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目的研究骨髓间充质干细胞来源外泌体(exosomes derived from bone mesenchymal stem cells, BMSCs-Exo)对脓毒症相关急性肾损伤体外模型的作用。方法利用超速离心法提取骨髓间充质干细胞分泌的外泌体,通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析及Western印迹法鉴定外泌体。用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)处理人肾小管上皮细胞(HK-2)建立脓毒症相关急性肾损伤(sepsis-induced acute kidney injury, SAKI)细胞模型,将细胞分为对照组(CON组)、脂多糖组(LPS组)和脂多糖+外泌体组(LPS+EXO组)。CCK-8法检测各组细胞活性、流式细胞仪检测细胞凋亡率,应用Western印迹法检测细胞凋亡相关蛋白cleaved-Caspase3、Bax和bcl2水平,采用qRT-PCR检测炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA水平。结果应用LPS处理HK-2细胞成功构建了SAKI细胞模型。LPS组中,HK-2细胞经LPS(100 μg/mL)处理后细胞活性和抗凋亡蛋白bcl2表达明显下降(P<0.05),而细胞凋亡率和凋亡蛋白cleaved-Caspase3、Bax表达水平显著上升(P<0.01),同时炎性指标TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA表达上调(P<0.01)。LPS+EXO组中,BMSCs-Exo逆转了LPS对HK-2细胞的作用,细胞活性升高、凋亡蛋白cleaved-Caspase3以及Bax下降和抗凋亡蛋白bcl2升高(P<0.05),同时还下调了炎性因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)mRNA表达水平(P<0.05)。结论BMSCs-Exo在LPS诱导的SAKI体外模型中发挥抗炎和抗凋亡的保护作用,为未来临床利用BMSCs-Exo治疗SAKI提供理论基础。 相似文献
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大量研究表明间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)主要通过旁分泌作用抑制细胞凋亡、抑制心肌纤维化、促进血管生成、抑制免疫反应来修复心肌损伤,外泌体在其中起主要作用。外泌体是细胞分泌的天然的纳米载体,内含细胞特异性蛋白、核酸和脂质。与脂质体载体相比,还具有低免疫原性、无细胞毒性及能够穿透生物屏障等优点。目前已有多种靶向心脏的工程外泌体在动物心肌梗死模型中取得很好的疗效。本文就MSC及MSC来源外泌体促进心肌梗死后受损心肌修复的机制及研究进展作一综述。 相似文献
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间充质干细胞(MSC)来源于中胚层,具有修复组织损伤的作用。外泌体是细胞分泌的囊泡样物质,与来源细胞功能相似。近年来,间充质干细胞来源外泌体(MSC-exo)受到广泛关注,其生物学特性及作用机制成为研究热点。本文就外泌体特性及间充质干细胞来源外泌体在治疗疾病中作用机制作一综述。 相似文献
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目的 基于前期研究证实温和灸联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)移植可协同促进大鼠损伤肛门括约肌结构和功能修复的基础,探索协同修复效果是涉及Wnt/β-catenin通路,及BMSC源性外泌体对C212成肌细胞的影响。方法 将16只SD大鼠随机等分4组,所有大鼠均采用Zutshi大鼠肛门括约肌复合体损伤模型,造模成功后分别采用温和灸30 min、BMSC移植及生理盐水治疗,连续14 d。治疗结束后剥离肛门括约肌后采用q PCR和Western blot检测组间Wnt4、Wnt5a、Wnt5b蛋白表达差异。将BMSC源性外泌体与小鼠成肌细胞C2C12共培养后采用EDU及CCK8检测BMSC外泌体对C2C12细胞增殖作用,探索不同浓度外泌体对BMSC增殖的差异。流式细胞术检测BMSC源性外泌体对C2C12细胞周期的影响。结果 免疫印迹和qPCR分析结果提示温和灸联合BMSC移植可促进Wnt4、Wnt5A、Wnt5B高表达。CCK8结果显示BMSC源性外泌体可促进C2C12细胞的增殖,在浓度为25μg/mL时疗效最佳。共培养结果... 相似文献
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间充质干细胞治疗骨关节炎的有效性已在动物实验和临床研究中得到验证,越来越多的证据表明间充质干细胞主要通过旁分泌机制发挥作用,外泌体在其中扮演着重要角色。外泌体是含有多种活性物质的细胞外囊泡,在细胞间和细胞内的通讯中发挥关键作用。文章就不同间充质干细胞来源的外泌体治疗骨关节炎的研究进展进行综述,讨论间充质干细胞来源的外泌体治疗骨关节炎的未来方向,为骨关节炎的治疗提供新思路。 相似文献
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基于间充质干细胞的细胞治疗是组织再生与修复的重要策略之一。近年的研究表明外泌体作为间充质干细胞分泌的重要产物可以起到类似于亲本间充质干细胞的作用。作为细胞间传递信息的重要途径,外泌体(Exosomes)参与多种生理病理过程,在促进组织修复与再生中发挥重要作用,为组织工程提供了新思路。 相似文献
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基于间充质干细胞的细胞治疗是组织再生与修复的重要策略之一.近年的研究表明外泌体作为间充质干细胞分泌的重要产物可以起到类似于亲本间充质干细胞的作用.作为细胞间传递信息的重要途径,外泌体(Exosomes)参与多种生理病理过程,在促进组织修复与再生中发挥重要作用,为组织工程提供了新思路. 相似文献
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<正>组织修复是临床治疗中极为重要的环节,伴随着组织细胞的再生、增殖、分化和迁移,炎症水平调节,活性氧(ROS)含量的回归稳态,伤面消肿愈合等过程。目前有关组织修复方面的临床治疗方法很多,但效果不尽人意。通过对外泌体的研究,我们发现其在促进组织修复方面有着重要的作用。本文拟对间充质干细胞(MSC)来源外泌体促进组织修复方面的研究进展进行综述,现报道如下。1 MSC的旁分泌机制MSC是一种来源于中胚层,具有自我更新和多方向分化能力的多能干细胞, 相似文献
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《中南医学科学杂志》2019,(4)
缺血性脑卒中是严重威胁人类健康的高发病,大量动物研究数据揭示了间充质干细胞移植对缺血性脑卒中的神经修复作用。最新研究发现,间充质干细胞衍生的外泌体具有相似修复作用,通过参与细胞间信号传导及细胞或组织新陈代谢,影响脑组织对缺血的应激和促发修复反应。本文对间充质干细胞衍生的外泌体特性和生物学功能及其潜在临床价值做以下综述。 相似文献
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器官纤维化是组织损伤后过度修复的结果,与器官衰竭和高死亡率有关,因而寻找有效的治疗纤维化的方法具有重要价值。近年来研究发现间充质干细胞来源的外泌体具有体积小、免疫原性低、无致瘤作用等优势,在抗纤维化方面显示出良好的应用前景。该文综述了间充质干细胞来源的外泌体治疗各种器官纤维化的机制及相关研究进展。 相似文献
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目的 研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)源性外泌体(Exosomes)对盆腔炎(PID)模型大鼠氧化应激和炎症反应的影响。方法 通过全骨髓粘附法体外分离,培养和纯化正常SD大鼠的骨髓组织中的BMSCs。采用ExoQuick试剂法从BMSCs上清液中分离提纯Exosomes。按随机数字表法将60只雌性SD大鼠分为模型组、治疗组、左氧氟沙星组、对照组、空白组和假手术组6组,每组10只。对各组大鼠进行子宫组织HE染色,外周血白细胞测定,血清炎症因子检测,氧化应激状态评估。结果 分离培养大鼠BMSCs,并成功提取了BMSCs源性Exosomes。治疗组大鼠子宫组织HE染色显示炎症反应较模型组和对照组明显减轻。治疗组大鼠外周血白细胞数、中心粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞均较模型组出现降低;且治疗组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6和 IL-8的浓度水平值也均较模型组出现降低(P<0.05)。氧化应激指标检测显示治疗组大鼠SOD和T-AOC表达水平均较模型组出现升高,而MDA表达水平则降低(P<0.05)。治疗组大鼠除中心粒细胞数和血清IL-1β浓度水平值要高于左氧氟沙星组,其余外周血白细胞、血清炎症因子和氧化应激指标比较无统计学差异(P>0.05)。结论 BMSCs源性Exosomes对盆腔炎模型大鼠子宫具有保护作用,其机制可能通过抑制氧化应激和炎症反应发挥作用。 相似文献
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肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是一种以进行性肺血管收缩、肺血管重构、右心室肥厚为特征,进而导致右心衰竭的疾病。目前治疗PH的方法仍存在很多不足,需要寻找新的治疗策略。近年来,有关间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)对PH的治疗作用及机制研究相继被国内外许多学者所重视,成为PH细胞治疗的研究热点之一。其中,MSC的旁分泌机制被认为起到一个重要的治疗作用。从MSC中分离出的外泌体(exosomes,EXO)具有抑制肺血管重构的潜力,被认为是治疗PH的一种新的潜在治疗方法。本文就MSC外泌体在PH治疗中的作用及可能机制做一综述,从而为MSC的EXO治疗PH提供理论依据。 相似文献
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目的探讨兔外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells derived from peripheral blood, EPCs)外泌体(Exosomes)调控骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells, MSCs)差异基因表达情况。方法将EPC-Exos和MSCs共培养作为实验组,单独MSCs作为对照组,各培养14d后进行基因芯片送检,筛选出分子网络模块和关键基因。结果从高通量芯片数据中共筛选到差异基因表达共1772个,其中表达上调基因664个,下调基因1 108个。基因表达差异主要与染色体、着丝粒等细胞器定位、细胞增殖、细胞周期等密切相关;EPC-exos调控MSCs显著富集的通路中P53通路、MARK通路及酮体合成和降解途径差异明显。结论利用基因芯片方法筛选的相关基因可能在EPC-Exos调控MSCs生物学功能中发挥重要作用,并可作为外泌体修复糖尿病创面的的理论依据。 相似文献
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目的 通过体外实验探索间充质干细胞来源的外泌体(mesenchymal stem cells-derived exosomes, MSCs-Exo)对老年小鼠心脏成纤维细胞衰老表型的调控作用,并初步探索发挥关键作用的外泌体蛋白。
方法 使用超速离心法提取人脐带来源间充质干细胞条件培养基中的外泌体,通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析及Western印迹法进行鉴定。分离18月龄老年小鼠与4周龄年轻小鼠的心脏成纤维细胞,分别作为衰老组和年轻组,加入外泌体干预后的衰老细胞作为治疗组。进行细胞衰老标志物β-半乳糖苷酶染色实验、细胞活力实验和细胞迁移能力实验,对结果做定量分析。基于公共数据库结果,对外泌体的蛋白质内容物进行质控后的GO富集、蛋白互作等生物信息学分析,筛选潜在关键内容物,并结合基因敲低实验与衰老标志物检测进行验证。
结果 间充质干细胞来源的外泌体可以显著减少老年小鼠的衰老心脏成纤维细胞衰老标志物β-半乳糖苷酶的表达(P<0.001),同时显著促进细胞活力与细胞迁移速度(P<0.001)。生物信息学分析显示: 外泌体蛋白内容物中的P4HA2可能是GO富集程度最高的胶原纤维组织通路中的关键蛋白。敲低P4HA2显著下调MSCs-Exo缓解老年小鼠心脏成纤维细胞衰老的能力(P<0.001)。
结论 间充质干细胞来源的外泌体能够对老年小鼠心脏成纤维细胞起抗衰老、促活力、促迁移的效果,而外泌体中的P4HA2蛋白可能是行使上述功能的核心成分。 相似文献
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比较及鉴定超高速离心法及ExoQuick-TC法提取小鼠骨髓间充质干细胞来源外泌体.采用BCA蛋白检测可见ExoQuick-TC法提取的外泌体蛋白含量高于超高速离心法提取的蛋白含量.Exosome Antibodies,Array & ELISA Kits检测可见ExoQuick-TC法提取外泌体的纯度优于超高速离心法提取的纯度.两种方法提取的外泌体电镜下形状无差异,随机选取3个电镜视野进行计数可见ExoQuick-TC法提取外泌体数量多于超高速离心法提取外泌体. ExoQuick-TC法提取的外泌体具有更高的产量及纯度. 相似文献