日本血吸虫肝门型童虫蛋白质SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳的分析

本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对日本血吸虫肝门型童虫蛋白组分进行了分析，结果显示：１４ｄ肝门型雌雄童虫出现３３条蛋白区带，主带８条；２１ｄ肝门型雌雄童虫出现３４条蛋白区带，主带８条；２１ｄ雄性童虫出现３１条蛋白区带，主带７条。各组童虫与成虫比较，有２７～２８茶共同蛋白区带，提示日本血吸虫不同时期的肝门型童虫与成虫的蛋白组分在质与量方面虽然存在着某些差异，但总体上两者的蛋白组分有很大的相似性。     

日本血吸虫肝门型童虫在体外培养中的生长、发育和产卵

本文报导在不同培养基中日本血吸虫肝门型童虫的生理活动、生长、生殖器官的发育和产卵。结果表明:在培养35d 内,不同培养基中童虫雌雄合抱率均有随培养时间延长而升高的趋势;M-841培养基、M-841+影细胞培养基中童虫生长速度快于841培养基,但三种培养基中睾丸、卵巢的生长速度差异无显著性(P>0.05)。培养35 d 时,在以上三种培养基中童虫卵黄腺均可发育成熟。最早于培养10d 时,在 M-841+影细胞培养基中查见体外产出的虫卵。提示 M-841影细胞培养基比较适合于肝门型童虫的体外培养。     

致倦库蚊发育各期蛋白质分析

应用垂直板状ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳分析致倦库蚊发育各期蛋白带谱变化，结果显示，自雌蚊卵巢发育、虫卵发育到成蚊整个生命期各期蛋白带数逐渐增多，但各期共有相同的蛋白带１２条，Ｒｆ分别为０．０３，０．１１，０．１６，０．２５，０．３３，０．３６５，０．４１，０．６０，０．６８，０．８５～０．８６，０．９６～０．９７；分子量为１０７ＫＤ，９１ＫＤ，８２ＫＤ，６７ＫＤ，５５ＫＤ，５３ＫＤ，４６ＫＤ，３４ＫＤ，３１ＫＤ，２６ＫＤ，１８ＫＤ，１４ＫＤ。卵期蛋白带数较稳定；成蚊胸肌蛋白带数较整体的少，且较清晰。     

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的改良及其应用

ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的改良及其应用ＡｎｉｍｐｒｏｖｅｄｍｅｔｈｏｄｆｏｒＳＤＳ－ＰＡＧＥａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ胡承香，张玉纯，李磊，顾长国（第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第一研究室）重庆，６３００４２生物样品分子量的测定...     

日本血吸虫童虫培养细胞形态的初步观察

首次报道日本血吸虫童虫培养细胞的光镜及扫描电镜观察结果，光镜下日本血吸虫童虫培养细胞可分为圆颗粒形鞭毛形，多角形，三角扇形及不规则形，其中以圆颗粒形细胞占多数，童虫培养细胞呈较成虫培养细胞小，但在光镜和扫描电镜下两者的结构相似，ＳＥＭ－ＩＰＳ图像分析结果表明，圆颗粒形细胞和鞭毛形细胞在面积，周长，最大，最小直径及圆球率等方面差异存在显著性（Ｐ〈０．０１）。     

在体外培养中吡喹酮对日本血吸虫肝门型童虫活动及存活影响的观察

用体外培养技术观察了吡喹酮对日本血吸虫肝门型童虫活动及存活情况的影响。童虫接触较低浓度(1μg/ml以下)吡喹酮后表现为短时间兴奋,继而出现轻度挛缩,虫体活动减弱,换正常培养基后活动很快恢复并能正常存活;而接触较高浓度(1μg/ml以上)吡喹酮后,童虫立即出现强直性挛缩,活动几乎停止,短时间(6h内)换正常培养基童虫活力尚可恢复并能正常存活,延长与药物接触时间童虫活力不能恢复,继续培养时也不能存活。     

日本血吸虫童虫培养细胞形态的初步观察

首次报道日本血吸虫童虫培养细胞的光镜及扫描电镜观察结果。光镜下日本血吸虫童虫培养细胞可分为圆颗粒形，鞭毛形、多角形、三角扇形及不规则形，其中以圆颗粒形细胞占多数。童虫培养细胞虽较成虫培养细胞小，但在光镜和扫描电镜下两者的结构相似。ＳＥＭＩＰＳ图像分析结果表明，圆颗粒形细胞和鞭毛形细胞在面积、周长、最大、最小直径及圆球率等方面差异存在显著性（Ｐ＜０．０１）。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳中一种快速敏感的蛋白质双染色法

本文报道了我们在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中改良了一种考马斯亮兰(Coomassic Brillant Blue,CBB)与铬银染色法相结合的新的蛋白质双染色法。这种方法比单一的CBB染色或单一的银染色敏感,比CBB与氨银双染法简便,一般实验室也能采用本法。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳部分纯化新生牛肝再生刺激因子

利用新生牛肝脏，采用改良Labrecque法提取肝再生刺激因子（HSS），并应用非解离聚丙烯酰胺凝胶电泳对其进行纯化，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实其分子量约为15000道尔顿，经过弛化，其杂蛋白含量降低近950倍。     

根据SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳结果测定蛋白质分子量软件的研制及应用

0引言通常根据十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）结果推算未知蛋白质分于量步骤繁琐，用肉眼与标准品（Marker）比较来估计也不准确．我们编写的计算机软件-ProCac，可自动列出回归直线方程，计算未知蛋白质的分子量。1设计思想在SDS-PAGE中，当蛋日质的分子量在11．7－165．0kD之间时，蛋白质-SDS复合物的电泳迁移率与蛋白质分子量以10为底的对数符合直线方程：lgMW=a+b·mR（MW为蛋白质的分子量，mR为蛋白质-SDS复合物电泳相对迁移率，a和b为常数）首先，分别测出Marker各条带、未知蛋白质和它们各自的指示剂…     

培养基及血清因素对体外培养日本血吸虫童虫的影响

在本室创立的８４１培养基的基础上，以不同种类和不同浓度的血清，对体外培养４６ｄ、９５ｄ的日本血吸虫进行了实验观察，并比较了８４１和８５１培养基虫体的吞食红细胞率、肠管汇合率及虫体存活率。结果表明：３项指标８４１培养基均优于８５１培养基（Ｐ＜０．０１）．童虫用８４１培养基培养２周后，提高血清浓度至２５％继续培养至９５ｄ，吞食红细胞率和肠管汇合率均明显高于１０％血清浓度（Ｐ＜０．０１），而虫体存活率两组无明显差异（Ｐ＞０．０５）。提示在后期童虫的培养中，适当提高血清浓度有利于虫体的发育。     

抗日本血吸虫童虫表膜单克隆抗体的制备

目的为制备分泌抗日本血吸虫感染保护性单克隆抗体细胞株。方法应用杂交瘤技术，将照射致弱尾蚴免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤的细胞融合。结果经两次以上有限稀释克隆化后，抗日本血吸虫童虫表膜抗原阳性率为１００％，建立了５株稳定分泌抗童虫表膜单抗的细胞株。杂交瘤细胞诱生腹水，ＥＬＩＳＡ效价达１０．６４×１０５～１１．２８×１０５。初步鉴定单克隆抗体类型分别为ＩｇＭ、ＩｇＧ２ａ和ＩｇＧ２ｂ。抗原抗体定位于童虫表膜。结论该单抗的制备为进一步研制抗日本血吸虫童虫表膜分子疫苗奠定基础。     

日本血吸虫组分蛋白SjR47的大量纯化、收集和鉴定

从日本血吸虫感染兔红细胞上分离的SjR47和SjR12两种组分蛋白能诱导宿生产生明显的抗病免疫效应。为大量纯化、收集该两种组分蛋白，我们采用了聚丙烯酰胺凝胶大柱制备电泳技术，并对该法收集蛋白的纯度及其生物活性进行了鉴定。结果表明，该技术不仅可使蛋白收集量达到毫克级水平，而且蛋白纯度较高，还可保持较高的天然蛋白生物活性，经透析处理后蛋白生物活性更高，用以免疫家兔后可获得高效价的多克隆抗体，为今后进一步深入研究该两种蛋白分子的特性奠定了基础。实验结果进一步表明聚丙烯酰胺凝胶大柱制备电泳技术是一种有效的蛋白纯化方法。     

用于遗传操作的日本血吸虫童虫体外培养方法的研究

目的建立日本血吸虫机械断尾尾蚴制备的童虫的体外培养,并用于相关的遗传操作。方法采用常规1 640培养基和添加激素等成分,建立日本血吸虫机械童虫的体外培养,并采用电穿孔技术将外源的小RNA分子导入到日本血吸虫机械童虫。结果成功体外连续培养了14d的日本血吸虫机械童虫,并建立了电穿孔技术将小RNA分子导入到日本血吸虫机械童虫的方法。结论建立的日本血吸虫机械童虫体外培养方法和转染小RNA分子的技术为血吸虫基因功能研究奠定了基础。     

无电极缓冲液的水平薄层SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳

无电极缓冲液的水平薄层ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳邵军，陈镔复，刘智广（中心实验室）关键词蛋白质，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳，缓冲液，凝胶条中图法分类号Ｑ５１电泳已成为当代测定生物大分子特性和纯度的主要工具之一。它的高分辨率既能用于分析又能用于制备，设...     

人蛔虫、猪蛔虫和犬弓蛔虫蛋白质聚丙烯酰胺凝胶板状电泳比较

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳对人肠道蛔虫、人胆道蛔虫、猪蛔虫和犬弓蛔虫的蛋白质进行了比较。结果表明:人肠道蛔虫、人胆道蛔虫和猪蛔虫蛋白质的电泳区带没有明显区别,而犬弓蛔虫与人肠道蛔虫、人胆道蛔虫和猪蛔虫蛋白质的电泳区带却有明显区别。