乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的分子表达研究

目的:分析乙型肝炎患者外周血Tregs水平并探讨其在HBV感染者中发病机制的作用.方法:采用流式细胞术检测不同类型乙型肝炎患者及健康对照组外周血Tregs的水平及应用荧光定量PCR技术测定其血清中HBvDNA载量.结果:①慢性乙型肝炎组(CHB)Tregs表达率较急性乙型肝炎组(AHB)有明显差异(P＜0.05),与无症状携带者组及健康对照组则有显著差异(P均＜0.01);②AHB组较健康对照组的稍低,但无统计学意义(P>0.05),且明显低于CHB组(P＜0.01)；③无症状携带者组与健康对照组相比无显著差异(P＞0.05).④CHB组外周血HBVDNA载量较其他三组明显偏低(P＜0.01)；AHB组与无症状携带者组、健康对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).⑤不同类型HBV感染患者外周血Tregs表达率与HBVDNA载量呈正相关.结论:①外周血Tregs表达的水平与乙肝患者病情轻重有一定关系,它在乙型肝炎持续感染中可能发挥了重要作用.②不同类型HBV感染患者外周血Tregs表达率与HBVDNA载量呈正相关.     

结肠癌患者外周血 CD4+ CD25+调节性 T细胞检测的临床意义

目的 探讨结肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞检测的临床意义。方法采用流式细胞技术对51例结肠癌患者和30例健康体检者外周血淋巴细胞CD4及CD25进行了检测。结果（1）结肠癌组CD4^＋CD25^＋细胞明显高于正常对照组（P〈0．05），CD4^＋CD25^＋细胞则显著低于正常对照组（P〈0．05）；（2）结肠癌组手术后患者CD4^＋CD25^＋、CD4^-CD25^＋细胞与手术前相比显著下降（P〈0．05）；（3）结肠癌组淋巴结转移患者CD4^＋CD25^＋细胞明显高于未转移组（P〈0．001）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数可以反映肿瘤患者免疫系统存在抑制状态，且可能与肿瘤的免疫耐受有关，并可反映肿瘤淋巴结转移状况。     

肝癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨应用流式细胞术检测肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义.方法 应用三色免疫荧光流式细胞仪测定37例肝癌患者及30例肝硬化患者外周血T细胞亚群CD4~+CD25~+/CD~+比值.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血中转化生长因子β1(TGF-B1)的表达水平.结果 肝癌患者外周血CD4~+CD25~+/CD4~+比值较肝硬化患者显著增高,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+T细胞水平与肝癌原发肿瘤的大小、TGF-βl呈正相关(P<0.05).结论 肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞增多,对肝癌患者具有免疫抑制作用.     

CD4+ CD25+ CD127dim/-调节性T细胞细胞在乳腺癌患者外周血中的表达及意义

近年来,乳腺癌的发病率明显升高[1],乳腺癌癌细胞的免疫应答调节机制备受重视.本研究旨在探讨CD4+CD25+ CD127dim/-调节性T细胞细胞在乳腺癌患者外周血中的表达及意义. 一、材料与方法 1.研究对象:采集遵义医学院附属医院甲状腺乳腺外科2011年7月至12月有完整病历资料病理确诊的30例女性乳腺肿瘤患者术前外周静脉血1 ml;同期两次另取2例乳癌女性患者外周静脉血10 ml.采集标本时所有患者均未行治疗,排除其他疾病干扰,静脉血以乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝.     

动脉粥样硬化患者外周血CD4 T 细胞及CD4+CD25highCD127- 调节性T 细胞的变化

目的：探讨动脉粥样硬化（AS）患者外周血CD4 T细胞及调节性T细胞（CD4+CD25highCD127- Treg）比例及功能的变化。 方法：选择AS患者（AS组）及健康体检者（健康对照组）各40例,抽取外周静脉血,用流式细胞术测定CD4 T细胞、CD8 T细胞、IFN-γ+ CD4 T细胞、IFN-α+ CD4 T细胞和CD4+CD25highCD127- Treg细胞比例,以及各自的CD4+CD25highCD127- Treg细胞与CD4 T细胞共培养后,CD4 T细胞增殖能力以及CD4 T细胞分泌炎症因子能力的变化。 结果：与健康对照组比较,AS组外周血CD4 T细胞比例及CD4 T/CD8 T比值明显升高、IFN-γ+ CD4 T及IFN-α+ CD4 T细胞比例明显升高（均P<0.05）,而CD8 T细胞比例与CD4+CD25highCD127- Treg细胞比例差异无统计学意义（均P>0.05）。健康对照组CD4 T细胞的增殖能力、IFN-γ及IFN-α分泌能力在与CD4+CD25highCD127- Treg细胞共培养后较其单独培养均明显降低（均P<0.05）,而AS组CD4 T细胞的以上指标在与CD4+CD25highCD127- Treg细胞共培与单独培养间差异均无统计学意义（均P>0.05）。 结论：AS患者外周血CD4+CD25highCD127- Treg细胞功能的丧失,导致外周血CD4 T细胞比例升高、分泌炎症因子能力增强,从而引发AS的炎症状态。     

反复自然流产患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)在反复自然流产发病机制中的作用。方法:应用流式细胞术检测29例原因不明的反复自然流产妇女(URSA组)和20例正常妊娠妇女(正常对照组)外周血中CD4+CD25+Tr的比例。结果:URSA组外周血中CD4+CD25brightTr百分率[(1.98±0.96)%]显著低于正常对照组[(3.21±1.25)%,P<0.05],而2组间CD4+CD25+总百分率、CD4+CD25dim细胞百分率以及CD4+CD25bright/CD4+比值均无显著性差异(P均>0.05)。结论:URSA的发生可能与患者CD4+CD25brightTr比例下降有关,CD4+CD25brightTr在母胎免疫耐受中发挥重要作用。     

类风湿性关节炎患者外周血环瓜氨酸肽抗体与CD4+CD25+调节性T细胞检测的意义

目的 探讨类风湿性关节炎(RA)患者外周血环瓜氨酸肽(CCP)抗体、CD4+ CD25+调节性T细胞检测的意义.方法 54名符合1987年美国风湿病协会(ACR)修订的RA诊断标准的患者为实验组,20名正常体检健康人员做为对照组.用酶联免疫吸附试验(EUSA)检测血清CCP抗体,用流式细胞仪测定外周血CD4+ CD25+调节性T细胞水平,RA组患者均行双手和双足X线检查评价骨关节侵蚀情况.结果 RA组CCP抗体的阳性率为66.7％,较对照组明显增高(P＜0.01);RA组及对照组CD4+ CD25+调节性T细胞表达水平分别为(3.41±1.83)％、(4.23±2.16)％,两组差异有统计学意义(P＜0.05);RA患者CCP抗体阳性组与阴性组CD4+ CD25+调节性T细胞表达水平分别为(3.17±1.57)％、(3.59±1.84)％,差异无统计学意义(P＞0.05),两组骨关节侵蚀发生率分别为72.2％、16.7％,差异有统计学意义(P＜0.05),CCP抗体阳性组骨关节侵蚀率与CD4+ CD25+调节性细胞水平无明显相关(r=-0.126,P＞0.05).结论 CCP抗体可以作为RA的重要实验室检测指标;CCP抗体阳性RA患者较阴性患者更易发生骨关节侵蚀,但骨关节侵蚀的发生可能与CD4+ CD25+调节性T细胞的表达水平降低无关.     

CD4+CD25+调节性T细胞与移植免疫耐受

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是一类具有特殊免疫调节功能的T细胞亚群,它所介导的免疫抑制在移植免疫耐受的诱导和维持中起关键作用。本文对近年来CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的作用机制及免疫耐受等方面的研究进行了综述。     

重症急性胰腺炎患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞的动态变化研究

目的 动态观察重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)患者外周血CD4+CD25 high调节性T细胞(Treg)和Foxp3及细胞因子IL-10、IFN-γ及IL-4的变化,探讨其临床意义.方法 将2008年8月-2009年6月收治的42例SAP患者根据病程的变化分为3期:Ⅰ期(全身炎症反应综合征期即SIRS期);Ⅱ期(SIRS下调期);Ⅲ期(感染相关并发症期).对照组为同期住院的38例急性轻型胰腺炎(MAP)患者.分别抽取外周血,以流式细胞仪检测Treg及Foxp3百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测IFN-γ、IL-4及IL-10的水平,并对以上指标进行相关性分析.结果 Treg百分率和IL-4水平在SAP Ⅰ期开始升高(Treg:1.37%±1.12%;IL-4:22.92±4.17),Ⅱ期高于Ⅰ期(Treg:3.12%±1.21%;IL-4:35.42±12.50),Ⅲ期升至最高(Treg:4.47%±1.04%;IL-4:76.04±14.58);IFN-γ水平在SAP Ⅰ期最高(978.57±213.29),Ⅱ期降低(571.43±157.14),在Ⅲ期降至最低(357.14±150.00);各期相比差异有统计学意义(P＜0.05),且均明显高于对照组(P＜0.05).Treg比例与IFN-γ水平负相关(r=-0.895,P＜0.01),与IL-4水平正相关(r=0.813,P＜0.01).结论 Treg可能通过抑制IFN-γ的分泌及促进IL-4的产生,对抗过度炎症反应对机体造成的损害.     

前列腺癌患者外周血中CD4+CD25high调节性T细胞及调节因子TGF-31和COX-2的表达

目的:通过检测前列腺癌患者以及健康志愿者外周血中CD4+ CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达,初步探讨CD4+ CD25high调节性T细胞在前列腺癌发病机制中的作用及其与TGF-β1和COX-2的相关性.方法:应用流式细胞术检测30例前列腺癌患者治疗前后(其中前列腺癌局限组11例,非局限组19例)及20例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+ CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其外周血清中TGF-β1和COX-2的表达.对前列腺癌患者上述指标进行术前术后对比分析,另对CD4+ CD25high调节性T细胞与TGF-β1及COX-2的相关性进行分析;并探讨上述指标在前列腺癌患者局限组和非局限组间是否存在差异性.结果:流式细胞术检测显示,前列腺癌患者治疗前PBMC中CD4+ CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例为(18.32±7.49)%,高于健康志愿者对照组(7.77±1.86)%(P＜0.05).前列腺癌患者治疗后其比值为(17.34±5.87)%,较治疗前稍减低,但两者相比无显著差异(P＞0.05).ELISA检测外周血清中TGF-β1和COX-2显示,前列腺癌组分别为(215.97±55.16) ng/ml和(6.88±5.14) ng/ml,对照组分别为(149.75±:47.11) ng/ml和(5.65±2.69) ng/ml;前列腺癌患者外周血清中TGF-β1的表达水平高于健康志愿者对照组(P＜0.05),COX-2的表达水平与对照组无显著差异(P＞0.05).通过多重线性回归分析表明,前列腺癌患者PBMC中C14+ CD25high调节性T细胞的表达与血清中TGF-β1和COX-2的表达无显著相关.前列腺癌局限组和非局限组外周血中CD4+ CD25 high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达均无显著性差异(P＞0.05).结论:前列腺癌患者PBMC中CD4+ CD25high调节性T细胞可能参与前列腺癌的发生,其增殖机制与血清中TGF-β1和COX-2的表达无关,可能与肿瘤本身及肿瘤局部微环境相关.     

肝癌病人外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T淋巴细胞表达水平的临床研究

目的 了解CD4+CD25+FOXP3+T调节性T细胞在肝癌病人外周血中的表达水平并探讨其临床意义.方法 应用流式细胞术测定18例肝癌病人外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞百分比,并与26例l临床对照者和24例健康对照者进行比较.结果 肝癌病人外周血中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞百分比(4.25%±3.98%)明显高于临床对照组(1.34%±1.14%)及健康对照组(1.29%±0.95%)(P＜0.01),而两个对照组之间并无显著性差异(P＞0.05).CD4+CD25+FOXP3+T细胞在肝癌病人外周血所占CD4+T细胞比率(2.94%±0.91%)也较临床对照组(0.76%±0.34%)及健康对照组(0.81%±0.29%)显著升高(P＜0.001),且升高幅度强于CD4+CD25+T细胞水平,两个对照组之间并无显著性差异(P＞0.05).结论 CD4+CD25+FOXP3+T细胞是更为准确的调节性T细胞,其在肝癌病人外周血中表达水平明显升高,检测CD4+CD25+FOXP3+T水平对肝癌的预防治疗具有重要临床意义.     

乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平的检测及意义

目的：探讨乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（Treg）水平检测的意义。 方法：流式细胞术检测74例乳腺癌患者与30例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞百分比,分析CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与乳腺癌患者临床病理特征及相关免疫组化指标的关系。 结果：乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞的百分比高于健康对照者[（9.15± 2.24）% vs.（2.29±1.36）%],差异有统计学意义（P<0.05）。统计分析显示,乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与肿瘤组织学分级、淋巴结转移、pTNM分期以及HER-2、pS2、nm23的表达有关（均P<0.05）,而与肿瘤大小、病理类型以及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、p53、Ki-67表达无关（均P>0.05）。进一步相关性分析显示,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与肿瘤组织学分级、淋巴结转移数、pTNM分期、HER-2的表达呈正相关（r=0.583,r=0.333,r=0.919,r=0.604,均P<0.05）而与pS2、nm23表达呈负相关（r=-0.229,r=-0.401,均P<0.05）。 结论：乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平升高,并与与乳腺癌的进展、转移密切相关,对其检测可能有助于患者预后及治疗效果的评估。

     

大肠癌患者外周血调节性T细胞的检测及临床意义

目的观察大肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T（Treg）细胞数量的变化，探讨其与肿瘤临床病理特征的关系。方法应用流式细胞仪分析大肠癌患者和健康对照组外周血单个核细胞的Treg细胞数目，比较Treg细胞百分比变化与大肠癌临床病理特征的相关性。结果结直肠癌患者Treg细胞占CD4^＋T细胞百分比（15±8）％，与健康对照组（6．0±3．5）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；CEA正常的结直肠癌患者Treg细胞占CD4^＋T细胞百分比（13±4）％，与CEA升高的结直肠癌患者Treg细胞（17±10）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；Duke＇s C和D期的结直肠癌患者Treg细胞占CD4^＋T细胞百分比（19±6）％，与A期和B期Treg细胞百分比（12±5）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结直肠癌患者外周血TGF-131含量（1．2±0．4）ng／L，与Treg细胞数目呈正相关（r=0．253，P〈0．05）。结论Treg细胞在大肠癌患者中比例升高，可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制，Treg细胞增加可作为大肠癌患者肿瘤进展的重要标志。     

TGF-β1和Treg细胞在肝细胞癌患者外周血中表达及意义

目的：探讨原发性肝癌患者外周血中转化生长因子TGF-β1及Treg细胞表达水平的变化及意义。方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测原发性肝癌患者和对照组血清TGF-β1水平；采用流式细胞仪进行外周血Treg数量进行检测。结果：60例原发性肝癌患者血清TGF—β1水平为（68．86±13．27）ng／L，40例正常人血清TGF-β1水平为（21．31±7．65）ng／L，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；原发性肝癌组Treg细胞数量明显高于对照组[（27．66±5．48）％vs（17．31±2．84）％，P〉0．01）。结论：原发性肝癌患者血清TGF-β1和Treg的水平明显增高，可能是造成肝癌患者免疫力低下的重要因素之一。     

关节置换患者外周血调节T细胞水平变化及其临床意义

目的探讨调节性T细胞(Treg)与关节置换假体植入的关系及临床意义。方法 2009年1月至2009年6月将人工髋关节置换手术患者及同期无假体植入的关节镜手术患者分为两组,用流式细胞仪检测术前及术后3 d外周血Treg水平并进行统计学分析。结果关节置换组术前外周血中Treg的水平为(2.99±1.33),术后为(4.66±1.96),两者比较差异有统计学意义(P0.01);非假体植入组术前为(3.36±1.61),术后为(3.47±1.83),两者比较差异无统计学意义(P0.05);术后关节置换组与非假体植入组对比,两组间Treg水平的差异有统计学意义(P0.01)。结论假体植入体内可使患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平显著升高,提示关节置换假体感染引起的免疫反应与单纯组织感染时的免疫反应不同,T细胞能否成为假体感染的病情进展及疗效评估的指标有待进一步研究。     

脾切除对心脏移植大鼠外周血淋巴细胞凋亡及调节性T淋巴细胞的影响

目的 探讨脾切除对同种异体心脏移植大鼠外周血淋巴细胞凋亡及调节性T淋巴细胞的影响.方法 以Wistar大鼠为供者、SD大鼠为受者,进行腹部异位心脏移植,同时切除受者的脾脏(心脏移植切脾组),并以不切脾者为对照(心脏移植对照组),另设不行任何处理的对照组和单纯切脾的单纯切脾组.术后第1、3、5、7天.取各组受者的移植心脏和外周血,观察移植心脏的组织学变化和细胞超微结构改变情况,以流式细胞仪检测外周血淋巴细胞的凋亡率及CD4+ CD25+ T淋巴细胞的变化,逆转录聚合酶链反应检测CD4+ CD25+ T淋巴细胞上Foxp3 mRNA的表达情况,记录移植心脏的存活时间.结果 心脏移植对照组移植心脏存活时间为(7.47±2.24)d,心脏移植切脾组移植心脏存活时间为(17.63±4.54)d,二者间的差异有统计学意义(P<0.05).心脏移植对照组的移植心脏肿胀,质硬,色暗,间质水肿、出血,弥漫性炎症细胞浸润,大量心肌细胞坏死、溶解,横纹不清;心脏移植切脾组的移植心脏质软,色红,局部灰白,外膜下以及细胞间局灶性水肿,炎症细胞浸润,心肌细胞结构完整,横纹清晰;心脏移植切脾组的细胞超微结构改变轻于心脏移植对照组.心脏移植切脾组术后第5天和第7天的淋巴细胞凋亡率分别为(7.62±2.15)%和(9.41±3.82)%,明显高于心脏移植对照组(P<0.05,P<0.05).心脏移植切脾组术后第3、5、7天时的CD4+ CD25+ T淋巴细胞明显多于心脏移植对照组(P<0.01,P<0.01,P<0.01),其Foxp3 mRNA的表达也较心脏移植对照组明显上调.结论 脾切除使心脏移植大鼠外周血淋巴细胞凋亡率增加,调节性T淋巴细胞增多,其Foxp3 mRNA表达上调,这些变化与移植心脏病理改变呈负相关.     

大黄素对大鼠肝移植后CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响

目的研究大黄素对大鼠肝移植后CD4+CD25+调节性T细胞的比例以及对其免疫抑制功能的影响。方法双袖套法建立大鼠原位肝移植模型,以大黄素和环孢素A(CsA)分别在术后腹腔给药,并以给予PBS作为模型对照组,观察不同药物移植后大鼠存活时间的影响,以及对移植术后大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Tregulatory cells,Treg)亚群的变化以及免疫功能的影响。结果大黄素能显著延长大鼠原位肝移植的术后成活时间,大黄素组大鼠的平均存活时间(17.4±2.5)d与肝移植模型对照组(8.8±1.9)d相比差异具有统计学意义;大鼠肝移植后大黄素给药可显著上调受体大鼠外周血以及肝内CD4+CD25+Treg的比例,并显著增强CD4+CD25+Treg抑制效应性T细胞的增殖能力(P0.05)。结论大黄素能够延长大鼠原位肝移植的术后成活时间,并可能通过上调外周血以及肝内CD4+CD25+Treg的数量及免疫抑制功能来实现移植后免疫排斥反应的抑制。