组织工程骨体内植入运动与感觉神经束后的成骨效果

目的:用放射学方法评估和比较两种组织工程骨体内神经支配重建方法的成骨效果,探讨神经化与成骨的相互关系。方法:实验于2003-12/2005-03在南方医科大学南方医院动物所完成。20只新西兰大白兔随机分成3组:组织工程骨组、感觉神经束植入组、运动神经束植入组,每组6只。另2只兔作为骨缺损空白组。①除骨缺损空白组外,其余3组兔均制备组织工程骨。②各组兔均建立股骨1.5cm长骨缺损模型。③组织工程骨组于骨缺损处只嵌入β-磷酸三钙 经诱导分化的骨髓基质细胞复合物;感觉神经束植入组将隐神经束植入β-磷酸三钙 经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内;运动神经束植入组将股神经束植入β-磷酸三钙 经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内并加以固定;骨缺损空白组骨缺损内不植入任何材料。④术后4,8,12周除骨缺损空白组外各组处死2只兔,观察组织工程骨的表面变化、内痂形成、骨缺损修复情况及周围组织反应。摄股骨正位X射线片,用放射影像学评分和X射线阻射影分析比较骨缺损修复情况。骨缺损空白组于术后12和18周各处死1只,摄片观察骨缺损愈合情况。结果:实验兔20只均进入结果分析。①术后各组X射线片观察结果:组织工程骨组、运动神经束植入组在术后4,8,12周时,骨缺损区阻射影、材料吸收变化、截骨端愈合情况大体类似,感觉神经束植入组在各时间点的成骨量与骨痂塑形均较组织工程骨组、运动神经束植入组出现早且截骨端愈合快。②术后各组植入修复骨缺损的放射影像学评分结果:感觉神经束植入组正位照片骨缺损修复评分在4,8,12周均较组织工程骨组、运动神经束植入组的放射影像学评分为优犤4周:(8.333±0.816),(5.333±0.517),(5.500±0.836)分;8周:(11.333±0.516),(7.166±0.408),(8.167±0.307)分;12周:(12.500±0.894),(9.083±0.376),(10.083±0.801)分,P<0.05犦,但组织工程骨组、运动神经束植入组间无明显差异(P>0.05)。③术后各组植入骨缺损阻射密度测量值的比较:感觉神经束植入组在4,8,12周的骨缺损阻射密度相对值均大于组织工程骨组、运动神经束植入组(4周:58.663±2.541,43.501±2.725,44.578±2.948;8周:62.375±0.992,54.638±1.265,54.203±1.556;12周:84.582±1.017,71.683±2.101,73.585±1.975,P<0.05),但组织工程骨组、运动神经束植入组间差异不明显(P>0.05)。结论:利用感觉神经束植入的方法可以提高组织工程骨的成骨作用,而植入运动神经束却无此作用。     

植入神经的自体骨髓基质细胞-β磷酸三钙复合体修复兔长骨骨缺损

目的：评估在自体骨髓基质细胞-β磷酸三钙复合体内植入感觉神经、运动神经以及感觉神经、运动神经联合神经束的成骨效果，分析组织工程骨神经化与成骨的关系。 方法：实验于2003—12／2005—03在解放军第一军医大学南方医院组织工程实验室完成。选取健康6月龄新西兰大白兔32只，取2只兔作为骨缺损空白组，剩余30只兔随机分为5组：组织工程骨组、感觉神经束植入组、运动神经束植入组、血管束植入组、感觉，运动神经束联合植入组，6只／组。①除骨缺损空白组外，其余5组兔均采用速眠新、氯胺酮和阿托品复合液肌肉注射麻醉制备组织工程骨。②各组兔均建立股骨1．5cm长骨缺损模型。从兔左后肢股骨前外侧纵切口，沿股直肌与股外侧肌间隙锐性分开进入，不切开骨膜，采用钢板和螺钉内固定。于钢板第2、3孔之间，以线锯锯断股骨一侧，用直尺测量股骨1．5cm长，标记好另一端截骨线，线锯截断，切除该段对应的骨膜，造成标准的1．5cm段缺性骨与骨膜缺损。③组织工程骨的神经支配重建：组织工程骨组于骨缺损处只嵌入β磷酸三钙＋经诱导分化的骨髓基质细胞复合物；感觉神经束植入组将隐神经游离足够的长度，锐性切断后将隐神经束植入β磷酸三钙＋经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内；运动神经束植入组解剖出由股神经发出的支配股内侧肌的肌支，游离一段长度后切断，将此神经束植入β磷酸三钙＋经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内并加以固定；血管束植入组将股动脉游离所需长度后不切断血管，直接将血管束顺行植入β磷酸三钙＋经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内；感觉，运动神经束联合植入组将隐神经和股神经肌支联合植入β磷酸三钙＋经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内并加以固定。骨缺损空白组仅制作标准的股骨1．5cm段缺性骨与骨膜缺损，然后钢板内固定，骨缺损内不植入任何材料。④术后4，8，12周组织工程骨组、感觉神经束植入组、运动神经束植入组、血管束植入组、感觉、运动神经束联合植入组各处死2只兔，观察组织工程骨的表面变化、内痂形成、骨缺损修复情况及周围组织反应。摄股骨正位X线片，用放射影像学评分和X线阻射影分析比较骨缺损修复情况。骨缺损空白组于术后12、18周各处死1只，摄片观察骨缺损愈合情况。 结果：实验选取兔32只，全部进入结果分析。①细胞培养过程中倒置显微镜下观察结果：刚接种的骨髓中体积较大的单个核细胞呈球形，悬浮于培养液中。传代培养后3-4h开始贴壁，并逐渐向梭形细胞、多角型细胞转化，5～7d后细胞融合成单层，以后细胞可重叠生长，不发生细胞间的接触抑制现象，最后形成矿化结节。②术后各组大体观察结果：术后12周，组织工程骨组、运动神经束植入组材料大部分为骨痂所包裹，感觉神经束植入组骨缺损区为骨痂包裹，血管束植入组材料见骨缺损区为骨痂连接，感觉，运动神经束联合植入组骨缺损处为骨痂所充填，骨缺损空白组见骨缺损区有少量比较薄的骨痂，靠近两截骨端，骨缺损区为软组织包裹。③术后各组X线片观察结果：术后4，8，12周，感觉神经束植入组、血管束植入组、感觉、运动神经束联合植入组骨缺损区阻射影、材料吸收变化、截骨端愈合情况大体类似，但各组的成骨量与骨痂塑形均较组织工程骨组、运动神经束植入组出现早且截骨端愈合快。④术后各组植入修复骨缺损的放射影像学评分结果：与组织工程骨组、运动神经束植入组比较，感觉神经束植入组、血管束植入组、感觉，运动神经束联合植入组术后4，8，12周骨缺损区影像学评分均明显升高（P均〈0．05），但此3组之间基本相似（P〉0．05）。⑤术后各组植入骨缺损阻射密度测量值的比较：与组织工程骨组，运动神经束植入组比较，感觉神经束植入组、血管束植入组、感觉，运动神经束联合植入组术后4，8，12周骨缺损阻射密度相对值均明显升高（P均〈0．05），但此3组之间基本相似（P〉0．05）。 结论：在组织工程骨中分别植入感觉神经束、血管束、感觉神经联合运动神经束后，可显著提高组织工程骨的成骨效果，但在组织工程骨中植入运动神经未明显增加组织工程骨的成骨作用。     

兔骨髓间充质干细胞复合小牛脱钙骨修复胫骨缺损的可行性

目的：通过兔骨髓间充质干细胞复合小牛脱钙骨对兔胫骨长段骨-骨膜缺损修复情况的观察，探讨骨髓间充质干细胞与小牛脱钙骨联合应用于负重骨修复的可行性。 方法：实验于2001—10／2002-08在牡丹江市第二人民医院放射科进行。①健康成年新西兰大白兔-24只，随机编号后从自体骨髓中分离出骨髓间充质干细胞，与小牛脱钙骨于体外复合培养，并将这24只大白兔制备成双侧胫骨中段10mm骨一骨膜缺损模型，行常规钢板螺钉固定。②随机选取其中的20只，对同一只兔将复合物植入右侧胫骨缺损处作为实验组，将小牛脱钙骨植入左侧胫骨缺损处作为对照组；另4只兔作为空白组，双侧骨缺损不植入任何材料。然后分栏放养，观察各组兔术后一般情况。③在8，12，16，24周各时间点分别取出骨缺损修复标本，进．行大体观察和骨密度测试，并进行统计学分析，以比较各组修复骨缺损的能力。 结果：实验大白兔24只均进入结果分析。①各组兔术后一般情况：术后各组动物恢复及进食均正常，伤口无炎性反应，愈合良好。②各组兔骨缺损修复标本大体观察：术后8周实验组骨缺损部分修复，12，16周骨缺损完全修复，8，12，16，24周时实验组的骨缺损修复和骨痂生长情况明显好于对照组；24周时空白组的各缺损区均未发现有骨组织形成。③各组兔骨缺损区的骨密度测量结果：术后8，12，16周时各缺损区的骨密度测量结果显示实验组明显高于对照组（实验组：0．945&;#177;0．063，1．246&;#177;0．027，1．568&;#177;0．059；对照组：0．601&;#177;0．024，1．001&;#177;0．023，1．219&;#177;0．033，P〈0.05）。24周时实验组与对照组比较无统计学意义（1．627&;#177;0．054，1．462&;#177;0．107，P〉0．05）。空白组骨缺损未修复。 结论：骨髓间充质干细胞构建的组织工程骨早期修复骨缺损能力较强，且与单纯小牛脱钙骨相比成骨量大、迅速，能够对负重骨缺损进行有效的修复。     

兔骨髓间充质干细胞复合生物衍生骨修复胫骨缺损

目的：探讨骨髓间充质干细胞与生物衍生骨复合修复兔胫骨的长段骨-骨膜缺损，以及修复负重骨缺损的可行性。 方法：实验于2001-10／2002-08在牡丹江市第二人民医院放射科进行。①取成人尸体胫骨4具（来源于哈尔滨医科大学），切取干骺端松质骨及皮质骨2．0cm&;#215;0．5cm&;#215;0．5cm的骨块，经脱细胞、脱脂、脱蛋白及去抗原等处理后冻干，制备成生物衍生骨。②取健康成年新西兰大白兔24只，随机编号后从自体骨髓中分离出骨髓间充质干细胞，与生物衍生骨于体外复合培养，并将这24只大白兔制备成双侧胫骨中段10mm骨一骨膜缺损模型，行常规钢板螺钉固定。③随机选取其中的20只，对同一只兔将复合物植入右侧胫骨缺损处作为实验组，将单纯生物衍生骨植入左侧胫骨缺损处作为对照组；另4只兔作为空白组，双侧骨缺损不植入任何材料。然后分栏放养，观察各组兔术后一般情况。④在8，12，16．24周各时间点分别取出骨缺损修复标本，进行大体观察和骨密度测试，并进行统计学分析，以比较各组修复骨缺损的能力。 结果：实验大白兔24只均进入结果分析。①各组兔术后一般情况：术后各组动物恢复及进食均正常，伤口无炎性反应，愈合良好。②各组兔骨缺损修复标本大体观察：术后8，12周实验组骨缺损部分修复，16周骨缺损完全修复，8，12，16周时实验组的骨缺损修复和骨痂生长情况明显好于对照组；24周时空白组的各缺损区均未发现有骨组织形成。③各组兔骨缺损区的骨密度测量结果：术后8，12，16周时各缺损区的骨密度实验组明显高于对照组（0．923&;#177;0．045比0．571&;#177;0．021，1．234&;#177;0．023比1．003&;#177;0．037，1．643&;#177;0.071比1．157&;#177;0．029，P〈0．05）。24周时实验组与对照组比较无统计学意义（P〉0．05）。空白组骨缺损未修复。 结论：骨髓间充质干细胞构建的组织工程骨早期修复骨缺损能力较强，且较单纯生物衍生骨成骨量大、迅速，能够对负重骨缺损进行有效的修复。     

血管化组织工程骨修复山羊胫骨骨缺损的实验

背景：组织工程骨修复大型哺乳动物大范围的骨缺损，如何促进组织工程骨的体内再血管化进程是核心问题。在临床工作中，常采用带蒂筋膜技术促进植入物的再血管化。目的：观察带蒂深筋膜瓣促组织工程骨修复羊胫骨骨缺损及其再血管化的能力。设计：随机对照动物实验。单位：南方医科大学南方医院创伤骨科。材料：36只中国青山羊，体质量14．5～15．5kg，雌雄不限。方法：实验于1999-12／2003-12在原解放军第一军医大学南方医院创伤骨科完成。36只中国青山羊制作单侧胫骨中段20mm骨与骨膜缺损，钢板内固定，随机分4组：空白组、单纯材料组（珊瑚羟基磷灰石）、组织工程骨组（单纯珊瑚羟基磷灰石复合经诱导分化的骨髓基质细胞）、筋膜瓣组（带蒂深筋膜包裹组织工程骨）。术后2，4，8周行放射性核素骨显像检查；4，8，12周放射学及组织学检查、12周生物力学检查评价各组成骨及再血管化情况。主要观察指标：各组动物骨缺损区大体观察、X射线、放射性核素骨扫描、生物力学及组织学观察结果。结果：36只羊均进入结果分析。①各组动物骨缺损修复标本大体形态观察：术后空白组在各个时间点均无骨组织形成。单纯材料组8～12周时．材料表面未见明显骨质形成和骨痂形成。组织工程骨组骨8～12周骨缺损渐被充填，材料表面可见有较多骨痂突出并向中央集中，并基本包裹材料。筋膜瓣组骨其成骨过程明显优于组织工程骨组。②各组动物发射型断层扫描仪检查结果：筋膜瓣组2～8周间肉眼可明显分辨出术侧感兴趣区的放射性浓度呈明显上升趋势，组织工程骨组呈现与筋膜瓣组类似的变化趋势，但其感兴趣区计数及T／WT比值均较相应的筋膜瓣组低。单纯材料组的递增趋势亦较组织工程骨组低。③各组动物放射学检查结果：通过吸光度比值的测量按成骨量大小形成的顺序依次为筋膜瓣组、组织工程骨组、单纯材料组[12周分别为（4．180&;#177;0．192），（3．480&;#177;0．453），（2．959&;#177;0．682）]。④各组动物生物力学检测结果：筋膜瓣组、组织工程骨组、单纯材料组组间载荷、弯曲应力差异显著[载荷依次为（758．333&;#177;88．754），（530．214&;#177;65．297），（359．667&;#177;60．715）N；弯曲应力依次为（13．937&;#177;2．199），（10．123&;#177;1．243），（6．223&;#177;0．945）N／mm^2]。⑤各组动物组织学结果：空白组术后各时间点切片显示无骨组织。其余3组随时间增长，成骨范围和质量依次为筋膜瓣组、组织工程骨组、单纯材料组。结论：筋膜瓣通过促进组织工程骨体内再血管化的速度，促进其体内成骨速度及修复骨缺损的能力。     

用于组织工程骨构建研究的兔单一负重骨缺损模型

目的：为组织工程骨构建及修复负重长骨缺损的研究提供标准化的实验性骨缺损动物模型。方法：本实验于2004-10／2005-04在南方医科大学南方医院组织工程实验室和实验动物研究中心完成。①测量成年新西兰大白兔5只10具股骨干标本相关解剖数据并据此改进兔股骨固定方法。②18只新西兰大白兔随机分为3组，每组6只，分别制备10mm，15mm，20mm的股骨干中段骨和骨膜缺损，普通钢板螺丝钉及钢丝固定。③术后4，8，12周分别摄X射线侧位片进行定性分析、双能量X射线骨密度测量仪（DEXA）测量骨密度进行定量分析，各时间点每组各取2只标本做组织学检查。结果：23只兔均进入结果分析。①兔股骨测量结果：股骨长度（94．1&;#177;3．01mm；股骨干中点横径（7．4&;#177;0．4）mm，矢状径（5．8&;#177;0．41mm；骨皮质平均厚度（1．2&;#177;0．1）mm；髓腔平均直径（4．1&;#177;0．2）mm。②大体观察：4周时各组骨缺损均为纤维组织填充；8周时10mm骨缺损组已经见到骨痂连接；12周时10mm骨缺损组骨痂坚实，无异常活动，而15mm，20mm骨缺损组均为纤维瘢痕组织填充，去除内固定后有异常活动度。③X射线观察缺损区骨生长情况：10mm骨缺损组第12周时骨缺损区图像与4周时相比有明显的新骨形成；而15mm，20mm骨缺损组各时间段均无骨性填充影像；DEXA测量结果显示10mm骨缺损组在12周时新生骨已达临近骨组织密度的一半，而15mm，20mm骨缺损组各时间段的骨密度均为零。④组织学检查：12周时10mm缺损组由新生骨和软骨组织填充，部分髓腔再通；15mm，20mm骨缺损组在12周的观察期内只有骨断端和钢板螺丝钉周围有少量骨痂生长。以上各项检查显示：10mm骨缺损组均于8～12周出现骨性愈合；15mm和20mm骨缺损组直到12周仍未见骨愈合现象。结论：钢板螺丝钉固定的兔股骨干15mm以上的实验性骨缺损不能自行愈合，可用于组织工程骨的血管神经同步构建研究。     

兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质构建组织工程骨修复骨缺损的实验研究

目的：观察兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质构建组织工程骨的可行性及其骨缺损修复作用。方法：实验于2004-03／2005-01在哈尔滨医科大学第一临床医学院动物实验中心完成。①选取日本大耳白兔36只，雌雄不限，随机分成两组，即实验组和对照组各18只，每组再随机分成3小组即4，8和12周组各6只，另选3只日本大耳白兔作为空白组。②将实验组所有动物于胫骨结节处用骨穿针刺入骨髓腔抽取骨髓2．0mL，进行分离、培养和诱导，适时将功能状态良好的兔骨髓源成骨细胞以一定细胞浓度与人部分脱钙骨基质支架材料复合构建组织工程骨，并于复合后24．48和72h用扫描电镜观察细胞在支架材料孔隙内贴附、生长、增殖和功能情况。③所有动物于右侧桡骨中段制作1．5cm骨膜骨缺损模型，实验组骨缺损处植入组织工程骨，对照组骨缺损处植入人部分脱钙骨基质支架。于术后4，8，12周行X射线检查、大体观察，组织学检查，对比研究其成骨和血管化过程及其骨缺损修复能力。结果：①兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质复合后24h在材料孔隙内部分贴附良好，部分堆积成团；48h基本全部贴壁并有胶原分泌；72h全部贴壁，细胞完全伸展，相邻细胞间有突起相互连接，细胞分布均匀，数量增多，并有大量胶原分泌。②术后12周，实验组X线有明显阻射，骨缺损部位塑型基本完成，骨髓腔已开始再通；对照组支架材料X线阻射进一步增强，两端已愈合，已开始塑型。空白组术后无X射线阻射，无成骨。③实验组和对照组随着时间的推移其成骨量和新生血管数量逐渐增多，实验组4，8，12周组织学血管面积测定值均高于对照组[（2．068&;#177;0．216）％比（0．532&;#177;0．102）％，（2．976&;#177;0．304）％（1．302&;#177;0．354）％．（3．708&;#177;0．382）％比（2．246&;#177;0．402）％，P〈0．05]。结论：兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质生物相容性良好，支架材料为细胞生长提供了良好的三维空间，用兔骨髓源成骨细胞与人部分脱钙骨基质构建组织工程骨是可行的，构建的组织工程骨具有良好的骨修复作用。     

异种煅烧骨与Ⅰ型胶原复合骨形态发生蛋白修复兔桡骨缺损过程中的组织学与生物力学变化特征

目的：制备异种煅烧骨、Ⅰ型胶原和骨形态发生蛋白复合材料，观察在骨缺损修复过程种的组织学和生物力学变化。 方法：实验于2004-07／2005-04在第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所实施。①采用小牛骨粒制备牛煅烧骨；胃蛋白酶液消化新鲜牛腱制备Ⅰ型胶原；牛骨形态发生蛋白及Ⅰ型胶原制备活性复合颗粒实验材料。②取兔36只，建立桡骨中段15mm骨缺损模型，随机分为4组，每组9只。空白对照组不植入材料；煅烧骨组植入单纯煅烧骨，将煅烧骨与骨水泥按1：1复合后制成长15mm，直径4mm柱件，至骨水泥面团期时填入骨缺损处；自体骨组植入自体骨；复合材料组植入活性复合颗粒，按1：1质量比将活性颗粒与骨水泥复合。植入物均不作固定，清洗，缝合，术后回笼喂养。③观察指标：术后4，12，24周每组各取3只兔，分别通过X射线检查，组织学观察，生物力学测定和扫描电镜等手段观察新骨形成和材料降解情况。 结果：36只兔均进入结果分析。术后各组动物均无毒性反应。①各组兔骨缺损区X射线检查结果：术后24周时复合材料组、自体骨组骨缺损已修复，而煅烧骨组，空白对照组未修复。②各组植入材料组织学观察结果：术后24周时复合材料组、自体骨组骨缺损有大量新骨形成，而煅烧骨组、空白对照组未见新骨形成。③复合材料扫描电镜观察结果：复合材料空隙率高，复合紧密。④各组植入材料生物力学测定：术后24周复合材料组最大扭转强度和最大载荷接近自体骨组[（0．76&;#177;0．05）N&;#183;m．（162．6&;#177;4．1）N，（0．82&;#177;0．03）N&;#183;m，（172．2&;#177;6．1）N，P〉0．05]，明显高于煅烧骨组[（0．26&;#177;0．01），（46．8&;#177;6．8）N，P〈0．05]。 结论：①异种煅烧骨、Ⅰ型胶原和骨形态发生蛋白复合移植物具有较强的成骨作用及修复骨缺损能力。②复合材料组最大扭转强度和最大弯曲载荷接近自体骨组。③可望成为新型骨缺损修复材料。     

植入神经的自体骨髓基质细胞-β磷酸三钙复合体修复兔长骨骨缺损

目的:评估在自体骨髓基质细胞-β磷酸三钙复合体内植入感觉神经、运动神经以及感觉神经、运动神经联合神经束的成骨效果,分析组织工程骨神经化与成骨的关系。方法:实验于2003-12/2005-03在解放军第一军医大学南方医院组织工程实验室完成。选取健康6月龄新西兰大白兔32只,取2只兔作为骨缺损空白组,剩余30只兔随机分为5组:组织工程骨组、感觉神经束植入组、运动神经束植入组、血管束植入组、感觉 运动神经束联合植入组,6只/组。①除骨缺损空白组外,其余5组兔均采用速眠新、氯胺酮和阿托品复合液肌肉注射麻醉制备组织工程骨。②各组兔均建立股骨1.5cm长骨缺损模型。从兔左后肢股骨前外侧纵切口,沿股直肌与股外侧肌间隙锐性分开进入,不切开骨膜,采用钢板和螺钉内固定。于钢板第2、3孔之间,以线锯锯断股骨一侧,用直尺测量股骨1.5cm长,标记好另一端截骨线,线锯截断,切除该段对应的骨膜,造成标准的1.5cm段缺性骨与骨膜缺损。③组织工程骨的神经支配重建:组织工程骨组于骨缺损处只嵌入β磷酸三钙 经诱导分化的骨髓基质细胞复合物;感觉神经束植入组将隐神经游离足够的长度,锐性切断后将隐神经束植入β磷酸三钙 经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内;运动神经束植入组解剖出由股神经发出的支配股内侧肌的肌支,游离一段长度后切断,将此神经束植入β磷酸三钙 经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内并加以固定;血管束植入组将股动脉游离所需长度后不切断血管,直接将血管束顺行植入β磷酸三钙 经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内;感觉 运动神经束联合植入组将隐神经和股神经肌支联合植入β磷酸三钙 经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内并加以固定。骨缺损空白组仅制作标准的股骨1.5cm段缺性骨与骨膜缺损,然后钢板内固定,骨缺损内不植入任何材料。④术后4,8,12周组织工程骨组、感觉神经束植入组、运动神经束植入组、血管束植入组、感觉 运动神经束联合植入组各处死2只兔,观察组织工程骨的表面变化、内痂形成、骨缺损修复情况及周围组织反应。摄股骨正位X线片,用放射影像学评分和X线阻射影分析比较骨缺损修复情况。骨缺损空白组于术后12、18周各处死1只,摄片观察骨缺损愈合情况。结果:实验选取兔32只,全部进入结果分析。①细胞培养过程中倒置显微镜下观察结果:刚接种的骨髓中体积较大的单个核细胞呈球形,悬浮于培养液中。传代培养后3～4h开始贴壁,并逐渐向梭形细胞、多角型细胞转化,5～7d后细胞融合成单层,以后细胞可重叠生长,不发生细胞间的接触抑制现象,最后形成矿化结节。②术后各组大体观察结果:术后12周,组织工程骨组、运动神经束植入组材料大部分为骨痂所包裹,感觉神经束植入组骨缺损区为骨痂包裹,血管束植入组材料见骨缺损区为骨痂连接,感觉 运动神经束联合植入组骨缺损处为骨痂所充填,骨缺损空白组见骨缺损区有少量比较薄的骨痂,靠近两截骨端,骨缺损区为软组织包裹。③术后各组X线片观察结果:术后4,8,12周,感觉神经束植入组、血管束植入组、感觉 运动神经束联合植入组骨缺损区阻射影、材料吸收变化、截骨端愈合情况大体类似,但各组的成骨量与骨痂塑形均较组织工程骨组、运动神经束植入组出现早且截骨端愈合快。④术后各组植入修复骨缺损的放射影像学评分结果:与组织工程骨组、运动神经束植入组比较,感觉神经束植入组、血管束植入组、感觉 运动神经束联合植入组术后4,8,12周骨缺损区影像学评分均明显升高(P均<0.05),但此3组之间基本相似(P>0.05)。⑤术后各组植入骨缺损阻射密度测量值的比较:与组织工程骨组、运动神经束植入组比较,感觉神经束植入组、血管束植入组、感觉 运动神经束联合植入组术后4,8,12周骨缺损阻射密度相对值均明显升高(P均<0.05),但此3组之间基本相似(P>0.05)。结论:在组织工程骨中分别植入感觉神经束、血管束、感觉神经联合运动神经束后,可显著提高组织工程骨的成骨效果,但在组织工程骨中植入运动神经未明显增加组织工程骨的成骨作用。     

自行设计微创植骨器修复骨缺损的疗效观察

目的：应用自行设计的微创植骨器进行微创植骨术修复骨缺损的生物功学和组织学观察。方法：实验于2004-04／10在上海第二医科大学附属仁济医院动物实验中心完成。将12只新西兰大白兔双侧桡骨截骨制成骨缺损模型，随机把每只兔双侧前肢分为两组：开放植骨术组沿原切口切开20mm长皮肤进入，开放桡骨髓腔，植入金世植骨灵骨块。微创植骨术组应用自行设计的微创植骨器进行植骨。分别在术后第4，8周，各随机取6只兔进行生物力学检查及组织学观察，比较两组家兔桡骨骨缺损修复情况。结果：12只兔均进入结果分析。①两组兔桡骨生物力学检查结果：第4周开放植骨术组和微创植骨术组分别有2根和5根桡骨可以进行生物力学检查，微创植骨术组桡骨的抗弯曲破坏应力值大于开放植骨术组[（69．58&;#177;34．99），（12．83&;#177;20．41）N，P〈0．05]；第8周开放植骨术组和微创植骨术组均有6根桡骨可以进行生物力学检查，微创植骨术组桡骨的抗弯曲破坏应力值大于开放植骨术组[（220．97&;#177;33．79），（186．73&;#177;29．84）N，P〈&;#177;0．05]。②两组兔桡骨组织学观察结果：第4周微刨植骨术组骨缺损区骨小梁密度（比值）大于开放植骨术组[（67．07&;#177;4．56），（51．29&;#177;5．95）P〈0．01]；第8周，微创植骨术组骨缺损区骨小梁密度小于开放植骨术组[（40．82&;#177;6．37），（50．81&;#177;7．51）P〈0．05]，骨小梁改建形成板层骨比开放植骨术组早。结论：通过生物力学检查及组织学观察，微创植骨术修复骨缺损的疗效优于开放植骨术。