氨基胍对白介素-1β损伤的离体大鼠胰岛细胞的保护作用

目的：观察氨基胍ＡＧ）对白细胞介素－１β（ＩＬ－１β（诱民的胰岛细胞损害的作用。方法：应用体外单层培养的大鼠胰岛细胞，分别检测ＩＬ－１β、ＡＧ及基至胰岛细胞亚硝酸盐生成、胰岛素分泌以及胞内ＤＮＡ、胰岛素含量和细胞活性的影响。结果：以ＩＬ－１β诱导，胰岛细胞亚硝酸盐生成量显著增加，同时胰 素发泌以及葡萄糖刺激的胰遍素释放量均明显减少；胰同细胞内ＤＮＡ、胰钫 含量及细胞活性（ＭＴＴ值）均显著下降；ＡＧ     

诱导型一氧化氮合酶对大鼠胰岛细胞凋亡的影响

目的:探讨细胞因子和诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)对体外培养的大鼠胰岛细胞凋亡和功能的影响及其机制。方法:大鼠胰岛细胞体外培养,随机分组,培养液中分别加入细胞因子IL-1β、TNF-α和/或iNOS抑制剂氨基胍,分为空白对照组、细胞因子组、氨基胍组、氨基胍+细胞因子组。检测指标包括:培养液NO水平和组织iNOS、结构型NOS活性,RT-PCR检测胰岛组织中iNOS基因和凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达情况,AO/EB染色检测胰岛存活,胰岛素释放实验检测胰岛功能。结果:与细胞因子IL-1β和TNF-α共同培养后,大鼠胰岛组织中iNOS的表达增强,活性显著提高(38.93±4.72)U/mL,NO水平上升(313.0±35.4)mol/L,而结构型NOS没有变化;同时胰岛促凋亡基因表达上调,抗凋亡基因表达下降,细胞的存活率下降,胰岛素分泌大大减少。加入氨基胍后,随着胰岛组织中iNOS的活性明显受到抑制,胰岛的凋亡程度减轻,存活和胰岛素分泌情况都明显改善。结论:iNOS在细胞因子诱导的胰岛细胞凋亡中起到十分关键的作用,而氨基胍通过抑制iNOS活性,减轻了细胞因子的损害,降低了胰岛凋亡水平,改善胰岛的存活与功能。     

氨基胍缓解糖尿病大鼠主动脉内皮损伤

糖尿病大血管病变是糖尿病严重慢性并发症之一,其病理基础是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)。血管内皮损伤被认为是AS的始动和关键环节。氨基胍(aminoguani-dine,AG)对糖尿病主动脉内皮的保护作用,是否通过抑制诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS),进     

L-精氨酸、氨基胍和胍丁胺在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用

目的: 观察L-精氨酸 (L-Arg)、氨基胍 (AG) 和胍丁胺 (AGM) 对大鼠局灶性脑缺血组织中一氧化氮 (NO) 含量的影响,探讨3种药对脑缺血再灌注损伤大鼠是否具有保护作用和NO在脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法: 线栓法建立大鼠局灶性脑缺血 (MCAO) 模型,大鼠行为学改变用Longa评分标准来评价,血清NO浓度用酶标仪检测,脑内诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)用免疫组织化学方法测定。结果: 与假手术组相比,模型组、L-Arg组、AG组和AGM组在缺血再灌注12、24、72 h的NO含量均显著增加(P<0.05);与模型组相比,在缺血再灌注12 h,L-Arg组行为学评分显著降低(P<0.05),NO含量显著升高(P<0.05);在缺血再灌注24 h,AG组和AGM组行为学评分显著降低(P<0.05),NO含量也显著降低(P<0.05)。在缺血再灌注12、24、72 h,L-Arg组的iNOS阳性细胞数与模型组相比无显著差异(P>0.05);而AG组和AGM组则均显著低于模型组(P<0.05)和L-Arg组(P<0.05)。结论: 脑缺血再灌注损伤后血清NO和海马内iNOS的表达随时间有动态变化。L-Arg在术后12 h、AG和AGM在术后24h对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用。     

氨基胍对糖尿病大鼠心肌损伤的拮抗作用

目的：研究氨基胍（AG）对糖尿病大鼠心肌保护作用的机制。 方法：用透射电镜观察AG对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠心肌形态学改变的影响，并测定心肌组织内超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性及丙二醛(MDA)含量，采用Western blotting法检测ONOO-标志物-硝基酪氨酸(NT)蛋白质在心肌组织中的含量。 结果：电镜下可见模型组大鼠心肌细胞核周围水肿，部分肌节断裂消失，Z线模糊或消失，心肌细胞线粒体部分嵴部分膜断裂或消失；SOD含量变化无统计学差异，NOS、iNOS活性，MDA和NT蛋白质含量大于对照组。AG组心肌组织形态学病变较轻，心肌细胞线粒体嵴部分消失，肌纤维排列较整齐，仅见少量脂滴沉着；AG治疗组NOS、iNOS活性及MDA含量低于模型组；NT含量低于模型组。 结论：AG可能通过抗脂质过氧化作用和降低ONOO^-水平而对糖尿病心肌产生保护作用。     

一氧化氮合酶抑制剂氨基胍对脑缺血大鼠脑组织氨基酸含量的影响

目的：研究选择性一氧化氮合酶抑制剂氨基胍对脑缺血大鼠脑组织中氨基酸含量的影响，探讨氨基胍对脑缺血组织的保护作用及其作用机制。方法： 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型，模型建成后腹腔注射氨基胍。相应时间断头取脑，然后测定脑梗死体积、纹状体、海马、皮层中天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果： 氨基胍组脑梗死体积明显小于缺血组；缺血组纹状体、海马、皮层中天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、GABA含量显著高于假手术组，氨基胍组天门冬氨酸、谷氨酸的含量明显低于缺血组，甘氨酸、GABA含量明显高于缺血组。结论： 氨基胍降低脑组织中兴奋性氨基酸的含量，升高抑制性氨基酸的含量可能是保护缺血脑组织的重要机制之一。     

β胰岛细胞表面GAD的表达决定NOD小鼠自身免疫型糖尿病的发病

型糖尿病 ,是一种由 T细胞介导的 β胰岛细胞损伤引起的自身免疫型疾病。许多学者认为 GAD是自身抗原最可能的候选者 ,但一直缺少确切的证据。本文作者将 GAD的反义基因转移到人类 型糖尿病的动物模型 NOD小鼠染色体 DNA上 ,建立 β胰岛细胞缺失表达 GAD的 NOD小鼠品系。利用这种转基因小鼠 ,作者研究了 β胰岛细胞上 GAD的表达与 NOD小鼠糖尿病发病的确切关系。作者将两种不同变异型的小鼠 GAD c DNA的反义基因转移到 NOD小鼠的胚系细胞上 ,然后将这些干细胞植入雌性 NOD鼠 ,经传代得到六个表达 GAD反义基因的转基因NOD…     

氨基胍对AGEs致2型糖尿病小鼠肾脏TGF-β1表达的影响

目的：研究氨基胍对晚期糖基化终末产物（Advanced glycation end products,AGEs）致2型糖尿病肾脏损伤KKAy 小鼠TGF-β1表达的影响.方法：筛选已形成2型糖尿病小鼠模型,随机分组（n=10）：模型对照组及氨基胍（20、40、80 mg·kg-1）干预组,同时设立正常血糖KK小鼠组（n=10）.末次给药12 h后,生物化学法检测空腹血糖（FBG）值,终点法测定尿蛋白水平及ELISA法测定肾内AGE含量.同时,Western blot法检测肾脏组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）表达.结果：与模型对照组比较,氨基胍有效降低血糖水平（P＜0.01）,并抑制尿蛋白生成（P＜0.01）,同时减少肾内AGE含量（P＜0.01）.此外,明显下调肾脏组织中TGF-β1表达（P＜0.01）.结论：氨基胍有效改善AGEs致2型糖尿病小鼠的肾脏代谢功能,其机制与调节肾组织内源性TGF-β1表达而减少AGEs沉积有关.     

胰岛β细胞凋亡与1型糖尿病

1型糖尿病是以胰岛β细胞破坏为特征的一种自身免疫性疾病,1型糖尿病的发生、发展与胰岛β细胞凋亡密切相关.并进一步对β细胞凋亡的调控因素及可能的作用途径进行了了解.了解凋亡的作用和在I型糖尿病发病机制中的调节机制,可提供防治这种疾病的新思路.     

LMH对脑损伤后大鼠胰岛细胞及血糖含量的影响

目的　观察L 盐酸赖氨酸(LMH)对脑损伤后大鼠胰高血糖素细胞(A)、胰岛素细胞(B)和生长 抑素细胞(D)及血糖含量的影响。方法　采用落体法致大鼠脑损伤模型;伤后立刻一次腹腔注射LMH,24h 后断头处死全部大鼠,用免疫组织化学方法观察LMH对脑损伤后大鼠胰岛A、B和D细胞的影响;用生化分 析仪测定血糖含量。结果　与对照组比,脑损伤组大鼠胰岛A、D细胞免疫反应明显增强(P<0.05),胰岛B 细胞免疫反应明显减弱(P<0.05),血糖含量明显增高(P<0.05)。LMH组大鼠胰岛A细胞免疫反应明显 弱于脑损伤组(P<0.05),但与对照组相比无明显差异(P>0.05);胰岛B、D细胞免疫反应与脑损伤组无 明显差异(P>0.05);LMH组血糖含量低于脑损伤组(P<0.01)。结论　LMH在大鼠脑损伤过程中可能 参与了胰岛A细胞功能的调节,并产生显著的降血糖作用。     

小鼠胰岛内分泌细胞的构成及其与Ⅱ型糖尿病的关系

目的观察和分析II型糖尿病动物模型db/db小鼠病程进展中胰岛内分泌细胞的构成变化及与II型糖尿病病因的关系。方法分别选取3、5、8、10和12月龄的尾静脉空腹血糖高于10.0mmol/L且肥胖的db/db自发性糖尿病小鼠,每组5只,作为糖尿病组;选取相应年龄段的尾静脉空腹血糖低于6.0mmol/L体重正常的db/+m表型正常小鼠,每组5只,作为对照组。于相应年龄段取胰尾,用于免疫组织化学观察和比较。结果各月龄糖尿病组胰岛B细胞(胰岛素阳性细胞)阳性率低于对照组(p<0.05),而A细胞(胰高血糖素阳性细胞)和D细胞(生长抑素阳性细胞)阳性率分别高于对照组(p<0.05)。糖尿病组胰岛B细胞阳性率随自发性db/db糖尿病小鼠病程进展呈降低趋势(p<0.05),而A细胞和D细胞阳性率则呈增高趋势(p<0.05);对照组3种细胞阳性率无变化(P>0.05)。结论II型糖尿病动物模型db/db小鼠胰岛内分泌细胞的构成变化与糖尿病病情的轻重有关,胰岛内分泌细胞之间的比例失衡可能与II型糖尿病的发病有关。     

Crystals and Alpha-1-Antitrypsin-Reactive Globoid Inclusions in an Islet Cell Tumor of the Pancreas

An islet cell tumor of the pancreas with unusual light microscopic, ultrastructural, and immunocyto-chemical features is reported. In addition to secretory granules and positive immunostaining for pancreatic polypeptide, the tumor contained globoid intracytoplasmic inclusions by light and electron microscopy, which correlated with a positive immunoreaction for alpha-1-antitrypsin, and Reinkelike crystals.     

STZ诱导小鼠糖尿病模型中T、B淋巴细胞功能的变化

目的：探讨多次小剂量注射链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病模型小鼠中T、B淋巴细胞功能的变化及可能的机制，为小鼠糖尿病模型的应用提供实验依据。方法：①采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导昆明小鼠糖尿病作为动物模型。⑤用ConA和Insulin分别刺激脾和胸腺T细胞，采用MTT法检测成熟与未成熟T细胞对于丝裂原和特异性抗原的增殖转化能力。③采用ELISA间接法测定血清中Insulin自身抗体（IAA）的水平。④采用ELISA夹心法测定小鼠脾细胞及胸腺细胞培养上清的IL-4与IFN-γ的含量。结果：①糖尿病模型组血清中Insulin自身抗体（IAA）含量明显高于正常组（P〈0．05）。②模型组成熟T细胞（脾脏细胞）对于ConA刺激的增殖能力较弱（P〈0．05），对于Insulin刺激的增殖能力与正常组没有显著差别（P〉0．05）；模型组未成熟T细胞（胸腺细胞）对于ConA刺激的增殖能力与正常组没有显著差别（P〉0．05），而对于Insulin刺激的增殖能力较高（P〈0．05）。③模型组脾细胞培养上清的IFN-γ的含量明显高于对照组（P〈0．05），而胸腺细胞培养上清中IFN-1的含量在模型组与对照组之间无明显差异，IL-4在实验组和对照组均未检出。结论：多次小剂量注射STZ诱导糖尿病小鼠模型是自身免疫应答所导致；自身免疫性T、B细胞的功能及自身抗体均有增强；Th1介导的细胞免疫在STZ诱导的糖尿病中发挥着重要作用。     

选择性破坏胰岛A细胞的大鼠空肠肌间神经丛胆碱能末梢VAChT的定量研究

目的　探讨胰岛A细胞与肠胆碱能神经的关系。方法　采用免疫组化SP方法检测硝酸钴选择性破坏胰岛A细胞的大鼠空肠肌间神经丛胆碱能末梢VAChT阳性反应物的变化 (注钴后 1,2 ,3,4,6 ,10d) ,并进行显微图象定量分析。结果　注钴后 2d开始 ,VAChT阳性反应物显著减少 (P <0 0 5 ) ;尤以 3,4d后最为显著 (P <0 0 1) ,10天后恢复。结论　胰岛A细胞可能参与肠胆碱能神经的功能调节     

糖尿病早期大鼠胰岛B细胞超微结构的改变及氨胍的保护作用

目的：探讨糖尿病早期大鼠胰岛B细胞超微结构的改变及氨胍（Aminoguaniodine，AG）的保护作用。方法：选择30只健康成年SD大鼠随机分成Ⅰ（正常对照）组、Ⅱ（糖尿病）组和Ⅲ（糖尿病氨胍治疗）组，对Ⅱ、Ⅲ两组一次性空腹注射链脲佐菌素（Streptozocin，SIZ）诱发糖尿病模型。以后各组大鼠每30d测血糖一次。90d时取胰尾组织行透射电镜观察。结果：在30d、60d和90d后Ⅱ、Ⅲ两组血糖升高，与Ⅰ组比较及Ⅱ、Ⅲ两组间比较，差异有显著性（P〈0．05）。糖尿病90d大鼠胰尾胰岛B细胞核固缩，粗面内质网和线粒体出现退行性改变，并见有大量脂滴堆积。AG治疗组90d大鼠胰尾胰岛B细胞细胞核、粗面内质网和线粒体均有明显恢复，胞浆内未见有脂滴堆积。结论：氨胍对糖尿病大鼠胰岛B细胞有保护作用。     

IDDM患者T细胞受体介导的信号通路受损

目的 :进一步研究IDDM患者T细胞应答改变的机制。方法 :用抗TCR抗体激活患者外周血T细胞 ,分析TCR介导的信号通路的水平。结果 :与正常对照组相比较 ,抗TCR抗体诱导的增殖性应答较弱 (P <0 .0 5) ;rIL 2能部分恢复对抗TCR抗体应答的缺乏 ;抗CD2 8抗体刺激不能恢复TCR介导的增殖性应答 (P =0 .0 3 )。结论 :IDDM患者的T细胞对抗TCR抗体应答的缺乏与TCR介导的信号通路受损有关 ,但协同刺激信号通路正常。TCR信号通路的缺乏增加了IDDM患者T细胞对凋亡的敏感性或无反应性     

胰岛素依赖型糖尿病患者的HLA－DQA_1等位基因分析

应用聚合酶链反应与序列特异寡核苷酸探针杂交技术（ＰＣＲ／ＳＳＯＰ），分析了北京地区６１例汉族胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）患者和５０例非糖尿病对照者的ＨＬＡ－ＤＱα链第５２位氨基酸的编码基因。结果表明：１．８９％的患者ＨＬＡ－ＤＱα链５２位是精氨酸，其编码基因为ＨＬＡ－ＤＱＡ１０３０１和（或）０５０１，其中１０８％为０３０１纯合子，７０．３％为０３０１杂合子，１８．９％为０５０１纯合子，２．患者中的ＨＬＡ－ＤＱＡ１０３０１和０５０１等位基因频率较对照组明显升高，相对危险度分别为ＲＲ＝１２．５４９，ｐ＜０．００１和ＲＲ＝１．５１０，ｐ＞０．０５；３．患者中ＨＬＡ－ＤＱＡ０２０１等位基因频率较对照组无明显降低。上述结果提示，ＨＬＡ－ＤＱＡ１０３０１和０５０１等位基因与中国汉族人群的ＩＤＤＭ遗传易感性正相关，而０２０１等位基因与ＩＤＤＭ抗性无关。     

选择性破坏胰腺A细胞的模型大鼠骨骼肌运动终板VAChT免疫组化研究

目的　探讨选择性破坏胰腺A细胞的模型大鼠骨骼肌运动终板胆碱能神经的变化。方法　选用硝酸钴和利血平选择性破坏大鼠胰腺A细胞 ,观察了模型大鼠外周胆碱能神经终末在骨骼肌运动终板的变化。结果　与正常对照组比较 ,硝酸钴模型大鼠组表现为骨骼肌运动终板VAChT免疫反应明显减弱 ,利血平组明显增强。结论　这种内源性乙酰胆碱的变化可能与胰腺A细胞损伤有关 ,提示胆碱能神经除受其上级中枢调节外 ,还受某些内分泌细胞的影响。