三聚氰胺单克隆抗体的制备及鉴定

制备了抗三聚氰胺(melamine)单克隆抗体,鉴定了其免疫学特性并建立三聚氰胺标准抑制曲线。以人工合成抗原Melamine-BSA免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术建立分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的细胞株,以体内诱生腹水法生产三聚氰胺单抗,用硫酸钠盐析法提纯,以直接竞争ELISA法建立三聚氰胺标准抑制曲线。获得了1株能稳定分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株H2C6。用间接ELISA方法测定腹水单抗效价为2×10-7。经金标免疫层析实验鉴定单抗与三聚氰胺特异性结合,H2C6杂交瘤细胞株单抗对三聚氰胺的半数抑制浓度(IC50)为4.15μg/mL。除与三聚氰酸交叉反应性为72%外,与三嗪及各类抗生素等交叉反应性都小于5%。体外多次传代培养和反复冻存复苏后抗体分泌稳定。     

人参皂苷Rb1单克隆抗体的制备与鉴定

用人参皂苷Rb1分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)反应合成了交联抗原GRb1-BSA(GRb1与BSA的结合比为10∶1)和GRb1-OVA(GRb1与OVA的结合比为8∶1)。以GRb1-BSA为免疫原,分5次免疫3只BALB/C小鼠,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,Hat筛选,有限稀释法克隆。建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。采用ELISA(酶联免疫吸附测定)间接法和竞争法检测抗体的特异性。结果获得了一只小鼠分泌抗体效价达1∶16000,并获得两株分泌GRb1的单克隆抗体的细胞系,分别命名为1F7和1G3,单抗检测显示在0.01~1μg/mL呈线性关系,GRb1的检测范围达50~350 ng/mL,两株单抗针对相同的抗原决定簇,制备的单克隆抗体可用于GRb1含量的检测和分离。     

抗禽流感病毒单克隆抗体的研制

以H5亚型禽流感病毒采用长程免疫法免疫的BALB/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合,融合率为65.8%.建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体.初检阳性率为14.2%,经2次亚克隆反复筛选获得了2株能稳定分泌抗禽流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为5A6,5G7.ELISA证实所获得的单抗是特异性针对H5和H9亚型禽流感病毒的共同表位,5A6,5G7经反复冻存、复苏及多次传代,仍能分泌高效价抗体,乳胶凝集试验证实所分泌抗体均属IgG1,κ型.     

人胰岛素和胰岛素原单克隆抗体制备及分析

应用杂交瘤技术获得针对胰岛素和胰岛素原的各4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞.其中4株分泌胰岛素单克隆抗体的细胞(NI1、NI7、NI13、NI15)所分泌的抗体亚型均为IgG1;分泌胰岛素原单克隆抗体的细胞株所分泌的抗体亚型分别为IgA(NPI1)、IgG1(NPI3、NPI5)和IgG2a(NPI9);所有抗体的轻链均为κ型.所制备的胰岛素原单克隆抗体均不与胰岛素和C肽交叉反应,但所有胰岛素单克隆抗体均与胰岛素原交叉反应.     

模拟抗原（Ac-NK16-Ahx-3）免疫反应抗体ELISA检测方法研究

为满足实验室单克隆抗体的制备研究,本实验特对实验室常用的制备单抗的模拟抗原（Ac-NK16-Ahx-3）进行ELISA间接法检测,进而建立一种高效的检测方法。通过对不同稀释度待测抗体的免疫吸附测定,检测出它的最终灵敏度为0.078mg/mL,最佳二抗稀释倍数为300倍,其最佳拟合曲线为y=-0.0732x＋0.6875,R2=0.8619。并且,通过统计学方法进行统计分析,确定出各实验组的相关性及变异系数,从而排除实验中的操作误差,最终可确定最佳的实验条件,并保证实验的准确性。     

睾丸酮诱导下的不同菌种中3α-HSD的表达及含量检测

3-羟类固醇脱氢酶(3α-hydroxysteroid dehydrogenase,3α-HSD)是睾酮丛毛单胞菌分泌的一种类固醇脱氢酶。本实验利用已构建的pET-3α-HSD转化BL21,得到BL21pET-3α-HSD,经IPTG诱导表达提纯3α-HSD蛋白,建立了3α-HSD蛋白标准曲线。应用ELISA方法检测在睾丸酮的诱导下,三种工程菌C.testosterone,Ca3,BL21PET-3 hsd对3α-HSD的表达量,经过对比研究发现,在三种工程菌中,C.testosterone更宜适合作为检测环境中载体类化合物的指示菌种,并且得出3α-HSD是C.testosterone和Ca3在降解载体化合物的关键酶,在检测中可作为目标蛋白。     

四环素与金霉素完全抗原的制备研究

采用戊二醛交联法和混合酸酐法制备了四环素-BSA与金霉素-BSA完全抗原，分别将两种不同偶联法制备的四种完全抗原按照常规免疫程序免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。酶联免疫吸附法测定出抗四环素与金霉素特异性抗体的效价最高达1：320000，这为进一步制备抗四环素与金霉素抗体提供了良好的免疫原，同时为食品中四环素类残留的免疫学检测方法的建立奠定了基础。     

牛布鲁氏杆菌杂交瘤细胞株的筛选及其单克隆抗体鉴定

采用牛型A544布鲁氏杆菌膜蛋白为抗原,筛选出BBH—C_9杂交瘤细胞株。所分泌免疫球蛋白亚类为IgG_1,染色体数为105.1±3.3,培养液抗体滴度为1:100,小白鼠腹水抗体滴度为1:12800;单克隆抗体亲积力为4.5×10~8L/M,分子量重链5.6×10~4道尔顿,轻链为2.4×10~4道尔顿。用免疫亲和层析法和辛酸——硫酸铵法纯化抗体导致其蛋白质含量和抗体活性分别为15％、30.03％和55％、75％。     

四环素与金霉素完全抗原的制备研究

采用戊二醛交联法和混合酸酐法制备了四环素-BSA与金霉素-BSA完全抗原,分别将两种不同偶联法制备的四种完全抗原按照常规免疫程序免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,酶联免疫吸附法测定出抗四环素与金霉素特异性抗体的效价最高达1320000,这为进一步制备抗四环素与金霉素抗体提供了良好的免疫原,同时为食品中四环素类残留的免疫学检测方法的建立奠定了基础.     

抗膀胱肿瘤抗原单克隆抗体纯化方法的比较

利用单克隆抗体制备,细胞融合及选择培养基筛选等技术制备抗膀胱肿瘤抗原单克隆抗体（BTA）。通过G蛋白亲和层析法（G柱法）和Q-琼脂糖亲和介质离子交换层析法（蓝胶加Q柱层析法）分别提取抗体,以SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外分光光度计、酶联免疫吸附试验双抗体夹心法对两种不同方法提取的抗BTA抗体进行分析,发现G柱法得到的抗体含量明显高于蓝胶加Q柱法（P<0.05）,抗体质量浓度达到60 ng/mL,G柱法提取的抗体与BTA的亲和力大于其他方法,且蓝胶加Q柱层析法生产样品活性为市售基准的97.11%（质量分数）,G柱生产样品活性为101.55%（质量分数）,这两种方法在抗BTA单克隆抗体纯化方面均可满足要求,可根据实际工艺状况及质控要求进行选择。     

Banach代数中的行列式理论

探讨了 Banach 代数中的行列式理论.给出了具有单位元的迹 Banach 代数具有行列式的充要条件.     

非织造布滤料性能及过滤过程的研究进展

对近年来非织造布滤料的研究进展做了简要综述,介绍了内部结构的研究及表征、过滤性能及其影响因素、过滤过程的计算机模拟,指出进一步发展所需要解决的问题。     

单面约束系统的微分变分原理与运动方程

研究单面约束力学系统的微分变分原理和运动方程。方法利用Ｄ＇Ａｌｅｍｂｅｒｔ原理建立Ｄ＇Ａｌｅｍｂｅｒｔ－Ｌａｇｒａｎｇｅ原理．Ｊｏｕｒｄａｉｎ原理和Ｇａｕｓｓ原理,结果与结论得到系统的微分变分原理和带乘子的Ｅｕｌｅｒ－Ｌａｇｒａｎｇｅ形式,Ｎｉｅｌｓｅｎ形式和Ａｐｐｅｌｌ形式的运动方程。     

q-树的重构性

q 是一个正整数,所谓 q-树的图是递归定义的:最小的 q-树是完全图 K_q,一个 n+1阶的 q-树是通过在 n 阶 q-树上加上一个新点并连接这点与 n 阶 q-树中任意 q 个互相邻接的点而获得,其中 n≥q.1-树我们通常称为树.在本文中,证明了对任意正整数 q,q-树是可重构的.     

β-环糊精-毛细管区带电泳分离扑尔敏对映体

采用毛细管区带电泳模式,以β-环糊精为手性选择剂分离了药物扑尔敏的光学对映体.考察了在不同背景电解质 pH 值尤其是较低 pH 值下环糊精浓度对对映体表观淌度差的影响,并研究了有机改性剂尿素在分离中的作用.     

层状球形夹杂复合材料的弹性模量

利用层状球形夹杂在无限大基体中的局部化关系及平均应力场理论,给出了一种方法来分析含 n 种层状球形夹杂所构成复合材料的弹性模量.对于文献给出的空心玻璃球和高分子基构成的复合材料,该理论的预测与实验吻合很好.当表层稍失时,该理论退化为传统的 Mori-Tanaka平均应力场理论.     

Sun Creator在研究生管理信息系统中的应用

本文研究Java环境下的可视化Web开发。以高校研究生管理信息系统为例,探索Sun Java Creator的数据源配置、可视化Web组件、行集、Session Bean等在Java Web中的应用。     

统计应用系统中指标公式的处理

介绍了指标公式定义的数据结构及存储结构 ,描述了对指标公式进行计算的原理及工作流程 ,给出了在PHP下实现了的程序代码。     

从松节油出发，制备紫苏糖的研究

以松节油中的α-蒎烯为原料,SeO2为氧化剂,无水乙醇为溶剂,在回流温度下反应5h生成桃金娘烯醛,产率为61％,在430℃60kPa下通过黄铜丝床层0．3－0．5s异构化反应生成紫苏醛,采用亚硫酸氢钠法,提纯紫苏醛后用盐酸羟胺进行肟化反应生成紫苏糖,总得率大约20％。     

计算光度法同时测定铅铋铁锰

在弱碱性介质中,Ｐｂ＾２＋,Ｂｉ＾３＋,Ｆ３＾２＋,Ｍｎ＾２＋与ＰＡＲ显色剂形成水溶性有配合物,其吸收光谱严重重叠。本采用均匀设计与ＰＬＳ方法结合,对这４种且分的混合体系进行分析,实现了不经分离而直接同时测定Ｐｂ＾２＋,Ｂｉ＾３＋,Ｆｅ＾３＿,Ｍｎ＾３＋的含量,相对标准偏差小于０．０２。