单纯疱疹病毒2型对单核细胞表达HLA-II类抗原的影响

目的　研究单纯疱疹病毒 2型 (HSV -2 )对人单核细胞表达HLA -Ⅱ类抗原 (HLA -DR、HLA -DQ)的影响 ,探讨单核细胞及HLA -Ⅱ类抗原在单纯疱疹病毒 2型感染中的作用。方法　用单纯疱疹病毒 2型 ( 3 3 3株 )感染人单核细胞 ,于感染后 1、3、5、7d分别收集细胞 ,用APAAP法检测单核细胞HLA -DR、HLA -DQ表达水平。结果　单纯疱疹病毒 2型感染后 1,单核细胞表达HLA -DR、HLA -DQ抗原水平明显降低 ,以后均逐渐升高 ,至 7d达到对照组水平。结论　单纯疱疹病毒 2型感染早期能抑制单核细胞表达HLA -Ⅱ类抗原 ,HSV -2抑制单核细胞表达HLA -II类抗原可能是HSV -2逃避机体的手段之一。HLA -Ⅱ类抗原在单纯疱疹病毒 2型致病及免疫过程中可能起重要作用。     

应用ELISA方法检测单纯疱疹病毒-Ⅱ型抗体的研究

目的 了解广东省汕头市人群单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-Ⅱ）的感染状况.方法 采用ELISA方法检测HSV-Ⅱ IgM和IgG抗体.结果 性传播疾病（性病）患者的抗体阳性检出率：HSV-Ⅱ IgM为16.2%（88/544）,HSV-Ⅱ IgG为62.9% （324/544）;正常对照组的抗体阳性检出率：HSV-Ⅱ IgM为3.3%（2/60）、HSV-Ⅱ IgG为41.7%（25/60）.两组的阳性检出率,患者组明显高于对照组（P＜0.01）.结论 不同人群HSV的感染状况不同;正常人群中存在HSV-Ⅱ感染,HSV-Ⅱ是性病的重要病原体之一.     

306例患者单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体检测结果分析

目的:了解本市STD人群单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的感染状况。方法:采用ELISA方法检测HSV-Ⅱ型IgM和IgG抗体。结果:306例患者的单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体阳性检出率:HSV-ⅡIgM 26.1%,其中男性为22.0%、女性为32.5%;HSV-ⅡIgG为59.8%,其中男性为59.1%、女性为60.8%;HSV-ⅡIgM与HSV-ⅡIgG同时阳性的检出率为15.0%,其中男性为12.9%、女性为18.3%。结论:本地区STD人群HSV的感染比例不低,IgG抗体的阳性率明显高于IgM抗体,HSV-Ⅱ隐性感染及复发的可能性较大,是性病的重要病原体之一。     

江苏省单纯疱疹病毒2型分子流行病学分析

目的 了解江苏省性病门诊就诊者中单纯疱疹病毒(HSV-1、HSV-2)感染流行状况和主要流行病毒株进化特征。方法 选取江苏省苏南、苏中、苏北3个地区16家性病门诊就诊者116例,采集生殖器疱液标本,采用聚合酶链反应(PCR)扩增HSV-1和HSV-2 TK基因,对阳性样品进行序列分析,与国际参考株进行对比,构建进化树。结果 116例性病就诊者中,HSV-1阳性4例,感染率为3.5%;HSV-2阳性36例,感染率为31.0%;PCR扩增到1130 bp大小的目的基因片断;进化树分析结果显示,苏南地区HSV-2流行毒株全部聚集形成1个病毒簇;苏中地区流行株除1株外,其他也聚集成簇;苏北流行株差异较大,形成>4个独立流行簇,其中2株在核酸序列上与苏南株更接近。结论 HSV-2是江苏省生殖器疱疹主要病原体,HSV-2流行株具有明显的地域特点,并已形成不同地区间传播。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白在真核细胞中的表达

目的：构建真核表达质粒pcDNA3／gD，并在体外COS-7细胞中进行表达。方法：体外PCR扩增出gD糖蛋白基因，克隆入真核表达质粒pcDNA3中。PCR、酶切和测序证实插入的gD基因正确后，转染COS-7细胞，用原位ELISA鉴定表达蛋白。结果：构建了pcDNA3／gD真核表达质粒，经原位ELISA证实，转染，COS-7细胞表达的gD蛋白能和gD单克隆抗体ID3和DL11结合，证明该蛋白具有天然gD蛋白的抗原性。结论：柯建的重组真核表达质粒pcDNA3／gD能够在COS-7细胞中表达。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型感染者抗原和抗体检测结果

目的探讨Ⅱ型单纯疱疹病毒抗体（HSV-ⅡIgM/IgG）与生殖器疱疹的相关性,辅助临床诊断。方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测142例生殖器疱疹患者血清中HSV-Ⅱ抗体以及分泌物中的HSV-Ⅱ抗原。另选100名健康体检人员血清作为对照组。结果 142例生殖器疱疹患者中,血清HSV-Ⅱ抗体阴性27例中,分泌物HSV-Ⅱ抗原阳性18例（66.67%）;血清HSV-Ⅱ抗体阳性115例（80.10%）,抗体阳性率明显高于抗原阳性率（P〈0.01）。正常对照组HSV-Ⅱ抗原未检出,HSV-Ⅱ抗体阳性2例（2.00%）。结论性病门诊生殖器疱疹患者同时检测HSV-Ⅱ的抗原和抗体,可以提高临床确诊率。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型ICP22真核表达载体的构建及其对Vero细胞活性的影响

目的构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染细胞蛋白22(ICP22)真核表达载体p EGFP-C2/ICP22并研究其对非洲绿猴肾细胞(Vero)细胞活性的影响。方法经双酶切实验和测序验证,以Xfect为介导将构建的真核表达载体p EGFP-ICP22转染至Vero细胞,并通过反转录PCR(RT-PCR)和绿色荧光检验其在细胞中的表达,最后以MTT法检测细胞活性。结果 48 h后观察,发现转染重组质粒组细胞经RT-PCR验证有目的基因的转录,并通过荧光显微镜观察到融合蛋白表达。而空白质粒组只检测到荧光蛋白但未检测到目的基因转录本,且对照组未检测到荧光蛋白表达。转染重组质粒的细胞相对活性值为(82.39±6.44)%。结论成功构建了p EGFP-ICP22真核表达载体,实现了其在Vero中的表达,融合蛋白GFP-ICP22明显降低了细胞活性。为进一步探讨HSV-ⅡICP22的功能和HSV-Ⅱ潜伏复发机制奠定了实验基础。     

降落PCR扩增单纯疱疹病毒Ⅱ型D蛋白基因的研究

目的:建立一种快速、准确检测单纯疱疹病毒Ⅱ型D蛋白基因的方法.方法:根据已发表的gD蛋白核苷酸序列设计引物,采取降落PCR对gD蛋白DNA进行扩增.结果:从2份病毒株中均扩增出与预期大小完全一致的目的片段,并且采用降落PCR能有效地降低或避免非特异性扩增.结论:TD-PCR能够用于快速,准确地检测gD蛋白,为生殖器疱疹的鉴别诊断在分子水平上提供了理想的新方法.     

自身免疫型糖尿病和HLA-Ⅱ类基因的关联

1型糖尿病(type 1diabetesmellitus ,DM 1) ,其特征为易发生酮症倾向的体内葡萄糖平衡失调,是一种遗传异质性的自身免疫性疾病。由于自身免疫反应选择性地破坏胰岛β细胞,引起胰岛素合成绝对不足所致[1] ,其发病受遗传影响。欧洲人中发病率约0 .3‰,我国DM 1发病率约1/10万,近年,其发病在世界范围呈现上升趋势。目前已明确其主要的疾病易感基因位于人类组织相容性复合体的第Ⅱ类基因区中,DM 1的发病和MHC的产物———人类白细胞抗原(humanleucocyteantigen ,HLA)有关,HLA提供了DM 1约5 0 %的遗传易感性,是DM 1的主要易感性位点[2 ] …     

降落PCR扩增单纯疱疹病毒Ⅱ型G蛋白基因的研究

目的建立一种快速，准确检测单纯疱疹病毒Ⅱ型G蛋白基因的方法。方法根据已发表的gG蛋白核苷酸序列设计引物，采取降落PCR对gG蛋白基因进行扩增。结果从2份病毒株中均扩增出与预期大小完全一致的目的片段，并且能有效地降低或避免非特异性扩增。结论TD-PCR能够用于快速，准确地检测gG蛋白基因，为生殖器疱疹的鉴别诊断在分子水平上提供了理想的新方法。     

门诊女性生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型感染情况分析

目的 了解女性泌尿生殖道感染者单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的感染情况,为早期诊断及治疗提供依据.方法 应用荧光定量PCR技术对158例女性患者生殖道分泌物进行HSV-Ⅱ-DNA检测,同时以40名健康体检妇女作为对照组.结果 在158例生殖道感染者中有48例HSV-Ⅱ阳性,阳性率为30.4%,明显高于对照组(7.5%)...     

性传播疾病患者单纯疱疹病毒2型检测结果分析

目的了解性传播疾病(sexually transmitted disease,STD)患者单纯疱疹病毒2型(herpes simples virus type 2,HSV-2)的感染情况,为STD的临床诊治提供依据。方法 2010年1月—2011年12月选择临床确诊的STD患者486例作为观察组,随机选择同期门诊就诊的非STD患者118例为对照组,分别采集血液标本,分离血清,ELISA法检测HSV-2 IgG抗体。结果观察组HSV-2 IgG抗体阳性率40.95%(199/486),对照组16.10%(19/118),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不同性别SHV-2阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论患生殖器疱疹、尖锐湿疣、梅毒、念珠菌性龟头炎、阴道炎等的患者HSV-2感染率高,应将HSV-2感染检测纳入实验室常规项目,同时加强STD患者的健康教育,倡导安全性行为。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D基因的原核表达及鉴定

[目的]构建单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）糖蛋白D原核表达载体并鉴定其表达产物。[方法]用PCR方法特异性扩增HSV-2糖蛋白D基因片断,经双酶切后将其克隆到融合蛋白原核表达载体pGEX-1λT中。将重组表达载体转化大肠杆菌后进行诱导表达,表达产物进行Western-blot鉴定。[结果]重组表达载体诱导表达产物用SDS-PAGE证明含有相对分子质量（Mr）约60kD的糖蛋白D/GST融合蛋白。Western-blot分析证实纯化之后表达产物在相对分子量为60kD处有明显的阳性杂交带。[结论]重组原核表达载体诱导表达出的HSV-2糖蛋白D具有较好的抗原性,为以后的HSV-2糖蛋白D基因工程亚单位疫苗研究打下了基础。     

云南省某县HIV感染者Ⅱ型单纯疱疹病毒感染及高危性行为研究

目的 了解云南省某县HIV感染者中Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)感染率、HSV-2感染相关因素及高危性行为情况.方法 从常规随访的HIV感染者中招募研究对象,问卷调查收集人口学、行为学信息,采集血标本检测HSV-2抗体和CD4+T淋巴细胞计数.结果 共招募研究对象300人,其中105人检测为HSV-2抗体阳性,感染率为35.0%.多因素logistic回归模型显示,傣族(OR=0.300,95%CI:0.152～0.593)和景颇族(OR=0.376,95%CI:0.167～0.850)HIV感染者HSV-2感染风险低于汉族;经性途径感染HIV者HSV-2感染风险高于经注射吸毒感染HIV者(OR=4.244,95%CI:1.924～9.364).105人合并感染HIV和HSV-2,其中60人最近3月内有性行为,未坚持使用或不使用安全套者占有性行为者的41.7%,主要见于婚内性行为.结论 HIV感染者中HSV-2感染率较高,HIV/HSV-2合并感染者中有不安全性行为者比例高.     

HLA-Ⅱ类基因与人类妊娠期特定疾病的相关性

通过DNA分型技术，已经明确了人类妊娠期多种疾病的发生、发展与HLA-Ⅱ类基因相关联。目前可通过计算相对危险因子来判断HLA等住基因的频率。HLA-Ⅱ类基因多态性可以改变HLA分子、抗原、T细胞之间相互作用的特性，并因此控制对外来抗原的免疫应答。HLA-Ⅱ类基因编码的某一氨基酸序列调控对疾病的易感性和临床性状。构成HLA基因群的各个基因是高度连锁的，因此与某一特定疾病关联的易感基因有可能不是单一的，而是一些连锁基因的组合。     

性病门诊生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型感染状况调查

目的了解性病门诊患者泌尿生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的感染状况。方法应用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对420例性病门诊患者的生殖道分泌物进行HSVⅡ-DNA的检测。结果共检出HSV-Ⅱ阳性140例,阳性率为33.33%,男女检出率性别差异无统计学意义(P﹥0.05);水疱液或渗出液的HSV-Ⅱ阳性率最高为80.95%,与其他标本相比差异有统计学意义(P﹤0.05);31～40岁年龄组HSV-Ⅱ阳性率最高为43.69%,与其他年龄组相比差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论性病门诊中检测到的HSV-Ⅱ的感染阳性率较高,以31～40岁为主,水疱液或渗出液的阳性率最高。部分无生殖器疱疹症状患者的泌尿生殖道分泌物也能检测到HSV-Ⅱ的感染,因此对无生殖器疱疹的性病患者进行HSV-Ⅱ检测是十分必要的。FQ-PCR检测HSV-Ⅱ敏感、快速、准确,对感染的早期诊断、治疗方案选择、提高疗效具有较大的指导意义。     

3262名孕妇单纯疱疹病毒-Ⅱ型近期感染的监测

目的：为了解孕妇单纯疱疹病毒-Ⅱ型(HSV-Ⅱ型)近期感染状况。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对3262名孕妇静脉血标本进行了HSV-Ⅱ-IgM检测。结果；在上述3262名孕妇中检测出HSV-Ⅱ-IgM阳性标本．11例，阳性率为1．26％。结论：孕妇单纯疱诊病毒-Ⅱ型近期感染应引起临床医师关注。     

杆状病毒和分批补料发酵联用高效表达单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D

目的利用Bac-to-Bac表达系统和分批补料式培养技术在草地夜蛾昆虫细胞(Sf9)中高效表达重组单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2 gD2)。方法 以HSV-2基因组DNA为模板克隆全长gD2基因,利用Bac-to-Bac表达系统构建含目的基因的重组杆状病毒。同时采用分批补料式培养技术高密度培养Sf9细胞实现重组gD2蛋白的高效表达。构建豚鼠生殖器疱疹模型,研究重组HSV-2 gD2蛋白的免疫活性。结果在一个5 L生物反应器内,在15 mmol/L葡萄糖、0.4 g/L谷氨酰胺以及45%溶解氧的培养条件下,重组gD2蛋白的产量高达192 mg/L。此外,纯化后的重组gD2免疫能显著降低豚鼠生殖器疱疹模型的外阴皮损症状。结论 重组HSV-2 gD2蛋白利用杆状病毒和分批补料发酵联用得到高效表达,并表现出良好的免疫原性,为发展HSV-2疫苗奠定了基础。     

我国单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)感染与宫颈癌关系的Meta分析

[目的]探讨我国妇女单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)感染与宫颈癌发病的关系.[方法]采用Meta分析的方法,检索中国知识资源总库、万方全文数据库、重庆维普数据库,对学者自1986年3月～2007年12月公开发表的有关HSV-2感染与宫颈癌发病关系的研究文献进行综合定量分析,应用Review Manager 4.2软件计算优势比值(OR).[结果]入选的15篇文献包括了865个病例,1105个对照.HSV-2感染与宫颈癌发病之间关联明显,其OR=6.15,95%CI为(4.37,8.66).[结论]感染单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)会增加宫颈癌的发病风险.