超高效液相色谱-串联质谱法同时测定人乳中的 胆碱、L-肉碱、乙酰基-L-肉碱和牛磺酸

目的 建立一种新颖、简单、快速、灵敏的同时测定母乳中胆碱、L-肉碱、乙酰基-L-肉碱和牛磺酸的超高效液相色谱-串联质谱法。方法 样品经甲醇沉淀蛋白、乙醚去除非极性杂质,UPLC BEH Amide色谱柱分离后采用保留时间和多反应离子检测（MRM）定性、定量,同位素内标校正。结果 牛磺酸的定量下限（LOQ）为0.02 mg/100g,胆碱、L-肉碱和乙酰基-L-肉碱的LOQ均为0.003 mg/100g。标准加入法测定所有被测物的高、中、低三个浓度加标水平的回收率在84.8 %-90.3 %之间,相对标准偏差（RSD）在1.7 %-5.3 %之间。4种被测物在各自浓度范围内线性良好,r2均大于0.999。结论 本文建立了同时测定母乳中胆碱、L-肉碱、乙酰基-L-肉碱和牛磺酸的超高效液相色谱-串联质谱法。方法前处理简单、快速,样品需要量少;采用质谱检测器同位素内标一对一校正定量,检测结果准确、灵敏。方法可以为母乳中相关营养素含量的调查、研究和为配方奶粉母乳化提供技术支持。     

超高压液相色谱-串联质谱法同时测定人乳中的硫胺素、核黄素、烟酰胺、泛酸和吡哆醛

目的建立一种快速、灵敏的同时测定人乳中多种B族维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法样品经甲醇沉淀蛋白、乙醚去除非极性杂质,UPLC HSS T3色谱柱分离后采用保留时间和多反应离子检测(MRM)定性、定量,同位素内标校正。结果维生素B1(硫胺素)、维生素B2(核黄素)和维生素B6(吡哆醛)的定量下限(LOQ)均为0.2μg/100 g,维生素B3(烟酰胺)和维生素B5(泛酸)的LOQ均为0.3μg/100 g。标准加入法测定所有被测物的高、中、低三个浓度加标水平的回收率在93.1%~101.1%之间,相对标准偏差(RSD)在2.8%~6.2%之间。5种水溶性维生素在各自浓度范围内线性良好,R2均大于0.998。结论本文建立了同时测定人乳中5种B族水溶性维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法前处理简单、快速,样品需要量少;采用质谱检测器同位素内标一对一校正定量,检测结果准确、灵敏。方法可以为人乳中维生素含量的检测、调查、研究提供技术支持。     

比色法测定L-肉碱酯化体系中的酰基肉碱

以乙酰-L-肉碱为例阐明了L-肉碱酯化体系中酰基-L-肉碱比色测定的方法。显色反应在有机溶液-盐溶液两相体系中进行,有机溶液为每100 mL 1,2-二氯乙烷-异戊醇混合溶液(体积比96:4)加入0.05 g溴酚蓝,12～25℃显色反应条件下,盐溶液为每100 mL 55%K_2HPO_4水溶液加入14 g Na_2CO_3。两相显色体系的乙酰-L-肉碱含量在0.004 5～0.025 4 g范围内同显色反应吸光度成线性关系(R~2>0.99)。L-肉碱酯化体系加标回收率为99.53%～103.33%,相对偏差低于4.30%,检测限为0.441mg,准确度、精密度和灵敏性均较好。该方法不受L-肉碱的干扰,为酰基-L-肉碱的制备研究提供了有效、经济、快速的检测方法。     

手性镧系位移试剂识别-核磁共振氢谱法测定保健食品中肉碱对映体含量

目的 采用手性镧系位移试剂识别-核磁共振氢谱法（CLSR-1H qNMR）对保健食品中的肉碱对映体进行快速定性、定量分析研究。方法 样品经氘代甲醇溶解,以吡嗪为内标,经过涡旋、超声辅助萃取、离心后,取适量上层清液,加入手性镧系位移试剂Eu(thfc)3,直接对待测物进行检测。结果 左旋肉碱的质量浓度线性范围在16.3～4 800μg/mL,相关系数（r）>0.99,检出限（LOD）为24.5 mg/kg,定量限（LOQ）为73.5 mg/kg;右旋肉碱的质量浓度线性范围在10.6～530μg/mL,r>0.99,LOD为27.5 mg/kg,LOQ为82.5 mg/kg。方法的加标回收率为95.9%～114.6%,RSD(n=6)为3.31%～6.12%。对网购宣称具有减肥功效的胶囊、奶茶、咖啡粉、片剂进行检测,均未检测出右旋肉碱。结论 本方法简便、快速、灵敏,25 min内即可完成检测,能够为肉碱对映体各自含量的快速检测提供理论基础。     

高效液相色谱法检测运动饮料中的L-肉碱

建立一种快速、有效的高效液相色谱法测定运动饮料中L-肉碱的方法。样品经1.0 mmol/L盐酸提取后,采用MCX固相萃取小柱进行净化和富集。采用RP C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以乙腈∶辛烷磺酸钠(50 mmol/L)=25∶75(体积比)作为流动相,用PDA检测器检测,外标法峰面积定量。结果表明,L-肉碱标液在1.0μg/m L~20.0μg/m L浓度范围内线性良好,相关系数r~2为0.999,检出限为0.1 mg/kg,定量限为0.3 mg/kg,加标回收率达到82.3%~84.1%。     

肉中L-肉碱的提取及含量比较研究

L-肉碱在生物体内的长链脂肪酸运送到线粒体过程中起重要的作用.各种肉中都有不同含量的L-肉碱,本文采取三种不同溶剂提取,并用酶法和高效液相色谱法进行检测,而对于L-肉碱的定量,高效液相色谱法是较为实用和精确的方法.比较各种肉中肉碱的含量及所在肉的品种羊肉、牛肉、猪肉和鸡肉.结果显示,羊肉含有最高含量的L-肉碱,鸡肉最少,几乎不能被检测出.L-肉碱的最佳提取率可通过高氯酸达到,但考虑到实用性问题,用盐酸作为提取溶剂,也能得到较好的提取效果.     

液相色谱同位素稀释串联质谱法测定牛奶和奶粉中3种硝基咪唑类禁用兽药及其代谢物的残留量

目的 建立了液相色谱同位素稀释串联质谱法同时测定牛奶和奶粉中3种硝基咪唑类禁用兽药(甲硝哒唑、二甲硝咪唑和罗硝哒唑)及其代谢物(羟基甲硝唑和1-甲基-2-羟甲基-5-硝基咪唑)残留量的方法.方法 采用乙腈沉淀样品蛋白,乙酸乙酯提取目标物,强阳离子交换固相萃取柱净化提取液,液相色谱-串联质谱测定,同位素内标法定量.结果 牛奶样品中5种分析物的检测限( LOQ)为0.5～1 μg/kg,奶粉样品中5种分析物的LOQ为2.5 ～5μg/kg.5种分析物在0～50 μg/L的浓度范围内呈良好线性,线性相关系数＞0.995.方法在3个水平的添加回收率在88.3％ ～ 104.4％之间,相对标准偏差在3.67％～8.52％之间.结论 方法采用同位素稀释法定量,回收率高、重现性好,适用于牛奶、奶粉等样品中硝基咪唑类药物残留的定量及确证检测.     

高效液相色谱法测定鸡血浆中L-肉碱含量

试验旨在建立高效液相色谱（high-performance liquid chromatography,HPLC）法检测鸡血浆中L-肉碱含量的方法。样品采用乙腈甲醇混合液（9∶1,体积比）提取,涡旋振荡,离心,定容后,经0.22 μm 滤膜过滤,使用ACE Excel 5 Super C18 色谱柱进行分离。流动相为乙腈-5 mmol/L 庚烷磺酸钠（加入0.1%磷酸）水溶液（15∶85,体积比）,流速0.6 mL/min,柱温30 ℃,检测波长210 nm,进样量20 μL。结果显示,该条件下,L-肉碱质量浓度与其峰面积在0.01～0.60 mg/mL 内,具有良好的线性关系,相关系数为0.999 8,检测限为0.005 mg/mL,定量限为0.017 mg/mL,平均回收率为97.393%～98.703%,相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为0.8%（n=6）。使用该方法测得鸡血浆中L-肉碱峰型良好,无杂峰干扰。研究表明该方法成本低,操作简单,有较高的回收率,适用于鸡血浆中L-肉碱的含量测定。     

羊肉中L-肉碱抗疲劳作用的研究

研究羊肉中L-肉碱抗疲劳作用.将昆明种小鼠分组,分别用平行实验和交叉实验测定抗疲劳功能,观察L-肉碱对实验小鼠游泳时间、身体指数、血清生理生化指标和腿部肌肉L-肉碱含量的影响.L-肉碱可以有效延长实验小鼠平均游泳时间,减轻体重及腹部脂肪量,显著降低血清中甘油三酯及总胆固醇的水平、乳酸及尿素氮含量;液相色谱显示小鼠体内L-肉碱含量与游泳时间有显著的相关性.L-肉碱有显著的抗疲劳作用.     

同位素内标-超高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中氯霉素及甲硝唑

目的采用同位素内标-超高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中氯霉素及甲硝唑的残留量。方法样品经乙酸乙酯提取,MCS复合型固相萃取柱(500 mg/6 ml)净化,采用ZORBAXSB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,以甲醇和5 mmol/L乙酸铵溶液(含0.05%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾正/负离子多反应监测模式检测,同位素内标法定量。结果氯霉素、甲硝唑的浓度为0.05~5.00 ng/ml时,线性关系良好,相关系数r0.999。添加0.5、2.0、5.0μg/kg三个不同水平时,氯霉素、甲硝唑的回收率为79.3%~96.7%,相对标准偏差(RSD)为5.5%~14.8%,定量限均为0.15μg/kg,检出限均为0.05μg/kg。结论该方法灵敏度及准确度良好,可应用于日常大批量样品的高灵敏分析。     

液相色谱-串联质谱法测定葡萄酒中赭曲霉毒素A

以赭曲霉毒素B为内标物,建立了应用固相萃取-液相色谱-串联质谱法(SPE-LC-MS/MS)对葡萄酒中赭曲霉毒素A残留量测定的方法。葡萄酒样品经过调节pH值至7.0和C18固相萃取净化的前处理过程后,采用液相色谱-串联质谱法进行测定(正离子方式,多反应监测模式)。方法定量限(LOQ)为2.0g/L。内标法定量计算,在0~10g/L质量浓度范围内线性相关系数0.998。在葡萄酒中分别进行2.0g/L、4.0g/L和8.0g/L三个添加水平的测试,该检测方法回收率范围97.6%~109.7%,相对标准偏差(RSD)3.0%~4.6%。方法简便、快速、准确,可用于葡萄酒中赭曲霉毒素A的定量测定。     

羊肉中L-肉碱抗疲劳作用机理研究

研究羊肉中L-肉碱抗疲劳作用机理.将昆明种小鼠分组,分别进行平行实验和交叉实验测定抗疲劳功能,观察L-肉碱对实验小鼠游泳时间、身体指数、血清生理生化指标、腿部肌肉L-肉碱含量和脂肪酸片断的影响.结果表明:L-肉碱可以有效延长实验小鼠平均游泳时间,减轻体重及腹部脂肪量,显著降低血清中甘油三酯及总胆固醇的水平、乳酸及尿素氮含量;液相色谱显示小鼠体内L-肉碱含量与游泳时间有显著的相关性.L-肉碱有显著的抗疲劳作用,通过脂肪代谢参与供能.     

超高液相色谱串联质谱法检测土豆及土豆制品中α-茄碱

目的建立超高效液相色谱串联质谱法检测土豆及其制品中α-茄碱的分析方法。方法通过优化提取液,土豆样品经1%甲酸-甲醇(1:1,V:V)超声提取,采用BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,梯度洗脱,采用超高效液相色谱串联质谱法,在多反应监测模式进行定性和定量分析,而土豆淀粉用MCX固相萃取柱进行净化,液相色谱串联质谱法测定。结果土豆样品中回收率为75%~115%,相对标准偏差为5.0%~8.6%,土豆淀粉的回收率范围为67%~100%,相对标准偏差为3.4%~11.3%,方法的检出限和定量限分别为0.5 mg/kg和1.0 mg/kg。结论该方法适合于土豆及其制品中α-茄碱的分析。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定茶叶中高氯酸盐

目的建立一种使用同位素内标法定量测定茶叶中高氯酸盐的超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)。方法茶叶样品经0.2%乙酸提取,高速离心,上清液用石墨炭黑柱净化,再经Thermo Acclaim TRINITY P1色谱柱分离,串联质谱法检测,内标法定量。结果高氯酸盐在0.25~50.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r)为0.9991。加标浓度为0.05~0.80 mg/kg时,方法的平均回收率分别为在94.6%~110.2%,相对标准偏差为1.8%~9.6%。结论本方法前处理简单、灵敏度高、准确、可靠,适用于茶叶中高氯酸盐的测定。     

异戊酰-L-肉碱在[Bmim]PF6离子液体中的酶催化合成

异戊酰-L- 肉碱的酶催化合成需要选择疏水、极性的溶剂作为反应介质。本实验以满足上述条件的离子液体[Bmim]PF6 作为反应介质,研究异戊酰-L- 肉碱的酶催化合成。其最佳反应条件为：Novozyme 435 作为催化剂,初始水分活度0.22,反应温度60℃,异戊酸和L- 肉碱摩尔比4:1,反应体系含0.4mmol L- 肉碱和1.6mmol 异戌酸时,脂肪酶用量50mg,200mg 分子筛(反应开始时添加),摇床转速200r/min,反应时间40h。在此条件下产品得率达到59.61%。以[Bmim]PF6 为介质的异戊酰-L- 肉碱的酶催化合成,其产品得率高于在乙腈中的合成。     

凝胶渗透色谱法净化-同位素稀释-超高效液相色谱-串联质谱法测定奶粉中4-壬基酚

建立了凝胶渗透色谱法(Gel Permeation Chromatography, GPC)净化技术结合同位素稀释的超高效液相色谱-串联质谱法对奶粉中的4-壬基酚进行测定。样品以乙酸乙酯和环己烷超声提取后,上清液用GPC进行净化,然后进行旋转蒸发浓缩。在优化的仪器条件下,采用ESI负离子模式采集离子对,多反应监测(Multi-selected reaction monitoring,MRM)模式扫描测定,同时结果使用d4同位素内标校正。4-壬基酚在1.0~100 μg/L范围内呈较好线性,相关系数R²为0.9998,方法定量限附近的三个浓度添加水平的平均回收率为87.3%~96.6%,相对标准偏差为1.58%~3.35%。方法检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.6 μg/kg和2.0 μg/kg。该方法操作简单高效,有效校正结果偏差,方法学结果表明方法回收率高、灵敏度高、重复性好,可有效测定奶粉中4-壬基酚。     

分散微固相萃取-同位素内标法-超高效液相色谱-串联质谱法测定水果中的吗啉

目的建立分散微固相萃取-同位素内标法-超高效液相色谱-串联质谱测定水果中吗啉残留量的检测方法。方法样品经含1%甲酸的乙腈提取,经分散微固相萃取净化、超高效液相色谱BEH HILIC色谱柱分离后,经串联质谱检测,同位素内标法定量。结果吗啉在0~200μg/L浓度范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9998。相对标准偏差(relative standard derivation,RSD)为1.2%~2.9%,加标回收率为93.0%~101.6%。结论本方法采用同位素内标法,具有灵敏度高、精密度和准确度好等优点,简便快捷,适合水果中吗啉的日常检测工作。     

非衍生化液相色谱-串联质谱法测定茶叶中草铵膦残留量

目的 建立非衍生化液相色谱-串联质谱法直接测定茶叶中草铵膦残留的分析方法。方法 茶叶样品经水均质提取,HR-X固相萃取小柱净化,采用非衍生化液相色谱-串联质谱直接测定,电喷雾离子源负离子模式(ESI^-)下采用多反应监测模式(MRM)检测,同位素内标法定量。结果 在优化的条件下,草铵膦在5~200 μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9998,方法定量限(LOQ)为0.1 mg/kg。方法平均回收率为84.2%~104.9%,相对标准偏差(RSDs)低于7.6%。结论 本方法前处理简单、准确性好、灵敏度高,可用于绿茶、红茶、乌龙茶、普洱茶等茶叶中草铵膦残留量的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肝中14种喹诺酮类药物残留

目的建立猪肝中14种喹诺酮类抗生素残留的提取、净化和超高效液相色谱串联质谱测定的方法。方法样品采用EDTA缓冲溶液提取、经正己烷除脂、固相萃取柱净化后,利用超高效液相色谱串联质谱法检测。结果本方法显著地除去了动物内脏中的磷脂类杂质的干扰,待测物均获得了良好的信号响应。方法回收率为72.7%~116.8%、相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.6%~19.5%、定量限均为1.0μg/kg。结论本方法前处理简单、重复性好、定量限低,适合作为猪肝中喹诺酮类抗生素残留的日常检测方法。     

HPLC-PAD外标法及UPLC-MS/MS内标法测定乳及乳制品中三聚氰胺的含量

分别建立高效液相色谱-二极管阵列法(HPLC-PAD)、超高压液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定乳及乳制品中三聚氰胺含量的方法。利用HPLC-PAD外标法进行样品中三聚氰胺的初筛,利用UPLC-MS/MS法进行确证,以13C315N3-三聚氰胺为同位素内标定量。乳制品经乙腈、乙酸锌、盐酸溶液提取,质谱检测时,样品再经MCX固相萃取柱富集净化。HPLC-PAD法的定量限为4mg/kg,UPLC-MS/MS的定量限为0.05mg/kg;HPLC-PAD的添加回收率为95.7%～102.3%,UPLC-MS/MS的添加回收率为91.3%～95.7%(基质匹配曲线校正),两种方法的相对标准偏差(RSD)分别为1.98%～4.51%,1.60%～3.27%。