电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤组织IL-1β、IL-1ra mRNA表达的影响

目的 :观察电针对单侧佐剂性关节炎大鼠的疼痛试验评分、炎症灶局部病理反应 ,以及病灶局部皮肤组织IL 1β、IL 1ramRNA表达的影响。方法 :通过将完全弗氏佐剂 50 μL注入SD大鼠左后肢外踝关节皮下制造单侧佐剂性关节炎疼痛模型 ,电针“环跳”穴、“阳陵泉”穴 (刺激参数为0 .5～ 1.5V ,4～ 16Hz,3 0min) ,应用跖、背屈关节评分连续观察大鼠 7d内的痛反应曲线 ,应用HE组织化学染色方法观察病灶局部皮肤组织炎性病理反应 ,应用RT PCR技术检测IL 1β、IL 1ramRNA表达情况。结果 :电针可明显减少炎症痛大鼠的疼痛评分 ,抑制佐剂性关节炎大鼠病灶局部炎性病理反应 ,并抑制病灶局部皮肤组织IL 1βmRNA表达 ,促进IL 1ramRNA表达 ,使IL 1ra/IL 1β比值上升 (P <0 .0 1)。结论 :电针可能通过调节炎症灶局部致炎细胞因子及抗炎细胞因子之间的平衡 ,从根本上解除局部病灶免疫细胞的激活状态 ,达到扶正祛邪、平衡阴阳的调控作用 ,从外周途径缓解疼痛。     

中药熏蒸方对佐剂性关节炎大鼠IL-1Ra/IL-1β的影响

目的:研究中药熏蒸方对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠血清、关节滑膜组织中的白细胞介素1β(IL-1β)、IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra)的影响,并探讨其改善类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法:采用弗氏完全佐剂诱导AA大鼠模型,随机分为模型组、MTX组、中药熏蒸组、MTX+中药熏蒸组,分别给予中药熏蒸,MTX(1.9 mL·kg~(-1)·w~(-1))腹腔注射,中药熏蒸+MTX(1.9 mL·kg~(-1)·w~(-1))腹腔注射,另设正常大鼠为正常组,连续给药20天后处死大鼠收集血清、关节滑膜组织。观察大鼠关节肿胀度和关节炎指数的变化,酶联免疫吸附剂(ELISA)测定检测血清IL-1β、IL-1Ra的水平,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测滑膜组织中IL-1β、IL-1Ra mRNA表达量的变化,并观察中药熏蒸方对这些指标的影响。结果:与正常组比较,模型组关节肿胀度和关节炎指数明显升高,血清、滑膜组织IL-1β表达水平明显升高、IL-1Ra表达水平下降;中药熏蒸方能抑制模型组血清、滑膜组织IL-1β的表达,上调血清、滑膜组织IL-1Ra表达量,而中药熏蒸方和MTX两药协同的效果更加明显。结论:中药熏蒸方改善AA大鼠关节炎机制可能与恢复IL-1Ra/IL-1β的平衡相关。     

电针对佐剂性关节炎大鼠血清IL-2和IL-10的影响

1实验材料Wistar大鼠40只,雄性,体重180～200g,1．5月龄,黑龙江中医药大学实验动物中心提供。弗氏完全佐剂：美国Sigma;血清白细胞介素-2（IL-2）和白细胞介素-10（IL-10）ELISA试剂盒;     

电针对佐剂性关节炎大鼠脾细胞IL—1和IL—2活性的影响

目的 为了探讨电针（EA）对炎症痛镇痛的外周机制,观察EA对佐剂性关节炎（AA）大鼠脾细胞中细胞因子白细胞介素1（IL－1）和白细胞介素2（IL－2）活性的影响。方法 用福氏完全佐剂造成佐剂性关节炎,电针刺激悬钟和昆仑穴,用H^3-TdR掺入法和MTT显色法分别检测IL－1和IL－2的活性。结果 EA对AA大鼠镇痛的同时,能够提高细胞因子IL－1和IL－2的活性。结论 EA对炎症痛镇痛的外周机制与其提高细胞因子IL－1和IL－2的活性有关。     

痹痛定胶囊对佐剂性关节炎大鼠血清IL-1β TNF-α的影响

目的：观察痹痛定胶囊对佐剂性关节炎的治疗作用及对细胞因子IL-1β、TNF-α的影响。方法：将60只大鼠随机分为正常对照组、模型组、正清风痛宁治疗组、痹痛定胶囊小剂量治疗组、痹痛定胶囊中剂量治疗组、痹痛定胶囊大剂量治疗组，每组10只，制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外的其余动物右后足跖皮内注射0．05mL致炎。观察各组血清中各细胞因子含量的变化。结果：与模型对照组相比，痹痛定胶囊治疗组的IL-1β、TNF-α显著降低（P〈0．01），并与正清风痛宁治疗组无显著性差异（P〉0．05）。结论：痹痛定胶囊与正清风痛宁对大鼠佐剂性关节炎均有治疗作用；痹痛定胶囊可能通过下调致炎因子（IL-1β、TNF-α），抑制致炎效应、增强抗炎效应，从而达到治疗类风湿性关节炎的作用。     

痹痛定胶囊对佐剂性关节炎大鼠血清IL-1βTNF-α的影响

目的:观察痹痛定胶囊对佐剂性关节炎的治疗作用及对细胞因子IL-1β、TNF-α的影响.方法:将60只大鼠随机分为正常对照组、模型组、正清风痛宁治疗组、痹痛定胶囊小剂量治疗组、痹痛定胶囊中剂量治疗组、痹痛定胶囊大剂量治疗组,每组10只,制备完全佐剂并分别向除正常对照组以外的其余动物右后足跖皮内注射0.05mL致炎.观察各组血清中各细胞因子含量的变化.结果:与模型对照组相比,痹痛定胶囊治疗组的IL-1β、TNF-α显著降低(P＜0.01),并与正清风痛宁治疗组无显著性差异(P＞0.05).结论:痹痛定胶囊与正清风痛宁对大鼠佐剂性关节炎均有治疗作用;痹痛定胶囊可能通过下调致炎因子(IL-1β、TNF-α),抑制致炎效应、增强抗炎效应,从而达到治疗类风湿性关节炎的作用.     

电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤CB2受体阳性细胞免疫反应性的影响

目的:研究电针缓解炎性痛的机制是否与其对病灶局部内源性大麻素2型受体(CB2受体)阳性细胞免疫反应性的影响有关。方法:采用健康成年雌性SD大鼠共48只,随机分为:空白对照组(n=12)、模型组(n=12)、穴位电针组(n=12)和非穴位电针对照组(n=12)。除空白对照组外其它各组大鼠于左后肢外踝关节皮下注射完全弗式佐剂(CFA,Sigma公司产品)50μL制备单发局限性佐剂性关节炎模型。对其进行行为学观察,研究电针患侧“环跳”穴、“阳陵泉”穴对背屈、跖屈踝关节疼痛试验评分的影响,并结合免疫组化技术,观察电针对佐剂性关节炎大鼠致炎后第6天和第16天病灶局部皮肤CB2受体阳性细胞免疫反应性的影响。结果:①电针佐剂性关节炎模型大鼠致炎足同侧穴位,可产生明显镇痛作用,且电针效果在致炎后第3-5天最为显著,穴位电针组背屈、跖屈踝关节疼痛试验评分在致炎第3天和5天均较模型组和非穴位电针对照组显著降低(P<0.05)。②免疫组化结果显示,致炎后第6天穴位电针组大鼠炎性痛病灶局部皮肤组织CB2受体阳性细胞的数量显著高于空白对照组、模型组和非穴位电针组(P<0.05);致炎后第16天穴位电针组该值与空白对照组、模型组和非穴位电针组间统计学差异不明显(P>0.05)。结论:电针腧穴可使炎症病灶局部皮肤组织CB2受体免疫反应阳性细胞的数量显著上调,从而调控炎性痛病灶局部组织中致炎致痛物质与镇痛物质之间的平衡,解除局部病灶神经免疫微环路的激活状态,通过外周途径缓解疼痛。     

逐痹胶囊对大鼠佐剂性关节炎的影响

目的:观察逐痹胶囊对大鼠佐剂性关节炎(adjuvantarthritis,AA)的影响及作用机制。方法:用福氏完全佐剂(CFA)诱导大鼠AA模型,MTT法检测脾淋巴细胞增殖能力,免疫组织化学方法检测踝关节滑膜白细胞介素1(IL-1),白细胞介素6(IL-6)含量,并且测量原发及继发性关节肿胀程度。结果:生药52,26,13g·kg^-1体重灌胃大鼠,逐痹胶囊显著抑制AA大鼠原发及继发踝关节炎性肿胀;降低脾淋巴细胞增殖能力及踝关节滑膜内IL1,IL-6含量。结论:逐痹胶囊对大鼠AA有一定抑制作用。     

桂芍知母汤及其加味对佐剂性关节炎大鼠踝关节病理变化及TNF-α、IL-1β、IL-10的影响

目的:研究桂芍知母汤及加味对佐剂性关节炎大鼠的治疗效果,并探讨其作用机理。方法:采用佐剂性关节炎大鼠模型,测量足肿胀度,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β和IL-10水平,并观察踝关节及周围组织病理。结果:与模型组相比,布洛芬组(63mg/kg)、桂芍知母汤组(17.325 g/kg)、桂芍知母加活血组(21g/kg)与桂芍知母加藤类组(25.2g/kg)足肿胀度均能明显下调,血清TNF-α和IL-1β水平均显著降低,IL-10水平显著升高,并对关节滑膜炎性细胞浸润、结缔组织增生等有不同程度改善。结论:桂芍知母汤及加味均能有效缓解佐剂性关节炎大鼠局部炎症反应,其机理可能与减少促炎因子TNF-α和IL-1β的合成,升高抑炎因子IL-10有关。     

不同脉冲波形电针对佐剂性关节炎大鼠的影响

目的:探讨电针治疗佐剂性关节炎(AA)最佳适宜的脉冲波形参数.方法:将40只Wistar大鼠随机分为5组,电针观察组分别采用不同脉冲波形电针对AA大鼠进行治疗,以痛阈、关节肿胀度和炎症局部组织中5-羟色胺(5-HT)、β内啡肽(β-EP)、亮脑啡肽(LEK)的含量为观察指标.结果:治疗后不同脉冲波形电针组痛阈高于模型组(P＜0.05,P＜0.01);电针组炎症局部肿胀度虽然高于正常组(P＜0.01),但较模型组为低(P＜0.05,P＜0.01);电针组炎症局部组织中5-HT含量低于模型组(P＜0.05,P＜0.01);与模型组相比,声电波电针有升高炎症局部组织中β-EP和LEK含量的作用(P＜0.01,P＜0.05),断续波电针有升高β-EP的作用(P＜0.05).结论:电针治疗AA最佳适宜的脉冲波形为声电波.     

督脉腧穴电针对佐剂性关节炎大鼠IL-2影响的实验观察

目的 :观察督脉腧穴电针对大鼠炎症和免疫功能的影响。方法 :制作大鼠佐剂性关节炎模型 ,观察电针“大椎”、“命门”对关节炎症局部 ,下丘脑、脾脏、肾上腺、血清白细胞介素 2 (IL 2 )的影响。结果 :电针组大鼠的局部炎症肿胀明显好转 ,且IL 2在下丘脑、脾脏、血清中的含量或活性均有改变 ,其中在下丘脑表现为降低 ,在脾脏、血清中表现为升高 (P <0 .0 1 )。结论 :电针“大椎”或“命门”能在神经、免疫、内分泌各不同水平影响IL 2的含量 ,以发挥其抗炎免疫的调节作用。同时也说明针刺督脉腧穴可以通过IL 2等共同介质对神经内分泌免疫网络进行免疫调节。     

IL-1及TNF-α在关节炎大鼠模型血清中表达的实验研究

目的检测白细胞介素1（IL-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在佐剂性关节炎（AA）大鼠模型血清中的水平。方法建立AA大鼠模型,根据X线片及组织病理学的特点证实造模成功。用ELISA法检测AA大鼠模型血清中炎性细胞因子IL-1、TNF-α的水平。结果与对照组大鼠比较,模型组大鼠血清中IL-1、TNF-α水平明显升高。结论模型组大鼠血清中含有大量的IL-1、TNF-α,提示IL-1、TNF-α在类风湿关节炎的发病过程中起着重要作用。     

关节炎大鼠模型血清中IL-4、IL-10表达的检测

目的检测白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）在佐剂性关节炎（AA）大鼠模型血清中的水平。方法建立AA大鼠模型,根据X线片及组织病理学的特点证实造模成功。用ELISA法检测AA大鼠模型血清中炎性细胞因子IL-4、IL-10的水平。结果与对照组大鼠比较,模型组大鼠血清中IL-4、IL-10水平明显降低。结论模型组大鼠血清中含有少量的IL-4、L-10,提示在类风湿关节炎的发病过程中IL-4、IL-10的分泌受到了抑制。     

通痹灵对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA表达的影响

目的:探讨中药复方制剂通痹灵(以桂枝芍药知母汤为基础)对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞单核细胞趋化蛋白 1(MCP-1)mRNA表达的影响。方法:采用半定量RT-PCR法测定佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA表达水平。结果:通痹灵明显抑制了佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA的表达,提示通痹灵治疗类风湿性关节炎的分子机制与抑制MCP-1基因表达有关。     

电针夹脊穴对关节炎大鼠的治疗作用及对T细胞亚群的影响

目的:从细胞免疫的角度探讨电针夹脊穴对佐剂性关节炎(AA)大鼠的疗效机制。方法:以随机数字表法将30只雄性Wistar大鼠分为3组,每组10只。①正常组:不造模,不电针。②模型组:大鼠右后足掌皮下注射弗氏完全佐剂0.1 mL,造成佐剂性关节炎模型。正常组与模型组每日以与电针组相同的方式捆绑固定30 min,连续7 d。③电针组:于造模当天进行电针L3、L5夹脊穴30 min,每日1次,连续治疗7 d。检测其痛阈、肿胀度及T细胞亚群的变化。结果:电针夹脊穴明显提高AA大鼠痛阈,显著抑制致炎大鼠原发足肿胀,显著提高CD8+细胞百分率,降低CD4+/CD8+比值。结论:电针夹脊穴有明显的抗炎镇痛作用,其机制可能与调整AA大鼠紊乱的T细胞亚群有关。     

盐酸青藤碱对佐剂性关节炎大鼠关节滑膜肥大细胞表达的影响

目的：观察盐酸青藤碱对佐剂性关节炎大鼠关节滑膜肥大细胞表达的影响,探讨盐酸青藤碱治疗关节炎的作用机制。方法：选用Wistar大鼠45只,造模成功30只,治疗组灌服盐酸青藤碱,对照组灌服雷公藤多甙并设单纯造模组。42 d后观察大鼠关节滑膜肥大细胞表达和关节肿胀指数。结果：盐酸青藤碱、雷公藤多甙均能改善关节肿胀指数,盐酸青藤碱能减少佐剂性关节炎大鼠关节滑膜肥大细胞总数及脱颗粒率。结论：盐酸青藤碱改善关节肿胀指数的机制可能与减少佐剂性关节炎大鼠关节滑膜肥大细胞总数有关,其作用机制与雷公藤多甙不同。     

电针对佐剂性关节炎大鼠炎症局部δ阿片受体mRNA表达的影响

目的:从阿片受体角度观察电针(EA)对佐剂性关节炎(AA)大鼠产生镇痛的外周机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、EA组和单针组。于实验第1天在模型组、EA组大鼠右后足垫部向踝关节方向注入弗氏(Freund s)完全佐剂0.1 mL造模。以“悬钟”“昆仑”为EA穴位,刺激参数为2~4 V,20~100 Hz,每天1次,每次20 min,连续6 d。以原位杂交等为检测方法,在EA治疗后观测大鼠痛阈、炎症局部δ阿片受体(DOR)mRNA的表达。结果:①EA可明显提高炎症痛大鼠的痛阈,EA组与模型组比较有显著性差异(P<0.01),而与正常组无显著性差异(P>0.05);②EA组炎症局部DOR mRNA的表达明显高于模型组(P<0.01)。结论:EA对AA大鼠有明显镇痛效应,且镇痛效应的产生与大鼠炎症局部的DOR mRNA表达增强有关。     

桑寄生总黄酮对大鼠佐剂关节炎模型的影响

目的:观察桑寄生总黄酮(TFHT)对佐剂性关节炎大鼠的药理作用。方法:雄性SD大鼠,测量1次/7 d足趾肿胀度及进行1次关节评分。第22天给药后将大鼠处死,取左后足踝关节(除正常给药组大鼠外)做病理切片观察;酶联免疫吸附测定法测定血清中TNF-α、IL-10、IL-6的含量。结果:TFHT高、中剂量组能够明显改善佐剂性关节炎组大鼠足趾肿胀程度及大鼠全身症状;降低免疫器官系数;降低血清中IL-6、TNF-α的含量,升高IL-10的含量;病理切片显示踝关节软骨破坏明显减轻,渗出物及血管翳生成减少或无;提示桑寄生总黄酮具有显著的祛风湿和逆转骨关节破坏的作用。结论:桑寄生总黄酮具有明显的祛风湿作用,其作用机制与降低血清中IL-6、TNF-α的含量,升高IL-10的含量有关。     

蜂针对佐剂性大鼠关节炎滑膜细胞因子基因表达的影响

目的 :检测IL 1 β、IL 6在类风湿性关节炎 (RA)的表达 ,探讨蜂针治疗RA的作用机理。方法 :将 40只大鼠随机分为四组 ,采用PCR微板核酸杂交 ELISA方法检测滑膜IL 1 β、IL 6的mRNA表达水平。结果 :蜂针组和激素组IL 1 β、IL 6的mRNA表达水平无显著性差异 ,而与模型组比较有显著性差异。结论 :RA早期IL 1 β、IL 6的mRNA表达水平是上调的 ,蜂针治疗后可以抑制其转录和表达 ,有利于RA病情的缓解     

麝香乌龙丸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织形态及MIF ICAM-1表达的影响

目的:观察麝香乌龙丸对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织形态及巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨麝香乌龙丸的抗炎作用是否与调节以上两种因子的表达有关。方法:建立AA大鼠模型,分正常组、模型组、麝香乌龙丸低剂量组、麝香乌龙丸高剂量组进行研究,HE染色观察关节滑膜组织形态学变化,免疫组织化学方法检测MIF、ICAM-1的表达。结果:麝香乌龙丸低剂量组、高剂量组均能减轻关节滑膜病理积分,均能降低MIF、ICAM-1在AA大鼠滑膜组织的表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),麝香乌龙丸低剂量组和高剂量组比较差异无统计学意义。结论:麝香乌龙丸抑制AA大鼠炎症进展的作用机制与调节MIF、ICAM-1的表达有关。