竹节参总皂苷通过调节TGF-β1/Smad3通路改善衰老大鼠心肌纤维化的作用研究

研究竹节参总皂苷(saponins extracted from Panax japonicas,SPJ)对衰老大鼠心肌纤维化的改善作用及作用机制。将18月龄SD雄性大鼠随机分为衰老模型组、SPJ低剂量组、SPJ高剂量组,每组10只;衰老模型组,SPJ低、高剂量组分别灌胃给予等量的生理盐水,SPJ 10,60 mg·kg^-1·d^-1,每周6次,持续灌胃6个月至24月龄;另取10只6月龄大鼠作为青年对照组。处死动物后,采用HE染色观察各组大鼠心肌形态;Masoon染色观察各组大鼠胶原沉积的变化;RT-PCR法检测各组大鼠心脏组织中胶原相关蛋白COL1α2,COL3α1,肌成纤维细胞标记物α-SMA和基质金属蛋白酶MMP9,MMP2的mRNA表达水平;Western blot法检测各组大鼠心脏组织中TGF-β1,p-Smad3,IL-1β,TNF-α的蛋白表达。SPJ能有效改善衰老大鼠心肌纤维紊乱程度,减少炎性细胞浸润,降低衰老大鼠胶原蛋白沉积;能明显下调衰老心脏组织中COL1α2,COL3α1,α-SMA和MMP9,MMP2的mRNA表达水平;同时,能有效抑制衰老心脏中TGF-β1,p-Smad3,TNF-α,IL-1β蛋白的表达量。SPJ能有效改善衰老大鼠心肌纤维化程度,其作用机制与抑制衰老心脏中TGF-β1,p-Smad3蛋白表达,降低心肌炎症反应有关。     

基于TGF-β1/Smad2/3信号通路研究芪参六味方对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响

目的:采用芪参六味方干预自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化(MF)模型,观察其对大鼠MF的影响并探讨其作用机制。方法:SHR大鼠15只,分为模型组、中药组和氯沙坦钾组,每组5只。另魏-凯二氏大鼠(WKY)5只作为对照组。干预12周后检测各组大鼠超声心动图,处死后取左室心肌组织进行相关检测。采用Masson染色及苦味酸-天狼猩红染色,观察心肌组织胶原含量与分布;采用Western blot法测定各组大鼠心肌组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1、转化生长因子(TGF)-β1、Smad2、Smad3蛋白的表达;采用RT-PCR法检测TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达。结果:干预12周后,与模型组比较,中药组镜下胶原纤维明显减少,排列较均匀,E/E’、心肌组织胶原纤维面积百分比、CollagenⅠ/CollagenⅢ明显降低(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-9、TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达量均降低(P<0.05),T...     

大承气汤通过调节TGF-β1/Smad3信号通路减轻大鼠急性肝损伤及全身炎症反应＊

目的 观察大承气汤对盲肠结扎穿刺（cecum ligation and puncture，CLP）诱导的脓毒症大鼠急性肝损伤的保护作用及对全身炎症的影响，并探讨其可能的作用机制。方法 30只雄性SPF级SD大鼠（Sprague-Dawley rats）随机分为假手术对照组、模型对照组、大承气汤2.5 g/kg组、大承气汤5 g/kg组、大承气汤10 g/kg组5个小组，每组6只（n=6）。运用苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining，HE）观察大鼠肝组织病理学改变，检测大鼠肝脏组织中天冬氨酸转氨酶（aspartate transaminase，AST）和丙氨酸转氨酶（alanine transaminase，ALT）的变化；采用Elisa检测大鼠血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平；通过免疫组织化学（IHC）观察大鼠肝脏中转化生长因子-β1（TGF-β1）和Smad3的蛋白表达差异；最后运用免疫印迹试验（Western Blot）检测肝脏组织中TGF-β1和Smad3的蛋白表达情况。结果 与假手术对照组相比，模型对照组大鼠肝脏组织病理损伤明显，肝功能显著上升（P<0.01），大鼠全身促炎细胞因子分泌显著增加（P<0.01），转化生长因子-β1（TGF-β1）和Smad3的蛋白表达显著上升（P<0.01）；与模型对照组相比，大承气汤给药后，肝脏组织病理损伤逐渐减轻，肝功能显著下降（P<0.01），大鼠全身促炎细胞因子分泌明显降低（P<0.05），转化生长因子-β1（TGF-β1）和Smad3的蛋白表达显著下降（P<0.01），且呈浓度梯度。结论 大承气汤可以对盲肠结扎穿刺诱导的脓毒症相关的急性肝损伤发挥保护作用，改善其肝功能，抑制大鼠全身炎症反应，其作用机制可能通过调节TGF-β1/Smad3信号通路实现。     

TGF-β1/Smad通路通过参仙升脉口服液改善增龄性大鼠窦房结纤维化的表达变化

目的:观察TGF-β1/Smad通路在参仙升脉口服液改善增龄性大鼠窦房结纤维化中的表达变化。方法:SD大鼠60只,其中3月龄20只、12月龄大鼠20只、18月龄大鼠20只,随机分为两组即实验组和对照组。实验组大鼠每日灌胃参仙升脉口服液2 m L,30 d后取材。HE染色观察窦房结组织病理变化;Western-blot检测TGF-β1、Smad 2、Smad3、Smad 7蛋白的表达水平。结果:对照组中,12月龄组和18月龄组大鼠窦房结组织纤维化程度较重,3月龄组无纤维化改变不明显;TGF-β1、Smad 2、Smad 3表达水平随月龄增长升高,Smad 7表达水平降低。实验组与对照组相比,12月龄组与18月龄组大鼠窦房结组织病理程度明显降低,TGF-β1、Smad 2、Smad 3表达水平明显降低,Smad 7表达水平提高,而3月龄组大鼠实验组与对照组无明显差异。结论:参仙升脉口服液能降低增龄性大鼠TGF-β1、Smad 2、Smad 3表达水平,提高Smad 7表达水平,延缓窦房结纤维化进程。     

抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌TGF-β1表达的影响

目的 观察抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1)表达的影响.方法 喂饲呋喃唑酮建立Wistar大鼠扩张型心肌病模型,随机分组后药物干预8周,检测大鼠心肌TGF-β1的表达.结果 各组TGF-β1阳性表达的比较:与模型组相比,中西药联用组、中药大剂量组和卡托普利组均能明显抑制TGF-β1的表达(P<0.05),其中以中西药联用组抑制TGF-β1的表达最明显.结论 抗纤益心方能够抑制扩张型心肌病大鼠心肌TGF-β1的表达,这可能是其干预扩张性心肌病(DCM)大鼠动物模型心室重构的机制之一.     

健脾软肝方对肝纤维化TGF-β/Smad细胞信号转导通路的影响

目的:观察健脾软肝方对四氯化碳大鼠肝纤维化模型中TGF-β/Smad信号转导通路的影响。方法:复制CCl4大鼠肝纤维化模型,观察不同剂量健脾软肝对模型大鼠肝纤维化TGF-β/Smad通路各位点的影响。利用RT-PCR方法检测TGF-β1mRNA的表达水平,免疫组化法检测TGF-β1受体的表达和Western Blot法检测大鼠肝组织中Smad3、Smad7蛋白的表达。结果:健脾软肝方可以下调TGF-β1mRNA和TGF-β1受体的表达,调节Smad3/Smad7的比例。结论:健脾软肝方对TGF-β/Smad细胞信号转导途径中多个位点均有抑制作用。     

中药干预TGF-β1/Smad信号通路抗肝纤维化研究进展

肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)是多由于各种损肝因素所致的肝内纤维组织异常增生与沉积的病理过程。现已有研究表明转化生长因子β1(Transforming Growth Factorβ1,TGF-β1)是促肝纤维化的重要因子之一,TGF-β1/Smad信号通路是HF主要的信号转导通路,因此采取各种的措施阻断该信号成为抗纤维化的重要治疗靶点。中药在治疗肝纤维化具有多途径、多环节、多靶点的优势,近年来越来越多学者以中药治疗肝纤维化集中在阻断或转导TGF-β1/Smad信号通路上,文章基于TGF-β1/Smad信号通路抗肝纤维化的中药研究概况做一综述,揭示现代中医药作用的靶点和调控机理,为HF的防治及中医药现代研究提供新的思路和策略。     

抗纤益心方对扩张型心肌病模型大鼠心肌纤维化相关因子及心肌组织β-catenin/PPARγ信号通路的影响

目的 探讨抗纤益心方治疗扩张型心肌病(DCM)心肌纤维化的可能作用机制.方法 100只Wistar大鼠随机分为正常组8只及造模组92只.造模组大鼠采用自主饮用呋喃唑酮水溶液法制备DCM大鼠模型,将造模成功的40只大鼠随机分为模型组、卡托普利组及抗纤益心方低、中、高剂量组,每组8只.抗纤益心方低、中、高剂量组分别给予抗纤...     

黄芪葛根汤对糖尿病大鼠心肌TGF-β_1/Smad3通路的影响

目的:研究黄芪葛根汤对实验性糖尿病心肌病变的干预作用及机制。方法:采用高脂饲料喂养和链脲佐菌素腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠心肌病变模型,观察黄芪葛根汤对血糖、胰岛素、心肌纤维化、转化生长因子-β1(TGF-β1)及其信号蛋白Smad3表达的影响;mRNA表达采用RT-PCR方法检测,蛋白表达采用免疫组化方法。结果:黄芪葛根汤可显著降低糖尿病大鼠空腹血糖、胰岛素,改善胰岛素抵抗,减少心肌羟脯氨酸含量抑制胶原增生,降低心脏指数,并显著抑制心肌TGF-β1/Smad3 mRNA和蛋白的强表达。结论:黄芪葛根汤可以通过调控TGF-β1/Smad3通路显著干预实验性糖尿病心肌纤维化病变。     

中药干预TGF-β1/Smad通路抗肾间质纤维化的研究概况

肾间质纤维化是慢性肾脏疾病的典型特征,肾间质纤维化最突出的特点是肾间质细胞外基质过度沉积。转化生长因子β1(transforminggrowthfactor-β1TGF-β1)是肾纤维化发展的重要介体,Smad蛋白是TGF-β1信号的关键下游介质。目前中药治疗肾间质纤维化的研究中,大量的注意力集中在TGF-β1/Smad通路。本研究就中药干预TGF-β1/Smad通路抗肾间质纤维化的研究概况作一综述。     

扩心方治疗扩张型心肌病的临床疗效观察

目的观察扩心方治疗扩张型心肌病的临床疗效。方法将88例扩张型心肌病患者随机分为治疗组(43例)和对照组(45例)。两组均采用常规西药治疗,治疗组加用中药扩心方口服。两组疗程均为6个月,观察临床疗效,比较心功能分级、心脏超声相关指标及血清脑钠肽水平的变化情况。结果 (1)治疗组、对照组临床总有效率分别为90.70%、73.33%;组间临床疗效比较,治疗组明显优于对照组(P0.05)。(2)组间治疗后NYHA心功能分级比较,治疗组明显优于对照组(P0.05)。(3)组间治疗后比较,治疗组心输出量(CO)、心脏指数(CI)、左心室射血分数(LVEF)水平明显高于对照组(P0.05),而左心室舒张末期内径(LVEDd)、血清脑钠肽(BNP)水平明显低于对照组(P0.05)。结论扩心方治疗扩张型心肌病,可明显改善心功能及临床症状,提高患者生活质量。     

基于TGF-β1/Smad3通路和AGEs/RAGE分子研究丹蛭降糖胶囊干预糖尿病大鼠心肌纤维化的作用

目的 从转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad3信号通路和晚期糖基化终末产物(AGEs)/AGEs受体(RAGE)分子水平研究丹蛭降糖胶囊干预糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及其机制.方法 采用高糖高脂饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)方法 建立2型糖尿病大鼠模型,饲养6周后将造模成功30只大鼠随机分为二甲双胍...     

芪蚣抗纤方中活血化瘀药对肝纤维化大鼠转化生长因子-β1及Smad2/3的影响

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)活血组对免疫损伤性肝纤维化大鼠转化生长因子(TGF-β1)及Smad2/3的影响.方法:猪血清腹腔注射法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,分为正常对照组,模型组、活血低剂量组、活血高剂量组,用双抗夹心法(ELISA法)测定血清TGF-β1含量;免疫组化法检测肝组织TGF-β1,Smad2,Smad3的表达.结果:①血清学指标:模型组血清TGF-1含量较其他组明显升高(P＜0.01).与模型组比较,活血组血清TGF-β1含量显著下降(P＜0.01),并具量效关系.②免疫组化检测:模型组肝组织TGF-β1,Smad2,Smad3表达明显,活血组肝组织中TGF-β1,Smad2,Smad3表达明显低于模型组(P＜0.01).结论:芪蚣抗纤方活血组通过降低TGF-β1,减少Smad2/3的激活,从而抑制肝纤维结缔组织增生,减轻肝损伤及肝纤维化程度.具有抑制肝纤维化的作用.     

丹参多酚酸盐通过TGF-β1/Smad通路预防大鼠心肌纤维化的发展

目的:探讨丹参多酚酸盐对异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化的保护作用及其可能的机制。方法:48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、丹参多酚酸盐1 mg/kg组、丹参多酚酸盐10 mg/kg组、丹参多酚酸盐20 mg/kg组、普萘洛尔组。心肌纤维化模型采用大鼠腹腔注射异丙肾上腺素10 mg/kg,连续30天。丹参多酚酸盐和普萘洛尔于造模前一天灌胃给药,连续给药30天。观察药物对大鼠心重指数,心肌病理学变化,胶原容积分数,心肌组织中羟脯氨酸(Hyp)含量,以及转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2/3和Smad7表达的影响。结果:与正常对照组比较,异丙肾上腺素组心脏指数增加43.4%,心肌组织Hyp含量增高63.6%,心肌组织胶原纤维增生明显,胶原容积明显升高,TGF-β1和Smad2/3蛋白表达显著升高,Smad7表达降低。20 mg/kg丹参多酚酸盐可不同程度的降低心重指数,Hyp含量,减轻心肌组织胶原增生情况,降低心肌胶原容积分数,同时降低异丙肾上腺素诱导的TGF-β1和Smad2/3蛋白表达增高,Smad7表达降低。结论:丹参多酚酸盐可能通过TGF-β1/Smad信号通路减轻异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化。     

黄芪后处理对大鼠肝纤维化中的影响及TGF-β1/Smad2、p38MAPK 作用

目的：研究黄芪对CCl4 诱导的大鼠肝纤维化肝组织中TGF-β1、Smad2 和p38MAPK 表达的影响,探讨TGF-茁信号通路在黄芪后处理中可能的抗纤维化机制。方法：60 只Wistar 大鼠被随机分成对照组、模型组、黄芪后处理组及鳖甲软肝片组,其中黄芪后处理组又分为小剂量组、常规剂量组和大剂量组,大鼠背部皮下注射CCl4 构建肝纤维化模型,分别用HE 和VG 染色法染色,肝纤维化程度直接在光学显微镜下观测。同时采用SABC 免疫组化方法检测各实验组TGF-β1、Smad2 和p38MAPK 的表达情况。结果：与对照组比较,模型组TGF-β1、Smad2 表达明显增强（P < 0.05）,而p38MAPK 表达显著下降（P <0.05）。与模型组比较,黄芪后处理各组中大鼠肝组织中TGF-β1 表达均有减弱（P < 0.05）,且随着黄芪剂量的增加而减少;随着黄芪剂量增加逐步下调Smad2 的表达（P < 0.05）、上调p38MAPK 的表达（P <0.05）。此外,黄芪组大鼠肝脏病理变化显著改善。结论：黄芪后处理明显影响大鼠肝组织TGF-β1 信号表达,且对CCl4 诱导的大鼠肝纤维化的作用呈剂量依赖性增强,其可能的机制为负性调节TGF-β1,减少Smad2 及增强p38MAPK 的表达。     

胰泰复方对慢性胰腺炎胰腺纤维化大鼠TGF-β1及Smad2/3表达的影响

目的：观察中药胰泰复方对慢性胰腺炎胰腺纤维化大鼠TGF-β1及Smad2/3表达的影响。方法：13.3%的L-精氨酸左下腹腔注射制备大鼠慢性胰腺炎模型,予相关药物灌胃治疗,2个月后处死各组动物后取材;免疫组织化学法检测各组大鼠胰腺组织TGF-β1及Smad2/3的表达。结果：模型组TGF-β1及Smad2/3的表达明显高于空白组、中药对照组及中药治疗组;中药治疗组的表达低于中药对照组。结论：胰泰复方能降低纤维化胰腺组织中TGF-β1及Smad2/3的表达,有效阻止和逆转慢性胰腺炎纤维化的进程。     

复方丹参片通过调控TGF-β1/Smad 通路及基质金属蛋白酶水平对肾纤维化大鼠的作用机制研究

目的基于TGF-β1/Smad 通路和基质金属蛋白酶水平探讨复方丹参片对肾纤维化大鼠的保护作用及相 关机制。方法采用灌胃腺嘌呤（250 mg·kg-1）的方式制备肾纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型 组、氯沙坦组（0.09 g·kg-1）及复方丹参低（0.3 g·kg-1）、高（0.6 g·kg-1）剂量组。各组大鼠给予相应剂量灌胃给 药,每日1 次,连续干预4 周。检测大鼠血清Cr、BUN 水平;采用HE 及Masson 染色法观察肾脏组织病理形 态及纤维化程度;采用免疫组织化学法检测肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7 蛋白表达水平;采用 Western Blot 法检测肾脏组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1 蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大 鼠血清Cr、BUN 水平明显升高（P＜0.05）;肾脏出现明显纤维化病变;肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、 TIMP-1 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）,Smad7、MMP-2、MMP-9 蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。与模 型组比较,低、高剂量复方丹参片均能明显降低大鼠血清Cr、BUN 水平（P＜0.05）;明显改善肾脏纤维化病 变;降低肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、TIMP-1 蛋白表达水平（P＜0.05）,升高Smad7、MMP-2、 MMP-9 蛋白表达水平（P＜0.05）。结论复方丹参片可能通过抑制TGF-β1/Smad 通路及提高基质金属蛋白酶 水平来实现对肾纤维化大鼠的保护作用。