌细胞凋亡与Fas／FasL基因表达变化及牛磺酸对其的影响。方法 结扎冠状动脉制备心肌缺血模型，缺口末端标记法检测心肌凋亡细胞，免疫组织化学法检测Fas／FasL蛋白水平．RT—PCR法分析Fas基因mRNA表达变化。结果 缺血后心肌细胞凋亡指数、Fas／FasL蛋白阳性染色细胞指数及Fas基因的mRNA表达水平均明显增加．心肌组织SOD活性和MDA含量升高．Ca^ -ATP酶活性降低。牛磺酸能明显降低心肌细胞凋亡指数，Fas基因mRNA表达及Fas／FasL蛋白阳性染色细胞指数．抑制心肌组织MDA的生成．提高Ca^2 -ATP酶活性。结论 牛磺酸对缺血心肌细胞凋亡与Fas／FasL基因表达水平增高均有较好的拮抗作用。     

参附注射液对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨参附注射液对大鼠缺血再灌注心肌细胞Bax、Bcl2及Fas蛋白表达的影响及它们与心肌细胞凋亡的内在联系。方法:健康SD大鼠36只随机分为3组,空白对照组(S组)、缺血再灌注+生理盐水组(I/R组)、缺血再灌注+参附注射液组(SF组),每组12只。采用钳闭左冠状动脉前降支制备心肌缺血再灌注模型。免疫组化检测Bax、Bcl2及Fas蛋白的表达,每组选24个视野分别测量光密度值(OD值)。TUNEL法检测凋亡心肌细胞并计算凋亡指数。结果:I/R组BaxOD值明显高于S组(P<0.01),SF组BaxOD值明显低于I/R组(P<0.01),且低于S组(P<0.05)。I/R组Bcl2OD值高于S组(P<0.05),且SF组Bcl2OD值高于S组(P<0.01),但I/R组与SF组比较差异无显著性。I/R组FasOD值明显高于S组(P<0.01),且明显高于SF组(P<0.01)。I/R组细胞凋亡指数明显高于S组和SF组(P<0.01),而SF组高于S组(P<0.05)。结论:参附注射液增加心肌Bcl2蛋白的表达,降低Bax及Fas蛋白的表达,抑制心肌细胞凋亡,保护缺血再灌注心肌。     

葛根素对重度烧伤后心肌组织损伤和炎性反应影响的研究

目的 研究葛根素（Puerarin）对大鼠重度烧伤后心肌组织损伤和炎性反应的抑制作用及机制。方法通过92℃水浴18s复制30% TBSA Ⅲ度烧伤模型大鼠;设假烧伤组、模型对照组和葛根素（50、100、200、400mg/kg）组;观察心肌组织形态结构变化,测定血清中心肌酶和肌钙蛋白T （cTnT）含量、心肌组织中抗氧化酶活性和丙二醛（MDA）含量;检测心肌细胞凋亡状况及凋亡相关蛋白表达;检测血清中炎性细胞因子含量水平。结果 与模型对照组比较,葛根素组大鼠心肌组织形态结构病理性改变明显改善,以200mg/kg组效果最为显著;葛根素（100、200、400mg/kg）组心肌酶AST、CPK、LDH含量和cTnT含量均显著降低,SOD、CAT、MPO活性显著升高且MDA含量显著降低,心肌细胞凋亡状况明显改善,凋亡指数（AI）显著降低,cleaved caspase-3、Bax蛋白表达显著下调、Bcl-2显著上调,Bcl-2/Bax显著升高,炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8含量显著降低,200mg/kg组IL-1含量显著降低、IL-10含量显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 葛根素对重度烧伤后心肌组织损伤和炎性反应均具有一定的抑制作用,其机制可能与葛根素能够改善抗氧化酶活性、调节凋亡相关蛋白表达以及影响炎性细胞因子含量有关。     

卡维地洛对心衰大鼠心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨卡维地洛(CAR)对心肌梗塞(MI)后充血性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：将雄性Waistar大鼠前降支结扎，于术后1周开始予CAR和美托洛尔(MET)干预7周，观察CAR和，MET对大鼠心肌细胞凋亡、Fas、FasL和Bdl-2的mRNA和蛋白表达的影响。结果：CAR和MET都可不同程度地降低心肌细胞凋亡指数，但CAR降低心肌细胞凋亡指数、Fas及FasL的mRNA水平、上调Bcl-2表达效果优于MET。结论：CAR可有效地减少MI后心肌细胞凋亡、防治CHF，这与其抑制Fas和FasL表达、促进Bcl-2表达有关。     

Effects of Carvedilol on Cardiomyocyte Apoptosis and Gene Expression In Vivo after Ischemia-Reperfusion in Rats

The effects of carvedilol on cardiomyocyte apoptosis and expression of bcl-2, bax genesfollowing ischemia (0.5 h) and reperfusion (48 h) in vivo and the possible biological mechanism ofcarvedilol inhibiting cardiomyocyte apoptosis were studied. The left anterior descending artery inWistar rats were ligated to establish ischemia-reperfusion (I/R) models. The model animals were di-vided into two groups: I/R group, the model rats not subject to other treatments except ischemia-reperfusion (n=8); carvedilol-treated group (n=8), I/R model rats treated with carvedilol. Eightrats in the sham-operated group were subjected to only experimental open operation. The number ofapoptotic cardiomyocyte was determined by TUNEL staining. Immunohistochemistry and in situ hy-bridization histochemistry (ISHH) were used to detect the expression of bcl-2 and bax genes. Imageprocessing system was used to quantitatively dispose the positive metric substances of both immuno-histochemistry and ISHH through the average optical den