牛轮状病毒RT-LAMP检测方法的建立

建立一种适用于牛轮状病毒(BRV)的反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)的快速检测方法。根据GenBank中登录的BRV VP7基因序列,针对其保守区设计了4条引物,利用RT-LAMP方法进行检测,并优化了反应体系与反应时间,检测了该方法的特异性和灵敏度。结果表明,该方法在等温条件下只需要50min就能检测出结果,与普通RT-PCR相比,具有较短的检测时间、良好的特异性和较高的灵敏度。论文针对BRV建立的RT-LAMP快速检测方法操作简便、无需昂贵设备、结果可视,适用于BRV在基层的快速检测。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP检测方法的建立

针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因设计了2对特异性引物,建立了快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的环介导等温扩增(RT-LAMP)方法,并进行了酶切鉴定以及特异性、灵敏性和临床试验确定。酶切鉴定试验结果与RT-LAMP结果完全符合;特异性试验结果表明本研究所建立的RT-LAMP检测方法只针对猪繁殖与呼吸综合征病毒;灵敏度试验结果显示RT-LAMP是RT-PCR方法的100倍;临床试验中RT-LAMP方法的检出率与病毒分离的符合率为100%。本检测方法操作简单,不需要复杂的仪器,是适合基层和现场检测而无需送至诊断实验室的快速灵敏实用的分子生物学检测方法。     

基于牛呼吸道合胞体病毒F基因TB Green Ⅱ荧光定量PCR检测方法的建立

为了对牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus, BRSV)进行准确定量检测，针对BRSV F基因设计特异性引物，构建pMD19T-BRSV-gF重组质粒，以其为模板优化反应条件及反应体系，建立TB GreenⅡ荧光定量PCR方法并应用于临床BRSV检测。结果显示，针对BRSV F基因建立的TB GreenⅡ荧光定量PCR方法标准曲线线性关系良好，相关系数为0.995 2;灵敏度高，BRSV最低检测限达3.9×10¹ copies/μL;特异性良好，可特异性检测出BRSV,对牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒的扩增呈阴性；重复性好，批内和批间重复性试验变异系数均小于2%。对50份临床样品进行检测，荧光定量PCR对BRSV的阳性检出率(26%)明显优于常规PCR方法(14%)。结果表明针对BRSV F基因建立的TB GreenⅡ荧光定量PCR检测方法适合BRSV的临床检测。     

鸡传染性支气管炎病毒RT-LAMP快速检测方法的初步建立

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)引起的一种急性、高度接触传染性呼吸道疾病.该病造成了巨大的经济损失,使感染的肉鸡被淘汰,产蛋鸡产量下降. 目前针对IBV的检测方法主要有病原分离、RT-PCR、IBV Real-time PCR检测方法、基因芯片检测方法等,以上方法虽然也可达到检测结果准备、敏感、特异高的特点,但是操作过程复杂且需要较为昂贵的仪器,不适合在基层推广使用.针对上述方法的缺陷,本试验旨在建立一种快速、简便、经济实用的IBV检测方法.     

羊布鲁氏菌病的实验室常用检测方法对比

对于羊布鲁氏菌病的实验室检测,比较常用的方法包括虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)、补体结合试验(CFT)以及酶联免疫吸附试验(ELISA)等,这几种方法各有优势。笔者主要针对前两种检测方法,对比其检测的敏感性和准确性,希望能够对防控布鲁氏菌病起到一定的积极作用。     

猪急性腹泻综合征冠状病毒RT-LAMP快速检测方法的建立与应用

为建立简捷、灵敏的猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)检测方法,本研究针对SADS-CoV N基因片段保守区域设计特异性的反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,经条件优化后显示建立的SADS-CoV RT-LAMP检测方法最佳反应条件为64℃,50 min,初步建立SADS-CoV的RT-LAMP快速检测...     

几种布鲁氏菌病检测方法的比较

为研究虎红平板凝集试验(RBT)、全乳环状试验(MRT)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)及胶体金检测试纸条对布病的检测效果,本研究采用以上方法分别对感染地区和净化地区的牛群血清、羊群血清、牛群奶样进行了检测效果的比对。结果显示,针对牛群血清,RBT结果阳性率最高,iELISA与胶体金结果阳性率相似,表明RBT的敏感性较好,iELISA与胶体金检测试纸条的特异性较RBT好;针对羊群血清,iELISA与胶体金检测试纸条的敏感性和特异性较RBT好;针对牛群奶样,MRT结果阳性率低于全乳iELISA和胶体金检测试纸条。全乳iELISA和胶体金检测试纸条在试验中显示出具有较高的敏感性和特异性。     

基于部位组合HOG特征的行人检测

本文针对传统的基于梯度直方图特征(HOG)的行人检测耗时长的问题,提出结合头部与腿部特征的行人检测方法,根据腿部和头部的检测结果,综合采用部位约束,特征转化以及分类器阈值调整的方法对检测结果融合,大幅提升对于行人的辨识能力。     

反转录环介导等温扩增技术快速检测猪水疱病毒方法的建立

为了建立一种针对猪水泡病毒(SVDV)的反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),用于减少猪水泡病与口蹄疫因临床症状相似而造成的误诊,试验针对SVDV VP1基因序列设计4个LAMP引物,其中外侧引物用于SVDV PCR检测,并利用RT-LAMP和RT-PCR方法进行敏感性试验、特异性试验以及临床样品检测。结果表明:针对SVDV的RT-LAMP检测方法的敏感性是RT-PCR的10倍; RT-LAMP方法的特异性良好,与口蹄疫病毒无交叉反应;两种方法对临床样品检测的符合率为100%。说明试验建立的RT-LAMP方法具有敏感性高、特异性强、快速等特点,适合实验室和临床对SVDV的快速诊断。     

猪瘟病毒NASBA-RT-LAMP快速检测方法的建立

本研究基于核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)和反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种针对猪瘟病毒的,快速、灵敏、特异的两步法检测技术。该方法的检测灵敏度与反转录巢式PCR(RT-NestPCR)相当,最低能检测出46 pg/μL的病毒RNA。该方法的建立为猪瘟病毒的快速诊断提供了新思路。     

三探草坪的起源、演化及其概念——几种外文、外语“草坪”一词及其他

初步发掘、整理了英、德、拉丁、俄、日等五种文字、语言中草坪一词内积淀的有关草坪起源与演化的信息。三证草坪草的分化 ,草坪的起源与早期演化均属自然。人类活动于草坪中 ,认识、利用和发展了草坪 ,可以劲直、也可以曲折。人类利用草坪的方式 ,无论中、外大致相同 ,利用的水平与社会整体发展的水平大体相应。草坪由草地分化发育 ,是草地的一个特殊类型。     

加速溶剂萃取/超高效液相色谱-荧光法检测猪肉中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留

为给动物源性食品中同时检测氟苯尼考（FF）及其主要代谢产物氟苯尼考胺（FFA）的残留提供新的安全可靠的方法，本研究建立了猪肉中FF及FFA残留检测的加速溶剂萃取/超高效液相色谱-荧光检测（ASE/UPLC-FLD）法。试验采用乙酸乙酯：氨水（98：2，V/V）为提取剂，样品经加速溶剂萃取后浓缩，用乙酸乙酯饱和正己烷除脂，再经浓缩复溶后进行UPLC-FLD检测。结果表明，FF及其代谢产物FFA在添加浓度为9.8~400和3.2~400 μg/kg的范围内线性关系良好，相关系数（R²）分别为0.9993和0.9999。FF的检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别为3.3和9.8 μg/kg；FFA的LOD和LOQ分别为1.2和3.2 μg/kg。样品在LOQ、0.5 MRL、1.0 MRL和2.0 MRL加标水平下的平均回收率为82.92%~96.72%，相对标准偏差（RSD）低于3.11%。综上所述，加速溶剂萃取（ASE）方法省时、环保、提取效率高，超高效液相色谱-荧光检测（UPLC-FLD）检测方法高效、灵敏、回收率高，是符合检测标准的新方法。     

Viscoelastic materials in veterinary ophthalmology

Viscoelastic materials have applications in both human and veterinary ophthalmology and orthopedics and for humans in otorhinolaryngology, urinary incontinence, cosmetic surgery and cosmetics. In ophthalmology, viscoelasties are most commonly used in facilitating cataract and other anterior segment surgeries, but also have applications in posterior segment surgery and in the topical management of keratoconjunctivitis sicca. Viscoelastics are routinely used during anterior segment surgery in filling and maintaining the anterior chamber, repositioning the iris, and to coat and protect the corneal endothelium, and expand the capsular bag prior to intraocular lens implantation. Viscoelastics can also be essential in the management of intraoperative complications such as miosis, hemorrhage, posterior capsular tears, and vitreous presentation. The most common products available for ophthalmic use include various concentrations of sodium hyaluronate, chondroitin sulfate, and hydroxypropylmethylcellulose. The physical properties of each viscoelastic material are dependent on chain length, and intra-and interchain interactions. The rheologic properties of viscosity, pseudoplasticity, viscoelasticity, and surface tension dictate the usefulness of each material for a specific purpose.     

Field trials of a formulation containing moxidectin and 6 in 1 vaccines for sheep

Objective: To assess the efficacy and safety of a formulation containing moxidectin and 6 in 1 vaccine in sheep under field conditions.
Design: Efficacy and safety study.
Animals: Two hundred and five crossbred Merino lambs and two hundred and eight Merino ewes were used in the studies.
Procedure: A formulation was made for the simultaneous treatment of sheep with moxidectin and immunisation against clostridial diseases and caseous lymphadenitis. The efficacy against nematodes, vaccine response and safety were assessed.
Results: Effective control of nematodes and responses to antigens were achieved following subcutaneous administration. The formulation was safe to administer; occasional minor tissue reactions were evident, but no other adverse effects of treatment were observed in either pregnant ewes or lambs, using either the recommended dose, or an overdose of the formulation.
Conclusion: Administration of a formulation containing moxidectin, five clostridial antigens and caseous lymphadenitis antigen proved safe and efficacious under field conditions.     

储存环境对鸡蛋壳表面3种沙门氏菌存活与迁移的影响

为探明不同储存环境对蛋壳表面沙门氏菌存活和向蛋内迁移的影响,在鸡蛋壳表面人工接种肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌,试验环境设定温度4、25和37℃,环境相对湿度（RH）设定为50%和90%,在不同的储存环境下,各个时间点检测蛋壳表面沙门氏菌数量与蛋内容物中沙门氏菌污染情况。结果显示,4℃环境下可显著减少蛋壳表面3种沙门氏菌的数量;50% RH、25和37℃环境下蛋壳表面3种沙门氏菌的数量均逐渐下降;90% RH、25℃环境下蛋壳表面肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌在个别时间点出现数量反弹,其总体数量呈现下降趋势,37℃环境下鸡白痢沙门氏菌的数量快速下降,而肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌的数量先下降后上升,并保持在接种的数量级水平。鸡蛋内容物的检测结果显示,肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌在高温、高湿环境下更易被检出,而鸡白痢沙门氏菌始终未被检出。综上所述,低温、低湿可减少蛋壳表面沙门氏菌存活,并阻止其菌体向蛋内迁移,高温、高湿环境促进蛋壳表面沙门氏菌的增殖,增加了其向蛋内迁移的几率,不同血清型沙门氏菌在鸡蛋壳表面的存活和向蛋内迁移的侵袭力存在一定差异。     

Pemphigus: current therapy

Pemphigus is an autoimmune skin disease that can present in a variety of forms and can be a challenging disease to manage and treat. An overview of the different forms of pemphigus and diagnostics are discussed including pemphigus foliaceus (PF), pemphigus erythematosus (PE), panepidermal pustular pemphigus (PPP), pemphigus vulgaris (PV) and paraneoplastic pemphigus (PNP). Emphasis on therapy is presented. Included are the most current commonly used therapeutics (glucocorticoids, azathioprine, chlorambucil and tetracycline and niacinamide); current alternative therapeutics (cyclosporin and tacrolimus and mycophenolate mofetil) and additional alternative therapeutics (cyclophosphamide, chrysotherapy, dapsone, sulfasalazine and intravenous immunoglobulin (IVIG) therapy).     

犬瘙痒性皮肤病研究进展

瘙痒是犬皮肤病的典型临床症状之一，通常除瘙痒外还常伴脱毛、红斑等皮肤症状。瘙痒问题不仅困扰动物本身，也影响到饲养者的生活质量。瘙痒的发生机制复杂，目前国内外已有大量对人和犬瘙痒性皮肤病的临床和基础研究，揭示了瘙痒和神经免疫系统之间的关系，引入了"瘙痒-抓挠"循环的概念，且表明了免疫系统、皮肤屏障和神经系统的单独促进作用和交互作用是瘙痒产生的关键因素，任一环节的问题都可开启"瘙痒-抓挠"的恶性循环。临床上引起犬瘙痒的病因复杂，参照2007年由国际瘙痒研究论坛成员提出的瘙痒分类，将引起犬瘙痒的疾病根据病因类比对应分为了六大类，引起皮肤病性瘙痒的疾病分为了感染性、过敏性、肿瘤性等，其中在临床上最主要的是犬过敏性瘙痒。犬瘙痒性皮肤病的诊断方法及鉴别诊断多样，需从多方面对患病犬进行信息收集，按一定顺序进行排查和鉴别诊断。犬瘙痒性皮肤病的治疗周期长且疾病易反复，目前常用的西医药物存在副作用大、靶点单一、价格昂贵等不足，中药方剂成分复杂，有效成分多，可从多通路多途径治疗机制复杂的瘙痒，在犬瘙痒性皮肤病的治疗上具有优势和广阔前景。文章对瘙痒发生的机制、犬瘙痒性疾病的分类、诊断及中西医治疗思路等最新研究进展进行综述，以期为小动物临床瘙痒相关疾病的诊治提供参考依据。     

Genetic Analysis of Growth Traits in Muzaffarnagari sheep

Data on 4112 Muzaffarnagari sheep, maintained at the Central Institute for Research on Goats, Makhdoom, Mathura, India, and recorded between 1976 and 1999, were analysed to study the growth-related traits and their genetic control. The average weights at birth, and at 12 months of age were 3.1±0.2 and 28.0±0.6 kg, respectively. The pre- and post-weaning average daily weight gains were 127.8±3.3 g and 49.4±1.6 g, and the associated growth efficiencies were 3.59±0.08 and 0.95±0.03. Significant differences associated with the year of lambing were observed in body weight, weight gain and efficiency in weight gain at different stages of growth. The lambs born in the dam's second parity were generally of heavier weight and higher daily weight gain than those born in other parities. Males were heavier and had a higher weight gain than females at almost all stages of growth and the differences tended to increase with age. Single-born lambs had a distinct advantage over those born in multiple births at all stages of growth. The heritabilities of all body weights, weight gains and efficiency in weight gains at different stages of growth were moderate (0.18–0.26), except for birth weight, which was of low heritability (0.068±0.01). The phenotypic and genetic correlations among the different body weights were positive and high, except for birth weight. The genetic correlation of the pre- and post-weaning average daily weight gains with body weights were high and positive.     

饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马营养物质消化代谢和血浆生理生化指标的影响

本试验旨在探讨饲粮钙、磷水平对泌乳期伊犁母马体重、胸围、营养物质表观消化率和代谢以及血浆生理生化指标的影响,为确定泌乳期伊犁母马钙、磷适宜需要量提供参考。选取年龄(11~14周岁)、体重[(371±21)kg]和胎次(4~6胎)接近的处于第2泌乳月的伊犁母马25匹,随机分为5组,每组5匹。第3泌乳月Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组母马钙饲喂水平分别为45.03、48.50、51.96、55.43和58.89 g/d,磷饲喂水平分别为30.05、32.03、34.01、35.99和37.97 g/d;第4和第5泌乳月Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组母马钙饲喂水平分别为43.60、46.42、49.25、52.07和54.92 g/d,磷饲喂水平分别为27.63、29.24、30.86、32.47和34.12 g/d。试验为期90 d,每30 d为1个试验周期。结果显示:饲粮钙、磷水平对母马体重和胸围以及干物质、有机物和中性洗涤纤维的表观消化率均无显著影响(P0.05)。Ⅴ组的粗蛋白质表观消化率最高,分别比Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组提高12.26%、12.37%和18.28%(P0.05);Ⅰ组的总能表观消化率最高,分别比Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组提高8.32%、7.19%和11.24%(P0.05);Ⅰ和Ⅲ组的钙表观消化率分别较Ⅳ组提高17.74%和14.49%(P0.05);Ⅲ组的磷表观消化率最高,比Ⅱ组提高35.39%(P0.05)。饲粮钙、磷水平对母马氮和钙代谢均无显著影响(P0.05)。Ⅰ组的代谢能较Ⅱ和Ⅳ组分别增加7.95%和11.33%(P0.05);Ⅰ组的能量沉积率较Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组分别提高9.30%、8.50%和12.10%(P0.05);Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ组的磷沉积量显著高于Ⅱ组(P0.05),其中Ⅲ组在各组中最高,比Ⅱ组提高42.59%;Ⅰ和Ⅲ组的磷沉积率显著高于Ⅱ和Ⅳ组(P0.05),其中Ⅰ组在各组中最高,分别比Ⅱ和Ⅳ组提高49.67%和46.32%;Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ组的磷利用率显著高于Ⅱ组(P0.05),分别比Ⅱ组提高17.74%、18.80%和16.79%。饲粮钙、磷水平对血浆中离子钙、磷、降钙素、骨钙素、胎盘催乳素、垂体泌乳素、雌二醇、孕酮和雌酮水平均无显著影响(P0.05)。Ⅲ组的血浆中甲状旁腺素水平显著高于Ⅳ和Ⅴ组(P0.05),分别提高70.61%和47.58%。由此得出,Ⅰ组饲粮(在第3泌乳月钙、磷饲喂水平分别为45.03和30.05 g/d,第4和第5泌乳月钙、磷饲喂水平分别为43.60和27.63 g/d)即可满足伊犁母马泌乳期的钙、磷需要。适宜的饲粮钙、磷水平有助于维持较高水平的能量和钙的表观消化率以及能量和磷的沉积和利用。