固定化酶生产低聚异麦芽糖工艺研究

壳聚糖溶解于20％的盐酸，配成25％的壳聚糖溶液，然后用注射器注射到含15％氢氧化钠和30％甲醇的混合溶液中凝结成2mm左右的中空球形壳聚糖。经4％的戊二醛活化的中空球形壳聚糖分别与α-葡萄糖转苷酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、切枝普鲁兰酶在室温反应2h，4℃静置过夜，制备固定化酶。固定化酶的最适pH值约降低1个单位，最适温度提高约10℃。固定化α-淀粉酶和β-淀粉酶的相对酶活力分别为7．2％和22.3％。四种不同的固定化酶重组构成酶催化反应器，生产低聚异麦芽糖含量达38．9％。     

大豆外源DNA导入后代的异柠檬酸脱氢酶酶谱分析

采用淀粉凝胶电泳的方法，对利用外源总ＤＮＡ导入栽培大豆的变异后代异柠檬酸脱氢酶酶谱进行了分析，结果表明：酶谱谱带清晰，呈现Ａ、Ｂ、Ｃ三种类型。后代与受体及供体间谱带存在差异，有些后代的同工酶谱带中含有供体的特异带，说明供体的ＤＡＮ片段已整合到受体基因组中，并得到了表达。     

浅谈固定化酶技术及其应用研究进展

固定化酶是酶工程的重要组成部分,在生物酶促反应中有许多优良的性质,且反应后容易分离、提纯,可重复利用。本文介绍了固定化酶的性质、固定方法以及载体材料,阐述了固定化酶在食品和其它各个领域中的广泛应用,并对其前景进行展望。     

固定化酶法生产低聚异麦芽糖的研究

研究采用固定化α 葡萄糖苷酶生产低聚异麦芽糖 ,研究结果表明 ,最佳工艺条件为 :初始pH值 4 8,反应温度 60℃ ,底物流速 2 4mL/h。在保持产品组成恒定的条件下 ,底物流速与反应时间之间的关系模型为底物流速 ,V =-4 42 15lnt+ 2 6 5 79,R2 =0 984,符合对数规律。与游离酶法低聚异麦芽糖相比 ,固定化酶法低聚异麦芽糖的质量稍有下降 ,但仍符合低聚异麦芽糖的工业标准     

漆酶固定化及其性质研究

本文就漆酶的固定化及固定化酶的性质作了初步研究。利用明胶和海藻酸钠的聚合作用与海藻酸钙凝胶球的包埋作用制备固定化漆酶。结果表明固定化酶米氏常数Km为12.0mg/ml,游离酶米氏常数Km为7.0mg/ml,固定化酶最适温度为40,游离酶为30,同时固定化酶明显提高了游离酶的耐热性、储藏稳定性和操作稳定性。     

褐藻胶裂解酶及其裂解产物的研究进展

从海洋生物中筛选提取有应用价值的酶类，已成为海洋生物资源开发的一个重要方面。近年来，对褐藻胶裂解酶及其降解产物——褐藻寡糖的研究受到人们的普遍关注。就这两方面作一较为详细的总结与阐述。     

Fe3O4磁性纳米粒子固定化微泡菌褐藻胶裂解酶AlgL17的研究

本论文旨在优化微泡菌褐藻胶裂解酶AlgL17固定化条件,以期探索出高效的固定化条件。以单宁酸功能化的四氧化三铁磁性纳米粒子作为载体,对褐藻胶裂解酶AlgL17进行固定化条件优化。测定固定化酶的最适反应温度和最适反应pH,并对固定化酶进行傅里叶变换红外光谱(FTIR)和扫描电镜(SEM)检测。结果表明,褐藻胶裂解酶AlgL17最佳固定化条件为:加酶量2.7 U、载体量25 mg、固定时间5 h,固定化酶的最适反应条件为:温度35℃、pH8.5。FTIR和SEM结果显示,褐藻胶裂解酶AlgL17固定在载体表面。四氧化三铁磁性纳米粒子可以成功固定褐藻胶裂解酶AlgL17,固定化后的褐藻胶裂解酶具有工业应用的前景。     

固定化谷氨酰胺酶及其性质的研究

采用聚乙烯醇,将黑曲霉AS3350菌丝体用包埋法固定化,经活化与诱导,其酶活力远高于游离细胞,固定化酶的作用最适温度为37℃,耐热性比游离细胞提高,活化的最适温度为30℃,pH7.0—7.5,时间为45hr,并探讨了其耐盐性。     

单宁酸功能化Fe3O4磁性纳米粒子固定化微泡菌褐藻胶裂解酶的工艺条件优化

该研究探讨单宁酸功能化Fe3O4磁性纳米粒子固定化微泡菌褐藻胶裂解酶的工艺条件.以单宁酸功能化磁性纳米粒子(TA-MNPs)作为固定化酶的载体,通过测定固定化酶的活力和酶活回收率优化微泡菌褐藻胶裂解酶的固定化条件,并利用傅里叶变换红外光谱和透射电镜对固定化酶的结构进行了表征.结果表明,固定载体量为10 mg时,微泡菌褐...     

固定化酶的新型制备方法及其在食品工业中的应用

固定化酶是酶工程的核心技术之一,它有利于实现酶的重复使用及产物与酶的分离。目前该技术已经广泛地应用于食品、发酵、制药等行业,经济效益显著。本文综述了固定化酶的概念、性质,重点介绍了新型的酶固定化方法,并对该技术在食品工业中的应用进行了总结。最后对其将来的应用和发展进行了展望。      

磁性微球研究进展及其在固定化酶中的应用

磁性高分子微球是最近发展起来的一种新型功能高分子材料,它作为酶、细胞、药物等的载体被广泛地应用到了生物工程、细胞学和生物医学等领域.本文对磁性高分子微球的研究现状进行了综述,介绍了磁性微球的制备、性质,重点讨论了其用于酶的固定化研究,各种固定化酶的方法并指出了该领域今后的研究方向.     

磁性壳聚糖固定化转谷氨酰胺酶的研究

本文研究了磁性壳聚糖固定化转谷氨酰胺酶的最佳条件及固定化酶的酶学性质.以Fe3O4为磁性内核,液体石蜡为分散介质,Span-80为乳化剂,采用反相悬浮包埋法制备了磁性壳聚糖微球,并对其形貌的进行观察,结果显示该载体呈规则的球状、表面平滑,平均粒径为5μm,利于磁性微球在反应体系中的分离和酶的固定.以此磁性壳聚糖微球为载...     

磁性壳聚糖微球固定化糖化酶的研究

以磁性壳聚糖微球为载体,采用吸附一交联法固定化糖化酶。对给酶量、戊二醛添加量、交联温度、交联时间等因素进行了考察;并对固定化酶的酶学性质进行了研究。结果表明,固定化的最佳条件为：浓度为0．5mg／mL酶液8mL、1％戊二醛溶液4mL、交联温度45℃、交联时间4h;固定化酶的热稳定性和pH稳定性都优于游离酶;固定化酶连续使用5次,酶活仍保持了58％。     

改性纤维素磁球负载溶菌酶的制备及其抗菌性能

针对脂环酸芽孢杆菌对果汁工业的巨大威胁,该研究制备了一种抗菌材料,即溶菌酶接枝的带有聚多巴胺涂层的纤维素磁球,对该磁球进行了结构表征和抗菌试验。结果表明：FT-IR、XPS和EDS谱图结果证实了聚多巴胺和溶菌酶成功修饰在磁球表面;XRD结果显示纤维素的晶形结构由纤维素I转化为纤维素II,γ-Fe2O3使溶菌酶接枝的纤维素磁球LCs的II型晶体特征峰强度较纯纤维素球CB明显降低;热重分析结果表明再生纤维素磁球RC与LC-2、LC-3的最大降解速率温度依次为346、349和343℃,对应的最大降解速率绝对值依次为1.84、1.44和1.16,表明聚多巴胺涂层提升了纤维素磁球的热稳定性;VSM结果显示RC、LC-1和LC-3的饱和磁化强度分别为5.68、5.54和5.38emu/g,磁球具备超顺磁特性;抗菌试验表明磁球能够抑制脂环酸芽孢杆菌的生长,LC-3的抑制效果最好。综上所述,该磁球具有抗菌性能优良,热稳定性高且磁响应性灵敏、便于回收等特点,该研究结果为纤维素磁球在果汁领域的实际应用提供理论依据。     

磁珠离子交换吸附法纯化兔血清中多克隆抗体的研究

以羧基化的超顺磁纳米磁珠作为离子交换吸附介质,建立一种新型的非层析离子交换吸附方法,用于对兔血清中抗副溶血弧菌多克隆抗体进行纯化。通过优化吸附、洗脱缓冲液pH值、盐离子浓度以及洗涤液Tween-20体积分数,确立磁珠离子交换吸附纯化条件,并将该纯化方法和辛酸-硫酸铵法、亲和层析法进行比较。结果表明:血清中的多克隆抗体能够在pH6.0的磷酸盐缓冲液(0.01mol/L)中被磁珠完全吸附,经过含0.1%Tween-20的洗涤液两次洗涤,能够达到较好的洗涤效果,用含0.3mol/L NaCl的磷酸盐缓冲液(pH8.0)可以将吸附的抗体洗脱;经该法纯化后,多抗纯度为82.6%,回收率为58.0%,效价为1/64000;每克磁珠可纯化10mL的血清,整个过程只需要1h。该方法和辛酸-硫酸铵法、亲和层析法相比有明显的优势,因此具有较好的应用前景。     

来源于Anoxybacillus sp. SK3-4普鲁兰酶PulASK的固定化及酶学性质研究

普鲁兰酶在淀粉加工、多糖制备以及啤酒酿造等领域有着广泛应用。然而,该酶游离下催化产物需分离纯化和本身不可再生限制了其工业应用。磁性纳米材料具有可重复使用、磁回收性质和比表面积大等特点,有助于解决游离酶的工业化应用难题。作者将源于LAnoxybacillus sp. SK3-4的普鲁兰酶PulASK固定在纳米磁性材料Fe₃O₄@Histidine上以制备固定化酶复合体：Fe₃O₄@Histidine/PulASK,测定固定化酶的酶学性质和动力学参数。结果显示,与游离酶PulASK相比,固定化酶Fe₃O₄@Histidine/PulASK的最适反应温度由60 ℃提高到65 ℃,最适pH与游离PulASK相同;在60 ℃,pH 6.0下孵育7 h,固定化酶残余酶活为62%,而游离酶的仅为30%。分析酶动力学数据可知,在60 ℃,pH 6.0的情况下,游离酶PulASK的K_m为4.7 mmol/L,为Fe₃O₄@Histidine/PulASK的1.47倍;Fe₃O₄@Histidine/PulASK的k_cat值是350 s^-1,与PulASK的k_cat值相当,Fe₃O₄@Histidine/PulASK的k_cat/K_m是PulASK的1.57倍;并且Fe₃O₄@Histidine/PulASK在重复使用9次后,活力仍保持50%以上。与PulASK相比,Fe₃O₄@Histidine/PulASK具有良好的热稳定性且可重复使用,具有潜在应用于食品工业的价值。     

氨基化磁珠非靶向富集食源性致病菌的条件筛选及优化

该研究基于氨基化磁珠静电富集细菌技术,建立了一种可同时富集鼠伤寒沙门氏菌,金黄色葡萄球菌,单增李斯特氏菌的方法。在每2 mL单菌液中（103 CFU/mL）分别加入5~200 μg的3种粒径的氨基化磁珠（1 μm、300 nm、100 nm）,当孵育5~90 min时检测各细菌的富集效率。将单菌液体系的富集正交试验结果应用至混和菌体系的单因素试验和正交试验,将最终结果应用至大体积实验体系以及实际样本（市售牛奶、水果沙拉）。结果表明,当氨基化磁珠添加量为50 μg、孵育时间为30 min时对3种病原菌可以达到60%以上的捕获率,所有反应均在pH值7.4的PBS中进行。磁珠粒径选择300 nm（p<0.05）。在实际样本牛奶、水果沙拉中,当三种混合菌的最低终浓度为2×102 CFU/g（mL）时,捕获率高于55%,结果可达到荧光定量PCR的检测低限。氨基化磁珠与免疫磁珠比较,其具有稳定保存、低成本,高效率等优势,其非靶向富集的能力为下游食源性致病菌的快速检测提供有效前处理富集手段。     

两种功能化磁性载体固定重组几丁质酶的研究

以四氧化三铁磁性微球为核,表面分别接枝氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)、甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA),制备两种功能化磁性载体,对粗酶液中的重组几丁质酶进行固定化研究。结果表明：PGMA-Fe3O4单位蛋白载量、纯化倍数均高于APTES-Fe3O4,分别为1689.7436mg/g、6.8013;4℃环境中贮藏10d,PGMA-Fe3O4固定的重组几丁质酶相对酶活力为69.66%;重复利用7次后,相对酶活力在44%以上。