复方菝葜体内外抑瘤作用研究

复方菝葜体内外抑瘤作用研究北京联合大学中医药学院（１０００８３）王学江，丰平，文朝阳，丁相海我们曾经观察过复方菝葜对荷瘤小鼠（腹水型Ｓ１８０）可延长生存期，有较好的抑瘤作用，在免疫指标的调整方面取得了良好的效果。为进一步探讨其抑瘤机理，我们作了实验动...     

动物肠道溶瘤病毒体内外溶瘤作用的电镜研究

动物肠道溶瘤病毒体内外溶瘤作用的电镜研究凌虹，程志，李呼伦，张凤民，李绍贤，吴振锋，朱平，张莉（哈尔滨医科大学，黑龙江１５００８６）病毒治疗肿瘤是近年来较受重视的肿瘤疗法之一。我们选用鹿肠道病毒ＥＣＣＯ－１８株和牛肠道病毒ＭＺ－４６８株进行溶瘤作用的...     

抑瘤素M研究新进展

抑瘤素Ｍ是继白细胞介素，白血病抑制因子、肿瘤坏死因子等抗瘤细胞因子之后发现的又一重要生物反应调节剂，体外实验证明：ＯＳＭ可以通过多种不同途径产生抑瘤或化瘤活性。同时根据ＯＳＭ与其它细胞调节因子如ＬＩＦ、Ｇ－ＣＳＦ、ＣＮＴＦ及ＴＬ－６间相互区别而又相互联系的生物学特点，可以认为：ＯＳＭ在枘本免疫应答网络、细胞抗感染免疫及多种细胞因子间的功能协调等方面发挥着广泛而又重要的作用。     

不同输注途径对CIK细胞体内分布和抑瘤作用的影响

目的 研究不同输注途径(皮下、腹腔、瘤周注射)对CIK细胞在活体内的分布规律和抑瘤活性的影响.方法 以同位素32P-adATP标记CIK细胞,而后经尾静脉途径和腹腔途径注射入裸鼠体内,用放射性定量检测方法分析CIK细胞在各器官的动态分布.裸鼠皮下注射结肠癌细胞建立肿瘤活体模型,分别按瘤周、腹腔和尾静脉注射途径接受CIK细胞治疗,观察肿瘤的体积和重量变化.结果 CIK细胞输入裸鼠体内后,迅速分布至肝、脾、肾、肺、胃、肠等器官,其中肝、脾、肾的分布浓度最高,CIK细胞在各脏器的分布规律与不同的输注途径存在一定的联系.裸鼠皮下接种结肠癌细胞系HCT-8后,瘤周和尾静脉注射CIK细胞可以明显抑制皮下移植肿瘤的生长,而腹腔注射CIK细胞对于皮下肿瘤的抑制没有统计学意义.结论 CIK细胞体内分布的广泛性表明它可以用于身体各部位恶性肿瘤的治疗;针对不同解剖部位的肿瘤可以选择不同的CIK细胞输注途径以最大限度地提高疗效.     

中药猪苓多糖抑瘤作用机理的初探

猪苓多糖是我国中药中的扶正固本药物 ,对某些肿瘤生长有抑制作用 ,但其机理尚未明确。本实验确定了猪苓多糖注射液对小鼠Ｓ180瘤的生长有抑制作用 ,并检测了猪苓多糖注射液对荷瘤小鼠脾细胞淋转、ＮＫ活性及脾组织ＩＬ 5ｍＲＮＡ表达的影响 ,以期初步揭示猪苓多糖注射液的抑瘤作用机理。材料与方法动物 :ＢＡＬＢ/ｃ纯系小鼠 ,雌雄各半 ,8～ 12周龄 ,体重 18～ 2 0克 ,一级动物 ,河北省实验动物中心提供 ,合格证号 :0 4 0 0 39。细胞株 :①肿瘤细胞株 :Ｓ180瘤株为本校微生物免疫教研室张元杏教授惠赠。②ＮＫ敏感细胞株 :ＹＡＣ 1小鼠胸…     

中药复方抑瘤饮影响荷S180瘤小鼠免疫功能的动态研究

研究荷S180瘤小鼠灌服中药复方抑瘤饮(简称抑瘤饮)不同时间点脾细胞免疫功能的动态变化,揭示其体内抗瘤的免疫机制。于BALB/c小鼠右腋皮下接种S180细胞,24 h后,抑瘤饮组开始每日灌服抑瘤饮,对照组灌服等量凉开水。分别于灌服第0、10、20、30、40天处死动物,称取体重和瘤重;无菌获取脾细胞,MTT法检测NK细胞杀伤活性、ConA诱导转化及IL-2诱生活性,流式细胞仪检测CD4+细胞和CD8+细胞百分率。结果显示,抑瘤饮对小鼠体内S180移植肿瘤的生长,有明显的渐增性抑制作用;抑瘤饮能够明显逆转S180移植肿瘤对小鼠脾细胞的NK细胞杀伤率、转化指数、IL-2诱生活性、CD4+细胞和CD8+细胞百分率的抑制作用,且逆转作用呈时间依赖性增强。表明抑瘤饮体内能够渐增地上调被S180移植肿瘤抑制的免疫功能,从而发挥抗瘤作用。     

灵杆菌LPS的抑瘤作用研究

灵杆菌ＬＰＳ (ＢａｃｔｅｒｉｕｍＰｒｏｄｉｇｉｏｓｕｍＬＰＳ ,ＢＰ ＬＰＳ)是从非致病性革兰氏阴性菌 (产色型灵杆菌ＢＰ Ｓ0 0 3号 )中提取的一种活性物质。以三氯乙酸法(ＴｒｉｃｈｌｏｒｏａｃｅｔｉｃＡｃｉｄ ,ＴＣＡ )及酚水法(ＰｈｏｎｅｌＷａｔｅｒ,ＰＷ )两种不同工艺提取的ＢＰ ＬＰＳ ,进行了抑瘤试验。产色型灵杆菌ＢＰ Ｓ0 0 3号 (来源于黑龙江省应用微生物研究所 )作为菌种 ,经发酵后收集菌体 ,分别经ＴＣＡ法与ＰＷ法提取纯化得ＢＰ ＬＰＳ。ＴＣＡ法提取物简称ＢＰ(Ｔ) ＬＰＳ ;ＰＷ法提取物简称ＢＰ(Ｐ) ＬＰＳ。…     

羟乙基壳聚糖抗人死亡受体5单链抗体纳米粒的制备、鉴定及体内抑瘤研究

目的为提高抗人死亡受体5单链抗体治疗肝癌的效果,探讨羟乙基壳聚糖抗人死亡受体5单链抗体纳米粒(GCS-aDR5ScFv)的制备、鉴定并研究其对小鼠肝癌H22模型的治疗效果及机制。方法用亲和镍柱层析法纯化抗人死亡受体5单链抗体(aDR5ScFv),采用离子凝胶法制备GCS-aDR5ScFv,应用扫描电镜来检测GCS-aDR5ScFv的外观形态,激光粒度分析仪分析纳米粒的粒径及粒径分布,并检测其表面Zeta电势。建立小鼠肝癌H22模型,用0.272 mg/ml GCS-aDR5ScFv隔天治疗并测量小鼠体质量及肿瘤大小,治疗2周。通过Western blot检测active-caspase8、active-caspase3及BAX表达。结果纯化的aDR5ScFv符合理论条带(Mr30 000),GCS-aDR5ScFv纳米粒形态均一,纳米粒径大小、Zeta电势和多分散指数表明GCS-aDR5ScFv稳定。与正常组相比,治疗组小鼠体质量显著差异,治疗组肿瘤体积和大小差异显著。Western blot检测active-caspase8、active-caspase3、BAX的表达水平上调。结论本研究制备的GCS-aDR5ScFv稳定,对小鼠肝癌H22模型具有抑瘤作用,其机制可能与active-caspase8、active-caspase3及BAX蛋白表达上调相关。     

复方虎杖酊的体内外抗感染作用

本文研究了复方虎仗酊的抗感染作用。体外实验表明:该药对金色葡萄球菌、阴沟杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等多种细菌均有明显的抑菌作用,对绿脓杆菌作用尤为突击。对大鼠皮肤烫伤后绿脓杆菌感染及金色葡萄球菌的感染有明显作用,降低了死亡率,与对照组相比,有明显的保护作用(P<0.05)。     

黄芪注射液对H22肝瘤小鼠的抑瘤作用及免疫功能的影响

目的:研究黄芪注射液对小鼠H22移植瘤的生长抑制作用及免疫功能的影响。方法:采用移植性H22肝癌小鼠模型,随机分为模型对照组,5-Fu处理组,黄芪注射液高、中、低剂量组。分别连续腹腔注射5-Fu(25 mg.kg-1),黄芪注射液(12 g.kg-1、8g.kg-1和4g.kg-1)10 d后,处死小鼠,计算抑瘤率、外周血白细胞数、脾指数、胸腺指数I、L-2、TNF-α等指标,分析黄芪注射液对小鼠H22移植瘤的生长抑制作用及免疫功能的影响。结果:与模型组相比,黄芪注射液低、中、高剂量组能显著减少移植瘤瘤重,其抑瘤率分别为18.23%,31.49%,43.09%,其中黄芪注射液高剂量组与CTX组抑瘤率比较,抑瘤率有显著性差异(P<0.05)。黄芪注射液各组可不同程度地升高荷瘤小鼠的白细胞数和胸腺指数、脾指数,且能提高荷瘤小鼠血清中IL-2和TNF-α的水平(P<0.05)。结论:黄芪注射液对小鼠H22移植瘤具有明显的抑瘤作用,其作用可能与增强机体的免疫功能有关。     

复方抗瘤冲剂抑制小鼠S180肉瘤生长的机理研究

目的探讨复方抗瘤冲剂对S180肉瘤的作用及机制。方法通过体内给药,测定抑瘤率及应用流式细胞仪测定S180肉瘤细胞的凋亡率、细胞内Bax及细胞黏附分子CD54的表达量。结果不同剂量复方抗瘤冲剂均有抑瘤作用,抑瘤率分别为19.76％、26.85％和29.94％,抑瘤率与剂量有正相关性,并且对肿瘤细胞有诱导凋亡的作用。Bax的表达水平用药后有明显升高,细胞周期用药前后没有显著改变。复方抗瘤冲剂对CD54表达也有明显的抑制作用。结论复方抗瘤冲剂的抑瘤活性与其诱导细胞凋亡有关,实验结果表明凋亡是通过上调Bax的表达水平来实现的。     

氯喹对S_(180)荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制

目的探讨氯喹(CQ)对小鼠移植性肉瘤S_(180)的抑瘤作用及其可能机制。方法采用40只S_(180)荷瘤小鼠分为模型组,氯喹低剂量组,氯喹中剂量组,氯喹高剂量组进行体内抑瘤实验,观察不同浓度氯喹对小鼠肉瘤S_(180)的抑制作用;透射电子显微镜观察氯喹作用下荷瘤鼠肿瘤细胞超微结构的变化;流式细胞术检测氯喹诱导荷瘤鼠S_(180)细胞凋亡的情况;免疫组织化学方法检测相关凋亡因子Bcl-2、细胞色素C和Cle-Caspase-3的表达情况;Western blotting检测荷瘤组织Bcl-2和Cle-Caspase-3蛋白表达水平的变化以及线粒体和细胞质中细胞色素C蛋白含量的变化。结果与模型组相比较,氯喹处理组小鼠移植肉瘤S_(180)生长速度显著减慢,肿瘤体积和瘤质量明显减小(P0.05);透射电子显微镜观察发现,与模型组比较氯喹处理组肿瘤细胞形态出现明显凋亡损伤改变,凋亡小体形成;各剂量组氯喹均可诱导荷瘤鼠S_(180)细胞凋亡,使抗凋亡因子Bcl-2表达下调,凋亡因子Cle-Caspase-3表达上调(P0.05);并且氯喹能够降低线粒体内细胞色素C蛋白的表达,提高细胞质细胞色素C蛋白的表达(P0.05),促使线粒体内细胞色素C向细胞质内释放。结论氯喹能够抑制小鼠S_(180)肉瘤的生长,可能是通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡,从而发挥抑瘤的作用。     

四种不同类型甲壳胺抑瘤作用的初步比较

目的制备并表征纳米级甲壳胺,初步比较其与O-羧甲基甲壳胺、水溶性低分子量甲壳胺、非水溶性高分子量甲壳胺对人结肠癌LoVo细胞的抑瘤作用。方法采用改进的离子凝胶法制备纳米级甲壳胺,通过透射电子显微镜、马尔文激光纳米粒度测定仪对其形态、粒径、表面电位进行表征。采用MTT法初步比较上述四种类型甲壳胺对人结肠癌LoVo细胞的抑瘤活性。结果制备得到平均粒径160nm的纳米级甲壳胺,高、中浓度下均对LoVo细胞生长有一定的抑制作用,高浓度的抑制率达54.0%,其它三种类型甲壳胺抑制率分别是O-羧甲基甲壳胺4.5%、非水溶性甲壳胺35.8%和低分子量甲壳胺38.1%。结论对人结肠癌LoVo细胞,四种类型甲壳胺中纳米级甲壳胺的体外抑瘤作用最好,O-羧甲基甲壳胺几乎无抑瘤作用。     

死亡肿瘤细胞诱导分化的巨噬细胞体内抗瘤作用的研究

目的观察死亡肿瘤细胞诱导分化的巨噬细胞的体内抗瘤作用。方法采用死亡H22肿瘤细胞诱导单核-巨噬细胞的分化。取40只健康纯系的昆明小鼠，随机分为4组：①生理盐水接种组（A组）；②热灭活H22肿瘤细胞接种组（B组）；③液体石蜡诱生的巨噬细胞接种组（C组）；④死亡肿瘤细胞诱导分化的巨噬细胞接种组（D组）。A组、B组、C组和D组小鼠分别于左后肢皮下接种生理盐水、热灭活H22肿瘤细胞、液体石蜡诱生的巨噬细胞和死亡肿瘤细胞诱导分化的巨噬细胞，2周后各组小鼠分别于左前肢皮下接种生长良好的H22肿瘤细胞，6周后处死全部小鼠，并计算成瘤率、瘤重量与瘤体积；制备小鼠全脾细胞作为效应细胞，以H22肿瘤细胞为靶细胞，混合培养72h后MTT法检测肿瘤细胞杀伤率。结果D组的成瘤率、瘤重量与瘤体积分别为10％、0．12g和0．10cm^3，明显低于A组[80％、（2．41±0．72）g和（2．45±0．82）cm^3]、B组[40％、（0．51±0．36）g和（0．65±0．31）cm^3]和C组[60％、（1．87±0．67）g和（2．15±0．45）cm^3]，P〈0．05，差异有统计学意义；D组的肿瘤细胞杀伤率为（35．89±13．86）％，明显高于A组（12．10±2．74）％、B组（14．88±3．96）％和C组（24．54±4．18）％，P〈0．05，差异有统计学意义。结论死亡肿瘤细胞诱导分化的巨噬细胞具有明显的抗瘤作用。     

IL-17体内外抗肿瘤作用及其机制研究

目的研究IL-17体内外抗肿瘤作用及其机制,为IL-17基因疫苗进入临床提供实验依据。方法建立稳定转染小鼠IL-17全长基因的小鼠乳腺癌细胞(4T1/IL-17)及相应的对照细胞(4T1/pcDNA3.1、4T1),MTS法检测3种细胞的体外增殖情况;流式法检测3种细胞表面MHCI、MHCⅡ、LFA-1分子表达的变化及3种细胞的凋亡情况。建立荷瘤动物模型,观察3种细胞移植瘤在小鼠体内成瘤性、生长情况及小鼠生存期的变化。接种肿瘤细胞6周后分别检测3组小鼠脾细胞CTL杀伤活性、脾细胞增殖情况。用ELISA法检测小鼠脾细胞经刺激后产生IFN-γ、IL-12的情况;流式细胞技术检测4T1/IL-17细胞接种于小鼠体内的细胞凋亡情况及肿瘤组织细胞表面MHCI、MHCⅡ、LFA-1等分子表达的变化。结果转染IL-17基因后在体外对4T1/IL-17、4T1/pcDNA3.1和4T1细胞的增殖;MHCI、MHCⅡ、LFA-1分子表达;细胞凋亡无影响。将4T1/IL-17细胞接种小鼠体内后,荷瘤小鼠的肿瘤生长速度、体积均明显小于4T1/pcDNA3.1细胞组及4T1细胞组,生存时间也明显延长(P<0.05);肿瘤细胞凋亡率明显增高(P<0.05);细胞表面MHCI、MHCⅡ、LFA-1分子表达水平显著性增高(P<0.01);CTL杀伤活性及对ConA刺激的细胞增殖反应性均明显升高(P<0.01);可产生高水平的IFN-γ、IL-12,有显著性差异(P<0.01)。结论 IL-17在体外未显示抗肿瘤作用,IL-17在小鼠体内具有明显的抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用与促进肿瘤细胞细胞凋亡及增强机体免疫应答有关。     

生物疗法在荷瘤裸鼠体内的抗瘤效应

肿瘤生物疗法是80年代兴起，并称之为肿瘤治疗的第4种模式’‘’。目前，在临床上应用的主要是一些细胞团于（cytokines）和淋巴因子激活的杀伤细胞（lym加hi。。tivatedkillercells，LAK细胞），但治疗效果评价不一。为了进一步研究这些生物制品的抗癌效应，本文做了如下探索。l材料和方法1．l实验动物和细胞Balb／c裸鼠，6周一百周龄，共15只，分成1个对照组和4个实验组。脾细胞：取新鲜胳膊用RPMI－1640制备成IX10’‘／L细胞悬液，37℃、5％COZ条件下培养3d－5d。1．2主要试剂①IL－2军事医学科学院产品），分别用生理盐水配制成…     

人乳头瘤病毒58型E6蛋白对p53的作用研究

目的 研究HPV58 E6蛋白与p53蛋白的作用关系，以初步探讨其致癌机理。方法 先通过GST沉降试验和体外降解试验，体外研究HPV58 E6结合降解p53蛋白的作用，进而将表达质粒导人SAOS-2细胞，在细胞内研究HPV58 E6对p53诱导细胞凋亡活性的影响。结果 HPV58 E6能够有效结合p53蛋白并进一步诱导其降解，而且在细胞内，HPV58 E6具有抑制p53蛋白的诱导凋亡的功能。结论 p53蛋白的降解影响其细胞周期调控和诱导凋亡的功能，导致细胞发生恶性转化引发子宫颈癌等肿瘤。     

抑瘤饮增加小鼠S180移植瘤巨噬细胞浸润及TNF-a和iNOS表达

目的 动态研究中药复方抑瘤饮对小鼠S180移植瘤内巨噬细胞(Mψ)浸润及TNF-a和iNOS表达的影响,揭示其体内抗瘤免疫机制.方法 Balb/c小鼠右腋皮下接种S180肿瘤细胞,24 h后,抑瘤饮组小鼠每日灌服抑瘤饮,对照组小鼠每日灌服等量凉开水.分别于第10、20、30天和第40天杀鼠取瘤制成切片,免疫组化染色法检测肿瘤组织内Mψ浸润及TNF-a和iNOS表达,以图像分析系统对染色结果进行测定.结果 所有4个时间点抑瘤饮组Mψ浸润均显著高于对照组;第10天时抑瘤饮组TNF-a和iNOS表达与对照组无差异,第20、30天和第40天时高于对照组.结论 抑瘤饮体内抗瘤作用可能与增加肿瘤组织中Mψ浸润及TNF-a和iNOS表达有关.     

黏液瘤病毒对裸鼠子宫内膜癌移植瘤的抑瘤作用及机制

目的 探讨黏液瘤病毒对裸鼠皮下移植子宫内膜癌的抑瘤作用及其可能机制.方法 采用皮下注射子宫内膜癌HEC-IB细胞的方法建立裸鼠子宫内膜癌模型.瘤内注射黏液瘤病毒后,观察肿瘤生长变化,并用免疫组化方法检测肿瘤组织中PI3K、Akt、GSK表达水平及活性的变化.同时通过瘤内注射灭活病毒和生理盐水作为对照组.结果 黏液瘤病毒对正常裸鼠不存在毒性及致病能力.黏液瘤处理组肿瘤大小较对照组缩小,差异具有统计学意义.经黏液瘤病毒处理的肿瘤组织中PI3K、Akt的表达水平较对照组显著降低.结论 黏液瘤病毒对裸鼠子宫内膜癌移植瘤具有抑瘤作用,其可能机制是通过调节PI3K/AKT（磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸激酶）信号通路调控细胞凋亡.     

三取代型钛钨硅酸盐体内抑瘤效应的免疫机制探讨

目的:探讨三取代型钛钨硅酸盐(WT)体内抑瘤效应的免疫机制。方法:建立荷H22肝癌小鼠模型,WT连续灌胃10d,取出肿瘤称重测定抑瘤率。用MTT比色法测定荷H22肝癌小鼠淋巴细胞转化的活性及NK细胞的杀伤活性。通过形态学观察和流式细胞仪检测WT诱导BEL-7402细胞的凋亡。结果:WT可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长(P<0.05),提高荷瘤小鼠淋巴细胞转化的活性及NK细胞的杀伤活性(P<0.05),并诱导肿瘤细胞发生凋亡。结论:WT的抑瘤作用与机体免疫功能的增强有关。