PTEN表达在胃癌发生及分化中的作用

目的:探讨PTEN的表达与胃黏膜癌变及癌细胞分化程度的关系.方法: 采用免疫组织化学方法对胃癌组织、癌前病变和对照组正常胃黏膜进行PTEN表达的检测.结果: 胃癌组PTEN阳性率为53.3%,较正常组和癌前病变组明显下降(P <0.01);低分化组PTEN阳性率为36.0%,显著低于胃癌高中分化组 (P <0.01);高中分化组PTEN阳性率与癌前病变组无差异(P>0.05).结论: PTEN与胃癌的分化程度密切相关,可作为判断胃癌恶性程度的指标.     

PTEN基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响

目的 通过增强型绿色荧光蛋白（EGFP）与PTEN融合蛋白真核表达载体的构建和表达,观察PTEN基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响。方法 （1）以RT—PCR方法扩增人的PTEN基因,经T—A亚克隆筛选后连入真核表达载体pEGFP—N1,构建融合蛋白表达载体。采用阳离子聚合物转染试剂,将重组质粒DNA瞬时转染至SHG-44细胞,检测融合蛋白的表达。（2）G418筛选出稳定转染的细胞（SHG-44-Z）,并扩增培养,通过细胞形态学、生长曲线观察PTEN基因对细胞形态和增殖的影响,免疫组织化学法检测对胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响。结果 （1）重组质粒阳性克隆的测序结果与GenBank报告序列一致。瞬时转染的SHG-44细胞于荧光显微镜下可见绿色荧光,流式细胞仪可检测到荧光表达量为17．8％,免疫细胞化学法检测到外源PTEN蛋白表达。证实pEGFP—PTEN融合蛋白表达载体构建成功,并在胶质瘤细胞得以正确表达。（2）转染组SHG-44-Z细胞株的生长增殖受到明显抑制,第7天细胞计数为未转染组细胞数的27．8％,且GFAP表达上调。结论携带绿色荧光蛋白的PTEN基因真核表达载体的构建,为进一步研究PTEN的作用机理及抑癌效应奠定了基础。     

PTEN在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与预后的关系

目的:研究抑癌基因PTEN在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化技术(S蛳P)检测50例原发性乳腺浸润性导管癌中PTEN的表达情况。结果:PTEN总的表达缺失率为44 %(22/50)。PTEN表达缺失率随着肿瘤大小、组织学分级和临床分期的增高而升高(P<0.05)。生存时间在10 a以上病例的PTEN表达缺失率显著低于生存时间不足5 a组和5 a～10 a组(P<0.05)。有腋淋巴结转移组和无腋淋巴结转移组的PTEN表达缺失率分别为58.3 %和30.8 %,但统计学分析差异无显著性(P=0.05)。PTEN表达与ER状态关系不大,但两者联合检测可能对临床评估预后更有意义。结论:检测乳腺浸润性导管癌PTEN在蛋白水平的表达缺失状况可能有助于对其预后的判断。     

人bax基因逆转录病毒表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达

[目的] 构建带有报告基因EGFP的bax基因逆转录病毒表达载体，建立高表达bax基因的Hela细胞。[方法] 通过RT-PCR方法从Hela细胞克隆bax基因，根据基因工程原理，经PCR、酶切等方法构建bax基因和报告基因EGFP双基因逆转录病毒表达载体pLBax SN-IRES2-EGFP．转染Hela细胞后，荧光显微镜和Western Blotting检测bax基因的表达情况。[结果] 成功构建了带有EGFP的bax基因的逆转录病毒表达载体，并将其转入Hela细胞。[结论] 成功建立的高表达bax基因的Hela细胞株，为探讨bax基因与放射敏感件之间的关系奠定了基础。     

一种新的抑癌基因PTEN在肾细胞癌中的表达及生物学意义

背景与目的：PTEN基因是新发现的一种抑癌基因,定位于人染色体10q23,它的缺失和突变可能构成一个新的信号转导途径,与人类恶性肿瘤的发生普遍相关,资料报道。肾细胞癌有抑癌基因PTEN的缺失和突变。但目前尚未见到关于抑癌基因PTEN在肾细胞癌中表达的研究,本实验研究抑癌基因PTEN在肾细胞癌的表达和生物学意义。方法：应用免疫组织化学SP法检测5例正常肾组织,18例癌旁肾组织和40例肾细胞癌组织中抑癌基因PTEN的表达,分析抑癌基因PTEN的表达与肾细胞癌病理类型,淋巴结转移之间的关系。结果：5例正常肾组织和18例癌旁肾组织均有较强的PTEN蛋白的表达,正常肾组织和癌旁肾组织PTEN蛋白的表达强度,阳性细胞的分布形式无明显差异,肾小管上皮细胞的胞质呈PTEN蛋白阳性,免疫组化染色程度较强,肾小球无PTEN蛋白的表达。抑癌基因PTEN在肾细胞癌中的表达不同于正常肾组织和癌旁肾组织,12．5％,呈PTEN蛋白阴性,17．5％呈弱阳性,70％呈阳性或强阳性,PTEN蛋白阴性,弱阳性和阳性的肾细胞癌,肾门淋巴结转移率分别为80％,51．74％,10．71％,PTEN蛋白阴性和弱阳性肾细胞癌的肾门淋巴结转移率与PTEN阳性者比较,差异有显著性（P＜0．05）,结论：本实验提示肾细胞癌中存在着抑癌基因PTEN的表达缺失和异常,可能与肾细胞癌的发生,发展有关,抑癌基因PTEN是肾细胞癌的一种新的相关基因。     

PTEN抑癌基因在晚期神经母细胞瘤中的表达及意义

10号染色体张力蛋白同源物磷酸脂酶(phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen,PTEN)是迄今为止发现的第一个具有磷酸酯酶活性的抑癌基因,可能有抑制细胞与细胞外基质相互作用的功能[1]。目前研究提示在人类多种肿瘤和遗传性肿瘤易感综合征等疾病中常出现PTEN杂合性缺失(LOH)或突变[2～9],PTEN基因的表达与肿瘤的预后有一定相关。一般认为PTEN变化是肿瘤的早期事件,用来区分良恶性具有一定意义,在国外已有在儿童神经母细胞瘤中的相关报道[10]。本研究运用流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测晚期神经母细胞瘤(neuroblasto…     

PTEN蛋白表达与子宫内膜癌的相关性研究

目的:探讨子宫内膜癌中抑癌基因PTEN的表达,及其与子宫内膜癌临床病理特征及预后的关系.方法:采用免疫组化检测16例正常子宫内膜、32例子宫内膜癌组织中PTEN蛋白的表达,分析其与临床病理的相关性.结果:抑癌基因PTEN在子宫内膜癌组中蛋白阳性表达显著低于正常子宫内膜组(P<0.01).PTEN阳性表达的缺失与组织学分级与肌层浸润深度有关(P<0.05).结论:PTEN基因突变及蛋白表达缺失与子宫内膜癌的发生有关,与子宫内膜癌的分化程度、肌层浸润深度有相关性.     

PTEN及其与前列腺癌关系的研究进展

抑癌基因PTEN是迄今为止人们发现的唯一具有双重特异性磷酸酶活性的基因,即脂质磷酸酶活性和蛋白磷酸酶活性。该基因的变异与人类多种肿瘤的发生发展及预后有关。本文就PTEN的研究进展及其与前列腺癌的关系进行了综述。1PTEN基因的概述1.1PTEN的发现1997年,Li等[1]采用代表性差     

抑癌基因PTEN在乳腺癌中的表达及意义

目的　研究一种新的抑癌基因PTEN在乳腺癌中的表达及意义。方法　应用免疫组织化学SP法 ,检测了 2 8例乳腺癌及2 1例癌旁乳腺组织PTEN蛋白的表达 ;EnVision法检测癌组织中雌、孕激素受体的表达。结果　 2 1例癌旁乳腺组织中均有PTEN蛋白的表达 ,免疫组化染色较强 ,阳性物质位于乳腺小叶腺泡上皮细胞及导管上皮细胞的胞质和胞核。在乳腺癌组织中PTEN蛋白表达于癌细胞的胞质和胞核 ,2 8例乳腺癌组织中PTEN蛋白的表达不同。 14 .2 8%乳腺癌组织无PTEN蛋白的表达 ;2 1.4 %乳腺癌组织PTEN蛋白呈弱阳性 ;6 4 .2 8%乳腺癌组织中有较强的PTEN蛋白表达 ,表达强度与正常乳腺组织无明显差异。此外 ,PTEN蛋白的表达与乳腺癌的临床病理学特点相关 ,PTEN蛋白阴性的乳腺癌 ,2 5 %为雌、孕激素受体阳性 ;而PTEN蛋白表达较强的乳腺癌 ,6 6 .6 7%为雌、孕激素受体阳性 ,且差异有显著性 (P <0 .0 5 )。另外 ,PTEN蛋白阳性的乳腺癌组织 ,腋窝淋巴结转移率为 2 2 .2 % ;而PTEN蛋白阴性的乳腺癌腋窝淋巴结转移率为 75 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　乳腺癌组织中存在着抑癌基因PTEN的表达缺失和减弱 ,抑癌基因PTEN的表达异常可能与乳腺癌的发生、发展及预后有关。     

PTEN、MLL基因在T淋巴母细胞淋巴瘤／白血病的表达及其意义

 目的　分析肿瘤抑制基因PTEN、混合系白血病（MLL）基因等在T淋巴母细胞淋巴瘤／白血病（T-LBL／ALL）的表达及意义。方法　选用76例T-LBL／ALL患者淋巴结存档蜡块,应用免疫组织化学EnVision法进行PTEN标记,用20例反应性增生淋巴结标本作正常对照。并用荧光原位杂交（FISH）技术检测MLL基因所在11q23染色体的断裂和扩增情况。结果　76例T-LBL／ALL中,PTEN的表达率为64.47 %（49／76）,低于淋巴结反应性增生的100 %（20／20）（χ2＝19.220,P＜0.05）。PTEN表达与临床分期、Ki-67、乳酸脱氢酶（LDH）呈负相关（P＜0.05）。76例T-LBL／ALL中,MLL基因发生11q23染色体断裂13例（17.11 %）,扩增18例（23.68 %）。MLL基因断裂组总体生存率（25.0 %）低于非断裂组（43.6 %）（χ2＝11.357,P＜0.05）。MLL基因扩增组总体生存率（17.1 %）低于非扩增组（42.7 %）（χ2＝4.533,P＜0.05）。结论　抑癌基因PTEN表达降低在T-LBL／ALL的发生发展中可能具有重要作用。MLL基因发生染色体11q23断裂和扩增有助于对T-LBL／ALL预后的判断,发生MLL基因断裂或扩增的T-LBL／ALL预后较差,提示MLL基因断裂或扩增可能为T-LBL／ALL的一种分子亚型。     

人脑胶质瘤中PTEN基因突变和蛋白表达的研究

目的 :研究人脑胶质瘤中PTEN蛋白表达和PTEN基因突变情况。方法 :应用免疫组化技术和聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 (PCR SSCP)技术 ,检测 10 2例人脑胶质瘤中PTEN蛋白表达及PTEN基因突变。结果 :PTEN阳性染色主要定位于细胞质中。 10 2例中PTEN蛋白表达 5 5 / 10 2(5 3 9% ) ,高分化组 (Ⅰ级和Ⅱ级 ) 32 / 39(82 1% )与低分化组 (Ⅲ级和Ⅳ级 ) 2 3/ 6 3(36 5 % )之间差异有极显著意义 ,P <0 0 1;4 2例胶质母细胞瘤中共有 11例发生PTEN基因突变 ,突变率为 2 6 % (11/ 4 2 ) ;6 0例其他胶质瘤中仅 1例发生突变 ,胶质母细胞瘤突变率显著高于其他胶质瘤 ,χ2 =11 6 2 ,P <0 0 1。结论 :PTEN基因突变或缺失在人脑胶质瘤的发生发展中起重要作用 ,与肿瘤恶性分化程度密切相关     

食管鳞癌中PTEN蛋白的表达及意义

目的　通过对PTEN在食管鳞癌中表达的研究,探讨其与食管鳞癌的发生、浸润、转移的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测49例食管鳞癌组织及40例正常食管黏膜组织中PTEN的表达。结果　食管鳞癌组织中PTEN蛋白表达率为5 3 0 6% (2 6/4 9)。显著低于正常食管黏膜组织的表达10 0 % (4 0 /4 0 ) ,在不同分化程度的癌组织中其阳性表达率有显著性差异(P <0 0 5 ) ,且PTEN蛋白表达率随癌组织浸润深度的加深而明显降低(P <0 0 5 ) ,有淋巴结转移组明显低于无淋巴结转移组(P <0 0 5 )。结论　PTEN基因缺失或蛋白表达降低在食管鳞癌的发生发展中可能起重要作用,且与肿瘤的分化程度、浸润转移密切相关。     

人抑癌基因FHIT真核表达质粒的构建与鉴定

[目的]构建人抑癌基因FHIT真核细胞表达载体。[方法]采用PCR方法，从人胎脑组织的总cDNA中扩增出444bp的人FHIT cDNA片段，然后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3．1／myc-His（-）B中，用限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒；用该表达质粒转染COS-7细胞，Western blot法检测FHIT蛋白的表达情况。[结果]人FHIT基因cDNA以正确方向插入到真核细胞表达载体DcDNA3．1／myc-His（-）B中；转染COS-7细胞后，可见转染细胞有Fhit蛋白的表达。[结论]本实验成功地构建了人抑癌基因FHIT的真核表达质粒pcDNA3．1／myc-His（-）B-FHIT，为研究FHIT基因在肿瘤的发生中的作用提供了有效的工具。     

Rare-type Mutations of MMAC1 Tumor Suppressor Gene in Human Glioma Cell Lines and Their Tumors of Origin

A total of 10 glioma cell lines were examined to evaluate the status of the MMAC1 gene, a candidate tumor suppressor gene. Six cell lines showed mutations with presumed loss of heterozygosity and 1 cell line showed no mRNA expression. The 6 mutations consisted of 3 3-bp deletions (codons 17, 101 or 199), 1 missense mutation (codon 252) and 2 truncation mutations (1 nonsense mutation at codon 233 and 1 2-bp insertion at codon 241). Among them, the 3-bp deletions, which are a rare type of mutation in MMAC1 gene, were located in the N-terminal half (codons 1–212) of the coding region, which is considered important in MMAC1 function. The missense mutation was located unusually in the C-terminal half (codons 212–403), but it was in a small region in which some other reported missense mutations are clustered. Thus, these 4 mutations were suggested to have functional effects on the MMAC1 activity, like the other 2 mutations with predicted protein truncations. By sequence analysis of cDNA clones, we confirmed that all the mutations including these 4 rare ones were in the MMAC1 gene, not in the PTH2 pseudogene. In 2 cases, we also examined the primary glioma tissues from which the cell lines had been derived and found the same mutations as in the cell lines in both cases. This suggested that the mutations in these cell lines were derived from the primary glioma tissues, but not from artifacts arising during long-term in vitro cultivation.     

亚硒酸钠抗氧化作用与抑瘤效应的实验观察

人ｐ１６基因是最近发现的一种肿瘤抑制基因。ｐ１６蛋白作为一种细胞增殖的负调控因子，在恶性肿瘤发生发展中起重要作用。为了进一步探讨ｐ１６基因的抗肿瘤特性，我们通过运用分子克隆技术构建重组人ｐ１６基因表达载体（ｐｃＤＮＡ３－ｐ１６），并通过电穿孔方法将ｐ１６基因导入到人肺腺癌ＮＣＩ－Ｈ４６０细胞中，经Ｃ４１８筛选获得可稳定表达ｐ１６的人肺腺癌细胞，观察ｐ１６基因对人肺腺癌细胞周期的影响和细胞增殖的作用     

PTEN在肝癌中表达缺失的意义及其体外转染对人肝癌细胞系的作用

目的探讨PTEN表达与肝细胞癌发生、发展的关系,观察体外转染外源性PTEN对肝癌细胞的生长、细胞周期和超微结构的影响。方法检测PTEN在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达缺失情况,以观察该基因与肝癌病理分级、转移和预后的关系。将含PTEN的反转录病毒载体及空载体转入人肝癌细胞系HHCC,观察转染前后细胞的生长、超微结构、细胞周期及裸鼠致瘤能力改变情况。结果肝癌中PTEN表达缺失率为30.16%(19/63),显著高于正常肝组织0(0/8)和肝硬化组织7.15%(1/14)。随着恶性程度的增高,PTEN表达缺失率随之增加。PTEN表达缺失与转移及预后显著相关。PTEN在人肝癌细胞系hHCC中也不表达。将抑癌基因PTEN转入后,hH-CC细胞生长明显受到抑制,细胞超微结构失去部分恶性表型特征,细胞周期由G1→S0期受抑制,并出现凋亡峰,体外成瘤能力下降。结论抑癌基因PTEN失表达多见于肝细胞肝癌进展期,并与肝细胞肝癌分化程度、是否转移以及临床预后相关;体外PTEN的转入可以明显地抑制HHCC生长、体外成瘤能力。     

抑癌基因 PTEN在宫颈腺癌组织的表达

目的：探讨抑癌基因PTEN（phosphatase and tension homolog deleted on chromosome ten)在宫颈腺癌组织的表达。方法：采用S－P免疫组织化学研究36例FIGOⅠ-Ⅱa期浸润性宫颈腺癌组织中抑癌基因PTEN的表达。结果：宫颈腺癌组织细胞核PTEN表达显著低于癌旁宫颈腺上皮组织（P＜0．01）,97．2％（35／36）的宫颈腺癌细胞核呈低表达（H≤1,26／36）或缺失（H＝0,9／36）,而仅36％（9／25）的癌旁宫颈腺上皮呈低表达（P＜0．01）;宫颈腺癌组织细胞浆PTEN表达水平略高于宫颈腺上皮组织（P＜0．05）,宫颈腺癌组织细胞浆低表达（5．6％,2／36）低于癌旁宫颈腺上皮（24．0％,6／25）（P＜0．05）。结论：PTEN在宫颈腺癌的发生中起一定的作用,其抑癌作用环节可在细胞核水平。     

Survivin基因真核表达载体的构建及其在cos-7中的表达

[目的]克隆人survivin基因并在真核细胞中表达。[方法]以人喉癌组织中提取总RNA为模版，采用反转录聚合酶链RT-PCR法获得survivin cDNA。将该基因克隆到pcDNA3．0载体中，构建真核细胞表达载体pcDNA3．0／survivin，将测序正确的survivin基因通过脂质体介导下转染cos-7,Westem blot检测survivin蛋白在cos-7中表达。[结果]DNA测序证明获得了survivin基因，其序列与GeneBank中报道序列完全一致。Western blot检测survivin蛋白获得高效表达，其相对分子质量为16．5kD。[结论]Survivin基因的克隆和表达均获得了成功，为进一步探讨survivin基因在喉癌诊治中应用奠定了基础。     

PTEN基因与恶性肿瘤

抑癌基因PTEN是双特异性磷酸脂酶,在多种恶性肿瘤中发生突变或缺失,导致其抑癌功能减弱或丧失,在多种恶性肿瘤的发生、发展中起重要作用。PTEN通过复杂的信号转导网络(PI3K/ AKT、FAK/MAPK、PTEN/P53/MDM2)调控细胞周期、促进细胞凋亡、抑制肿瘤的血管形成和侵袭转移等。对PTEN基因的深入研究将为恶性肿瘤的早期诊断、临床监测、基因靶向治疗、预后评估、新药研发和一级预防提供科学的理论依据。     

PTEN基因与恶性肿瘤

抑癌基因PTEN是双特异性磷酸脂酶，在多种恶性肿瘤中发生突变或缺失，导致其抑癌功能减弱或丧失，在多种恶性肿瘤的发生、发展中起重要作用。PTEN通过复杂的信号转导网络（PI3K／AKT、FAK／MAPK、PTEN／P53／MDM2）调控细胞周期、促进细胞凋亡、抑制肿瘤的血管形成和侵袭转移等。对PTEN基因的深入研究将为恶性肿瘤的早期诊断、临床监测、基因靶向治疗、预后评估、新药研发和一级预防提供科学的理论依据。