抗3α-HSD单克隆抗体制备方法的初步研究

为了利用杂交瘤技术制备抗3α-HSD单克隆抗体，用表达纯化的3α-HSD作为抗原免疫Balb/c小鼠，获得针对该抗原致敏的B淋巴细胞，并用获得的B淋巴细胞与SP2/0进行细胞融合，得到杂交瘤细胞株，在ELISA间接法筛选出阳性孔的基础上，进行亚克隆，筛选出能稳定分泌抗3α-HSD单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果得到能分泌抗3α-HSD单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备过程中发现很多特殊的现象，如杂交瘤细胞上清与单抗腹水效价过低，但多抗血清效价较高等。文章对在单抗的制备过程中遇到的问题做了初步分析，为之后制备抗3α-HSD单克隆抗体的研究提供技术支持。     

α-Al2O3纳米镀镍层中纳米粉含量测定方法的研究

Al2O3经高温1200℃转化为α-Al2O3，其粒径在1—100nm的α-Al2O3在金属镀层显示良好的抗蚀性和耐磨性，比常规镀层各方面性能均有大幅改善，因而测定镀层中的纳米材料多少是十分重要。本法对镀层通过物理方法剥离，用1 1盐酸溶解基体Fe及表层Cr,110℃烘干称重，硝酸溶样，用容量法测定镀层中Ni、Co，其差值为纳米α-Al2O3的含量。     

模板诱导/水热法制备α-氧化铝晶须及其表征

以硫酸铝为前驱体,采用模板诱导/水热法成功地制备了薄水铝石晶须,在1 200 ℃的温度下煅烧制得了α-Al2O3晶须;通过TG/DTA、SEM和XRD对所制备的产物进行了表征,讨论了薄水铝石晶须的生长机理,由AFM表征证明薄水铝石晶须的生长过程是螺旋位错生长.     

高纯α-AlH3的合成及表征

为制备高纯α-AlH3,将LiAlH4与AlCl3在乙醚溶液中反应,制备并分离出固体AlH3乙醚络合物,其在甲苯中90℃下脱醚2h可制得纯度为99.5％的α-AlH3,产率96.4％.对高纯α-AlH3进行了XRD、红外、元素分析、TG/DSC、SEM表征,同时考察了α-AlH3的结晶条件和稳定性.结果表明产品结晶性好、纯度高、性质稳定,合成方法具有操作简便、收率高、重现性好等优点.     

L-天冬氨酸α-脱羧酶异源表达和转化条件的优化

为提高L-天冬氨酸α-脱羧酶粗酶液催化L-天冬氨酸生产β-丙氨酸的效率,研究了诱导剂添加时间、诱导剂浓度、诱导温度和培养时间对重组菌株产酶的影响,并优化了粗酶液的反应温度、pH和底物浓度等转化条件.得到最优诱导条件:在OD600达到0.6左右时加入诱导剂IPTG 0.5 mmol/L、25℃下诱导表达18h时,酶活力达...     

新型离子液体中纳米α-Fe_2O_3的合成及研究

利用新型离子液体——共晶混合物一步合成了球状纳米α-Fe2O3,采用XRD、SEM及红外对其结构及形貌进行了表征,结果表明,合成的α-Fe2O3大小为130—150 nm,分布均匀。提出了纳米α-FeO可能的形成机理。     

新型离子液体中纳米α-Fe2O3的合成及研究

利用新型离子液体——共晶混合物一步合成了球状纳米α-Fe2O3,采用XRD、SEM及红外对其结构及形貌进行了表征,结果表明,合成的α-Fe2O3大小为130—150 nm,分布均匀。提出了纳米α-FeO可能的形成机理。     

半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中过量表达及IPTG诱导条件

从嗜热脂肪芽孢杆菌(IAM11001)中克隆出编码热稳定的半乳糖苷酶蛋白基因bgaB,构建具T7强启动子的PET-20-(b)-BgaB质粒，并在大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达，经IPTG诱导的后，重组菌周质中乳糖酶酶活达到0.12U/mL，胞内酶活为1.35U/mL，比酶活为6.66U/mg蛋白，比酶源菌产生的酶活提高5倍，通过对IPTG诱导时机，诱导浓度和诱导时间的优化研究，重组细菌产生的比酶活进一步提高至酶源菌的90倍。     

人胸腺素α1基因工程菌的构建与表达

胸腺素α1(Thymosin alpha 1,Tα1)是一种针对T淋巴细胞的免疫增强剂,临床用途广泛.为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成编码Tα1的基因,克隆于pUCmT,转化E.coli JF1125,经测序证明序列正确后,克隆入pET39(b)的BspT I和BamH I位点,成功地构建出包含信号肽,DsbA,连接肽,6个His,EKsite(Asp-Asp-Asp-Asp-Lys),胸腺素α1的表达载体,转化E.coliBL21(DE3),获得胸腺素α1基因工程菌.SDS-PAGE分析表明,经0.1 mmol/L IPTG和30℃诱导8 h,在大肠杆菌周质中大量表达表观分子量31 kD左右的融合蛋白.为进一步获得大量可供实验研究和临床应用的重组胸腺素α1创造条件.     

交通诱导系统中道路网络的表达与存储方法

考虑实际道路网络的特殊性以及最短路径算法对路网信息的要求,运用对偶图法的基本思想对前向关联边结构进行了改进,提出了一种能够提高路径优化算法实时性的路网表达方法与数据存储结构,并用Dijkstra和A*最短路径算法进行了验证。结果表明,这种方法在清楚表达转向限制、消除结点权重的同时,由于两个指针数组的引入,使得算法可以迅速而准确地定位相关结点的位置,从而减小了搜索空间,降低了最短路径算法的时间复杂度,提高了最短路径的搜索效率。     

α-Fe2O3的掺杂改性和降解性能

利用水热法制备α-Fe₂O₃,再以α-Fe₂O₃为活性组分,利用浸渍法制备Ag/α-Fe₂O₃、Al/α-Fe₂O₃、Zn/α-Fe₂O₃、Cu/α-Fe₂O₃催化剂,比较4种催化剂的催化活性,通过XRD、SEM、FT-IR等表征手段对Al/α-Fe₂O₃催化剂的结构和形貌进行分析,与纯的α-Fe₂O₃催化剂相比,负载铝的α-Fe₂O₃催化剂的催化活性更好,稳定性也更高。考察了Al掺杂量、煅烧温度、煅烧时间等制备条件对催化剂催化活性的影响,确定了最佳制备条件。结果表明:当Al掺杂量为40%,煅烧温度为700℃,煅烧时间为2 h,催化剂的催化活性最高,且Al/α-Fe₂O₃降解酸性大红符合伪一级动力学方程,催化剂在连续使用7次后,仍然保持较高的催化效果。     

中温α-淀粉酶基因的克隆及在枯草芽孢杆菌中的高效表达

利用高效表达载体pWB980,实现了Bacillus subtilis BF7658中温α-淀粉酶基因amy在B．subtilis DB403中的高效表达,活力达到770U／mL．经多步纯化,重组酶AMY的比活达到35．8U／mg,纯化倍数为1．7,获得凝胶电泳条带单一的蛋白样品,经SDS—PAGE检测,重组酶AMY相对分子质量为4．8×10^4．对酶学性质进行分析,重组酶AMY的最适反应温度为60℃,最适反应pH为6．0．     

人参皂苷-α-鼠李糖苷酶基因的亚克隆及表达

将人参皂苷-α-鼠李糖苷酶基因亚克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K,再将构建后的表达载体电转化到毕赤酵母GS115中,并诱导表达该基因。结果显示,重组酵母菌在甲醇体积分数为0.5%,72 h培养后,所提取的酶蛋白经酶活性检测,发现具有人参皂苷-α-鼠李糖苷酶的活性,经SDS-PAGE分析,确定其分子质量为52 ku,与理论值基本相符,表明该基因得到了表达。     

α-Fe2O3/Fe3O4纳米复合材料的相变化及室温磁性质

为研究纳米α—Fe2O3和Fe3O4在受热过程中的物相变化过程和磁学性质,采用燃烧合成方法制备了含α—Fe2O3和Fe3O4不同尺寸的纳米复合材料．用XRD、TEM、穆斯堡尔谱和振动样品磁强计,表征纳米复合材料相变化过程中的性质．结果表明,低于450℃煅烧的复合材料样品中含有一定量的超顺磁相,该相影响着此温度以下煅烧得到的纳米复合材料的磁性质,晶粒尺寸在该温度附近也具有临界现象;复合材料中存在的超顺磁相是超细颗粒尺寸α—Fe2O3和Fe3O4的贡献;当复合材料中的超顺磁相消失后,随煅烧温度提高在复合材料中α-Fe2O3的质量分数不断增加,而Fe3O4的质量分数不断降低直至消失．     

α-亚麻酸在部分食物中含量及性价比分析

必需脂肪酸中的α-亚麻酸(简写为ALA)对人体的健康起着不可或缺的作用,由于ALA在食物中含量相对较少并存在分布不均的情况,所以经常导致人们摄入不足。本文对《中国食物成分表》中的数据进行分析,筛选出ALA含量较高的食物,并通过其性价比研究,为人们日常饮食的选择提供参考。     

HCV e2-3pcx融合基因原核表达载体的构建及蛋白的初步表达

构建了丙型肝炎病毒e2-3pcx融合基因的原核表达载体pET28b(+)-e2-3pcx,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中。IPTG诱导融合蛋白高效表达。经SDS-PAGE电泳分析,结果表明在43 ku处有一条蛋白质特异条带,与预期的目的产物蛋白带大小一致。     

人参皂苷-α-鼠李糖苷酶基因的亚克隆及表达

将人参皂苷-α-鼠李糖苷酶基因亚克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K,再将构建后的表达载体电转化到毕赤酵母GS115中,并诱导表达该基因。结果显示,重组酵母菌在甲醇体积分数为0.5%,72 h培养后,所提取的酶蛋白经酶活性检测,发现具有人参皂苷-α-鼠李糖苷酶的活性,经SDS-PAGE分析,确定其分子质量为52 ku,与理论值基本相符,表明该基因得到了表达。     

雷公藤红素对人肝癌细胞Hep3B中HIF-1α表达的影响

为探讨雷公藤红素对人体肝癌细胞Hep3B中缺氧诱导因子（HIF-1a）活化的影响,利用氯化钴（CoCl2）模拟肝癌细胞缺氧模式,采用双荧光素酶报告基因法检测雷公藤红素对HIF-1α的转录活性,蛋白免疫印迹实验检测雷公藤红素对HIF-1α蛋白质的表达水平,RT-PCR检测雷公藤红素对HIF-1α下游靶基因血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达水平,电泳泳动度移动分析（EMSA）检测雷公藤红素对HIF-1αDNA的结合能力.结果显示：雷公藤红素呈剂量依赖性抑制了HIF-1α蛋白质的表达水平,降低了肝癌细胞中VEGFmRNA的表达水平并有效抑制了HIF-1α蛋白的DNA结合能力.这表明,雷公藤红素可以抑制肝癌细胞中HIF-1α的活性,这可能是其抗肿瘤的机理之一.