米非司酮对子宫内膜癌HHUA细胞裸小鼠移植瘤生长作用的研究

目的探讨米非司酮(RU486)对人子宫内膜癌HHUA细胞裸小鼠移植瘤生长的抑制作用。方法体外培养人子宫内膜癌HHUA细胞,裸小鼠皮下接种HHUA细胞建立裸小鼠移植瘤动物模型,将荷瘤裸小鼠随机分为两组,分别应用米非司酮、精制花生油治疗4周。治疗期间观察各组裸小鼠生长情况、移植瘤体积、增殖率和形态,治疗结束后应用流式细胞术(FCM)检测各组裸小鼠移植瘤组织细胞周期时相的变化和细胞凋亡率;应用免疫组化技术检测基因Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果米非司酮组裸小鼠移植瘤体积第3周明显减小,肿瘤增殖率明显降低(P<0.01)。4周治疗结束后米非司酮组裸小鼠移植瘤细胞G0/G1期比例升高(38.17±3.02)%,S期细胞比例(SPF)降低(43.87±4.29)%,与对照组比较差异均有显著性(P<0.05),移植瘤细胞凋亡率为(15.03±2.19)%,明显高于对照组(3.06±1.13)%(P<0.01);治疗组移植瘤细胞Bcl-2蛋白表达明显降低(1.9±0.61),而Bax呈现过度表达(4.0±1.28)(P<0.05)。结论抗孕激素米非司酮(RU486)能显著抑制人子宫内膜癌HHUA细胞裸小鼠移植瘤的生长,其抗肿瘤作用与调控细胞周期时相和诱导细胞凋亡相关。     

丁酸钠对人子宫内膜癌细胞系HHUA细胞增殖影响的研究

目的：探讨丁酸钠(NaB)对人子宫内膜癌细胞系HHUA细胞体外增殖的影响及机制。方法：不同浓度的NaB作用于体外培养的人子宫内膜癌细胞系HHUA，通过绘制细胞生长曲线观察NaB对细胞生长的抑制作用；用流式细胞仪定量分析细胞周期分布；用Western Blot分析p21、p53、pRb和E2F1蛋白表达。结果：NaB能诱导HHUA细胞周期G1期阻滞，上调p21蛋白表达，促进pRb去磷酸化，下调E2F1和p53蛋白表达。结论：NaB能抑制HHUA细胞体外生长，其诱导细胞周期G1期阻滞可能与p21等细胞周期调节蛋白的表达改变有关。     

雌孕激素及米非司酮对人子宫内膜癌细胞孕激素受体亚型调控的研究

目的:通过体外实验探讨雌激素、孕激素及米非司酮对人子宫内膜癌细胞孕激素受体亚型表达的调节。方法:体外培养表达不同孕激素受体亚型的人子宫内膜癌细胞HECCA-A(PRA+)、HECCA-B(PRB+)及HECCA-AB(PRA+和PRB+),分别加入雌激素、孕激素和米非司酮,作用24、48h后采用蛋白质印迹法测定各组细胞中2种孕激素受体亚型蛋白的表达。结果:雌激素作用48 h后,HECCA-A、HECCA-AB细胞的PRA表达水平明显升高,PRA/PRB比值升高,P<0.05;孕激素及米非司酮作用48 h后,HECCA-B、HECCA-AB细胞的PRB表达水平明显降低,PRA/PRB比值升高,P<0.05。结论:雌激素上调子宫内膜癌细胞PRA的蛋白表达水平,孕激素及米非司酮下调PRB的蛋白表达水平。     

丁酸钠对人子宫内膜癌细胞系HHUA细胞增殖影响的研究

目的 :探讨丁酸钠 (NaB)对人子宫内膜癌细胞系HHUA细胞体外增殖的影响及机制。方法 :不同浓度的NaB作用于体外培养的人子宫内膜癌细胞系HHUA ,通过绘制细胞生长曲线观察NaB对细胞生长的抑制作用 ;用流式细胞仪定量分析细胞周期分布 ;用WesternBlot分析p2 1、p5 3、pRb和E2F1蛋白表达。结果 :NaB能诱导HHUA细胞周期G1期阻滞 ,上调p2 1蛋白表达 ,促进pRb去磷酸化 ,下调E2F1和p5 3蛋白表达。结论 :NaB能抑制HHUA细胞体外生长 ,其诱导细胞周期G1期阻滞可能与p2 1等细胞周期调节蛋白的表达改变有关。     

米非司酮对裸鼠子宫内膜癌细胞HHUA移植瘤生长及COX-2、CDK4的影响

背景与目的子宫内膜癌是女性常见的恶性肿瘤,内膜癌中存在COX-2,CDK4的表达,并与肿瘤的发生发展有关,近年来发现米非司酮有抗肿瘤作用,但其作用机制不十分明了,我们研究米非司酮(mifeprisitone,MIF)对人子宫内膜癌HHUA细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制作用及对COX-2,CDK4的影响,以确定米非司酮能否通过干预肿瘤中COX-2,CDK4的表达而抑制肿瘤生长。方法体外培养人子宫内膜癌HHUA细胞,裸鼠皮下接种细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,随机将10只移植瘤荷瘤裸鼠分为两组,MIF组采用灌胃法[50mg/(kg·d)],对照组灌等量溶剂。观察治疗前后移植瘤的体积变化。免疫组织化学染色法检测移植瘤组织COX-2、CDK4的表达,后采用Leica IM50免疫组织化学评分软件(HSCORE)对染色结果进行半定量分析,HE染色观察肿瘤组织的病理变化。结果治疗6周后,MIF组移植瘤体积(115.25±10.97)mm3,对照组移植瘤体积(313.25±43.92)mm3,两者相比,差异有非常显著性(P<0.01);HE染色见MIF组较对照组移植瘤坏死面积显著增加;MIF组COX-2HSCOREs为(78.2±11.3),对照组(205.9±26.7),两者相比,差异有显著性(P<0.01);MIF组CDK4HSCOREs为(113.4±18.2),对照组HSCOREs为(238.7±35.9),两者相比,差异有非常显著性(P<0.01)。结论MIF具有抑制人子宫内膜癌细胞HHUA裸鼠移植瘤生长的作用;其机制可能与下调COX-2、CDK4的表达有关。     

HIF-1α、GLUT-1在子宫内膜癌中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)在子宫内膜癌中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学PV-9000二步法检测36例子宫内膜癌、18例不典型增生、12例子宫内膜复杂性增生、15例子宫内膜单纯性增生组织中HIF-1α、GLUT-1的表达情况.结果 HIF-1α,在子宫内膜单纯性增生、复杂性增生、不典型增生和子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为6.7%、25.0%、38.9%和77.8%.内膜癌组分别与单纯性增生、复杂性增生及不典型增生组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).GLUT-1在子宫内膜单纯性增生、复杂性增生、不典型增生和子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为0、8.3%、44.4%和83.3%.子宫内膜癌组分别与单纯性增生、复杂性增生及不典型增生组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).子宫内膜病变组织中HIF-1α与GLUT-1表达水平间呈正相关(r=0.559,P<0.01).结论 HIF-1α、GLUT-1在子宫内膜单纯性增生、复杂性增生、不典型增生及子宫内膜腺癌中的阳性表达率逐渐增高,说明HIF-1α及其靶基因GLUT-1可能在子宫内膜病变由良性到恶性转变过程及恶性肿瘤的进展中起重要作用.HIF-1α能提高GLUT-1的表达.     

子宫内膜癌组织PTEN和c-erbB-2蛋白表达临床意义的探讨

-2的阳性表达率明显高于正常子宫内膜和子宫内膜不典型增生,P<0.05; c-erbB-2阳性表达与子宫内膜癌的病理分级、临床分期、肌层浸润深度和淋巴转移相关(P<0.05),但与不典型增生的程度无关(P>0.05).在子宫内膜癌组织中PTEN的表达缺失率与c-erbB-2的过度表达呈正相关.结论:PTEN蛋白的表达缺失与子宫内膜癌的发生有关;c-erbB-2蛋白的高表达提示预后不良;PTEN和c-erbB-2联合检测可作为筛选复发转移高危因素的标志.     

β-连环素表达及基因突变与子宫内膜癌发生发展相关性的研究

目的：研究β-连环素（β-cat）在子宫内膜癌组织中的表达及基因突变在子宫内膜癌发生中的作用。方法：采用免疫组化SABC法和SSCP-PCR法检测31例子宫内膜癌标本和10例正常子宫内膜中β-cat的表达及基因突变，并对实验结果进行统计学分析。结果：31例子宫内膜癌74％为质／核聚集表达，明显大于正常子宫内膜，P〈0．05。其中，Ⅰ期为84％，明显高于Ⅱ、Ⅲ期（16％），P〈0．05；内膜样腺癌为88％，明显高于非内膜样腺癌，P〈0．01，且60％分化良好，P〈0．05。不同肌层浸润深度间比较差异无统计学意义，P〉0．05。SS-CP法检测出5例突变条带，均为FI-GOI期的子宫内膜癌，且4例为内膜样腺癌，但差异无统计学意义，P〉0．05。突变组均伴有肛cat聚集，与正常组相比差异有统计学意义，P〈0．05。结论：β-cat聚集与子宫内膜癌发生有关，尤其与早期、分化良好的内膜样腺癌的发生有关，但与肌层浸润深度无关。基因突变是β-cat聚集的重要分子事件，是导致子宫内膜癌发生的重要通路之一。     

甾体激素受体PR、ER表达与子宫内膜癌淋巴结转移关系的研究

目的 :探讨激素受体PR、ER表达与子宫内膜癌淋巴结转移的关系。方法 :采用免疫组化法对15 9例子宫内膜组织中的PR、ER表达进行检测。结果 :PR阴性子宫内膜癌的淋巴结阳性率明显高于PR阳性者 ,两者差异有显著性 (P <0 0 1) ;ER阳性和阴性的淋巴结阳性率差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;PR、ER阴性表达的淋巴结阳性率为 5 1 5 % ,而PR、ER阳性者为 10 7% ,两者差异有极显著性 (P <0 0 1)。结论 :PR表达与子宫内膜癌的淋巴结转移更具相关性 ,可将PR、ER表达结果作为评估盆腔淋巴结转移的参考指标之一     

依西美坦对子宫内膜癌细胞HHUA体外增殖的抑制作用

背景与目的:子宫内膜癌发生发展与雌激素相关,芳香化酶抑制剂依西美坦可以竞争性灭活芳香化酶,降低雌激素水平,影响细胞的凋亡。本实验观察芳香化酶抑制剂依西美坦对子宫内膜癌细胞HHUA体外增殖凋亡活性及芳香化酶P450、雌激素受体(ER)、Survivin表达的影响,以确定依西美坦能否抑制子宫内膜癌的生长及其可能的作用机制。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度依西美坦作用的子宫内膜癌HHUA细胞的吸光度(A);应用流式细胞仪(FCM)检测6×10-7mol/L依西美坦作用的子宫内膜癌HHUA细胞的凋亡率;采用免疫组化法检测依西美坦作用的子宫内膜癌HHUA细胞的ER、Survivin蛋白表达变化;应用RT-PCR法检测依西美坦作用的子宫内膜癌HHUA细胞P450、survivin mRNA转录。结果:不同浓度依西美坦对HHUA细胞体外增殖有抑制作用,增加细胞凋亡率。依西美坦显著下调ER、Survivin蛋白表达(P<0.05)。依西美坦浓度为6×10-7mol/L,培养72 h,HHUA细胞ER、Survivin蛋白表达染色评分分别为2.62±0.36和1.89±0.57,与对照组染色评分3.77±0.12和3.47±0.15比较,差异有显著性(P<0.05)。同样条件下,P450 mRNA光密度比值为1.67±0.15,对照组2.94±0.25,两者相比,差异有显著性(P<0.05)。survivin mRNA光密度比值为1.56±0.14,对照组2.57±0.21,两者相比,差异有显著性(P<0.05)。结论:依西美坦对子宫内膜癌细胞HHUA有增殖抑制和促凋亡作用,其抗肿瘤作用可能与降调P450、ER、survivin表达有关。     

雌孕激素及米非司酮对人子宫内膜癌细胞体外生长影响及其机制的探讨

目的:探讨雌激素、孕激素及米非司酮对表达不同孕激素受体(PR)亚型的人子宫内膜癌细胞体外生长的影响。方法:体外培养表达不同PR亚型的人子宫内膜癌细胞HECCA(PR-)、HECCA-A(PRA+)、HEC-CA-B(PRB+)及HECCA-AB(PRA+和PRB+),分为对照组、E2组、E2+R5020组和E2+R5020+RU486组,在24、48、72和96 h采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞生长情况,流式细胞仪测定96 h各个细胞周期的比例,比较S期细胞比率(SPF值)。结果:雌激素作用72 h后,四株细胞生长及SPF值明显高于对照组,P<0.05;E2+R5020作用72 h后,HECCA-B及HECCA-AB细胞生长均较E2组减慢,S期细胞比率下降,P<0.05;E2+R5020+RU486作用72 h后HEC-CA-B、HECCA-AB生长明显快于E2+R5020组,S期细胞比率明显升高,P<0.05,而HECCA细胞生长及S期细胞比率明显低于E2组及E2+R5020组,P<0.05。结论:雌激素促进子宫内膜癌细胞的生长,孕激素主要通过PRB的介导拮抗雌激作用。米非司酮在表达PRB细胞拮抗孕激素的...     

Measurement of estrogen receptor and progesterone receptor in human endometrium and endometrial carcinoma

The concentration of cytosol estrogen receptors (ER) and progesterone receptors (PR) in the endometrium of the normal menstrual cycle and endometrial carcinoma, were measured by Enzyme Immunoassay (EIA) using monoclonal antibody, and were compared with Dextran Coated Charcoal (DCC) method. In DCC method, maximum binding sites were estimated according to Scatchard plot analysis. Following results were obtained in this study. 1) In the normal endometrium obtained from 20 cases, the correlation coefficients for ER and PR were 0.907 and 0.778, respectively. Regression lines were as follows; ER (EIA) = 1.68 (DCC) + 19.1 fmol/mg protein and PR (EIA) = 0.13 (DCC) + 24.8 fmol/mg protein. A good correlation was found between the two methods in ER assay. 2) In the normal menstrual cycle, DCC values and EIA values of ER were increased in proliferative phase, and were decreased in secretory phase. DCC values of PR were increased in proliferative phase and not decreased in secretory phase, but EIA values of PR were not remarkably changed. 3) In the endometrial carcinoma obtained from 14 cases, there was good correlation between EIA and DCC values in ER assay (r = 0.941), but correlation between the two methods was not found in PR assay. 4) In relation of histology, positive rates were highest in patients with well differentiated types, and in relation of clinical stage, positive rates were higher in the patients with early stages than progressive stages. These results suggest that EIA is as useful as DCC in ER assay in normal endometrium and endometrial carcinoma.     

雷公藤甲素对子宫内膜癌细胞株HHUA体外抑制作用的研究

目的观察雷公藤甲素对子宫内膜癌细胞株HHUA增殖的影响。方法分别采用MTT法及流式细胞仪观察雷公藤甲素对子宫内膜癌细胞株HHUA增殖、细胞周期以及凋亡的影响。结果MTF实验结果显示,5～160ng/mL的雷公藤甲素均能抑制HHUA细胞的生长且生长抑制作用呈剂量及时间依赖性;流式细胞仪检测显示,雷公藤甲素（40ng/mL、80ng/mL）处理HHUA细胞48h后,能诱导HHUA细胞发生细胞周期阻滞,阻滞部位在S期,并诱导其发生凋亡。结论雷公藤甲素能抑制人子宫内膜癌细胞株HHUA细胞的生长,将其阻滞在S期,并诱导其发生凋亡。     

雌激素与抗雌激素制剂对子宫内膜癌细胞株化疗效应的研究

目的 探讨雌激素与抗雌激素制剂对子宫内膜癌细胞化疗效应的影响。方法 采用细胞凋亡ELISA方法检测雌激素、三苯氧胺与阿霉素相互作用后,ER( )RL-952子宫内膜癌细胞的凋亡水平。结果 阿霉素诱发：ER( )RL-952子宫内膜癌细胞产生一定的细胞凋亡水平,雌激素能阻断阿霉素的作用,使细胞凋亡水平下降,呈剂量依赖反应;三苯氧胺也能诱发细胞凋亡,与阿霉素作用后,促进子宫内膜癌细胞凋亡,高于三苯氧胺单一作用产生的细胞凋亡水平,并与三苯氧胺浓度剂量呈正相关。结论 雌激素能阻断阿霉素对子宫内膜癌细胞的细胞凋亡作用,而三苯氧胺能促进阿霉素的作用,三苯氧胺与阿霉素的联合应用有助于为子宫内膜癌临床治疗的选择提供依据。     

Characterization of a human ovarian carcinoma cell line with estrogen and progesterone receptors

The potential significant therapeutic and prognostic roles for the sex steroid receptors in ovarian cancer are recognized. The authors present in detail the biochemical, morphologic, cytogenetic, and growth characteristics of an ovarian carcinoma cell line, BG-1, which has functional estrogen and progesterone receptors (23 and 300 fmol/mg protein, respectively) in clinically significant levels. In particular, BG-1 has a DNA index of 1.14, a stable karyotype with specific translocations, and produces and secretes CA 125 into the media.     

Effects of progesterone on human endometrial carcinoma cells in vivo and in vitro

The effects of progesterone on the growth and differentiation of human endometrial adenocarcinoma cells (cell lines SNG-P and SNG-M derived from primary and metastatic tumors, respectively) were assessed in vitro and in vivo. Progesterone suppressed their growth and induced cell differentiation in vitro. The suppressive effect of progesterone was stronger in the primary tumor cells than in the metastatic ones. Progesterone produced morphologic changes such as multinucleation, multinucleolation, vacuolation, extensive Golgi apparatus, and papillary arrangement of cells. The cells were transplanted sc into nude BALB/c mice where they produced undifferentiated adenocarcinomas in untreated mice and well-differentiated adenocarcinomas in progesterone-treated ones. Progesterone reduced tumor growth and decreased transplantability in nude mice. This hormone produced no change in the distribution of the chromosome numbers or in the karyology.