QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速检测动物源性食品中14种喹诺酮类药物残留

目的 建立14种喹诺酮药物残留的QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法并应用于动物源性食品检测.方法 鸡肉样品经0.1 moL/L EDTA-Mcllvaine缓冲液和1％甲酸-乙腈提取.然后利用QuEChERS净化,再利用氮气吹至近干,用0.1％甲酸-乙腈∶水(1∶9)定容.随后,取滤液分析,利用UPLCTM ...     

液相色谱荧光法测定鸡蛋中喹诺酮类药物残留

喹诺酮类药物具有抗菌谱广、抗菌作用强、使用方便、价格相对较低等优点,自1978年问世以来,临床上广泛应用于治疗感染性疾病.后来,该药又扩大应用到养殖业上,用来预防和治疗动物的细菌性感染.喹诺酮类药物由于代谢缓慢,容易残留于肌肉、肝脏、肾脏等机体组织内[J].动物体内残留的喹诺酮类药物对消费者构成潜在危害,除了引起过敏反应外,还会对中枢神经系统产生副作用.消费者如果经常食用这些动物源产品,还会导致对抗生素产生耐药性.     

动物源性食品中喹诺酮类药物残留分析进展

喹诺酮类（QN5）药物广泛地应用于治疗人和动物的感染性疾病，主要的作用机制是抑制DNA拓扑酶Ⅱ。此类药物抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强，而且价格低廉。因此，已成为兽医临诊和水产养殖业中最重要的抗感染药物之一。     

超高效液相色谱-串联质谱内标法同时测定动物源性食品中15种喹诺酮类药物

目的 建立动物源性食品中15种喹诺酮类药物残留量的超高效液相色谱-串联质谱测定方法.方法 动物样品匀浆后,经EDTA-Mcllvaine缓冲溶液提取、HLB固相萃取柱净化,采用CORTECS UPLC C 18柱(100 mm×2.1 mm,1.6 μm)分离,以0.1％甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,正离子模式...     

超高效液相色谱-串联质谱法分析动物组织中7种喹诺酮类药物残留

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC/MS/MS)测定动物性食品中残留的7种喹诺酮类药物:培氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、环丙沙星、二氟沙星、单诺沙星、氧氟沙星。方法:样品经Mellvaine缓冲液超声提取,高速离心后,用HLB固相萃取拄净化后上UPLC/MS/MS,用多反应监测模式检测,外标法定量。结果:7种喹诺酮类药物在浓度1μg/L～100μg/L范围内线性关系良好,相关系数均达到r>0.9985。检出限0.1μg/kg～1μg/kg。结论:本方法简便、快速、定性准确,适合动物性食品中残留的7种喹诺酮类药物残留测定。     

我国动物性食品喹诺酮类药物残留检测及控制限量的部门差异

分析我国动物性食品中喹诺酮类药物残留标准及有关部门的监管情况,了解相关监管部门之间的限量差异.汇总和对比分析我国目前动物性食品中喹诺酮类兽药残留的限量标准以及我国有关部门对动物性食品中喹诺酮类药物的抽检或监测计划.农业农村部规定停止使用的洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星药物指标的现有判定标准存在缺失,且我国不同食...     

水产品中多种氟喹诺酮类药物残留的HPLC测定法

目的建立多种喹诺酮类（FQs）药物同时检测的高效液相色谱方法，建立水产品中（FQs）药物残留提取的前处理方法。方法研究水产品中喹诺酮类药物检测的最佳提取条件，液相色谱条件和荧光检测参数等。结果在该实验条件下，7种FQs类药物检测线性范围0.01～0.50mg/L（沙拉沙星0.10-5.0mg/1），最低检出限0.08-0.36μg/kg，变异系数1.5％～8.6％，样品加标回收率64.0％-93.4％。结论该方法能同时检测水产品中多种（FQs）药物残留，简单、快速、精密度较好、准确灵敏度较高，结果较满意。     

动物性食品中喹诺酮类抗生素残留测定

目的建立一种准确、快速、灵敏,能同时测定动物性食品中氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星3种喹诺酮类(QNs)抗生素残留的方法。方法样品匀质后加入酸化乙腈,超声提取,用正己烷萃取除去杂质,乙腈层浓缩后,加入乙腈-水(8:2)溶解残渣,采用高效液相色谱-紫外检测法检测。流动相为乙腈+0.01 mol/L磷酸二氢钠溶液(pH=4.0),采用梯度洗脱,检测波长279 nm。结果氧氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星色谱图分离良好,峰形尖锐对称,相关系数均>0.999 6;3种不同加标浓度的氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星相对标准偏差均<5%,重现性好,加标回收率均>85%;氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星检测限分别为2.7×10^-3、1.4×10^-3、6.5×10^-4 μg/mL。结论高效液相色谱-紫外检测法快速、准确,可满足动物食品中3种QNs类抗生素残留的同时批量检测。     

喹诺酮类药物及不良反应概述

喹诺酮类药物是近年来迅速发展起来的抗菌药物，具有抗菌谱广、抗菌力强、结构简单、给药方便，与其它常用抗菌药物无交叉耐药性，疗效价格比高等优势，因而愈来愈受到各国的重视，成为竞相生产和应用的热点药品，是抗感染药物中开发最活跃的领域之一。     

烟台市806份动物源性食品中违禁药物及兽药残留检测

目的 了解烟台市动物源性食品中违禁药物及兽药残留的污染情况。方法 采用随机采样的方法,于2012-2017年于烟台辖区内养殖环节、运输环节、流通环节和餐饮环节,采集动物源性食品806份,依据GB/T 22338-2008和《2013年国家食品污染和有害因素风险工作手册》中兽药及违禁药物检测的标准操作程序进行检测。结果 违禁药物及兽药残留总体检出率为261%(21/806)。13份样本中9种违禁药物检出,违禁药物样本检出率为161%(13/806)。其中2份鸡肉中均检出氧氟沙星和诺氟沙星,检出率分别为571%(2/35)和571%(2/35)。2份鸡蛋中检出强力霉素,检出率为8%(2/25)。2份猪肉、2份牛羊肉、1份动物内脏存在β-受体激动剂的检出,检出率分别为247%(2/81)、351%(2/57)和161%(1/62)。2份双壳类和2份鱼类水产品中有硝基呋喃代谢物检出,检出率分别为5%(2/40)和247%(2/81)。10份样本中4种兽药残留检出,兽药残留样品检出率为124%(10/806)。分别为8份鸡肉中检出达氟沙星和环丙沙星,检出率分别为2286%(8/35)和571%(2/35)。2份鸡肉中检出强力霉素和金霉素,检出率分别为8%(2/25)和4%(1/25)。结论 烟台市动物源性食品中违禁药物及兽药存在一定程度的残留污染,表明存在违禁药物及兽药滥用现象,建议强化规范生产和监督管理,保障食品安全。     

沙门菌属parE基因对氟喹诺酮类药物耐药性分析

目的 分析78株耐氟喹诺酮类药物的沙门菌属携带parE基因情况及对氟喹诺酮类耐药性的影响.方法 用PCR方法扩增沙门菌属parE基因的序列,并采用基因库在线比对软件BLAST程序进行比对分析.结果 78株耐氟喹诺酮类药物的沙门菌属中共检测到32株含有parE基因,选择其中10株阳性株进行测序,结果显示其74、107、115位碱基出现突变.结论 parE基因可能是引起沙门菌属耐氟喹诺酮类药物的重要原因,在10株沙门菌属中携带的parE基因中共检出3个点突变,这些突变的产生为沙门菌属对氟喹诺酮类抗菌药物的抗药性以及交叉耐药产生了影响.     

合理应用喹诺酮类抗菌药物

目的了解喹诺酮类抗菌药物的作用机制,不良反应及使用时的注意事项。方法对喹诺酮类抗菌药物在临床使用中的注意事项及所涉及的不良反应进行汇总。结果随着临床使用喹诺酮类抗菌药物的增加,药物的不良反应也随着上升,其不良反应发生率<2.0%,肾损害的发生率为0.9%~4.3%。结论在广泛应用喹诺酮类抗菌药物的同时,要更多地关注其安全性。     

鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性分析

目的 分析临床分离的鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药特点及耐药机制.方法 采用K-B纸片法测定33株鲍氏不动杆菌对喹诺酮类等21种抗菌药物的耐药性;用PCR技术扩增33株鲍氏不动杆菌的gyrA基因的耐药决定区,PCR产物经纯化后测序与GenBank中的标准序列比较,分析其突变情况.结果 33株鲍氏不动杆菌中,8株对环丙沙星耐药,占24.2％,4株对左氧氟沙星耐药占12.1％;对环丙沙星耐药的8个菌株均有gyrA基因突变,导致氨基酸变异为Ser-83→Leu,其中包括对左氧氟沙星耐药的4个菌株;所有对环丙沙星敏感的菌株未出现gyrA基因突变.结论 gyrA基因突变决定鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药.     

化妆品中喹诺酮类抗生素的液相色谱-串联质谱测定法

目的 建立同时测定化妆品中的喹诺酮类抗生素((噁)喹酸、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、司帕沙星、萘啶酸、奥比沙星)的液相色谱-串联质谱法.方法 样品以甲醇-水(0.3％甲酸)(体积比50∶50)溶液超声提取,离心分离,以0.3％甲酸水-乙腈溶液为流动相,LC-MS/MS测定喹诺酮类抗生素的含量.结果 该方法的线性范围为0.5～500 μgml,相关系数＞0.995,加标10～100μg/kg时,回收率为82.3％～106.0％,RSD为1.0％～8.9％,检出限为0.1～0.2μg/kg.结论 该方法灵敏、快速、准确,适用于化妆品中喹诺酮类抗生素的检测.     

苏州市动物性食品中喹诺酮类抗生素的残留状况

目的了解苏州市市售动物性产品中喹诺酮类抗生素的残留现状。方法 2011年6月—2012年3月随机选择苏州市农贸市场上常见动物性食品及苏州市特色水产品,共采集175份样品,采用超高效液相色谱/质谱进行喹诺酮类抗生素检测。结果 175份样品中,阳性检出50份,总检出率达28.6%,不同种类(鱼虾类、猪肉和猪肝类、鸡鸭类、蟹类)动物性食品中喹诺酮类抗生素检出率相比,差异无统计学意义(χ2=1.42,P0.05)。50份阳性样品中,恩诺沙星检出比例最高,占47.4%;氧氟沙星其次,占21.1%。结论苏州市市售动物性产品存在部分抗生素残留,需要加强水产品、禽肉产品养殖、销售的管理。     

质粒介导铜绿假单胞菌对喹诺酮类耐药机制的研究

目的 探讨铜绿假单胞菌临床分离株中是否存在质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)机制.方法 收集2010年1-12月中山大学附属第三医院临床分离的无重复铜绿假单胞菌256株,采用微量肉汤稀释法测定环丙沙星最低抑菌浓度(MIC),应用PCR方法扩增PMQR基因qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、aac(6')-Ib-cr、qepA,并对PCR阳性产物进行测序分析以确定基因亚型.结果 256株铜绿假单胞菌对环丙沙星的耐药株和敏感株分别为65株和180株,MIC50和MIC90分别为0.5 μg/ml、16 μg/ml;全部菌株中只有1株检测到qnrA基因,其PCR阳性产物经测序证实为qnrA1亚型,环丙沙星对该菌株的MIC为2μg/ml;未检测到qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、aac(6′)-Ib-cr和qepA基因.结论 国内首次从铜绿假单胞菌中发现qnrA1基因,该耐药基因介导细菌对环丙沙星低水平耐药,PMQR尚未成为铜绿假单胞菌对喹诺酮类耐药的主要机制之一.     

铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物耐药的分子机制研究

目的:研究铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物耐药的分子机制,为临床抗感染治疗提供依据。方法:用PCR法检测染色体介导的喹诺酮类耐药基因gyrA、gyrB、parC、parE和质粒介导的喹诺酮类耐药基因qn-rA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qepA、aac(6’)-Ib-cr、oqxA和oqxB,并对gyrA和parC阳性结果进行测序分析。结果:98株耐环丙沙星的铜绿假单胞菌中未检出parE、qnrC和qnrS基因。gyrA、gyrB和parC的阳性率分别为96.9%、87.8%和75.5%。测序证实84株菌(85.7%)发生gyrA或parC基因突变。90株菌(91.8%)携带质粒介导的耐药基因,qnrA、qnrB、qnrD、qepA、aac(6’)-Ib-cr、oqxA和oqxB的阳性率分别为31.6%、86.7%、15.3%、11.2%、53.1%、8.2%和26.5%,其中qnrB和aac(6’)-Ib-cr具有高携带率。结论:染色体介导的喹诺酮类耐药基因突变以及质粒携带qnr、qepA、aac(6’)-Ib-cr和oqxAB耐药基因是铜绿假单胞菌耐喹诺酮类药物的主要机制。首次在铜绿假单胞菌中发现qnrB基因和qnrD基因。     

泛耐药鲍氏不动杆菌喹诺酮类耐药相关基因研究

目的:调查泛耐药鲍氏不动杆菌喹诺酮类耐药相关基因的存在情况。方法:收集2008年1月-2008年12月住院患者标本中分离的泛耐药鲍氏不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析6种喹诺酮类耐药相关基因。结果:20株泛耐药鲍氏不动杆菌均存在gyrA基因第83位TCA→TTA突变,其它5种基因均未检出。结论:本组20株泛耐药鲍氏不动杆菌耐喹诺酮类药物与gyrA突变和AdeABC外排泵相关。     

绍兴地区肠道外气单胞菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药机制

目的了解浙江绍兴市人民医院肠道外分离气单胞菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药现状,及其主要耐药机制。方法对临床分离的50株肠道外气单胞菌菌株进行喹诺酮类药物敏感性测试,用PCR扩增喹诺酮类耐药基因gyrA、parC、qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac(6')-Ib-cr,基因序列比对分析该地区gyrA和parC基因的突变情况,分析肠道外气单胞菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药表型和耐药基因的关联性。结果绍兴地区肠道外气单胞菌对萘啶酸(NA)的耐药率已高达82.0%(41/50),对环丙沙星(CIP)和左氧氟沙星(LVX)的耐药率都在50.0%左右。27株(54.0%)菌株对两种以上喹诺酮类药物耐药。qnrS和aac(6')-Ib-cr的阳性率分别为52.0%和18.0%。qnrS基因阳性菌株对NA、CIP、LXV耐药率均显著高于阴性菌株(P<0.05);aac(6′)-Ib-cr基因阳性菌株对CIP和LVX的耐药率显著高于阴性菌株(P<0.05),但对萘啶酸耐药性无明显差异。未检测出qnrA、qnrB和qepA基因。gyrA中主要存在Ser83→Ile,parC中主要存在Ser80→Ile变异。结论绍兴地区分离的肠道外气单胞菌对喹诺酮类药物表现高耐药性,染色体介导的靶位基因突变为其主要耐药机制,目前突变较单一。     

广州市居民动物性膳食中喹诺酮和四环素类抗生素残留暴露评估

目的 评估广州市居民动物性膳食中喹诺酮和四环素类抗生素残留的暴露量,估算动物性膳食中这2类抗生素暴露引起的健康风险。方法 2013 - 2014年采用超高效液相色谱串联质谱法对广州市动物性食品中喹诺酮和四环素类抗生素含量进行监测,结合2007年居民营养与健康状况调查中食物摄入量数据,利用点评估的方法对广州市居民动物性膳食中这2类抗生素暴露状况进行评估。结果 广州地区人群肉类膳食中喹诺酮和四环素类抗生素的97.5百分位最高暴露量值分别为7.55 ng/(kg·bw·d)和3.71 ng/(kg·bw·d);蛋类的膳食97.5百分位值最高暴露量分别为127 ng/(kg·bw·d)和31.8 ng/(kg·bw·d),喹诺酮和四环素类风险商最大值分别为0.06451和0.00065,均远远小于1。结论 广州居民对于动物性膳食中喹诺酮和四环素类抗生素的暴露是安全的,不存在健康风险。