血管内皮生长因子受体KDR与不同部位大肠癌

目的探讨血管内皮生长因子受体KDR和血管生成与不同部位大肠癌发展的关系。方法用免疫组化法检测97例大肠癌手术标本肿瘤组织KDR表达、血管内皮生长因子(VEGF)表达和微血管密度(MVD)。结果KDR表达、MVD计数在左半大肠癌明显比右半大肠癌高,(P<0.05,P<0.01),而且KDR表达、MVD计数与大肠癌肝转移、淋巴结转移明显相关(左:P<0.01,P<0.05,右:P<0.05,P<0.05)。结论KDR表达、MVD计数在不同部分大肠癌中差异明显,与肝转移明显相关,可作为一个大肠癌的有重要意义的预后指标。     

SHG-44细胞体内外实验中KDR mRNA 的表达及意义

目的探讨插入型激酶受体(KDR)mRNA在裸小鼠可移植人脑胶质瘤不同生长阶段与不同组织区域中的表达规律,以及探讨其与肿瘤血管形成的作用关系,以期从肿瘤间质角度为胶质瘤选择治疗靶点提供实验依据.方法利用恶性人脑胶质瘤SHG-44细胞进行裸小鼠体内实验:在30只裸小鼠(10组)皮下建立SHG-44细胞移植瘤动物模型,每5天取一组标本,以KDR mRNA原位分子杂交技术处理移植瘤石蜡标本.同时在体外进行SHG-44细胞原位杂交,所得结果和移植瘤比较分析.结果 KDR mRNA高表达于移植瘤中内皮细胞和部分瘤细胞,且在移植的早期(5-15d)和晚期(35-50d)以及在缺氧瘤组织区域上存在相对高表达.体外SHG-44细胞不表达KDR mRNA.结论 KDR mRNA在移植性人脑胶质瘤细胞中有较高表达,在不同的生长阶段和不同的瘤组织区域上存在差异表达的规律性,对肿瘤血管形成具有重要作用.KDR可作为抗胶质瘤血管形成的治疗靶点.     

丹槐银屑浓缩丸治疗家兔寻常型银屑病的机制研究

目的建立兔寻常型银屑病动物模型,探讨丹槐银屑浓缩丸对其血管内皮生长因子及受体表达的影响。方法将40只家兔随机分为对照组、模型组、阿维A组、丹槐组。测定4组家兔耳病变组织VEGF蛋白及VEGF mRNA的表达,以及受体1(FLT-1)、受体2(KDR)的表达量,检测真皮乳头血管密度(MVD)、外周血T淋巴细胞百分率及肝功能三项[胆汁酸(TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)]。结果治疗后,与模型组比较,丹槐组VEGF蛋白及VEGF mRNA、受体FLT-1、受体KDR表达、MVD、T淋巴细胞百分率均显著下降(P<0.05);与阿维A组比较,丹槐组VEGF蛋白及VEGF mRNA、受体FLT-1、受体KDR表达明显下降。丹槐组与阿维A组间MVD、T淋巴细胞百分率比较差异无统计学意义(P>0.05)。丹槐组肝功能指标均在正常范围内。结论丹槐银屑浓缩丸在不影响动物肝功能的情况下,可降低实验性寻常型银屑病家兔耳病变组织VEGF的过度表达,阻断VEGF与其受体结合,抑制病变组织皮下血管新生与重建,并具有与阳性阿维A类似的抑制T细胞增殖的作用,可抑制T细胞介导的皮损局部炎症反应,进而降低真皮乳头微血管的异常增生,减轻寻常型银屑病对皮肤组织的破坏。     

血管内皮生长因子受体KDR在大肠癌发展中的研究

目的探讨血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)受体KDR和大肠癌间质新生血管与大肠癌预后的关系。方法应用免疫组化方法监测86例大肠癌组织VEGF及KDR蛋白表达和微血管密度(Mi鄄crovesseldensity,MVD),分析VEGF、KDR和MVD及其与大肠癌Dukes分期、淋巴结转移的关系。结果VEGF及KDR阳性者MVD值显著高于阴性者(P<0.01),VEGF、KDR表达和MVD与大肠癌Dukes分期(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.01)密切相关。结论KDR及VEGF与大肠癌的血管生成密切相关;对大肠癌的复发和转移有促进作用。KDR、VEGF和MVD可作为反映大肠癌生物学行为的客观指标。     

缺氧诱导因子-1α在胶质瘤中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在人脑不同级别胶质瘤中的表达,分析HIF-1α、血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）之间的相互关系及意义。方法采用免疫组化法检测54例胶质瘤组织中HIF-1α及VEGF的表达情况,并以VIII-R-Ag作为标记计数微血管密度（MVD）。结果58例胶质瘤组织HIF-1α的表达阳性率为65.5%（33/58）,HIF-1α的表达强度和胶质瘤的病理分级呈正相关（χ2=14.24,P〈0.05）。HIF-1α的表达和VEGF的表达呈正相关（χ2=4.02,P〈0.05）,HIF-1α和MVD呈正相关（t=3.22,P〈0.05）。结论HIF-1α与人脑胶质瘤组织中血管生成及病理分级密切相关,为治疗胶质瘤的提供一种可能的途径。     

微血管密度、抑血管内皮生长因子及其受体表达与乳腺癌临床病理因素的关系

目的评价微血管密度(MVD)和抑血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flk-1)在乳腺癌组织中的表达对预后的判断价值。方法用免疫组织化学染色方法检测76例乳腺癌、10例癌旁正常乳腺组织中抑血管内皮生长因子和受体的表达,并在CD34染色切片上检测微血管密度。结果(1)癌组织VEGF和Flk-1阳性表达率分别为59.2%和61.8%,明显高于癌旁组织(P<0.05);(2)乳腺癌MVD均值为(30.49±16.51)个/200倍视野,明显高于癌旁正常组织(P<0.01);(3)乳腺癌MVD与肿瘤大小、组织学分级、腋淋巴转移及复发转移有关(P<0.01);(4)血管内皮生长因子和受体的表达与腋淋巴转移及复发转移有关(P<0.05);(5)血管内皮生长因子和受体阳性组MVD均值(54.93±13.86)高于阴性组(41.28±11.69),其表达与MVD有关(P<0.01)。结论乳腺癌的VEGF和Flk-1表达阳性率与MVD大于良性乳腺疾病。VEGF和Flk-1与MVD与患者的预后相关,均可作为判断乳癌患者预后的指标之一。VEGF和Flk-1不是影响肿瘤新生血管形成的惟一因素。     

血管内皮生长因子的异常与子(癎)前期发病的关系

目的:研究血浆可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)浓度和胎盘组织血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PLGF)及其血管内皮生长因子受体1(VEGFR1,Flt-1)、可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1,sFlt-1)mRNA的表达与子前期的关系.方法:采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测45例子前期患者和45例健康产妇血清sICAM-1的浓度,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测胎盘组织中VEGF、PLGF、Flt-1、sFlt-1 mRNA的表达.结果:(1)子前期组sICAM-1水平为(218.45±29.93) μg/L,显著高于对照组的(168.84±19.39) μg/L(P < 0.01).(2)子前期患者胎盘组织VEGF、PLGF、Flt-1、sFlt-1 mRNA的相对表达量显著高于对照组(均P < 0.01).(3)血清sICAM-1浓度与胎盘组织中sFlt-1mRNA的相对表达量呈正相关(r = 0.90,P < 0.01).结论:子前期患者血清sICAM-1浓度升高,其胎盘组织VEGF、PLGF、Flt-1、sFlt-1 mRNA的相对表达量也升高.胎盘组织sFlt-1mRNA的高表达与子前期内皮损伤等有密切关系.     

血小板反应蛋白1在乳腺癌中的表达及意义

目的:探讨乳腺癌组织中血小板反应蛋白1(TSP-1) mRNA的表达,及其与血管生成和临床病理指标之间的关系.方法:采用RT-PCR方法检测乳腺癌患者癌组织及癌旁乳腺组织中TSP-1 mRNA的表达情况,并结合免疫组织化学法检测乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR) 、血管内皮生长因子(VEGF)和表皮样生长因子(c-erbB2)的表达情况及微血管生成情况,对所得的结果进行比较分析.结果:乳腺癌组织中TSP-1 mRNA的阳性表达率明显高于癌旁正常组织(P < 0.05).乳腺癌组织TSP-1 mRNA的阳性率仅与肿瘤直径有关(P < 0.05).乳腺癌组织TSP-1 mRNA表达阳性者的微血管密度低于TSP-1 mRNA阴性者(P < 0.05).结论:TSP-1在乳腺癌组织表达中阳性率明显增高,且其微血管密度降低,因此TSP-1可在一定程度上抑制肿瘤血管生成.     

非小细胞肺癌组织中内皮抑素、血管内皮生长因子受体的表达

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）组织标本中内皮抑素（endostatin）、血管内皮生长因子受体‐2（VEGFR‐2、KDR／FLK‐1）的表达,探讨两者在NSCLC血管新生中的作用及其与临床及病理指标的关系。方法应用免疫组织化学法检测内皮抑素和KDR在28例NSCLC患者癌组织和对照组织中的表达;通过标记CD34的表达情况,计数微血管密度（MVD）。结果肺癌组内皮抑素、KDR表达阳性率分别为60．71％、64．29％,与正常对照组的不表达,差异有统计学意义（P＜0．05）。肺癌组织、对照组织MVD分别为（29．30±3．80）、（98．86±18．87）,差异有统计学意义（P＜0．05）。癌组织中内皮抑素阳性表达的MVD显著低于阴性表达的 MVD ,KDR阳性表达的MVD显著高于其阴性表达的MVD（P＜0．05）。肺癌组织中内皮抑素和KDR有一定的共表达率,内皮抑素和KDR共表达为32．14％,与对照组无共表达比较,差异有统计学意义（P＜0．05）。有淋巴结转移者内皮抑素表达显著低于无淋巴结转移者。结论 NSCLC组织中内皮抑素升高,KDR降低与抑制肿瘤血管新生密切相关。内皮抑素表达与淋巴结转移有关。     

血管内皮生长因子及其特异性受体蛋白和mRNA在垂体腺瘤中的表达与肿瘤血管形成和侵袭性的关系

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其特异性受体（KDR）蛋白和mRNA在垂体腺瘤中的表达与肿瘤血管形成和侵袭性的关系。方法采用免疫组织化学S-ABC法和RT-PCR检测58例人垂体腺瘤中的VEGF及KDR蛋白和mRNA的表达，并对血管进行染色及计数。将肿瘤的侵袭程度分为0、1、2、3级，分别为5例、14例、20例和19例。结果VEGF阳性蛋白主要位于胞浆，血管内皮很少表达，KDR蛋白主要表达在垂体腺瘤微血管内皮细胞胞浆中。随侵袭性程度的增加，VEGF和KDR蛋白、mRNA的表达相应增加，1级与0级、3级与2级比较P〈0．01，但1级与2级比较，P〉0．05。以VEGF和KDR表达的中位数为界分成高、低表达组，VEGF和KDR高表达组中的微血管密度明显高于低表达组（P〈0．01）。结论VEGF以旁分泌、自分泌形式，通过KDR协同促进垂体腺瘤血管的生成，并与垂体腺瘤的侵袭性密切相关。     

Effect of heparin affin regulatory peptide on the expression of vascular endothelial growth factor receptors in endothelial cells

BACKGROUND: Heparin affin regulatory peptide (HARP) is an 18-kDa secreted protein that has been implicated in tumor growth and angiogenesis, although the mechanisms involved remain largely unknown. In the present work, the effect of human recombinant HARP on the expression of the vascular endothelial growth factor (VEGF) receptors KDR, Flt-1 and neuropilin-1 was studied in cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). MATERIALS AND METHODS: The mRNA and protein levels of VEGF receptors were estimated by semi-quantitative RT-PCR and Western blot, respectively. Cell proliferation and migration were measured by MTT, direct counting of the cells and modified Boyden chamber assays. RESULTS: HARP decreased the expression of KDR but increased the expression of Flt-1 and neuropilin-1 at both the mRNA and protein level. The effect reached a maximum 4 h after the addition of HARP into the cell culture medium and was reversed at later time-points. When HARP was added to the culture medium 4 h before the addition of VEGF165, it inhibited VEGF165-induced proliferation and migration of HUVEC. CONCLUSION: These data suggest that HARP affects the expression of VEGF receptors and inhibits VEGF165-induced activation of HUVEC.     

造血细胞表达血管内皮生长因子及其受体基因的研究

目的 探控血管内皮生长因子（VEGF）及其受体Flt-1和KDR基因在造血细胞中的表达。方法 提取正常外周血、骨髓单个核细胞及血液肿瘤细胞系的总RNA,以β2-微球蛋白基因为内标,用单定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析VEGF,Flt-1和KDR基因的表达。结果 在22份正常外周血和22份非恶性骨髓标本中,分别有18份和19份表达,VEGF基因,而10种人类血液肿瘤细胞系均有VEGF基因的高度表达。在12份外周血中,有4份检测到Flt-1基因表达,但均未见有KDR基因表达;在22份骨髓中,分别有9份和14份表达Flt-1基因或KDR基因。10种血液肿瘤细胞系有6种表达Flt-1基因,而KDR基因表达仅见于Raji细胞。血小板也有VEGF和Flt-1基因的低度表达。结论 VEGF作为血管生成的介导物,可能具有调节正常造血细胞和血液肿瘤细胞生长的作用。     

人脑胶质瘤的表皮生长因子基因及蛋白表达

国内首次报道采用Northern、斑点杂交和免疫组化的方法检测了50例胶质瘤、4个恶性胶质瘤体外细胞系和7例正常脑组织表皮生长因子(EGF)的表达水平。结果显示,上述组织或细胞都可表达5.0 kb的EGF mRNA片断,高恶度胶质瘤较低恶度胶质瘤和正常脑组织EGFmRNA表达水平增高,低恶度胶质瘤与正常脑组织的表达无显著差异。在50例胶质瘤中29例(58％)EGFmRNA过表达,其中多见于恶性胶质瘤。采用免疫组化检测胶质瘤ihEGF表达发现,随胶质瘤恶性程度增加,EGF阳性细胞数及着色强度亦随之增加,EGFmRNA表达与ih EGF表达及肿瘤的分级呈正相关。提示胶质瘤可以合成EGF,在胶质瘤的发生发展过程中,EGF参与或促进了其恶性进展。     

胶质瘤促血管生成素2基因表达的临床意义（附52例分析）

目的　探讨胶质瘤促血管生成素2 (Ang2) 基因在脑胶质瘤的表达及其临床意义。方法　采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR) 和链酶亲和素过氧化物酶复合物SABC法检测52例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中Ang2基因表达。结果　50 例脑胶质瘤和8 例正常脑组织均可表达Ang2 mRNA片段。高恶度胶质瘤Ang2 mRNA及蛋白表达显著高于低恶度胶质瘤(P<0 01); 低恶度胶质瘤Ang2 mRNA及蛋白表达显著高于正常脑组织(P<0 05)。免疫组化染色显示, Ang2蛋白主要分布在高恶度胶质瘤组织的瘤细胞和内皮细胞, 低恶度胶质瘤呈低水平表达, 正常脑组织不表达。结论　Ang2的表达与胶质瘤的分级密切相关, 可能对胶质瘤的恶性演进起促进作用。     

血管内皮生长因子及受体Flt-1在膀胱癌中的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1在膀胱癌血管生成中的作用及与膀胱癌分化程度的关系。方法 采用免疫组化S-P法对40例膀胱癌及5例正常膀胱组织中VEGF、Flt-1蛋白进行检测。结果 VEGF及其受体Fit-1主要分布在膀胱癌组织血管内皮细胞和癌细胞胞质内,VEGF及Fit-1在G3(低分化)膀胱癌血管内皮细胞和癌细胞中的表达高于G2(中分化)和G1(高分化)并且明显高于正常组织(P＜0.01)。结论VEGF和其受体Fit-1与膀胱肿瘤的分级和分期密切相关,可以作为判断膀胱癌生长和浸润的指标之一。     

New anilinophthalazines as potent and orally well absorbed inhibitors of the VEGF receptor tyrosine kinases useful as antagonists of tumor-driven angiogenesis

The sprouting of new blood vessels, or angiogenesis, is necessary for any solid tumor to grow large enough to cause life-threatening disease. Vascular endothelial growth factor (VEGF) is one of the key promoters of tumor induced angiogenesis. VEGF receptors, the tyrosine kinases Flt-1 and KDR, are expressed on vascular endothelial cells and initiate angiogenesis upon activation by VEGF. 1-Anilino-(4-pyridylmethyl)-phthalazines, such as CGP 79787D (or PTK787 / ZK222584), reversibly inhibit Flt-1 and KDR with IC(50) values < 0.1 microM. CGP 79787D also blocks the VEGF-induced receptor autophosphorylation in CHO cells ectopically expressing the KDR receptor (ED(50) = 34 nM). Modification of the 1-anilino moiety afforded derivatives with higher selectivity for the VEGF receptor tyrosine kinases Flt-1 and KDR compared to the related receptor tyrosine kinases PDGF-R and c-Kit. Since these 1-anilino-(4-pyridylmethyl)phthalazines are orally well absorbed, these compounds qualify for further profiling and as candidates for clinical evaluation.     

PEDF和VEGF在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨膀胱移行细胞癌中色素上皮细胞衍生因子(PEDF)mRNA、血管内皮生长因子(VEGF)的表达及临床意义.方法 用聚合酶链反应(PCR)检测42例膀胱移行细胞癌和20例癌旁正常组织中PEDF mRNA的表达.通过CD34免疫染色的办法检测肿瘤组织中微血管密度(MVD).采用免疫组织化学SP法检测VEGF的表达.结果 42例肿瘤组织中有34例(80.9%)检测到PEDF表达下调,而20例正常组织中只有1例(5.0%)(P＜0.01).PEDF表达下调与肿瘤的恶性程度和MVD相关,且与膀胱移行细胞癌组织中VEG蛋白表达程度呈负相关.结论 PEDF膀胱移行细胞癌中表达下调与肿瘤的恶性程度相关,PEDF表达与膀胱移行细胞癌组织中VEGF蛋白表达程度呈负相关,PEDF可能通过调节细胞因子从而发挥其抗肿瘤血管生长与转移功能.