HPLC测定1α－羟基维生素D _3胶丸的含量及含量均匀度

目的：测定１α－羟基维生素Ｄ＿３胶丸的含量及含量均匀度。方法：采用高效液相色谱法，用硅胶柱，以石油醚（６０～９０℃）－醋酸乙酯－四氢呋喃（２：１：１）为流动相，检测波长２６５ｎｍ。结果：在０．２～５．０μｇ／ｍｌ的浓度范围具有良好的线性关系，ｒ＝０．９９９９，平均回收率１００．２％（ｎ＝５），ＲＳＤ＝１．８％，日内、日间精密度分别为１．９％（ｎ＝１１）和２．２％（ｎ＝１４）。结论：方法简单、快速、灵敏、准确，并获得了满意的测定结果。     

反相高效液相色谱法测定维生素D3微生物转化液中骨化二醇含量

 目的 快速准确地测定维生素D₃微生物转化液中骨化二醇的含量。方法 采用依利特Hypersil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(85∶15),流速2.0 mL·min^-1,柱温50 ℃,检测波长265 nm,外标法定量。结果 骨化二醇在10.1~2 020 μg·mL^-1内呈良好线性关系,r=0.999 9,定量限0.6 ng,检出限0.3 ng,平均加样回收率为101.06%(RSD 1.44%,n=9)。结论 该方法简便,准确,灵敏度高,分离度好,可用于VD₃微生物转化生产中定量骨化二醇的要求。     

HPLC同时测定多维元素片中维生素B1、维生素C、维生素B6和烟酰胺的含量

 目的 应用高效液相色谱（HPLC）方法,建立多维元素片（29）中维生素B₁、维生素C、维生素B₆和烟酰胺的同时测定方法。 方法 采用Alltima C₁₈ 色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm）,以50 mmol·L-1磷酸二氢铵溶液（磷酸调至pH 3.0）-乙腈（95∶5）为流动相,流速0.5 mL·min-1,检测波长275 nm。 结果 在本方法中,维生素B₁、维生素C、维生素B₆和烟酰胺的线性关系良好,线性相关系数（r）都大于0.999 7;专属性强,4种成分和药品中其他成分以及强制降解产物之间都有良好的分离度;精密度良好,相对标准偏差（RSD）都小于2.10%;回收率良好,回收率在98.82%和100.3%之间;稳定性能满足实验要求,维生素C在4 h内保持稳定;方法学比较显示：维生素C测定值和国标方法测定值的相关性好。结论 该方法准确、简单、快速,可作为多维元素片（29）中维生素B₁、维生素C、维生素B₆和烟酰胺的同时测定。     

HPLC测定维生素B12注射液的含量和有关物质

 目的 建立测定维生素B₁₂的含量和有关物质的高效液相色谱法。 方法 采用以十八烷基硅烷化学键合硅胶为填充剂的色谱柱,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液pH 3.5(26∶74),检测波长为361 nm。 结果 线性浓度范围20.22～505.60 mg·L-1(r=0.999 97),最低检测限为3 ng,样品溶液(避光保存)至少在24 h内稳定,平均回收率为100.8%,精密度(RSD=0.1%)、重复性(RSD=0.1%)良好。结论 用同一高效液相色谱法来测定含量和有关物质,经方法学验证,此方法简便、灵敏、准确。     

高效毛细管电泳测定胸腺肽中α1的含量

 目的 测定胸腺肽溶液中α₁的含量。方法 以胸腺肽α₁纯品作为标准品,用高效毛细管电泳测定,未涂层石英毛细管柱(78 cm×30 μm);电泳缓冲溶液为0.05 mol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH 7.0);运行电压15 kV;负压进样(66.7 kPa);温度25℃;检测波长200 nm;进样时间1 s。用比例色谱的方法确定胸腺肽溶液中α₁峰的纯度。结果 胸腺肽α₁标准溶液的线性范围50～800 μg·ml^-1,低、中、高3种浓度的平均回收率分别为87.2%,91.0%,97.4%。分离出的胸腺肽溶液中α₁的组分峰为单一组分峰,3批胸腺肽溶液中α₁的质量百分比分别为1.24%,0.812%,0.732%。结论 该方法可用于胸腺肽质控中α₁含量的测定。     

亚型选择性α1肾上腺素受体拮抗剂

 目的：综述亚型选择性α₁肾上腺素受体拮抗剂的研究进展。方法：依据α₁肾上腺素受体的最新分类，分别从α_1A受体拮抗剂，α_1B受体拮抗剂和α_1D受体拮抗剂等方面总结文献报道的亚型选择性α₁肾上腺素受体拮抗剂的研究进展。结果：在几种亚型选择性α₁肾上腺素受体拮抗剂中，有关α_1A受体拮抗剂的研究报道最多，是目前治疗前列腺增生症较为理想的药物。结论：亚型选择性α₁肾上腺素受体拮抗剂的开发为这一研究领域的前沿，有可能取代非亚型选择性α₁肾上腺素受体拮抗剂的主导地位。     

维生素 D3-β环糊精包合物的理化性质及包合作用研究

 目的 考察维生素D3-β环糊精包合物中维生素D3的理化性质和包合作用特性。方法 紫外分光光度法测定维生素D₃含量,分别考察了包合物中维生素D₃的溶解性和体外溶出速率;摩尔连续递变法测定包合物表观稳定常数和相关热力学参数。结果 形成的维生素D3-β环糊精包合物中主客分子摩尔比为 3∶1;以维生素 D₃为对照,包合物中维生素D₃的溶解明显增大,在0.1 mol·L^-1盐酸溶液中溶出速率显著加快（P＜0.01）。结论 维生素D₃制成包合物有利于提高溶解度和稳定性。     

6，7-二甲氧基香豆素对α1受体、H1受体、M3受体和钙通道作用

 目的 分析6,7-二甲氧基香豆素(DMOC)对α₁受体、H₁受体、M₃受体和钙通道的影响。方法 以去甲肾上腺素(NE)、组胺、高钾和苯肾上腺素引起兔主动脉条收缩;用阿托品协同NE引起离体灌流肾灌注压升高。结果 DMOC使NE和组胺引起动脉条收缩的量效曲线平行右移,但在高剂量时收缩不能达最大值;不拮抗高钾引起的收缩,而拮抗苯肾上素引起无钙液中的动脉条收缩;阿托品对DMOC拮抗NE引起灌流肾灌注压的升高并无影响。结论 DMOC为α₁受体和H₁受体的竞争性拮抗剂,且抑制内钙释放,但对电压门控钙通道和M₃受体无作用。     

高效液相色谱法测定人血中脂溶性维生素的含量

 目的建立同时测定人血中5种脂溶性维生素的高效液相色谱法。方法取血清0.5mL,甲醇蛋白沉淀后用正己烷、乙醚分2次提取,提取液氮气吹干,用甲醇-氯仿(3:1)液定容进样。色谱柱:Hypersil ODS(4.0 mm×250 mm);流动相:0-4.0min 甲醇-水(90:10),4.5-9 min甲醇-异丙醇(95:5),10-20 min甲醇-异丙醇(60:40);检测波长:维生素A 325 nm,25-羟基维生素 D3和维生素D3 265 nm,维生素E 290 nm,β-胡萝卜素450 nm;流速:1.0 mL·min^-1;柱温:30℃。结果维生素A和β-胡萝卜素在0.1～1.2 mg·L^-1,25-羟基维生素D₃在10.0～120.0 μg·L^-1,维生素D₃在20～240μg·L^-1,维生素E在2.0～24.0 mg·L^-1内线性良好;提取回收率均大于69％,方法回收率均大于92％,日内、日间RSD均小于6％;以本法测定了50例体检儿童血清中5 种脂溶性维生素的浓度。结论本方法快速、灵敏,操作简便易行。     

离子对高效液相色谱法测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B6含量

 目的：建立同时测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B₆含量的离子对HPLC法。方法：采用ODS色谱柱,磷酸二氢钾、庚烷磺酸钠溶液（取磷酸二氢钾13.6 g与庚烷磺酸钠1.0 g,加水溶解并稀释成1000 ml）-甲醇-三乙胺（85∶15∶0.4）,用磷酸调pH至2.8为流动相;检测波长290 nm,峰面积外标法。结果：甲硝唑和维生素B₆线性范围分别为100～300 μg·ml^-1 （r=0.9999）,5～50 μ·ml^-1（r=0.9999）;平均回收率分别为100.2% (RSD=0.93%),100.4% （RSD=0.44%）,n=6。结论：离子对HPLC法测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B₆含量,方法准确,操作简便,回收率高。     

豚鼠肺膜LTD4受体结合特征及二苯乙烯低聚体(Gn-3)的LTD4受体拮抗作用

 目的 采用LTD₄放射受体结合实验方法,在分析LTD₄受体的有关特征的基础上,观察比较二苯乙烯低聚体(Gn-3)对LTD₄受体的拮抗作用。方法 以豚鼠肺膜为实验材料,采用³H-LTD₄为放射配体,以FPL₅₅₇₁₂作阳性对照药物,Gn-3为实验药物,进行药物竞争结合实验。采用离体器官生物检测法鉴定Gn-3对LTD₄受体的拮抗作用。结果³H-LTD₄与其相应受体呈现单一结合位点,其Kd和B_max值分别为19.9×10^-11mol·L^-1和232.9 fmol·mg^-1蛋白。Gn-3可明显取代³H-LTD₄与其受体结合,IC₅₀值为5.71×10^-7 mol·L^-1,Ki值为2.54×10^-7 mol·L^-1。生物学鉴定法证实Gn-3可抑制LTD-4引起的生物学效应。结论 豚鼠肺膜LTD₄受体为单一结合位点受体,Gn-3为高活性的LTD4受体拮抗剂。     

超临界CO2-分子蒸馏制备大蒜注射液

 目的：在低温（60℃以下）条件下制备大蒜注射液。方法：超临界CO₂对大蒜有效成分进行萃取,用分子蒸馏进行分离纯化,用超滤法过滤除菌。结果：注射液的各项指标符合中国药典2000年版附录IB注射剂项下的各项规定。结论：超临界CO₂与分子蒸馏制备大蒜注射液是一种较为先进合理的方法。     

中国大虎头蜂蜂毒毒性及其F(ab)2抗体的制备研究

 目的测定中国大虎头蜂蜂毒毒性,制备能有效中和中国大虎头蜂蜂毒的F(ab)₂抗体。方法小鼠腹腔注射测定胡蜂毒LD₅₀,以胡蜂毒免疫日本大耳白兔获得免疫血浆,经盐析、酶解、加热等步骤获得F(ab)₂抗体,并以免疫扩散、ELISA和小鼠体外中和法分别测定超免血浆、纯化的IgG及制备的F(ab)₂抗体对中国大虎头蜂及多种蛇毒的抗体效价。结果小鼠腹腔注射中国大虎头蜂蜂毒的LD₅₀为0.697mg·kg^-1,制备的F(ab)₂抗体SDS-PAGE电泳纯度为94.3%;ELISA检测结果表明纯化的IgG质量浓度为1×10^-9mg·mL^-1时对胡蜂毒素为阳性;免疫扩散结果表明制备的F(ab)₂抗体与中国大虎头蜂毒素（1∶1）时出现明显沉淀线,该抗体与胡蜂毒质量比（3.5∶1）时可保护小鼠100%存活。结论首次利用胡蜂毒免疫动物制备高纯度F(ab)₂抗体,该抗体可有效中和抗中国大虎头蜂毒蜂毒,并对银环蛇毒具有交叉中和作用。     

青龙衣中胡桃醌对S180肉瘤小鼠的抑瘤作用研究

 目的研究胡桃醌的体内抗肿瘤作用,探讨其可能的作用机制。方法建立S₁₈₀荷瘤小鼠肉瘤模型,考察胡桃醌的体内抑瘤活性及其对胸腺和脾脏指数的影响;HE染色,光镜观察各组小鼠肿瘤组织生长及病理变化;透射电镜观察肿瘤细胞超微结构改变;流式细胞仪检测肿瘤组织细胞的凋亡率及细胞周期的改变。结果在2,4和8μmol·kg^-1·d^-1剂量下,胡桃醌对S₁₈₀实体瘤的抑瘤率分别为29.04%,37.33%,52.66%,瘤重与空白对照组比较均显著降低(P<0.01);胡桃醌4,8μmol·kg^-1·d^-1剂量组脾脏指数降低(P<0.01),各剂量组胸腺指数无明显变化(P>0.05);光镜下胡桃醌各组肿瘤组织坏死程度明显增加;电镜下观察发现,胡桃醌各组均出现核染色质凝集、边聚,凋亡小体形成等典型的细胞凋亡形态学改变;胡桃醌2,4和8μmol·kg^-1·d^-1剂量下,流式细胞仪检测发现凋亡峰,凋亡率分别为(5.58±0.63)%、(6.66±0.85)%和(10.27±1.05)%。细胞周期观察发现,G₁期细胞百分率有所降低,而G₂/M期有所增加,推测胡桃醌可将细胞阻滞于G₂/M期,但还需进一步研究证实。结论胡桃醌能有效抑制小鼠S₁₈₀实体肿瘤的生长,诱导肿瘤细胞凋亡及引起G₂/M期阻滞可能是其主要作用途径。     

刺五加药材根和茎HPLC的指纹图谱研究

 目的 建立刺五加药材根和茎的高效液相色谱(HPLC) 指纹图谱及绿原酸的含量测定方法。方法 选择不同产地刺五加根（6批）和茎（10批）,用Diamonsil C₁₈(4.6 mm×250 mm, 5 μm)色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸(含2.5%四氢呋喃)为流动相(梯度洗脱),检测波长340 nm,柱温为25 ℃,流速为0.8 mL·min^-1,分析时间为150 min。结果 不同产地的刺五加药材中绿原酸的含量差别较大;刺五加药材根中共标示出6个共有峰,茎中8个共有峰。结论 从整体上显示刺五加根和茎的特征,为刺五加的质量控制提供有效手段。     

9-羟基利培酮手性异构体HPLC拆分方法的建立

 目的应用α₁-酸性糖蛋白(α₁-AGP)柱,建立9-羟基利培酮手性异构体的HPLC拆分方法,为研究9-羟基利培酮手性异构体药动学提供基础。方法在α₁-酸性糖蛋白柱上,考察了流动相pH值、有机改性剂种类及比例、缓冲盐种类及浓度、柱温对9-羟基利培酮手性异构体分离的容量因子、分离度、分离因子的影响,以摸索最优的拆分方法。结果以50mmol·L^-1醋酸铵(pH6.8)-异丙醇(96.5∶3.5)为流动相,流速0.9mL·min^-1,柱温25℃,在α₁-AGP柱上成功拆分9-羟基利培酮手性异构体。结论9-羟基利培酮对映体在AGP固定相上得到了完全分离且分离良好。