B16 黑色素瘤细胞对血管内皮细胞辐射损伤后侵袭作用机理的研究

通过体外培养血管内皮细胞，运用３ＨＴｄＲ标记示踪方法建立体外Ｂ１６黑色素瘤侵袭模型，对１５Ｇｙ６０Ｃｏγ射线照射血管内皮细胞前后侵袭率的时相变化进行研究，而且运用放免及酶标技术检测辐射前后血管内皮细胞分泌ＰＧＩ２、ＴＸＢ２、ＴＰＡ、ＰＡＩ的时相性变化，以探讨辐射在肿瘤转移中的作用机理。结果表明：血管内皮细胞电离辐射后，Ｂ１６黑色素瘤对内皮细胞单层的侵袭率显著高于对照组；Ｂ１６黑色素瘤侵袭过程中，ＰＧＩ２、ＴＸＢ２和ＴＰＡ、ＰＡＩ这两对平衡因子失去平衡；电离辐射后，血管内皮细胞ＰＧＩ２分泌减少，ＴＸＢ２和ＴＰＡ分泌增加，其时相性变化与侵袭率变化相对应。提示：电离辐射对血管内皮细胞功能损伤在肿瘤侵袭和进一步转移过程中起着重要作用。     

硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞辐射防护的作用

将对数生长期的人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)分为对照组、照射组和实验组,照射组和实验组均接受γ-射线辐照,实验组于照射前0.5 h加入硫酸镁。采用CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡率,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平。结果显示,6.25mg·mL-1以下浓度的硫酸镁对HUVEC细胞存活率无明显影响;6.25 mg·mL-1的硫酸镁可提高照射后HUVEC细胞的存活率,改善γ-射线诱导的HUVEC细胞G2/M期阻滞,降低HUVEC细胞凋亡率。提示硫酸镁对HUVEC细胞辐射损伤具有一定的防护作用。     

188Re对血管平滑肌与内皮细胞的辐射差异性

为比较β射线对平滑肌和内皮细胞的增殖抑制作用，探寻血管内放射治疗中保护内皮细胞的措施，应用放射性核素^188Reβ射线对培养的平滑肌细胞和内皮细胞进行了辐射，通过细胞增殖计数，细胞增殖周期分析和^3H-TdR掺入实验观察，研究辐射对平滑肌和内皮细胞在增殖方面的影响，结果显示，5．2Gy剂量β辐射，平滑肌细胞增殖计数，细胞增殖率，^3H-TdR参入率显著下降，而内皮细胞的上述指标则无明显改变；高于10Gy，小于20Gy折剂量辐射，两组细胞的增匀受到明显抑制，表明在体外细胞培养条件下，平滑肌细胞及内皮细胞对高剂量β辐射的敏感性一致，而对低剂量β辐射，内皮细胞较平滑肌细胞耐受，5．2Gy低剂量β辐射，是一个既能有效抑制平滑肌细胞增殖，又不影响内皮细胞增殖，且对心肌细胞无损伤作用的血管内放疗窗口。     

中能碳离子束对不同贯穿深度上黑色素瘤B16细胞的辐照存活效应

测量了49．30MeV/u及经脊形过滤器展宽的Bragg峰的74.55MeV/u^12C离子束在不同贯穿深度上辐射后黑色素瘤B16细胞的存活率。结果显示,在以存活为终点的B16细胞生物学效应与碳离子束能量沉积同步增大。即Bragg或展宽的Bragg峰区内细胞存活率远低于离子束入射或出射通道处的细胞存活率。通过实验测量与剂量平均LET结合的线性平方模型理论计算存活曲线的比较,发现在实验测量误差范围内两者符合较好。提示：剂量平均LET结合线性平方模型可能是预测中能重离子束贯穿深度上B16细胞存活效应的一种有效的方法。     

γ辐射对B淋巴杂交瘤细胞抗体分泌功能作用研究

分泌特异性抗体的Ｂ淋巴杂交瘤细胞，是高度分化的免疫活性细胞。在＾６０Ｃｏγ射线作用下，抗体分泌总量随受照剂量的增大而降低。然而每个克隆细胞的抗体分泌量却随受照射剂量的增加而有上升趋势，抗体分泌细胞受照射后抗体分泌浓度增加的效应，经细胞传代，冻存后丧失。表明抗体分泌功能的增强，是由于电离辐射－过性剌激的结果。实验表明，高度分化了的抗体分泌细胞在电离辐射作用下，存在着潜在致死性损伤，但这种损伤不影响存     

硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞的辐射防护作用

对数生长期的人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)分3组进行不同处理后采用流式细胞仪检测细胞周期分布;Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡率;Western blot检测Bcl-2蛋白的表达情况;RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA的表达情况。结果显示,硫酸镁可以在X-射线照射24 h后改善HUVECs细胞G2/M期阻滞;在辐照后24、48、72 h可以提高细胞对X-射线的辐射敏感性,并增加细胞凋亡率(t=4.24、7.19、3.20,p0.05);在辐照后48、72 h能明显抑制抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达;照后24、48、72 h的Bcl-2 mRNA表达量减少(t=3.034、6.182、3.957,p0.05)。结果提示,硫酸镁可以缓解X-射线照射后细胞G2/M期阻滞,增加照射后HUVECs的细胞凋亡率,降低X-射线诱导的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。     

硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞照射后NF-κB/ICAM-1的影响

为研究硫酸镁对粘附蛋白ICAM-1及其调控基因NF-κB表达的影响,进而探讨硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial,HUVEC)放射损伤的防护机制。取对数生长期细胞分为空白对照组、单纯照射组、照射加药组,单次4 Gy X射线照射单纯照射组及照射加药组,其中照射加药组于照射前0.5 h加入1.25 mg／mL硫酸镁,收集样本,利用流式细胞术和RT-PCR法检测NF-κB、ICAM-1 mRNA的表达情况,Western blot、激光共聚焦检测NF-κB、ICAM-1蛋白的表达情况。结果表明,照射后72 h内,NF-κB、ICAM-1 mRNA表达均高于空白对照组,其中照后3 h表达最为显著;在照射后48、72 h,1.25 mg/mL硫酸镁处理组中NF-κB / ICAM-1蛋白均低于单纯照射组。以上结果说明,电离辐射能够诱导NF-κB /ICAM-1高表达,而硫酸镁能抑制其表达,且可能是通过抑制NF-κB核转位来调控ICAM-1表达的途径参与辐射损伤防护。     

Egr-IFNγ重组质粒的构建和在B16细胞中的辐射诱导表达

小鼠IFNγ cDNA基因连接到Egr-1启动子的下游构建成Egr-IFNγ重组质粒,利用质脂体介导转染B16细胞,用ELISA方法检测x射线照射后IFNγ表达的剂量效应和时程。结果表明,实验组的表达水平明显高于对照组,其中20Gy和2Gy照射组高于其它实验组(p<0.01)。26y照射后6h IFNγ表达量最高(p<0.01)。转染后的B16细胞每隔24h接受2Gy x射线照射,结果显示第一次照射后表达量最高(p<0.01),然后逐渐降低。结果提示电离辐射可激活Egr-IFNγ重组质粒,并调节IFNγ基因表达,这项研究可能对肿瘤治疗的研究有一定的意义。     

止血新药“8401”对辐射后小鼠血小板和体外受照内皮细胞增殖力的保护作用

毛细血管壁的损伤是辐射引起出血的重要原因、实验明显地证实“8401”:3、4、5——三甲氧基苯甲醛(芥子酸胺盐衍生物)能升高辐射后小白鼠的血小板量,本文同时表明不同剂量“8401”对血管内皮细胞生长有影响,使用培养细胞(R_(22-25))在室温中以γ线15 Gy照射后,再以细胞密度为3.5×10~5/ml接种在12只培养并中,每二只培养并为一组,分别加“8401”1、2、3、4,5微克,二只培养瓶作对照,细胞培养七天后,每用胰蛋白酶消化后计数,结果1μg组细胞数为1.86×10~5/并,2μg组为2。17×10~5,3μg组为2.21×10~5,而对照组为1.23×10~5:“8401”用药组细胞量大大多于对照组(p<0.01),结果表明一定剂量的“8401”能刺激辐射后内皮细胞的生长,这可能是内皮细胞损伤后“8401”能促进其增殖能力。