晚期糖基化终末产物对中性粒细胞生物学行为的影响

目的 观察晚期糖基化终末产物(AGE)对中性粒细胞生物学行为的影响,了解皮肤组织中AGE蓄积与糖尿病愈合中异常炎性反应的关系. 方法 体外分离培养SD大鼠中性粒细胞.在细胞悬液中加入不同的刺激物,根据所加物质分为:对照组,加入RPMI 1640培养液;A组,加入0.315 mg/mL AGE+RPMI 1640;B组,加入0.625 mg/mL AGE+RPMI 1640;C组,加入1.250mg/mL AGE+RPMI 1640.噻唑蓝法检测中性粒细胞活力;反转录-PCR法检测L-选择素mRNA表达;酶联免疫吸附测定法检测中性粒细胞弹性蛋白酶释放量;二氢二氯荧光黄二醋酸盐法检测中性粒细胞内活性氧水平. 结果 A、B、C组中性粒细胞活力(0.320±0.030、0.380±0.020、0.290±0.010)均高于对照组(0.170±0.040,P＜0.05).各实验组L-选择素mRNA表达水平(A组0.95±0.08、B组1.36±0.27、C组0.50±0.26)、弹性蛋白酶释放量(A组1.98±0.43、B组2.50±0.43、C组2.01±0.18)、活性氧水平(A组1.64±0.20、B组2.16±0.26、C组3.26±0.75)也均高于对照组(此3项指标分别为0.36±0.26、0.91±0.21、0.72±0.15,P＜0.05). 结论 AGE能增强中性粒细胞活力,使细胞的多种生物学行为发生改变,这可能是糖尿病异常炎性反应的主要原因之一.     

金雀异黄素对终末糖基化产物刺激大鼠系膜细胞终末糖基化产物受体表达的影响

目的 研究金雀异黄素(Gen)对终末糖基化产物(AGEs)刺激下其系膜细胞受体(RAGE)表达的影响。方法 以AGEs刺激高糖培养的SD大鼠系膜细胞,采用细胞免疫组化法检测系膜细胞RAGE表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞内.RAGEmRNA水平;比色法检测细胞内丙二醛(MDA)水平。结果 AGEs刺激高糖培养的系膜细胞后RAGE表达及RAGEmRNA水平明显增加(P<0.05);MDA水平显著增加(P<0.01)。Gen能有效抑制RAGE及其:mRNA的表达,减少MDA水平,且呈时间和浓度依赖效应,以200μmol／L作用48 h效果最显著(P<0.01)。结论 体外模拟糖尿病环境下,AGEs刺激使。肾系膜细胞内RAGE高表达。Gen可以下调AGEs刺激后系膜细胞RAGE的异常表达,其可能的机制是阻断了氧化应激介导的AGEs-RAGE之间的正反馈途径,表现为细胞内MDA含量减低。     

晚期糖基化产物受体信号传导在羧甲赖氨酸诱导足细胞表达单核细胞趋化因子中的作用

目的 了解足细胞上晚期糖基化产物受体（RAGE）激活后的细胞内信号的传导途径.方法 激光共聚焦显微镜观察细胞内反应性氧自由基（ROS）的产生.Western印迹方法检测足细胞内丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）家族磷酸化,RT-PCR方法检测单核细胞趋化因子-1（MCP-1）的mRNA表达.结果 足细胞细胞核内存在基础性的ROS,AGE和羧甲赖氨酸（carboxymethyllysine,CML）分别诱导细胞浆内ROS增加2.2和2.6倍.N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）抑制基础性和诱导性ROS形成,RAGE中和抗体则完全抑制诱导性的ROS产生.NAC也可直接抑制CML以及外源性H2O2诱导的MCP-1的表达.使用CML刺激足细胞10 min后,磷酸化细胞外信号调节激酶（ERK）增加3.8倍.而CML刺激足细胞120 min仍没有发现磷酸化的p38MAPK和应激活化蛋白激酶（SAPK）/氨基末端激酶（JNK）表达或上调.使用NAC,7氨4三氟甲基香豆素（AFC）可以完全防止ERK磷酸化并抑制MCP-1的mRNA表达.PD98059阻断了ERK磷酸化却并不能完全抑制MCP-1的mRNA的表达.结论 足细胞上RAGE激活后,通过ROS-p21Ras-ERK信号途径诱导足细胞表达MCP-1.     

异丙酚对小鼠海马脑片细胞外信号调节激酶ERK1/2磷酸化水平的影响

目的 观察异丙酚对小鼠海马脑片细胞外信号调节激酶ERK1／2磷酸化水平的影响。方法BALB／C小鼠，体重18～22g，雌雄不拘，迅速断头取脑，取海马用震动切片机切成450μm厚的脑片。量效实验随机将脑片分为空白对照组（C组）及不同浓度异丙酚组[10^-4mmol／L（P1组）、10^-5mmol／L（P2组）、10^-6mmol／L（P3组）、10^-7mmol／L（P4组）、10^-8mmol／L（P5组）、10^-8mmol／L（P6组）]；分别以不同浓度的异丙酚36℃恒温孵育海马脑片1h。时效实验应用5μmol／L异丙酚孵育脑片，分别于孵育即刻、1、2、5、7、9、12、15、30、60min取出脑片；取5μmol／L异丙酚孵育5min后的部分脑片，以人工脑脊液洗出异丙酚，分别于洗出2、4、7、10、25min取出脑片。应用SDS-PAGE和Westem blot生化技术及Gel Doc凝胶成像系统半定量检测小鼠海马p-ERKI／2水平。结果 异丙酚能降低ERK1／2磷酸化水平，降低呈时间、浓度依赖性（P〈0．05）。随异丙酚孵育5min后洗出时间延长，ERK1／2的磷酸化水平逐渐恢复，但洗出25min时仍明显低于药物处理前水平（P〈0．01）。结论 异丙酚能显著地抑制小鼠海马脑片细胞外信号调节激酶ERK1／2磷酸化水平。     

晚期糖基化终末产物与慢性肾衰竭的研究进展

晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products AGEs)在衰老过程中积聚是正常现象,但在肾衰竭和糖尿病患者中,AGEs参与并加速了慢性肾衰竭(CRF)及糖尿病的进展。本文就近年来对AGEs在CRF中作用的相关研究作一综述。     

Cyclopamine调控Hedgehog信号通路对正常角质形成细胞的影响

目的:探讨cyclopamine抑制Hedgehog信号转导通路对角质形成细胞增殖的影响。方法:在培养的Hacat角质形成细胞中加入Hedgehog信号转导通路特异性抑制剂cyclopamine,在不同的作用时间,应用MTT和BrdU掺入的方法,检测cyclopamine对Hacat角质形成细胞生长和增殖的影响。结果c:yclopamine可以抑制Hacat角质形成细胞的生长和增殖。结论:抑制Hedgehog信号转导通路可能对角质形成细胞增殖起到一定的抑制作用。     

晚期糖基化终末产物与其受体对糖尿病创面氧化应激反应的影响

目的 观察糖尿病患者皮肤和创面中晚期糖基化终末产物(AGE)的蓄积和炎症反应,并结合体外干预实验推测两者之间可能存在的关系. 方法 采集10例2型糖尿病患者(糖尿病组)和12例非糖尿病患者(非糖对照组)的皮肤和创面组织标本,部分于光学显微镜下观察胶原排列、细胞分布(HE染色),AGE及其受体(RAGE)表达(免疫组织化学染色);部分匀浆后采用ELISA法检测丙二醛含量.体外采集、分离健康人外周血中性粒细胞,并分为正常对照组(添加RPMI-1640培养液培养)、低浓度干预组、中浓度干预组和高浓度干预组,3个干预组分别在RPMI-1640培养液中添加AGE修饰的人血清白蛋白,其中AGE的浓度依次为0.315、0.625、1.250 mg/mL;噻唑蓝法检测细胞存活率,荧光探针二氢二氯荧光黄双乙酸钠测定细胞内活性氧水平.对数据进行t检验. 结果 与非糖对照组比较,糖尿病组皮肤组织中胶原萎缩,排列紊乱;创面组织中炎性细胞弥散分布,胶原排列稀疏紊乱.糖尿病组皮肤组织中AGE和RAGE表达均多于非糖对照组;2组创面组织中RAGE呈阳性表达的细胞数量均多于所在组皮肤组织,以糖尿病组更显著,其创面内可见大量RAGE呈阳性表达的炎性细胞.糖尿病组患者皮肤和创面组织中每毫克蛋白丙二醛含量分别为(6 3±1.0)、(7.1±2.4)nmol,均明显高于非糖对照组相应组织[(2.9±1.0)、(3.6±1.4)nmol,t值分别为8.017、4.349,P ＜0.05或P＜0.01].与正常对照组[(34±5)％]比较,低浓度干预组、中浓度干预组、高浓度干预组中性粒细胞存活率均明显上升[(59±8)％、(77±5)％、( 67±6)％,t值分别为7.195、14.890、11.130,P＜0.05或P＜0.01].与正常对照组(0.58±0.06)比较,低浓度干预组、中浓度干预组、高浓度干预组中性粒细胞内活性氧水平均升高(1.67±0.14、2.13±0.17、3 48±0.48,t值分别为20.195、24.905、16.864,P＜0.05或P＜0.01). 结论 异常的氧化应激水平导致糖尿病皮肤具有异常的创伤修复起点,创面愈合过程中AGE-RAGE效应是影响糖尿病创面氧化应激水平的重要因素.     

与人汗腺细胞共培养的人骨髓间充质干细胞表型转化中细胞外信号调节激酶通路的作用

目的观察人骨髓间充质干细胞(MSC)与热休克的人汗腺细胞(SGC)间接共培养后,其表型转化情况及细胞外信号调节激酶(ERK)通路所起的作用。方法体外分离和培养人MSC、SGC,采用二步免疫细胞化学法鉴定其均为纯化的SGC、MSC。将原代培养的SGC于47℃下行热休克处理后收集上清液。将第3代MSC作为实验对象并分组。对照组:行常规培养;SGC上清液组:采用含体积分数30％SGC上清液、体积分数1％胎牛血清、1×105U／L青霉素和0．1 g／L硫酸链霉素的DMEM／F12培养基培养;SGC上清液+表皮生长因子(EGF)组、SGC上清液+PD98059组同SGC上清液组处理后,分别添加50μg／L EGF、10μmol／L PD98059继续培养。培养7 d时用流式细胞术检测各组细胞中细胞角蛋白(CK)7、癌胚抗原(CEA)的阳性表达率,以蛋白质印迹法检测ERK和磷酸化ERK(pERK)的表达水平。结果SGC上清液组CK7、CEA阳性表达率分别为(5.76±0．10)％、(2．01±0．09)％;SGC上清液+EGF组分别为(7．31±0.21)％、(7．27+0.12)％;SGC上清液+ PD98059组分别为(1．63±0．11)％、(1．54±0．07)％。与对照组比较,前两组两项指标均明显升高(P<0.01),后一组却与之相近。各组细胞均表达ERK;但pERK水平以SGC上清液+EGF组最高,其次为SGC上清液组,SGC上清液+PD98059组和对照组几乎无表达。结论人MSC、SGC间接共培养可诱导MSC表型转化,ERK通路参与该过程并起着积极作用。     

猪脱细胞真皮基质通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路对大鼠角质形成细胞细胞周期蛋白D1的表达的影响

目的:探讨猪脱细胞真皮基质(pADM)对大鼠角质形成细胞细胞周期蛋白(Cyclin) D1的影响及其机制。方法:体外培养原代大鼠角质形成细胞,免疫组织化学鉴定原代角质形成细胞;实验分组：对照组、pADM组、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路激动剂SKL2001组、pADM+Wnt/β-catenin信号...     

糖基化终末产物对骨髓间质干细胞增殖的影响

 目的 研究糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)对骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)增殖的影响及相关分子机制。方法 体外培养SD(Sprague-Dawley)大鼠骨髓MSCs, 流式细胞仪鉴定细胞表面的阳性指标(CD29 和CD90)和阴性指标(CD34 和CD45)。MTT 法检测不同剂量(0、25、50、100和200 μg/ml)终末期糖基化牛血清白蛋白(advanced glycation end productsbovine serum albumin, AGE-BSA)刺激骨髓MSCs不同时间(6 h、12 h、24 h)后MSCs的增殖变化。同时以200 μg/ml 的BSA 作为阴性对照, 以未经处理的骨髓MSCs 作为空白对照。用200 μg/ml 的AGE-BSA刺激骨髓MSCs 12 h和24 h后, 利用基因芯片检测相关基因表达变化。结果 AGE-BSA 可抑制骨髓MSCs 的增殖, 并呈剂量与时间相关性。与对照组相比, AGE-BSA 浓度为100 μg/ml 处理24 h 或浓度为200 μg/ml 处理12 h或24 h后, 骨髓MSCs 增殖活性明显下降, 差异具有统计学意义。基因芯片检测发现骨髓MSCs 在AGE-BSA作用12 h和24 h后均有17 个基因表达发生变化, 且两个时间点的差异基因相同, 其中表达上调基因12 个, 表达下调基因5 个。表达上调基因中包括4 个炎性因子(CCL3、CCL2、CCL4 和IL-1β)。结论 AGEs 可抑制骨髓MSCs的增殖, 此可能与糖尿病性骨质疏松症的发生密切相关。     

Radioreceptor assay for advanced glycosylation end products.

Previous assays for nonenzymatic advanced glycosylation end products (AGEs) formed in tissues and/or circulating in blood are unsatisfactory. Based on our earlier identification of AGE-specific receptors on the macrophagelike tumor cell line RAW 264.7, a new assay system for AGEs has been devised. RAW 264.7 cells were used in competitive radioreceptor assays (RRA) after a 3-day culture in 96-well plates with 1 mu CI/ml [3H]glycine. Bovine serum albumin (BSA), modified extensively by incubation with glucose-6-phosphate in vitro to form AGE-BSA, was labeled with 125I and was used as a model ligand at a concn of 10 micrograms/ml. One unit of AGE was defined as the amount of test protein required to inhibit 50% of the specific binding of [125I]-labeled AGE-BSA to the AGE-receptors of intact RAW 264.7 cells. Nonlabeled AGE-BSA was used as a specific competitor to construct standard curves. The reproducibility of the assay was assessed at AGE levels equivalent to mean, maximum, and minimum levels of sensitivity for assays run on a single day and over an extended period, and the RRA had a reproducibility (coefficient of variation) between 5.9 and 14.7%. Protease hydrolysis of in vitro glycosylated proteins before assay increases the competitive ability of these proteins in proportion to their glycosylation. Little or no AGE cross-reactivity was detected in native BSA, Amadori-BSA, maleylated BSA, formaldehyde-treated BSA, palmitic acid-BSA, and acetylated low-density lipoproteins (acetyl-LDL). Polyanions such as heparin or fucoidan strongly interfere with this receptor binding assay.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

糖基化终产物对大鼠肾脏结缔组织生长因子的作用

目的探讨糖基化终产物(AGEs)对大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)表达及细胞外基质(ECM)合成的影响。方法将Wistar大鼠随机分成4组:正常对照组(Con)、单纯大鼠血清蛋白组(RSP)、糖化血清组(AGEs)和氨基胍组(AG)。尾静脉注射AGE-RSP6周后,采用RT-PCR、免疫组织化学和蛋白质印迹杂交等方法检测AGEs对大鼠肾皮质TGF-β1和CTGF的mRNA和蛋白质表达及ECM蛋白成分表达的影响。结果与Con及RSP组比较,AGEs组肾小球系膜细胞增生,ECM红染区增大。AGEs组大鼠肾皮质TGF-β1和CTGF的mRNA和蛋白质表达均明显上调(P<0.01);TGF-β1和CTGF免疫组化阳性表达部位主要位于肾小球;肾小球ECM蛋白成分胶原(Col)Ⅳ和纤连蛋白(FN)合成也增多(P<0.05)。AG组上述所有变化均减轻。结论AGEs能明显诱导大鼠肾皮质CTGFmRNA和蛋白质表达增强,并使ECM蛋白成分合成增多。AGEs可能通过诱导CTGF表达上调引起ECM合成增多。     

Serum levels of advanced glycosylation end products in diabetic nephropathy

BACKGROUND/AIMS: Advanced glycosylation end products (AGEs) are important pathogenetic factors underlying diabetic complications. Recently, a highly reliable new enzyme-linked immunosorbent assay for these metabolites has been established. We used the assay to correlate AGEs in serum with renal function categories and histopathology in patients with diabetic nephropathy. METHODS: Type 2 diabetic patients (n = 71) and healthy control subjects (n = 35) were studied. The diabetic subjects were divided into two groups: normal renal function and chronic renal failure not requiring dialysis. In renal biopsy specimens from 22 diabetic subjects with a normal renal function, the severity of glomerular lesions was assessed morphometrically in terms of the ratio of the area of periodic acid-Schiff stained mesangium to total glomerular area. RESULTS: The serum AGE concentrations were higher in both undialyzed diabetic groups, especially in those with renal failure, than in the controls. The serum AGE concentrations increased with the severity of glomerular lesions (morphometric ratio under 15%, 2.85 +/- 0.73 mU/ml; 15-24%, 4.01 +/- 0.71 mU/ml; 25% or more, 5.12 +/- 0.64 mU/ml). CONCLUSIONS: The serum AGE levels measured by the new enzyme-linked immunosorbent assay reflected the severity of glomerulopathy, and, therefore, it may be a clinically useful tool for assessing diabetic renal complications.     

晚期糖化终末产物在老年大鼠骨质疏松发病中的作用

目的探讨晚期糖化终末产物（ＡＧＥ）在老年大鼠骨质疏松发病中的作用。方法选用２０月龄老年大鼠和３月龄大鼠,测定其骨密度及骨胶原中晚期糖化终末产物的含量及血、尿生化指标。结果老年大鼠骨密度明显低于３月龄大鼠（Ｐ〈０．０５）,而骨胶原中晚期糖化终末产物的含量明显升高（Ｐ〈０．００１）。同时发现老龄组大鼠血清甲状旁腺激素（ＰＴＨ）明显升高（Ｐ〈０．０５）,尿钙与肌酐比值升高（Ｐ〈０．０２）,而尿磷与肌酐比     

糖基化终末产物对糖尿病大鼠烧伤创面愈合的影响

目的 了解糖基化终末产物(AGE)蓄积对糖尿病大鼠烧伤创面愈合的影响. 方法 将75只SD大鼠按完全随机化方法 分为对照组、糖尿病组及氨基胍干预组,每组25只.将大鼠造成深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤)后,后2组制作成糖尿病模型,氨基胍干预组给予管饲氨基胍100 mg·kg~(-1)·d~(-1).于伤后0(伤后当天)、3、7、14、21 d处死大鼠.描取创面形状,并取全层皮肤组织待测.同时取大鼠背部表皮行KC培养及鉴定.观察各组创面愈合率及皮肤组织糖含量,创面组织形态学变化,皮肤组织中AGE分布.观察不同浓度AGE对KC增殖,凋亡的影响,以仅加表皮细胞培养液的KC为对照组. 结果 伤后7、14、21 d糖尿病组创面愈合率显著低于对照组(P<0.01),而氨基胍干预组却明显高于前2组(P<0.01).糖尿病组皮肤组织含糖量为(2.62±0.19)mmol/g,氨基胍干预组为(2.58±0.07)mmol/g,均高于对照组(1.04±0.09)mmol/g(P<0.01).对照组大鼠创面炎性细胞浸润强烈而局限,坏死组织形成、脱落及时,创面愈合无明显延迟;糖尿病组大鼠炎性细胞浸润缓慢、弥散而持久,坏死组织形成、脱落较迟,创面愈合明显延迟;氨基胍干预组大鼠炎性细胞浸润及时、强烈,坏死组织形成、脱落以及创面愈合时间较糖尿病组早.对照组中有少量散在的AGE沉积,糖尿病组AGE蓄积显著增加,而氨基胍干预组AGE含量显著降低.AGE作用48 h后,KC的增殖显著降低,呈现浓度依赖性,各剂量AGE干预组的吸光度值均低于对照组(P<0.01).100μg/mLAGE干预组KC早期凋亡连接素V阳性细胞比例为(15.1±2.3)%,明显高于对照组[(11.2±1.2)%,P<0.05];终未期凋亡双阳性细胞比例为(14.3±3.5)%,与对照组(15.2±2.4)%比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 高血糖可能是通过AGE蓄积,抑制KC等修复细胞增殖导致创面难愈;减少AGE蓄积,可改善糖尿病创面愈合延迟现象.     

Isolation of surface binding protein specific for advanced glycosylation end products from mouse macrophage-derived cell line RAW 264.7

Macrophages internalize and degrade proteins modified by advanced glycosylation end products (AGEs) via a specific receptor (AGE-R). Chemical cross-linking studies with AGE-bovine serum albumin have demonstrated that the molecular weight of this receptor is approximately 90,000. We previously established that the binding constant (Ka) of this receptor site for the chemically synthesized model AGE, 2-(2-furoyl)-4(5)-(2-furanyl)-1H- imidazole-butyric acid (FFI-BA), on cells of the mouse macrophagelike cell line RAW 264.7 is identical to that for AGE proteins. Therefore, FFI was used as an affinity matrix in the first purification step of the AGE-R. The membranes of RAW 264.7 cells were solubilized in octyl-beta-glucoside and subjected to affinity chromatography on FFI-sepharose and gel permeation on Superose 6 fast protein liquid chromatography. Sodium dodecyl sulfate (SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis analysis of this material revealed a high enrichment of a 90,000-Mr protein that had AGE binding activity. Approximately 25% of the protein at this step was the 90,000-Mr protein. The 90,000-Mr membrane protein was purified to homogeneity by rechromatographing the material on Superose 12 in the presence of SDS before and after reduction with 2-mercaptoethanol. After these harsh conditions, the 90,000-Mr protein lost AGE binding activity. Additional cross-linking studies on human peripheral monocytes revealed an AGE-R protein of identical size to that on RAW 264.7 cells, suggesting the relatively highly conserved nature of this molecule.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

糖尿病大鼠肾组织中糖基化终产物受体基因表达的研究

目的 观察不同病程的糖尿病大鼠肾组织内糖基化终产物受体(RAG)mRNA的表达水平的改变。方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测病程12周内RAGEmRNA水平。结果 诱发糖尿病大鼠2周时肾脏皮、髓质内RAGEmRNA表达无明显变化,4周后其表达不断地显著增加(P<0.05)。诱发8周、12周的糖尿病大鼠,其糖化血红蛋白(GHb)水平明显升高(P<0.001)。结论 糖尿病状态下,肾组织内RAGE的高表达可能与糖尿病肾病的发病有关,且可能是高血糖诱发AGEs形成的结果。     

晚期糖基化终末产物诱导皮肤成纤维细胞中lncRNA表达谱的变化

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)在晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的皮肤成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞中表达谱的差异。方法利用lncRNA芯片技术检测AGEs诱导的皮肤成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞中lncRNA表达谱的变化,经过对原始数据进行标准化处理后,筛选出差异表达lncRNA。结果与正常培养的皮肤成纤维细胞相比较,24 h AGEs诱导的皮肤成纤维细胞中差异表达的lncRNA有3421条,其中1079条表达上调,2342条表达下调,差异表达达10倍以上的lncRNA有448条,其中208条表达上调,240条表达下调。结论与正常皮肤成纤维细胞相比较,AGEs诱导的皮肤成纤维细胞的lncRNA的表达谱发生了显著的变化,提示lncRNA可能参与了糖尿病皮肤病变的发生、发展。     

晚期糖化终末产物对人成骨细胞增殖及分泌细胞因子的影响

目的：探讨晚期糖化终末产物对人成骨细胞增殖及分泌细胞因子的影响,以期揭示晚期糖化终末产物在骨质疏松发病中的作用。方法：用体外制备的AGE-牛血清白蛋白（AGE-BSA）加入人成骨细胞培养体系,观察不同浓度AGE和不同作用时间,对人成骨细胞增殖及分泌白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。结果：加入AGE-BSA24h后,低浓度抑制成骨细胞增殖;培养48、72h后,浓度依赖性的促增殖作用增加。加入AGE-BSA48h,100μg/ml AGE-BSA促进成骨细胞分泌IL-6。200μg/ml-100μg/ml对IL-6及TNF-α的分泌均无显影响。结论：晚期糖化终末产物对人成骨细胞表现出在较高浓度时,仍具有很强的促增殖活性,提示人对高浓度AGE的耐受性增强。AGE在较高浓度对人成骨细胞分泌IL-6和TNF-α无显影响。提示由随龄增加的AGE在老年人引起的成骨细胞介导的骨吸收没有明显增加,与老年性骨质疏松为低转换型结果相一致。