深圳5例肠道病毒71型手足口病病毒株遗传衍化分析

目的调查来源于2008年深圳5例EV71（Enterovirus71,EV71）型手足口病患者的5株肠道病毒71型的分子流行病学特点及其分子进化关系。方法通过病毒分离培养得到5株肠道病毒71型分离株,并对其进行全基因组核苷酸序：列测定,通过生物信息学软件分析,与既往其他国家地区分离株进行全基因序列分析比较,以及进化树分析。结果通过对VP1和VP4基因序列分析,5株病毒株均属于C4基因亚型。5株EV71分离株在全长核苷酸和氨基酸水平上差异都较小,其核苷酸和氨基酸同源性分别高于93．0％和98．0％,进化树分析提示2008深圳分离株与2004深圳株同源性最为接近,与2008安徽阜阳流行株和1998深圳株亦相距很近,死亡病例株与2008安徽阜阳株距离同源性最近（同源性为99．1％和96％）。结论推测这起疫情是由同一个病毒传播链引起的,本次流行株可能系1998深圳株演变而来。     

2020年云南省曲靖市手足口病病原学监测及基因特征分析

目的:了解2020年云南省曲靖市手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)病原学分布并分析病原体的基因特征。方法:采集曲靖市2020年儿童HFMD病例粪便标本,从便悬液中直接提取病毒RNA,先用MD91/OL68-1引物扩增肠道病毒(enterovirus,EV)VP4区基因并测序...     

2009-2011年上海市手足口病病原学检测及其临床特点分析

目的 了解上海市手足口病不同病原体的感染现状以及所致的手足口病的临床特点之间的差异,为制定观察、治疗方案,做好手足口病防控工作提供参考.方法 采集2009年3月至2011年12月在本院传染科门诊诊断为手足口病的357例病例的咽拭子、疱疹液、粪便共551份标本进行病原学检测.用RT-PCR法对肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)、肠道病毒通用型(PE)进行鉴别.结果 357例手足口病患儿共采集到551份标本,检测病毒总阳性率为79.7％,2009年手足口病以CoxA16流行为主,2011年以EV71流行为主,三年病毒流行株差异有统计学意义(P =0.005);疱疹液病毒检出率最高;EV71、CoxA16、PE病毒感染的手足口病患儿在发热、易惊的发生比例比较差异有统计学意义(P＜0.05);EV71感染的患儿外周血白细胞计数和中性粒细胞比例要高于CoxA16和PE感染的患儿,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 上海市手足口病在不同时期病原体呈现交替流行;对不同病原体临床特征的分析比较有助于EV71感染的防控、早期治疗、重症病例的筛查.     

烟台市手足口病合并脑炎病毒分离及基因序列分析

目的 了解烟台地区手足口病合并脑炎病原谱及其基因学特征.方法 采集烟台地区手足口病合并脑炎患者粪便及脑脊液标本,通过细胞培养分离病毒,实时荧光PCR鉴定病毒型别,RT-PCR扩增VP1区基因部分序列并测序,进行序列分析.结果 10份粪便标本分离病毒3株,均为EV71.与C4a型代表株核苷酸同源性为98％～99％,氨基酸同源性98.90％～99.45％.系统发生树中,烟台分离株与C4亚型C4a簇代表株位于同一分支.结论 烟台地区手足口病合并脑炎病原主要为EV71,属于C4亚型C4a簇.     

2013—2020年吉安市手足口病病原学流行病学特征分析

目的分析江西省吉安市2013—2020年手足口病的病原学流行特征, 为吉安市手足口病防控措施的制定提供依据。方法收集手足口病患者粪便等临床标本共5 089份, 采用荧光定量PCR方法进行肠道病毒核酸检测分型, 使用SAS统计软件从标本类型、时间、患者年龄和性别、地区分布等进行病原学流行特征分析。结果 5 089份标本中共检出肠道病毒(enterovirus, EV)阳性标本3 062份, 总阳性率为60.17%, EV71、柯萨奇病毒A组16型和其他肠道病毒构成比分别为15.15%、16.36%和68.49%, 以其他肠道病毒感染为主;2013—2020年的肠道病毒阳性检出率总体呈下降变化趋势, 不同年份阳性检出率差异有统计学意义(χ2=118.47, P<0.05);8年间, EV71型手足口病感染率总体呈下降趋势。手足口病例数主要集中在4～11月份, 5月和9月左右为最高峰。男女性别阳性检出率差异无统计学意义(χ2=3.44, P>0.05), 粪便、肛拭子、疱疹液标本的阳性率高于咽拭子标本, 不同样本阳性检出率差异有统计学意义(χ2=78.76, P<0.05)...     

我国深圳地区手足口病患者肠道病毒71型的分离与鉴定

肠道病毒７１型（Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓｔｙｐｅ７１;ＥＶ－７１）自１９７４年首次从患有中枢神经系统疾病的患者标本中分离后［１］,世界上许多国家和地区相继报道了该病毒的流行。近年来,ＥＶ－７１病毒的流行（特别是在亚洲地区的流行）、呈逐渐上升的趋势,日益...     

轻型和重型手足口病临床和实验室特征分析

目的 研究2008年深圳市轻型和重型手足口病临床特点和实验室特征.方法 将深圳市东湖医院和儿童医院共145例手足口病住院患者作为研究对象,其中轻型124例,重型21例.收集患者临床和一般实验室资料,急性期与恢复期连续粪便和血标本,通过RT-PER检测EV71病毒核酸,分离和培养EV71肠道病毒,其中2例死亡患者行病理组织学检测.结果 与轻型患者比较,重型患者白细胞计数、血糖显著升高,但年龄显著降低,粪便中轻型和重型患者EV71基因检出率分别为35%与67%,重型患者EV71检出率显著高于轻型患者,从9例患者粪便中分离培养出肠道病毒,其中1例为死亡患者粪便标本.2例患者死于神经源性肺水肿和脑干脑炎.结论 EV71是重型患者和死亡患者的最主要病原体,神经源性肺水肿和脑干脑炎是EV71型手足口病的最主要死亡原因,对年龄小于4岁,高热、皮疹稀疏和高血糖的EV71型手足口病患者应警惕向重型发展.     

2009年徐州地区疑似肠道病毒感染病例病原学研究

目的了解2009年徐州地区肠道病毒感染引起手足口病情况,为手足口病防控工作提供科学依据。方法采用荧光RT-PCR方法对240例临床诊断为肠道病毒感染的手足口病例中的222例肛拭子和咽拭子标本同时进行EV和EV71、CAl6特异性RNA检测,用ELA方法对其中的114例急性期血清标本进行EV71．IgM抗体检测。同时检测健康儿童254份咽拭子和258份血清标本以及密切接触者咽拭子54份标本。结果240例疑似肠道病毒感染者,总EV感染率为72．50％（174／240）,其中EV71感染率为57．92％（139／240）,CoxAl6感染率为9．17％（22／240）,其他EV感染率为5．42％（13／240）。240例疑似肠道病毒感染者中的222份肛拭子标本EV7l-RNA阳性率为45．94％（102／222）、咽拭子EV71-RNA阳性率为25．68％（57／222）,114份急性期血清中EV71．IgM抗体阳性率为86．84％（99／114）。254份健康儿童咽拭子EV7l-RNA阳性率为1．57％（4／254）,未检出CoxAl6-RNA;258份健康儿童血清标本EV71-IgM抗体阳性率是2．71％（7／258）。密接（医护人员）咽拭子54份,EV-RNA检测均为阴性。结论徐州地区手足口病流行主要由EV71型引起。3岁以下儿童流行期间存在被EV71型隐性感染,并产生IgM抗体。成人即使密切接触传染源也不易被感染EV71。疑似病例急性期血清中EV71-IgM抗体检测阳性率最高（86．84％）,其次为肛拭子EV71（45．94％）和咽拭子EV71（25．68％）的RNA检测阳性率。ELA试剂盒用于EV71型感染的早期诊断,具有操作简单快速经济,值得在基层推广。     

肠道病毒71型手足口病的疫苗筛选和观察

目的 筛选安全有效新型EV71候选疫苗,为将来EV71疫苗开发应用奠定基础.方法 以重组蛋白VP1为疫苗设计靶点,不同候选疫苗包括灭活疫苗、DNA疫苗、VP1蛋白疫苗在0、2周、4周分别按照不同剂量和肌内注射途径免疫BALB/c雌性小鼠,在0、2周、4周、6周、8周、10周、16周分别采集小鼠尾静脉血,16周处死小鼠,收集小鼠脾脏细胞,检测小鼠体液免疫和细胞免疫功能,筛选评价候选疫苗的疗效和安全性.结果 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗免疫小鼠2周后IgG抗体滴度即开始升高,4周后明显升高,8周后达高峰,至少维持16周以上;IgG亚类以IgG2a和IgG1为主.三种疫苗能诱导以γ-IFN和IL-4为主的细胞免疫反应.灭活疫苗疗效优于其他候选疫苗,未发现疫苗相关不良反应.结论 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗均能诱导持久的特异性细胞免疫和中和抗体反应,以灭活病毒疫苗疗效较好,需要将来攻毒实验可进一步验证其免疫力.     

菏泽市2011年手足口病病原学检测分析

目的 明确2011年引起菏泽市手足口病(HFMD)的病原体型别及分布特征.方法 采集临床诊断为手足口病病例的粪便或咽拭子样本,用Real-time PCR方法进行肠道病毒通用(EV)型、EV71型、CoxA16型的核酸检测,并对结果进行分析.结果 389例HFMD临床诊断病例样本检测,肠道病毒核酸阳性376例,检出率9...     

北京地区与手足口病相关的非EV71、非CoxA16型肠道病毒的分子特征分析

目的 了解北京地区引起手足口病的非EV71、非CoxA16型肠道病毒的病原构成及优势型别VP4区遗传特征分析.方法 收集2009年4月-12月检测为非EV71、非Cox16型肠道病毒的手足口病患者咽拭子标本共45份.提取病毒核酸,用巢式RT-PCR法扩增病毒VP4区序列,对PCR阳性扩增产物进行测序,通过与GenBan...     

临沂地区1426例手足口病流行病学及临床特征分析

目的探讨山东省临沂地区手足口病的流行病学及临床特征,为制定本地区疾病防治措施提供依据。方法制定手足口病观察项目表,采集2012年4—9月山东省临沂地区1426例手足口病患者的流行病学及临床特征,果用描述流行病学方法进行分析。结果临沂地区手足口病发病高峰为5月,以3岁以下散居及幼托儿童为主,发病率男童多于女童,农村高于城镇。临床表现主要包括发热、皮疹等,重症患儿可发生多系统并发症。辅助检查可见白细胞及中性粒细胞比值增高等特征。EV71为重症病例的主要病原,占重症病例的77．21％。结论山东省临沂地区手足口病流行具有明显季节性、人群性及地区性。针对本地区流行病特点,制定区域特异性防治措施至关重要。     

深圳市重症手足口病临床与实验特征变化趋势及随访1年报告

目的比较2012与2008年深圳市重症手足口病临床和实验特征,探讨其变化趋势。方法深圳市第三人民医院2008年及2012年共收治778例手足口病住院患儿,重点分析其中260例手足口病重症患者（2008年64例,2012年196例）。通过RT—PCR检测CoxsackieA16（CoxA16,A16）及Enterovirus71（EV71）病毒核酸,出现神经系统症状或体征者检查脑脊液常规及生化,部分患儿行头颅MRI检查,同时比较临床表现、血液生化等变化趋势。所有患者随访12个月评估再发情况。结果与2008年相比,2012年手足口病重症患者发病高峰年龄下降,〈12月龄儿童分别占2008年和2012年重症的15％和40％。两个年度重症患者均以EV71感染为主;与2008年相比,2012年EV71感染所占比率有下降趋势;重症患者手、足皮疹出疹率下降,而口腔疱疹出疹率明显增高,疱疹性咽峡炎引起的重症病例数上升;外周血白细胞计数、中性粒细胞比值及CRP水平均明显增高;但并发脑干脑炎或神经源性肺水肿的病例数略有下降。随访1年结果显示,无论EV71或CoxA16型手足口病临床治愈后均可多次再发,轻症再发率高于重症。结论深圳市手足口病从2008年暴发至2012年,发病呈上升趋势,重症手足口病病例临床表现具有一些新的特征,应引起广大医护人员重视。     

2008年广东省肠道病毒71型分离株全基因组核苷酸序列分析

目的 了解2008年广东省流行的肠道病毒(EV)71型基因特征.方法 选择2008年广东省分离的1株EV71毒株(GDFS-3),进行全基因组序列测定和基因进化特性的分析.结果 GDFS-3株与其他EV71型毒株相比,在编码区没有核苷酸的缺失和插入,其5'UTR和3'UTR的长度和序列有一定的差异.核苷酸同源性比较结果 表明,GDFS-3株与中国台湾流行株(TW984)的同源性最高(为96.0%),与新加坡流行株SIN5865及标准株MS、BrCr的同源性则在81.0%左右.氨基酸同源性比较结果 表明,GDFS-3株与TW984同源件最高(99.0%).根据VP1基因序列构建亲缘性关系树,GDFS-3株与C4亚型(subgenogroup)聚为一簇,与C4亚型代表株的核苷酸序列同源性为91.0%～95.0%.结论 遗传进化分析表明,GDFS-3株和中国台湾2004年流行的EV71毒株的亲缘关系最为密切,属于C4亚型,而与标准株BrCr和MS的亲缘关系较远.5'UTR的突变对于EV71毒力增强可能有重要作用.上述结果 有助于EV71型的基础研究和中国对于EV71所致疾病的预防.     

肠道病毒71型IgM抗体检测在手足口病早期诊断中的价值

目的评估人肠道病毒7l型（EV71）IgM抗体在手足口病早期诊断中的价值。方法自发病后连续每日采集2010年我院收治的38例手足口病患儿血清及咽拭子标本,分别检测EV 71 IgM抗体、肠道病毒核酸、EV71特异核酸。结果38例手足口病患儿IgM抗体,按发病天数累加阳性率分别为：第1天60．5％、第2天71．1％、第3～4天81．5％、第5天92．1％、第6天92．1％;肠道病毒核酸阳性率为73．6％;EV71特异核酸阳性率为60．5％。结论EV 7l IgM抗体在手足口病发病的第1天即可出现,至第5天阳性率达到峰值,可作为手足口病早期诊断指标之一。     

手足口病病原体实时荧光RT-PCR反应体系的建立与临床应用

目的 建立一种快速、准确、特异件高的方法 检测手足口病病原体.方法 根据引起手足口病常见致病原肠道病毒71(EV71)、柯萨奇病毒A16(CA16)及肠道病毒(EV),设计相应的引物、探针对35例临床诊断的手足口病患儿及20例正常健康婴儿的粪便进行EV、EV71、CA16三种病原体实时荧光RT-PCR检测,同时对55分标本进行EV71病毒培养分离.结果 35例临床诊断手足口病患儿粪便中EV全部阳性,EV71阳性25例,CA16阳性8例,其中3例为EV71、CA16同时阳性,与临床诊断符合率为85.71%,20例健康体检婴儿粪便中EV病毒5例阳性,EV71、CA16均阴性.结论 荧光RT-PCR对手足口病病原体检测准确性高、特异性强,具有快速、廉价等特点,适合于手足口病的早期诊断.