三七总皂苷改善宫内缺氧新生鼠脑损伤及学习记忆功能

目的:制作胎鼠宫内缺氧模型,探讨三七总皂苷对宫内缺氧新生大鼠突触重建及学习记忆功能的影响。方法:孕14 d开始将孕鼠置于动物缺氧培养箱中,制作胎鼠宫内缺氧模型。新生鼠经腹腔分别注入三七总皂苷和生理盐水;正常对照组不治疗。免疫荧光法检测脑微管相关蛋白-2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、突触素(SYN)和突触分化诱导基因1(SynDIG1)的表达。Morris水迷宫实验检测各组大鼠的学习记忆功能。结果:Morris水迷宫结果表明,与对照组相比,模型组大鼠学习记忆能力明显下降,经三七总皂苷治疗后学习记忆能力明显改善。缺氧后新生鼠脑MAP-2、SYN和SynDIG1表达明显减少,GFAP表达明显增多;治疗组MAP-2、SYN、SynDIG1表达明显高于模型组,GFAP表达明显低于模型组。结论:三七总皂苷可减轻缺氧缺血后神经元的损伤,减弱GFAP的表达,促进突触的重建,改善宫内缺氧大鼠学习记忆功能。     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑干听觉诱发电位的动态变化

目的：探讨缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑干听觉诱发电位（BAEP）的动态变化。方法：30只出生13天的新生SD大鼠随机分为对照组和缺氧缺血组,每组15只。将出生后第13天新生大鼠结扎左侧颈总动脉后,置于含氧8％的低氧环境中3h建立缺氧缺血性脑损伤动物模型。出生后第14、20、27、37、47、57、67和77天检测大鼠的BAEP。结果：缺氧缺血组新生大鼠3h缺氧复氧1h后,表现为向左侧旋转,爬行时右侧后肢呈现拖步。出生后第14～47天缺氧缺血组大鼠BAEP波峰潜伏期（PL）和波峰间潜伏期（IPL）较对照组显著延长（P〈0．05或P〈0．01）,这些鼠的BAEP的PL及IPL均随年龄的增加而缩短,并且鼠可发育成熟。结论：缺氧缺血性脑损伤新生大鼠BAEP有显著的可逆性异常变化,其PL和IPL是动态监测与客观评价新生期缺氧缺血性脑损伤和听觉障碍的灵敏指标。     

CEPO调控新生大鼠缺氧缺血性脑损伤Bcl-2、Bax基因表达的研究

目的 观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）脑组织Bcl-2、Bax基因表达变化及氨基甲酰化促红细胞生成素（CEPO）干预对其表达的影响,探讨CEPO发挥脑保护作用的可能机制.方法 将新生7日龄SD大鼠建立HIBD模型,利用RT-PCR检测缺氧缺血和CEPO干预后2h、12h、24 h、48 h、72 h凋亡基因Bcl-2、Bax的mRNA表达的改变.结果 与假手术组相比,缺氧缺组在2h、12h、24 h、48 h、72 h脑组织中Bcl-2、Bax的表达均增加（P＜0.05）,与缺氧缺血组相比,CEPO干预组在不同时间点Bcl-2表达增加（P＜0.05）,Bax表达下降（P＜0.05）.结论 在新生大鼠HIBD中Bcl-2、Bax mRNA的表达发生改变,调控二者的表达水平可能是CEPO发挥脑保护的作用机制之一.     

黄芪对缺氧缺血性脑损伤新生鼠脑组织Nogo-A蛋白表达的作用及意义

目的探讨Nogo-A蛋白在缺氧缺血性脑损伤新生鼠脑组织中的表达特点及黄芪对其表达的影响方法 7日龄Wistar新生大鼠72只,清洁级,雌雄不限,平均体重10-16g,随机分为假手术组,HIBD组,黄芪治疗组,每组24只。分离左侧颈总动脉并结扎,吸入92%N2+8%O2氮氧混合气体行缺氧处理2h,制成HIBD模型。假手术组只作分离左侧颈总动脉而不结扎,不作缺氧处理,不给与药物处理。黄芪治疗组于建模成功后立即及3h腹腔注射0.5ml/只,假手术组及HIBD组大鼠腹腔注射等量生理盐水,上述各组均于术后6h、12h、24h、72h随机抽取6只,于麻醉下处死取脑组织,HE染色观察脑组织病例变化,免疫组化法检测Nogo-A蛋白表达情况。结果与假手术组相比,HIBD组术后脑组织Nogo-A蛋白表达增高,但Nogo-A蛋白随各时间点有先上升后下降的趋势,差异有统计学意义(P0.05),与HIBD组相比,黄芪治疗组各时间点Nogo-A蛋白,差异有统计学意义(P0.05)。结论提示黄芪可下调缺氧缺血性损伤大鼠脑组织Nogo-A蛋白的表达,对神经元和神经纤维具有保护作用。     

早期干预对脑损伤大鼠学习记忆及神经生长因子的影响

目的:探讨早期干预对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠学习记忆功能的影响及机制.方法:结扎SD大鼠一侧子宫角血管建立HIBD模型,采用早期触摸和丰富环境刺激进行早期干预,为期28天.以一次被动回避反应、脑干听觉诱发电位(BAEP)、神经生长因子(NGF)作为检测指标.结果:干预组大鼠(18只)被动回避反应步入潜伏期(STL)长于非干预组(15只);BAEP的Ⅱ、Ⅳ波潜伏期(PL)及Ⅰ～Ⅳ波峰间期(IPL)短于非干预组;脑组织内NGF的含量高于非干预组(P＜0.05).结论:早期干预可有效改善HIBD大鼠学习记忆功能;提高脑组织内源性NGF的水平是早期干预促进HIBD大鼠脑功能修复的机制之一.     

围产期缺氧缺血性脑损伤大鼠神经细胞凋亡及巴曲酶神经保护作用的研究

围产期窒息所致缺氧缺血性脑病(HIE)是新生儿期危害最大的常见病,常导致新生儿死亡,存活者可遗留脑性瘫痪、癫痫、智力低下等严重的神经系统后遗症.本文通过夹闭孕足月大鼠双侧子宫动脉复制宫内缺氧缺血性脑损伤(HIBD)动物模型,检测不同缺氧缺血再灌注时间点宫内HIBD仓鼠神经细胞凋亡数量,应用工酶治疗HIBD仔鼠,研究其神经保护作用.     

缺氧缺血性脑损伤对新生大鼠发育期间额叶皮质突触质量的影响

用 7日龄 Wistar大鼠制成缺氧缺血脑损伤模型 ,从生后 7d到成年分 8个时间段对突触的质量进行了长期跟踪研究。结果显示 :脑损伤后鼠的额叶皮质神经元及神经纤维的密度明显降低 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ;突触的体视学参数表面积密度和面数密度降低 ;突触后膜致密层变薄 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。实验结果提示 :新生鼠脑缺氧缺血损伤后额叶皮质内突触质和量的改变是影响智力发育的重要因素之一 ;同时还表明神经纤维及突触有代偿性。这些是实行早期干预改善脑功能的形态学基础     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠TLR-4信号通路的影响

目的探讨高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠TLR-4信号通路的影响。方法选取36只7日龄SD新生大鼠,随机分为3组:假手术组(n=12),缺氧缺血性脑损伤组(n=12),高压氧治疗组(n=12)。采用Rice法制作新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,假手术组大鼠分离左颈总动脉后不结扎直接缝合皮肤,高压氧治疗组大鼠在模型制作成功后,给予高压氧治疗,1 h/d,连续7 d。测定各组大鼠体质量增长率与左/右脑重量比值;应用TUNEL法检测脑组织神经细胞凋亡情况,Western Blot方法与real time PCR方法分别检测各组新生大鼠脑组织TLR-4、MyD88与NF-κB蛋白与mRNA的表达。结果高压氧治疗可使缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的体质量增长率和左/右脑重量比值增加(P0.05)。与假手术组相比,缺氧缺血性脑损伤组新生大鼠脑组织的神经细胞凋亡数目、Toll样受体-4(TLR-4)、髓样分化因子(MyD88)与核转录因子-κB (NF-κB)蛋白与mRNA的表达均显著升高(P0.01);与缺氧缺血性脑损伤组相比,高压氧治疗组新生大鼠脑组织的神经细胞凋亡数目、TLR-4、MyD88与NF-κB蛋白与mRNA的表达均显著降低(P0.01)。结论高压氧减轻缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的脑组织损伤可能与抑制TLR-4信号通路相关。     

川芎嗪对缺氧缺血性脑损伤大鼠海马星形胶质细胞的影响

观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)大鼠海马星形胶质细胞的影响。将90只7日龄Wistar大鼠随机分为假手术组、HIBD组、TMP治疗组,各组分别在0h、6h、12h、24h、48h五个时间点取右脑,透射电镜下观察海马CA1区星形胶质细胞超微结构变化,免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary a-cidic protein,GFAP)表达的变化。结果显示,在电镜下HIBD损伤组星形胶质细胞肿胀,体积增大,核形状不规则,核质比增大,核仁明显,位于近核膜处,细胞器明显减少,线粒体肿胀,嵴紊乱,有缺失,可见粗面内质网池扩张;TMP组星形胶质细胞损伤轻,形态基本正常。HIBD后海马CA1区星形胶质细胞反应明显增强(P<0.01),川芎嗪治疗后可明显减轻星形胶质细胞的反应程度(P<0.01)。以上结果提示川芎嗪可通过减轻HIBD后星形胶质细胞的反应程度发挥保护和修复神经细胞的作用。     

丙酮酸乙酯对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织的保护作用

 目的： 探讨丙酮酸乙酯（ethyl pyruvate, EP）对缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage, HIBD）新生大鼠脑组织的作用及其可能机制。方法：165只7日龄SD大鼠随机分为3组:假手术组（n=43）、HIBD模型组（n=61）和HIBD+EP处理组（n=61）,造模前30 min腹腔注射EP（50 mg/kg）1次,此后每天1次,3 d后测定脑组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量以及脑组织含水量,TUNEL法检测脑组织凋亡细胞数;14 d后检测缺血侧和非缺血侧脑重量以判别脑萎缩程度。结果：HIBD+EP组脑组织SOD活性为(125.78±18.35)×103 U/(g protein),较HIBD模型组［(97.84±15.50)×103 U/(g protein)］明显增强（P<0.05）;MDA含量为(4.42±1.04) μmol/(g protein),较HIBD模型组［(6.02±0.89) μmol/(g protein)］明显降低（P<0.05）。此外,HIBD模型组缺血侧（左侧）的脑组织含水量高于非缺血侧（右侧）（P<0.05）,EP治疗后两侧的脑组织含水量无显著差异（P>0.05）,提示EP减轻了缺血侧的脑水肿。同时HIBD+EP组缺血侧脑皮质和海马每个视野的凋亡细胞数目分别为96.63±10.08和41.91±9.96,较模型组（111.54±1.64和51.73±1.77）明显减少,但仍多于假手术组（P<0.05）。HIBD+EP组左脑萎缩程度为(13.25±5.19)%,较HIBD模型组［(20.32±5.10)%］明显减轻（P<0.05）。结论：EP具有抗氧化功能,能减轻脑水肿,减少脑细胞凋亡,减轻脑萎缩,对HIBD新生大鼠脑组织具有保护作用。     

天麻素对缺血缺氧脑损伤新生大鼠小胶质细胞Sirt3表达的影响

目的:研究天麻素对缺血缺氧脑损伤(HIBD)新生大鼠脑内激活的小胶质细胞Sirt3表达的影响。方法:选取39只3 d龄SD幼年大鼠随机分为对照组(control)、缺血缺氧脑损伤组(HIBD)、天麻素组(HIBD+gastrodin)。采用左侧颈总动脉结扎结合缺氧法建立新生大鼠缺血缺氧性脑损伤(HIBD)模型,使用免疫荧光染色观察HIBD模型后新生大鼠大脑胼胝体区小胶质细胞的分布情况;使用免疫荧光双标染色及Western Blot检测大鼠大脑左侧胼胝体区小胶质细胞Sirt3的表达变化。结果:免疫荧光染色结果显示HIBD后新生大鼠大脑左侧胼胝体区小胶质细胞出现明显激活,确定模型建立成功。免疫荧光双标染色及Western Blot结果均显示,与对照组相比,HIBD模型组Sirt3的表达水平明显升高(P <0. 05);与HIBD模型组相比,天麻素组Sirt3的表达进一步增强(P <0. 05)。结论:天麻素可能通过促进新生大鼠脑内小胶质细胞Sirt3的表达,发挥其神经保护作用。     

解偶联蛋白在脑缺血缺氧性损伤中的作用

线粒体解偶联蛋白(uncoupling proteins,UCPs)是线粒体载体蛋白家族的一个亚族,位于线粒体内膜,可以将线粒体内膜外的质子转运回基质,降低线粒体的跨膜质子电动势,形成质子漏,使氧化磷酸化解偶联,ATP生成减少.目前共发现有5个成员,UCP1仅存在于棕色脂肪组织,主要参与机体非震颤产热;UCP2,UCP4和UCP5(又名脑线粒体膜载体蛋白1)在脑组织中表达较多.近年来UCPs在脑缺血缺氧性损伤中的病理生理作用研究较多,但也颇多争议.有人认为UCPs通过解偶联作用加重能量衰竭,进一步促进脑缺血缺氧损伤;也有人认为UCPs通过调节线粒体膜电位,抑制活性氧簇生成,维持线粒体内钙稳态,从而起到对神经系统的保护作用.     

氟西汀联合毛蕊花糖苷改善抑郁症大鼠抑郁行为、学习记忆能力和上调CREB水平

目的:观察氟西汀联合毛蕊花糖苷(Act)对抑郁症大鼠CREB表达、学习记忆能力的影响.方法:将SD大鼠随机分为对照组(健康大鼠)、模型组(抑郁症模型大鼠)、氟西汀组(模型+氟西汀)、Act组(模型+毛蕊花糖苷)、联合组(模型+氟西汀+毛蕊花糖苷),分别采用旷场实验、糖水测试观测抑郁程度,水迷宫、平衡木实验观察学习记忆能...     

Hyperbaric oxygenation promotes neural stem cell proliferation and protects the learning and memory ability in neonatal hypoxic-ischemic brain damage

The aim of our study was to evaluate whether hyperbaric oxygenation (HBO) was an effective therapy for neonatal hypoxic ischemic brain damage (HIBD). Seven-day-old rat pups were divided into 3 groups: sham, hypoxia-ischemia (HI) control and HI-HBO group. HBO was administered for HI rats daily. The pathologic changes in brain tissues were observed by hematoxylin-eosin (H-E) staining. The immunohistochemical staining was applied to detect the Nestin and 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) positive cells in hippocampal dentate gyrus region. The learning and memory function of rats was examined by Morris water maze. The HI rats showed obvious pathologic changes accompanied by levels decreasing and disorder arrangement of pyramidal cells, glial cells proliferation in postoperative, and nerve nuclei broken, while pathologic changes of rats in sham group was approximate to that in the HI + HBO group that was opposite to the HI group. Compared with the sham group, the Nestin and BrdU positive cells in HBO + HI group at different time points increased significantly (P < 0.01). Learning and memory function of rats in HI group was poor compared with the sham/HI + HBO group (P < 0.01), while that in HI + HBO group was approximate to that in sham group (P > 0.05). HBO treatment improved the learning and memory ability of the HI rats. HBO therapy may be effective for neonatal HIBD treatment.     

电磁脉冲辐射致大鼠皮层神经元超微结构损伤效应及对空间学习记忆能力的影响

目的:电磁脉冲辐射(electromagnetic pulse,EMP)可以引起中枢神经系统(CNS)损伤和神经行为学的改变。因此,研究EMP对CNS短期的生物学效应具有重要意义。方法:本文通过电子显微镜技术和Morris水迷宫技术,研究了场强为400 kV/m,脉冲为200次的EMP辐射后短时间内对大鼠皮层神经元超微结构及空间学习记忆能力的影响。结果:辐照射后6 h的大鼠皮层神经元超微结构显示,神经元胞核内异染色质增多;核膜有不同程度凹陷、破损及皱缩。胞质内有明显的线粒体肿胀;胞内粗面内质网呈囊性变、脱颗粒。EMP辐射后24 h时,部分神经元出现染色质浓集、边移,甚至细胞核明显皱缩而失去结构,类似凋亡细胞特点,并有凋亡小体出现。Morris水迷宫结果显示,与正常对照组相比,EMP损伤后,大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05);动物在平台象限停留时间明显缩短(P<0.01)。结论:400 kV/m的EMP可引起大脑皮层神经元超微结构发生损伤,且导致实验动物空间学习记忆能力的下降。     

雌激素对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆的影响

目的:探讨雌激素对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型大鼠学习记忆能力的影响。方法:选取雌性SD大鼠24只,随机分为假手术组、卵巢切除组(ovariectomy,OVX)、OVX+苯甲酸雌二醇组(estradiolbenzoate,EB),每组8只。于海马注射Aβ1-42建立AD大鼠模型,通过Morris水迷宫观察大鼠的学习记忆能力,同时用ELISA检测脑组织超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,ACh E)的活性,用免疫组化分析神经元型一氧化氮合酶(n NOS)并测定其OD值。结果:与OVX组比较,OVX+EB组逃避潜伏期明显缩短(P0.05),原平台象限活动时间明显增加(P0.05),穿越原平台次数明显增多(P0.05)。雌激素作用还提高大鼠脑组织SOD、ACh E和n NOS活性,降低MDA活性(P0.05)。结论:研究表明雌激素可改善AD模型大鼠的学习记忆能力,其机制可能通过提高脑组织SOD、ACh E和n NOS活性,降低MDA活性有关。     

Macamide B对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠脑中雌激素受体表达的影响

目的:观察玛卡酰胺B(Macamide B)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生小鼠脑组织中雌激素受体α(ER α)和雌激素受体β(ER β)表达的影响。方法:选择出生7 d C57BL/6小鼠30只并将其分为3组:假手术组(sham)、缺氧缺血性脑损伤组(HIBD)、玛卡酰胺B处理组(Macamide B+HIBD),每组10只。采用Rice法建立新生小鼠HIBD模型,采用免疫荧光组织化学染色对ER α和ER β在新生小鼠HIBD脑内的细胞定位进行分析,Western Blot方法检测Macamide B对新生鼠HIBD脑内ER α和ER β表达的影响。结果:ER α和ER β在HIBD新生小鼠脑内神经元和星形胶质细胞中均有表达;与sham组相比,HIBD组ER α和ER β的表达量均明显降低;与HIBD组相比,Macamide B可显著上调ER α和ER β的表达。结论:Macamide B可通过上调新生小鼠脑内ER α和ER β表达表达水平对HIBD发挥神经保护作用。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤AQP4表达及bFGF治疗效果的研究

目的探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)后脑组织水通道蛋白-4(AQP4)的表达变化及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)对其治疗效果的影响.方法结扎阻断左侧颈总动脉,仓内N2浓度95%、O2浓度9±1%,缺氧持续20min,建立脑缺氧缺血模型,用RT-PCR方法检测出脑缺氧缺血后不同时间段AQP4 mRNA基因的表达.并对7日龄HIBD后新生大鼠进行bFGF治疗(4μ/g体重,腹腔注射,连续15d).观察治疗后5h、3d、7d、15d、17d后AQP4 mRNA表达的变化.结果 HIBD后5h,脑组织AQP4 mRNA表达增加;HIBD后7日达到高峰(1.93±0.11),15d后仍高于正常组织(1.41±0.23);HIBD后腹腔注射bFGF,3d脑组织AQP4 mRNA有明显变化(0.79±0.15),15d明显降低(0.47±0.06).结论 AQP4与HIBD的形成密切相关;bFGF对HIBD后有明显的改善作用,可能与其保护作用有关.