4种药用植物内生放线菌的分离与初步研究

目的分离并研究具有抑菌活性的药用植物内生放线菌。方法使用高氏一号培养基定向筛选药用植物内生放线菌,采用滤纸扩散法评价分离菌株的抑菌活性,进而通过形态学、生理生化等特征的分析对其进行鉴定。结果共分离得到63株内生放线菌。对金黄色葡萄菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌等表现出选择性抑菌作用的菌株有17株,其中Y6菌株抗菌谱较广、抑菌作用较强。初步鉴定结果表明Y6菌株是链霉菌属的一个成员。结论 Y6对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好。     

内生放线菌和寄主植物的抑菌活性及其关系

从68种中草药植物中分离了560株内生放线菌菌株,其中84株(约占15%)对金葡菌有抑菌活性,36株(约6%)对白念珠菌有抑菌活性,提示中草药植物的内生放线菌可能是抗菌新药的一个来源。检测了9种中草药植物的水或乙醇抽提液对金葡菌的抑菌活性,发现内生放线菌菌株的抑菌活性与其寄主植物没有明显的对应关系。     

海南三亚红树林放线菌多样性及抗菌活性

目的 研究海南三亚红树林底泥样品中放线菌的多样性及抗菌活性,以期发现可以产生新颖活性物质的药用放线菌资源。方法 采用11种分离培养基以稀释涂布法对样品中的放线菌进行选择性分离;对分离菌株的16S rRNA基因序列进行扩增、比对,开展多样性分析;放线菌发酵液经乙酸乙酯萃取,采用纸片法对粗提物进行抗菌活性筛选;同时对放线菌的生物合成基因NRPS、PKS I和PKS II进行筛选。结果 共分离到149株放线菌,它们分布于6个目12个科16个属,其中小单孢菌属为优势菌属;菌株MG16072的16S rRNA基因序列与最近有效菌株Actinomadura hallensis H647-1T的相似率为97.94%,为潜在Actinomadura属新种;抗菌活性检测结果显示,有20株放线菌至少对1株检定菌具有抗菌活性;NRPS、PKS I、PKS II基因筛选结果显示,有82株放线菌至少含有1种生物合成基因。结论 海南三亚红树林含有丰富的药用放线菌资源,具有从中发现新颖活性物质的潜力。     

药用植物内生菌的生物多样性及活性成分

植物内生菌是一个多样性十分丰富的微生物类群，寄生于健康植物组织内而不产生外在感染症状，并与宿主植物协同进化。内生真菌产生的代谢产物有很多是应用前景广阔的新型生物活性物质，开发利用价值非常高。本文就药用植物内生真菌的种类，与高等植物的相互作用，内生菌产生的天然产物及其生物活性等方面进行归纳与讨论。     

金银花内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

目的 从药用植物金银花中筛选出对指示菌有抑制作用的内生真菌,并对其抑菌特性进行研究.方法 采用组织块法对金银花内生菌进行分离;用形态学方法对内生真菌进行鉴定;以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌为指示菌,对内生真菌发酵产物进行抑菌试验,并对活性物质的热稳定性进行了研究.结果 分离获得38株内生真菌,鉴定为5目、5科、8个属;其中2株有抑菌活性,且发酵液具有良好的热稳定性.结论 金银花组织中存在丰富的内生真菌,其代谢产物具有一定的抑菌作用.     

广西北仑河口红树林植物根际淤泥放线菌的分离、鉴定、多样性及抗菌活性研究

从红树林根际淤泥中分离鉴定放线菌并进行多样性分析及抗菌活性研究,为新抗生素的发现提供药用放线菌资源。方法 用6种分离培养基,利用涂布平板法分离放线菌;通过PCR扩增获得菌株16S rRNA基因并进行同源性比对,分析放线菌多样性;发酵液经处理分别形成发酵液酯相、发酵液水相和菌丝丙酮浸提液3类样品;纸片扩散法进行抗菌活性测试。结果 从5份红树林植物根际淤泥样品中分离纯化得到56株放线菌,分布于7个目7个科12个属,优势菌属为小单孢菌属和红球菌属;菌株L9T122、L1T1Jb1的16S rRNA基因序列与有效发表菌株Agromyces bracchium IFO 16238T(AB023359)、Streptomyces radiopugnans R97T(DQ912930)的相似率最高,分别为97.49%和97.07%,为潜在壤霉菌属和链霉菌属新种;抗菌活性检测结果表明,在20株放线菌中,15株具有抗菌活性,总阳性率为75.00%。其中L2T1Gb21、L9T122对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌均有较强的抑菌作用。结论 广西北仑河口红树林植物根际土壤中含有较为丰富的放线菌资源,菌株L2T1Gb21、L9T122有较强的抗菌活性,具有开发抗菌新药的潜力。     

广西茅尾海红树林根围淤泥放线菌多样性及抗菌活性

目的 对广西茅尾海红树林保护区植物根部淤泥中的放线菌进行分离鉴别,研究放线菌的多样性和抗菌活性。方法 选用10种分离培养基,经稀释涂布法分离放线菌;通过PCR扩增,测序后获得菌株16S rRNA基因序列;邻接法构建系统发育树并进行同源性分析,探测放线菌的多样性;针对发酵液经乙酸乙酯萃取后的有机相、水相及菌丝丙酮浸泡液共3类样品,采用纸片扩散法开展抗菌活性研究。结果 从8份红树林植物根围淤泥样品中分离纯化得到244株放线菌,分布于5个目13个科29个属,优势菌属为链霉菌属和小单孢菌属;16S rRNA基因序列相似性低于98.65%的放线菌共有4株,可能为潜在新物种;抗菌活性筛选结果表明,83株放线菌的抗菌活性阳性率达71.1%。结论 广西茅尾海红树林保护区植物根围淤泥中抗菌活性放线菌的多样性丰富。     

大狼毒内生真菌的分离、鉴定与抑菌活性研究

目的 分离和鉴定大狼毒根中的内生真菌,并检测其抑菌活性.方法 用组织块法分离,点植法对分离菌株进行分类鉴定;选择3种人类病原细菌作为指示菌进行体外抑菌试验.结果 分离获得内生真菌41株,鉴定为1纲、4目、6科、15属;其中9株有稳定的抑菌活性,尤其对大肠杆菌有显著抑制作用.结论 大狼毒根中存在丰富的内生真菌,其代谢产物具有一定的抑菌作用,可作为筛选抑菌活性物质的新资源.     

两株牛肝菌内生真菌的分离鉴定及活性初步研究

目的 从牛肝菌中分离内生真菌,并对其活性进行初步研究.方法 采用组织培养法从秦巴山区牛肝菌子实体中分离内生真菌,基于形态特征及ITS系统发育分析对内生真菌进行鉴定,以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌为指示菌,检测内生真菌发酵产物的抑菌活性,并对其绿豆芽的抑制活性进行了研究.结果 分离获得2株内生真菌L3和L5,L3和黄瘤孢菌(Hypompces chrysosperums)序列同源性为99％;L5和毛霉属序列同源性为100％;两株菌的形态学特征分别与黄瘤孢菌和毛霉属形态特征一致.结论 内生真菌L3和L5,分别鉴定为黄孢瘤菌和毛霉属;这两株菌发酵液对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用,对绿豆芽生长均具有抑制作用.     

三角叶黄连内生真菌的多样性及其抑菌活性的筛选

目的分离和鉴定三角叶黄连Coptis deltoidea根状茎、叶柄及叶中的内生真菌,并检测其抑菌活性。方法用平板法分离菌株,对照真菌鉴定手册,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率、质地、生长培养基的颜色变化以及菌丝体和孢子的形态特征进行分类鉴定;选择大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作为指示菌,采用杯碟法对内生真菌的发酵上清液进行体外抑菌试验。结果从三角叶黄连中分离获得的297株内生真菌,分属2目、3科、32属;抑菌实验表明:22株内生真菌的发酵液对指示菌均有不同程度的抑制作用,其中6号内生真菌同时对两种致病菌的抑菌效果明显。结论三角叶黄连内生真菌在种类、不同部位呈多样性分布,且部分内生真菌的代谢产物具有较强的抑菌作用,可作为筛选抑菌活性物质的新资源。     

从87种中草药植物中分离内生放线菌及其规律的初探

为了考察从植物中分离内生放线菌的规律,采集了87种中草药植物,包括62种草本植物和25种木本植物.减少系统误差后的统计数据显示,从55种草本植物和13种木本植物中各分离和初步鉴定了519株和41株内生放线菌,暗示从大多数草本植物比从木本植物中分离到内生放线菌的概率大.通过比较不同植物组织的出菌率,发现不论是草本还是木本植物,植物的地上部分(茎和叶)分离到的内生放线菌的数量比地下根部的多.这些初步的分离规律对于今后从中草药植物中高效地分离内生放线菌提供了借鉴意义.     

铁皮石斛内生真菌的鉴定及菌株205509的次级代谢产物研究

摘要：目的 鉴定铁皮石斛内生真菌及从中发现活性菌株,探究菌株205509产生的次级代谢产物。 方法 利用分子生物学方法并结合形态特征,对9株铁皮石斛内生真菌进行鉴定;采用琼脂扩散法和MTT法,筛选出次级代谢产物丰富,且具有抑制病原指示菌和人乳腺癌MCF-7细胞系的活性菌株;利用大米固体培养基对活性菌株进行发酵,乙酸乙酯萃取;采用硅胶、反相硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20和HPLC色谱技术进行分离纯化,得到化合物;通过质谱(MS)和核磁共振(1H NMR和13C NMR)等波谱技术并结合文献比对,确定化合物结构。结果 9株铁皮石斛内生真菌分属3个科的3个属,初步判定其中1株为枝顶孢霉属(Acremonium)的一个新种,2株为树粉孢属(Oidiodendron)的一个新种,2株为Acremoniopsis属的未确定种;获得抗菌活性和细胞毒活性较好的菌株205509,并从中分离得到了4个化合物,其中化合物HXW-3浓度为3 μg/mL时对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)和蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)表现出抑制活性。结论 铁皮石斛内生真菌物种较新颖,其次级代谢产物具有较好的生理活性,值得进一步研究。     

金荞麦中具抗菌活性内生真菌的筛选和鉴定

目的 研究药用植物金荞麦的抗菌活性内生真菌.方法 采用PDA培养基,从金荞麦的块根、茎、叶中分离到20株内生真菌,鉴定其抗菌活性,并对抗菌活性菌株进行形态学特征和分子鉴定.结果 发现其中1株内生真菌FD12对金黄色葡萄球菌有抗菌活性,但对大肠杆菌、黑曲霉无抑制作用;经形态学特征和分子鉴定,确定菌株FD12为黑肉座菌Hypocrea nigricans.结论 文中结果可为保护金荞麦野生资源,寻找和开发新型抑菌生物制剂开辟了一条新途径.     

Effects of isolation and fighting in mice on the rate of synthesis of noradrenaline,dopamine and 5-hydroxytryptamine in the brain

Male mice were isolated or housed in groups for 6–8 weeks. Some of the isolated mice were thereafter brought together in groups of 25–30 animals for 30 min, during which period they fought each other intensively. The brain concentration of 5-HIAA was lower in isolated than in grouped animals. 30 min after administration of the aromatic amino acid decarboxylase inhibitor 3-hydroxybenzyl-hydrazine HCl (NSD 1015) the amount of Dopa accumulated in the brain was lower in isolated than in grouped animals. There was no corresponding difference in the accumulation of 5-HTP. The accumulation of Dopa and 5-HTP after NSD 1015 was accelerated during fighting. The effects of isolation and fighting on DOPA accumulation were similar in NA- and DA-dominated areas of the brain. The brain concentrations of tryptophan and tyrosine were increased and the concentration of NA was decreased in fighting NSD 1015 treated animals. The brain concentrations of HVA was lower in isolated and higher in fighting animals than in grouped animals.The present results indicate that the rate of synthesis of brain CA is lower in isolated than in grouped animals and that intensive fighting rapidly accelerates the synthesis of CA and 5-HT in the brain.     

苔藓内生菌Bacillus megaterium z12的分离、鉴定和抗菌活性筛选

目的从无纹紫背苔(Plagiochasma intermedium)叶片中分离筛选出一株具广谱抗菌活性的内生菌z12。方法根据菌落和细胞形态、生理生化特性,以及16S rDNA序列对内生细菌z12进行了分析鉴定,并研究了它对14种供试菌株的抑制作用。结果经分析鉴定该菌属于巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。抑菌实验表明,内生细菌z12对7种供试菌都有不同程度的抑制作用,对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和白念珠菌(Candida albicans)的抑制作用较强。研究了z12菌株粗提物对水稻纹枯病原菌(Corticium sasakii)的抑制作用。结论该菌株具有开发成农用抗生素的价值。     

锡林郭勒盟高原盐湖放线菌资源勘探及抗菌活性筛选

摘要：目的 探究锡林郭勒盟高原盐湖放线菌的多样性、新颖性及抗菌活性,为新型抗菌活性产物的发掘储备菌种资源。方 法 采用20种分离培养基,以平板涂布法分离放线菌;依据16S rRNA基因的同源性对菌株进行分子鉴定;PCR检测代表菌株的I型聚 酮合酶(PKS I)、II型聚酮合酶(PKS II)和非核糖体多肽合成酶(NRPS)功能基因;菌株的发酵液上清和菌体分别经乙酸乙酯和丙酮提取, 提取样品经纸片扩散法进行抗菌活性检测。目标菌株合成次级代谢产物的能力通过antiSMASH对基因组序列进行分析预测。结果 从 7份盐湖土壤样品中分离获得了365株放线菌,其分布于放线菌纲的8个目15个科28个属,优势菌属为链霉菌属和拟诺卡菌属。分离获 得的链霉菌新颖性突出,13株链霉菌与近缘菌株16S rRNA基因的最高相似度≤98.0%,推测其归属于10个链霉菌属新种。受试放线菌 对革兰阳性菌的抗菌活性显著,并从中筛选出3株抗菌作用强且抗菌谱较广的链霉菌;20株受试放线菌同时含有3种抗生素生物合成基 因。菌株XMNu-295基因组含有24个潜在的次级代谢产物生物合成基因簇,以聚酮类、非核糖体多肽类和萜烯类等为主。结论 锡林 郭勒盟高原盐湖中可培养放线菌多样性较为丰富,新颖性突出,目标菌株值得进一步开展次级代谢产物的化学研究。     

海洋放线菌次级代谢产物及其抗菌、抗病毒、抗肿瘤活性研究进展

放线菌是发现大量药用天然产物的资源宝库,在微生物新药研究中占据着十分重要的地位。海洋放线菌生活环境特殊造就了其不同于陆地微生物独特的代谢途径,具有产生多种生物活性物质的潜力,是天然药用活性先导化合物的重要来源。从不同海洋生境来源放线菌的次级代谢产物中寻找生物活性物质已成为近年来的研究热点。目前已经分离到许多结构新颖、活性显著的化合物,为新药的研究提供了丰富的物质基础。本文主要对近3年（2015～2017）不同海洋生境来源且具有明显抗菌、抗病毒、抗肿瘤生物活性的放线菌次级代谢产物进行综述。