缺氧对大鼠肺泡上皮细胞凋亡及缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的 探讨氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)化学缺氧对大鼠肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell,AEC)凋亡的影响及相关凋亡蛋白缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-talpha,HIF-1α)的表达变化及意义.方法 将AEC进行体外培养,分4组,每组6个样本.缺氧4 h组:选用化学缺氧物质CoCl2 500/μmol/L为作用浓度,诱导AEC缺氧,共培养4 h;缺氧24 h组:与CoCl2共培养24 h;缺氧48 h组:与CoCl2共培养48 h;常氧对照组:不做任何特殊处理.利用荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞凋亡率,透射电子显微镜进行细胞凋亡的形态学观察,Western印记法检测HIF-1α蛋白的表达情况.结果 (1)荧光显微镜的结果 显示缺氧4、24、48 h组细胞凋亡率分别为(5.83±0.76)%、(15.00±3.28)%和(51.50±3.00)%,均高于常氧对照组[(1.50±0.50)%](P＜0.05);(2)流式细胞仪的结果 与荧光显微镜的结果一致;(3)透射电子显微镜可以观察到AEC凋亡的形态学改变,缺氧24 h显著;(4)缺氧4、24、48 h组HIF-1α蛋白的表达分别为0.69±0.035、1.02±0.044和0.71±0.046,均高于常氧对照组(0.21±0.026)(P＜0.01);(5)各组HIF-1α蛋白变化与荧光显微镜及流式细胞仪检测的细胞凋亡率变化均呈正相关(r=0.484,P=0.016;r=0.713,P=0.009).结论 缺氧对大鼠AEC的生存有抑制作用,这种抑制作用与缺氧引起的细胞凋亡有关;HIF-1α可能参与了缺氧诱导AEC凋亡的发生,而AEC凋亡可能又参与了缺氧肺损伤的发病.     

紫花牡荆素体外抑制人卵巢癌HO-8910细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的:探讨紫花牡荆素(casticin)体外抑制人卵巢癌HO-8910细胞增殖和诱导凋亡的效应及其机制。方法:MTT法检测casticin对人卵巢癌HO-8910细胞增殖的抑制;Hoechest33258染色观察细胞凋亡形态学改变;流式细胞术(FCM)检测casticin处理HO-8910细胞的凋亡率;Western blotting分析caspase-3、CyclinB1、p21蛋白表达变化。结果:casticin对人卵巢癌HO-8910细胞增殖有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性。经casticin作用48h后HO-8910细胞表现出典型的凋亡形态特征,并剂量依赖性地增加亚二倍峰,降低CyclinB1蛋白表达,增高caspase-3和p21表达。结论:casticin通过降低CyclinB1表达、活化p21和caspase-3抑制HO-8910细胞增殖并诱导凋亡。     

RelA反义寡核苷酸对卵巢癌细胞株COC1凋亡的影响

目的　探讨RelA反义寡核苷酸对卵巢癌细胞株COC1凋亡的影响。方法　应用不同浓度的肿瘤坏死因子 (TNF)α或泰素结合RelA反义寡核苷酸 ,分别处理COC1细胞株 ;应用间接免疫荧光、Westernblot、流式细胞术、DNA凝胶电泳等方法 ,检测RelA活化及COC1细胞凋亡。结果　 5 0nmol/L的泰素单独及其与RelA反义寡核苷酸联合处理COC1细胞 12h后 ,COC1细胞的凋亡率分别为 (12 3± 0 6 ) %、(2 7 4± 0 5 ) % ,两者比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;2 4h后 ,COC1细胞凋亡率分别为 (13 0± 0 5 ) %、(31 7± 0 3) % ,两者比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1)。 5 0 μg/L的TNFα单独及其与RelA反义寡核苷酸联合处理COC1细胞 12h后 ,COC1细胞凋亡率分别为 (13 2± 0 4 3) %、(30 8± 0 3) % ,两者比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;同样 10 0 μg/L及 2 5 0 μg/LTNFα单独及其与RelA反义寡核苷酸联合处理COC1细胞的凋亡率相比 ,差异均有极显著性 (P <0 0 1)。结论　RelA反义寡核苷酸可增加TNFα或泰素诱导卵巢癌细胞凋亡的敏感性。     

卡铂诱导卵巢癌细胞凋亡与端粒酶活性、hTERT基因表达改变的关系

目的研究卡铂诱导的卵巢癌细胞凋亡与端粒酶活性、hTERT基因表达改变的关系。探讨检测端粒酶活性和hTERT基因表达作为铂类药物治疗卵巢癌细胞的监测指标的潜在应用价值。方法在卵巢癌细胞HO-8910、COC1中采用PCR—ELISA方法检测端粒酶活性、RT—PCR半定量方法检测hTERT基因mRNA的表达。采用流式细胞仪分析Annex—V—Fluos染色的肿瘤细胞细胞凋亡情况。结果不同浓度卡铂1μM，10μM和100μM诱导卵巢癌细胞凋亡后，卵巢癌细胞HO-8910、COC1中的端粒酶活性和hTERT基因的表达浓度呈现出剂量依赖性和时间依赖性的下降。端粒酶活性和hTERT基因的表达的下降与卡铂诱导的卵巢癌细胞凋亡增加呈负相关（R=0．613，P=0．0347）。而且hTERT基因表达的改变比端粒酶活性更为敏感。结论检测端粒酶活性和hTERT基因的表达程度有助于判定卡铂诱导的卵巢癌凋亡的敏感性。     

低氧通过HIF-1α和HIF-2α上调SKOV3细胞Syndecan-1的表达

目的:探讨缺氧环境下,卵巢癌细胞株SKOV3中HIF-1α、HIF-2α和Synde-can-1在转录及蛋白水平的表达及相互作用关系。方法:利用MatInspector在线分析软件,分析Syndecan-1的转录因子结合位点。在CoCl2诱导缺氧环境以及低氧诱导因子(HIF)抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)的干预下,实时荧光定量RT-PCR检测HIF-1α、HIF-2α及Syndecan-1 mRNA水平的表达;Western blot检测HIF-1α、HIF-2α蛋白水平的表达。结果:Syndecan-1的转录因子结合位点中有3处HIFF(低氧诱导因子家族)/HIF保守序列。缺氧时,HIF-1αmRNA降低(P<0.05),HIF-1α蛋白、HIF-2αmRNA和蛋白、Syndecan-1mRNA水平均升高(P<0.05)。Rapamycin不能抑制CoCl2模拟缺氧条件下HIF-1α的蛋白表达,可抑制HIF-2α的表达。Syndecan-1 mRNA动态变化曲线和HIF-1α及HIF-2α蛋白水平的动态变化曲线一致。结论:低氧可诱导HIF-1α和HIF-2α的表达,并通过HIF-1α、HIF-2α途径增强Syndecan-1的表达。     

ILK-ASODN对卵巢癌HO-8910细胞增殖及凋亡影响的研究

目的:探讨脂质体介导的整合素连接激酶(ILK)反义寡核苷酸(ASODN)对卵巢癌细胞的增殖及诱导其凋亡的作用。方法:选用ILK的反义寡核苷酸(ILKASODN)、正义寡核苷酸(ILK-SODN)分别转染卵巢癌HO-8910细胞株。实验分为6组:空白对照组(A组)、脂质体对照组(B组)、ILK-SODN 100nmol/L组(C组)和ILK-ASODN60nmol/L、80nmol/L、100nmol/L组(分别为D、E、F组)。应用四唑单钠盐(WST-1)法检测转染后第24h、48h、72h、96h和120h的体外增殖抑制率;转染120h后,采用Annexin VFITC和碘化丙啶(PI)联合标记法测定细胞凋亡情况。结果:(1)与对照组比较,转染ILK-ASODN后,卵巢癌细胞生长受到明显抑制(P0.05),ILK-ASODN各浓度组分别于96h、72h、48h开始出现明显抑制作用,且抑制率随转染浓度的增高而增高;转染ILKSODN组的细胞生长也受到抑制(P0.05),但抑制效果低于ILK-ASODN各组。(2)转染ILK-ASODN后,细胞凋亡率增高(P0.05),其凋亡率随转染浓度的增高而增高;转染ILK-SODN后细胞凋亡率也有所增高,但低于转染ILK-ASODN组(P0.05)。结论:ILKASODN可能通过诱导细胞凋亡来实现抑制卵巢癌细胞的生长效应,从而最终达到抑制肿瘤发展、转移和恶化的目的。     

Survivin反义寡核苷酸诱导人卵巢癌耐药细胞株COC_1/DDP凋亡的实验研究

目的 :探讨经脂质体介导的survivin反义寡核苷酸诱导人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP凋亡的作用。方法 :将脂质体介导的survivin反义寡核苷酸 (survivin ASONs)作用于COC1/DDP细胞 ,采用一步法RT PCR检测survivin、bcl 2mRNA的表达 ,并进行细胞核DNA梯形电泳 ,检测caspase 3活性 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。结果 :经survivin ASONs作用后COC1/DDP细胞中survivin等抗凋亡基因的表达下降 ,细胞核DNA电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带 ,caspase 3活性增加且呈时间依赖性 ,细胞凋亡率达33.18% ,细胞周期G2 /M及S期明显下降而多阻滞于G0 /G1期 ,与对照组差异有显著性(P <0 .0 5 )。结论 :survivin ASONs反义寡核苷酸能诱导人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP细胞凋亡 ,且效果显著     

雷公藤内酯醇对耐顺铂人卵巢癌细胞株(COC1/DDP)体外活性影响机制的初步探讨

目的:通过研究雷公藤内酯醇(TP)对COC1/DDP体外活性的影响,初步探讨雷公藤内酯醇促进COC1/DDP细胞凋亡的机制,为TP成为治疗晚期或耐顺铂卵巢癌药物提供实验依据。方法:采用MTT法检测顺铂(DDP)、TP及两者联用对COC1/DDP的生长抑制作用;用透射电镜观察TP作用24h后细胞超微结构的变化;采用流式细胞术分析不同浓度TP对COC1/DDP细胞周期和细胞凋亡的影响;用DNA电泳分析用药后细胞基因组DNA断裂状况;以免疫组化分析TP对Caspase-7蛋白表达的影响。结果:DDP在24h、48h和72h三个时间段对COC1/DDP细胞的半数抑制量(50%concentration of inhibi-tion,IC50)分别为5.567μg/ml、2.866μg/ml和1.161μg/ml,其对COC1/DDP细胞增殖表现出浓度-时间依赖性的抑制作用(P<0.05);TP可抑制COC1/DDP细胞增殖,其抑制率呈浓度-时间依赖性(P<0.05);TP作用细胞24h后,电镜下可见凋亡小体形成;流式细胞术分析表明,各浓度TP组G1期细胞明显升高,细胞凋亡率呈浓度依赖性(P<0.05);DNA电泳分析可见细胞凋亡特有的DNA断裂形成的"梯形"条带;免疫组化表明Caspase-7参与了TP诱导COC1/DDP细胞凋亡过程。结论:TP对COC1/DDP具有明显的杀伤和促凋亡作用,凋亡机制与Caspase-7蛋白表达上调有关。     

缺氧微环境下HIF-1α对卵巢癌A2780细胞侵袭转移的影响及分子机制

目的:探讨缺氧微环境下HIF-1α在卵巢癌细胞系A2780侵袭转移中的作用。方法:常氧及缺氧微环境培养卵巢癌A2780细胞;RT-PCR及Western blot法检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA及蛋白的表达;siRNA干扰HIF-1α表达,检测干扰效率及MMP13表达的变化;Transwell小室侵袭实验检测siRNA干扰前后卵巢癌细胞侵袭转移能力。结果:缺氧诱导卵巢癌A2780细胞HIF-1α及MMP13表达上调,细胞侵袭数明显增多;siRNA能有效抑制HIF-1α表达及缺氧引起的MMP13增多,降低细胞侵袭能力。结论:HIF-1α通过调控MMP13表达增强缺氧环境下卵巢癌细胞的侵袭能力。     

缺氧下5-脂氧合酶在卵巢癌中的表达及意义

目的:检测缺氧环境下5-LOX在卵巢癌中的表达及与临床参数间的关系,探讨其在卵巢癌发生发展及治疗中的意义。方法:免疫组化检测56例卵巢癌组织中5-LOX与HIF-1α表达,并分析5-LOX表达与卵巢癌临床参数之间的关系。体外将人卵巢癌SKOV3细胞在缺氧环境下培养0、12、24h和48h,分别提取RNA和蛋白。qRT-PCR法和Western blot法分别检测5-LOX mRNA和蛋白表达;ELISA法检测缺氧环境下卵巢癌细胞5-LOX代谢产物5-HETE的变化。结果:5-LOX与HIF-1α表达具有明显的相关性,其表达水平与患者的淋巴结转移、远处转移和临床分期密切相关。缺氧条件下培养的SKOV3细胞的5-LOX在转录和蛋白水平均表达升高;缺氧条件下卵巢癌细胞培养上清的5-HETE较常氧条件下明显升高。结论:缺氧能促进卵巢癌5-LOX表达及增加代谢产物5-HETE的产生,提示5-LOX可作为治疗卵巢癌的潜在靶点,这为卵巢癌的发病机理研究和诊治提供了新的思路与方法。     

Hypoxia promotes vasculogenic mimicry formation by inducing epithelial–mesenchymal transition in ovarian carcinoma

Objectives

The functions of hypoxia and subsequent hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) activation in vasculogenic mimicry (VM) are currently unclear. This study aimed to investigate the effects of hypoxia on VM formation in ovarian cancer, and explore the possible mechanism involved.

Methods

The expression levels of HIF-1α, E-cadherin, vimentin, Twist1, Slug, and VE-cadherin proteins were analyzed by immunohistochemistry in 71 specimens of epithelial ovarian cancer. The results were correlated with VM and survival analysis. We used a well-established in vitro model of a three-dimensional culture to compare VM formation under hypoxia and normoxia in ovarian cancer cell lines SKOV3 and OVCAR3. To explore the potential mechanism, we examined the effects of hypoxia on the mRNA and protein expression levels of both E-cadherin and vimentin.

Results

HIF-1α expression was correlated with loss of E-cadherin expression and up-regulated vimentin expression in 11 of the 18 VM-positive patients. Ovarian cancer with evidence of VM was significantly more likely to have high Twist1, Slug, and VE-cadherin expression levels. VM was observed in vitro under hypoxia. The ovarian cancer cells presented morphological epithelial–mesenchymal transition (EMT)-like changes (more fibroblastoid morphology and loss of cellular cohesiveness) under hypoxic conditions. The mRNA and protein levels demonstrated the induction of EMT after hypoxia. Clinicopathological analysis revealed that both VM and HIF-1α expression levels presented shorter survival durations.

Conclusions

Hypoxia contributed to VM formation by inducing EMT. These results may offer new insights for consideration in ovarian cancer treatment strategies.     

Succinate dehydrogenase subunit B inhibits the AMPK-HIF-1α pathway in human ovarian cancer <Emphasis Type="Italic">in vitro</Emphasis>

Background

Ovarian carcinoma is one of the most common gynecological cancers with high mortality rates. Numerous evidences demonstrate that cancer cells undergo metabolic abnormality during tumorigenesis in tumor microenvironment and further facilitate tumor progression. Succinate dehydrogenase (SDH or Complex II) is one of the important enzymes in the tricarboxylic acid (TCA) cycle. Succinate dehydrogenase subunit B (SDHB) gene, which encodes one of the four subunits of SDH, has been recognized as a tumor suppressor. However the role of SDHB in ovarian cancer is still unclear.

Methods

Using the SDHB specific siRNA and overexpression plasmid, the expression of SDHB was silenced and conversely induced in ovarian cancer cell lines SKOV3 and A2780, respectively. The possible role of SDHB in ovarian cancer was investigated in vitro, using proliferation, migration and invasion assays. To explore the mechanism, proliferation and migration related proteins such as Bcl-2, cleaved caspase 3, p-ERK, MMP-2, and p-FAK were examined by western blot. P-P38, p-AMPKα, and HIF-1α were also examined by western blot. CoCl2 was used to induce HIF-1α expression in SKOV3 and A2780 cells.

Results

SDHB silencing promoted cell proliferation, invasion, and migration, but inhibited apoptosis of SKOV3 and A2780 cells. In contrast, overexpression of SDHB inhibited cell proliferation, invasion, migration, and promoted apoptosis in SKOV3 cells. It was observed that up-regulation of Bcl-2 and MMP-2, activation of p-P38, p-ERK, and p-FAK, inhibition of cleaved caspase 3 in SDHB-silenced cells. Meanwhile, decreased Bcl-2 and MMP-2, inhibition of p-P38, p-ERK, and p-FAK, activation of cleaved caspase 3 were shown in SDHB-overexpressed SKOV3 cells. HIF-1α, an essential factor in tumor progression, was up-regulated in SDHB-silenced cells with the activation of p-AMPKα and down-regulated in SDHB-overexpressed cancer cells with the decreased p-AMPKα. And SDHB was proved to be decreased due to upregulation of HIF-1α expression in CoCl2-treated cancer cells.

Conclusions

Our results firstly revealed that SDHB played a key role in cell proliferation, invasion, migration, and apoptosis of human ovarian carcinoma via AMPK-HIF-1α pathway. SDHB-overexpression might be a new approach to inhibit tumor progression in human ovarian carcinoma.

     

缺氧/复氧对卵巢癌SKOV3细胞增殖能力的影响

目的:探讨缺氧/复氧后卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV3增殖能力的改变及其相关机制。方法:SKOV3细胞分别缺氧24h及缺氧后复氧培养不同时间。用MTT法检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期;Western blot和RT-PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。用HIF-1α抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)预处理细胞30min后,检测上述各指标的变化。结果:复氧24h细胞增殖率增加(1.38±0.60,P=0.023);复氧48h细胞增殖率恢复为常氧培养水平(0.67±0.28,P=0.48)。流式细胞仪分析显示复氧24h时S期细胞增加[(48.45±1.15)%,P=0.013],G1期细胞减少[(45.71±2.28)%,P=0.044]。常规培养的SKOV3稳定表达HIF-1α,缺氧可使HIF-1α蛋白表达增加(P=0.0045),复氧8h,HIF-1α表达迅速下降。Rapamycin可以使细胞周期停滞于G0~G1期,从而降低细胞的增殖能力。结论:缺氧/复氧可增强卵巢癌细胞株SKOV3的增殖能力,HIF-1α通路可能在其中起重要作用。     

FTY720诱导卵巢癌细胞发生可逆性白噬及抗癌机制的探索

目的：体外观察FTY720对人卵巢癌细胞的生长抑制效应,探讨其独特的抗癌效应。方法：采用Mr丌法检测不同浓度（2．5,5,7．5,10,12．5,15μmol／L）FTY720作用24、48、72h后,对人卵巢癌OV2008和SKOV3细胞的生长抑制效应。以不同密度（亚饱和、饱和、过饱和）接种OV2008和SKOV3细胞,MTＴ及相差显微镜下检测细胞的形态学,并观察FTY720的抗卵巢癌效应与细胞接种密度间的关系。相差显微镜下观察FTY720诱导的可逆性自噬现象。Westernblot法检测自噬效应分子LC3的表达变化。MTT及Westernblot法分别检测mTOR抑制剂雷帕霉素（RA）、PP2A抑制剂冈田酸（OA）对FTY720抗癌效应的影响。结果：FTY720对卵巢癌OV2008、SKOV3细胞的生长抑制作用呈剂量时间依赖性,且其诱导的卵巢癌细胞毒性效应具有细胞接种密度依赖性。FTY720导致的卵巢癌细胞自噬具有可逆转性特点。RA不影响FTY720的抗卵巢癌效应,而OA则可协同FTY720的抗癌效应。结论：FTY720抑制卵巢癌细胞生长具有剂量时间依赖性,FTY720诱导的细胞密度依赖性抗癌效应、可逆性自噬现象、非mTOR途径依赖,以及其与PP2A途径发生协同抗癌效应等特点提示FTY720独特模式的抗卵巢癌效应。     

与ezrin基因表达相关的微小RNA的筛选及在卵巢上皮性癌浸润转移中的作用

目的 筛选卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞中与ezrin基因表达相关的微小RNA(miRNA),并分析其在卵巢癌浸润转移中的作用.方法 (1)实时逆转录(RT)PCR技术和蛋白印迹法分别检测两对具有不同侵袭转移能力的卵巢癌细胞系SKOV3和SKOV3ip细胞、HO-8910和HO-8910PM细胞中ezrin mRNA和蛋白的表达差异,选取其中ezrin mRNA和蛋白表达差异相对较大的1对细胞系(即SKOV3和SKOV3ip细胞)用于以下实验.(2)用miRNA芯片筛选SKOV3和SKOV3ip细胞中差异表达miRNA,然后用生物信息学工具[三大数据库,即TARGETSCAN(http://www.targetscan.org)、MICROCOSM(http://www.ebi.ac.uk/enright-srv/microcosm/htdocs/targets/v5/)和PICTAR(http://www.pictar.mdc-berlin.de)数据库]预测并比对miRNA芯片的筛选结果,筛选出与ezrin基因表达相关的miRNA,并采用实时RT-PCR技术验证.将筛选出来的miRNA转染SKOV3ip细胞,用蛋白印迹法和实时RT-PCR技术检测其对SKOV3ip细胞中ezrin mRNA和蛋白表达的调控作用,以未做任何处理者为空白对照.结果 (1)SKOV3ip细胞中ezrin mRNA的表达水平是SKOV3细胞的(81.74±5.34)倍,HO-8910PM细胞中ezrin mRNA的表达水平是HO-8910细胞的(2.61±0.14)倍,两者分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);蛋白印迹法检测显示,SKOV3ip细胞中ezrin蛋白的表达强度明显高于SKOV3细胞,HO-8910PM细胞中ezrin蛋白的表达强度明显高于HO-8910细胞.选取其中ezrin mRNA和蛋白表达差异相对较大的1对细胞系,即SKOV3和SKOV3ip细胞用于以下实验.(2)将miRNA芯片筛选结果与生物信息学工具预测结果对比分析,筛选出两个可能调控ezrin基因表达的特异miRNA,即miR-183和miR-22;实时RT-PCR技术检测显示,miR-183和miR-22在SKOV3和SKOV3ip细胞中的表达差异,与miRNA芯片筛选结果一致,SKOV3细胞中miR-183和miR-22的表达水平分别是SKOV3ip细胞的(5.84±0.66)和(6.67±0.67)倍,两者分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).miRNA转染SKOV3ip细胞后,其ezrin mRNA的表达水平是空白对照的(1.03±0.10)倍,两者比较,差异无统计学意义(P＞0.05);而ezrin蛋白的表达强度则明显低于空白对照.结论 侵袭力强的卵巢癌细胞中ezrin mRNA和蛋白均高表达,与ezrin基因表达相关的miRNA--miR-183和miR-22的过度表达均能有效调节侵袭转移相关基因ezrin蛋白的表达水平,它们可能具有ezrin基因介导的抑制卵巢癌细胞浸润转移的潜在功能.     

TWEAK对人卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移的影响及其机制的研究

目的:研究肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM转移相关能力的影响及其作用机制。方法:水溶性四唑盐(WST-1)比色法检测TWEAK对HO-8910PM细胞增殖力的影响,细胞黏附和移动实验检测TWEAK对细胞体外黏附和移动力的影响,细胞侵袭重建基底膜实验检测TWEAK组细胞体外侵袭力的变化。采用Western blot法检测TWEAK对细胞IκB-α、NF-κB(P65)和VEGF蛋白表达的影响。通过应用NF-κB拮抗剂PDTC,观察阻断NF-κB通路后VEGF蛋白表达的变化。结果:TWEAK组在24、48h和72h时细胞增殖率无明显变化(P>0.05)。TWEAK组细胞黏附力提高23.67%(P<0.01);TWEAK可增强细胞体外的移动和侵袭力,其趋化指数和侵袭指数分别为1.9±0.3和1.7±0.3(P<0.01)。TWEAK能显著下调IκB-α蛋白表达,上调NF-κB(P65)蛋白在核内的表达,并使VEGF蛋白表达量显著增加。用NF-κB拮抗剂PDTC阻断NF-κB通路,能有效抑制VEGF蛋白的表达。结论:TWEAK对HO-8910PM细胞增殖力无明显影响。TWEAK能促进HO-8910PM细胞移动、黏附和侵袭力。TWEAK促肿瘤侵袭转移的机制之一可能是通过激活NF-κB通路上调VEGF蛋白表达。