接骨丸对SD大鼠肝肾毒性的实验研究

目的:观察接骨丸对SD大鼠肝脏和肾脏的毒性,完善接骨丸质量标准,确保该制剂使用安全。方法:选择40只健康SD大鼠,雌雄各半,按照数字随机表法分为空白对照组、接骨丸低剂量组、接骨丸高剂量组及接骨丸生马钱子组,每组10只。实验开始前取每只大鼠的血液测定肝肾功能相关的生化指标,包括丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(T-BIL)、血糖(GLU)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及三酰甘油(TG)。对每组SD大鼠按照实验设定的给药剂量连续12周灌胃,每日1次,每周测定大鼠体质量,并根据体质量实时调整给药量。给药期间每日观察两次大鼠的活动及行为,记录变化情况。12周灌胃结束后,取每只大鼠的血样测量实验前测量的生化指标并比较。停药2周后再次进行上述指标检测并比较,处死小鼠取小鼠肝脏、肾脏测量肝、肾脏器系数,取肝组织和肾组织制片观察大鼠的病理改变。结果:40只小鼠在实验期间的活动及行为表现均无明显异常;实验前4组小鼠的血生化指标无明显差异;灌胃12周后、停药2周后,空白组、低剂量组小鼠的血生化指标和实验前比较无明显变化,灌胃12周后,高剂量组和生马钱子组小鼠的ALT、AST、ALP、TBIL、GLU、BUN、Cr及TG均较实验前有明显上升,前后比较差异具有统计学意义(P<0.05),生马钱子组小鼠上述指标的上升幅度明显高于高剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05)。停药2周后,高剂量组和生马钱子组小鼠的上述生化指标均得到明显下降,但与实验前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。停药2周后空白组、低剂量组小鼠的肝、肾脏器系数处于正常范围,而高剂量组和生马钱子组小鼠的肝肾脏器系数明显超出正常范围,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:按照质量标准生产的接骨丸在正常剂量范围内使用,安全可靠,但若超出常规剂量使用,具有一定的肝肾毒性,同时,若不按照规定工艺对马钱子进行炮制直接添加在接骨丸中,同时超量使用,其肝肾毒性更强,应引起生产单位、使用单位的高度重视。     

邻苯二甲酸二乙基己酯对小鼠初级精母细胞氧化应激及凋亡的影响

目的研究邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对小鼠初级精母细胞(GC-2 spd)氧化应激及凋亡的影响。方法体外传代培养永生化的GC-2 spd细胞,用二甲基亚砜(DMSO)溶解DEHP,以DMSO浓度为0.1%的细胞孔作为对照组,用DEHP终浓度为50、100和200μmol/L的细胞孔作为低、中、高剂量组染毒24 h。分光光度计法测定GC-2 spd细胞丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,流式细胞仪检测不同剂量组细胞凋亡情况。结果与对照组比较,DEHP低、中、高剂量染毒组MDA含量依次升高,差异无明显统计学意义(P>0.05);SOD活力在DEHP高剂量染毒组下降,差异有统计学意义(P<0.05);DEHP低、中剂量染毒组GSH-Px活力明显下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。DEHP中、高剂量染毒组细胞凋亡明显高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DEHP可通过诱发小鼠生精细胞氧化应激而诱导细胞凋亡。     

麦芽酚铝染毒致雄性大鼠神经元铁死亡及其机制研究

目的探讨亚慢性麦芽酚铝[aluminum-maltolate, Al(mal)_3]染毒致大鼠神经元铁死亡作用及其可能机制。方法选取18只健康雄性SPF级SD大鼠按体重随机分成3组:对照(生理盐水)组,9和18μmol/kg Al(mal)_3染毒组,每组6只。对大鼠进行Al(mal)_3腹腔注射染毒,1次/d,连续染毒90 d。通过Morris水迷宫实验和旷场实验测试大鼠学习记忆能力和自主活动能力;采用透射电子显微镜观察大鼠神经元线粒体超微结构变化;分别采用谷胱甘肽(glutathione, GSH)测试盒和组织铁(ferrum, Fe)测试盒测定大鼠脑组织GSH含量和Fe含量。结果水迷宫实验中,与对照组相比,各染毒组大鼠找到原平台位置时间逐渐延长,差异具有统计学意义(P<0.05)。旷场实验中,与对照组相比,各染毒组大鼠中央格停留时间明显延长,竖起次数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。电镜观察发现:染毒组大鼠神经元出现线粒体皱缩、线粒体膜密度增加及线粒体嵴消失等铁死亡特异性改变。与对照组相比,随染毒剂量增加,大鼠脑组织GSH含量逐渐降低,Fe含量逐渐升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论亚慢性Al(mal)_3染毒可导致大鼠神经元铁死亡,脑组织GSH含量减少和Fe含量增加可能是铝致神经元铁死亡的机制之一。     

刺五加叶纯化物对2型糖尿病大鼠降血糖、降血脂作用的实验研究

目的:探索刺五加叶纯化物对2型糖尿病大鼠血糖、血脂的作用及其治病机理。方法:通过高脂饮食联合STZ诱导的方法建立2型糖尿病大鼠动物模型,给予模型大鼠不同药物及剂量,观察刺五加叶纯化物对模型大鼠血糖、血脂及抗氧化机制的影响。结果:刺五加乙醇提取物组,刺五加叶纯化物高、中剂量组及阳性药物组FBG均低于模型对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。刺五加乙醇提取物组,刺五加叶纯化物高、中剂量组及阳性药物组TG及CHO含量均低于模型对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.01)。模型对照组各时间点FBG均高于正常对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.01);刺五加叶乙醇提取物组,刺五加叶纯化物高、中、低剂量组及阳性药物组各时间点FBG均低于模型对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.01)。模型对照组SOD含量明显低于正常对照组,比较差异有统计学意义(P<0.01);刺五加乙醇提取物组,刺五加叶纯化物高、中、低剂量组及阳性药物组SOD含量均高于模型对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。模型对照组MDA含量明显高于正常对照组,比较差异有统计学意义(P<0.01);刺五加乙醇提取物组,刺五加叶纯化物高、中、低剂量组及阳性药物组MDA含量均低于模型对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:刺五加叶纯化物及乙醇提取物具有降低模型大鼠的空腹血糖,降血脂功能,可明显增强自由基清除能力和降低ROS的产生,起到抗氧化应激、防止氧化损伤的效果,最终达到抗糖尿病、改善胰岛素抵抗的作用。刺五加叶纯化物比乙醇提取物和参芪降糖胶囊具有更加优越的治疗2型糖尿病的作用,并呈现剂量正相关。有望开发成为新一代的降血糖药物。     

女贞子提取物对糖尿病肾病大鼠糖脂代谢及氧化应激的影响

目的:观察女贞子提取物对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠血糖、血脂及肾皮质氧化应激的影响,探讨女贞子提取物对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用机制。方法:将65只大鼠随机分为正常对照组,DN模型组,女贞子提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组,缬沙坦阳性对照组。模型组、女贞子提取物各组和缬沙坦组采用一次性腹腔注射法注射55 mg·kg~(-1)链脲佐菌素构建糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后分别灌胃生理盐水1 m L·(kg·d)~(-1)、女贞子提取物0.2g·(kg·d)~(-1)、0.4 g·(kg·d)~(-1)、0.8 g·(kg·d)~(-1)、缬沙坦10 mg·(kg·d)~(-1);正常组灌胃生理盐水1 m L·(kg·d)~(-1),各组均每日给药1次。实验第8周末处死大鼠,检测大鼠体质量、空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、血脂及肾皮质中丙二醛(malonaldehyde,MDA)水平和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。结果:与正常组比较,模型组大鼠FBG、血脂、肾皮质MDA水平和SOD活性均有显著性差异(P<0.01),显示造模成功。与模型组比较,女贞子提取物中剂量组、高剂量组大鼠血糖水平显著降低(P<0.01);女贞子提取物中剂量组、高剂量组大鼠三酰甘油(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(ow density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)水平与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,女贞子提取物中剂量、高剂量能显著降低DN大鼠肾皮质MDA水平(P<0.01),提高SOD活性(P<0.01);与缬沙坦组比较,女贞子提取物中剂量组、高剂量组大鼠FBG、TC、TG、LDL、HDL水平有显著性差异(P<0.05),但肾皮质MDA水平和SOD活性无显著性差异(P>0.05)。结论:女贞子提取物能够有效纠正DN大鼠糖、脂代谢紊乱,对DN有良好的防治作用,其机制可能与降低血糖、降低血脂及减轻肾皮质氧化应激水平有关。     

傣药猫须草对大鼠肾功能衰竭作用研究

目的:以注射甘油复制大鼠肾功能衰竭模型,研究猫须草对大鼠肾衰模型的影响。方法:将大鼠分为正常组、模型组、给药组共3个组。除正常组大鼠外,其他各组大鼠1次性后肢注射50%甘油10m L/kg,同时各给药组按20m L/kg灌胃给药,每天1次,连续灌胃5d,末次给药后处死全部大鼠,取血测血清生化,取肾脏称重,并计算肾脏系数。结果:与正常组相比较,模型组大鼠的血清尿素氮、肌酐、白蛋白、球蛋白、总蛋白均升高(P<0.01或P<0.05),提示造模成功;与模型组相比较,给药组尿素氮、肌酐、白蛋白、球蛋白、总蛋白有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。末次给药后杀检体重和肾脏脏器系数结果看与正常对照组相比较,模型组大鼠体重减轻,脏器系数增大,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组相比较,给药组体重、肾脏脏器系数差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:猫须草对大鼠肾功能衰竭模型有一定的阻碍作用。     

敦煌医方四时常服方对镉染毒大鼠肾氧化应激的影响

目的研究敦煌医方四时常服方对镉染毒大鼠肾氧化应激的影响。方法将60只Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,阳性对照组,四时常服方高、中、低剂量组6组,每组10只。空白组腹腔注射0.9%氯化钠注射液,其他5组均腹腔注射0.1%氯化镉溶液1.5 mg/kg,制备镉染毒大鼠模型,每周5次,共5周,染毒的同时分别给予相应药物进行干预,每天1次,连续灌胃5周后处死大鼠,取血和肾组织,检测血清谷草转氨酶(AST)活性及肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并测定肾脏指数。结果与空白组比较,模型组肾组织中SOD活性明显降低(P<0.01),肾脏指数、肾组织中MDA含量和血清AST活性明显升高(P<0.01);与模型组比较,四时常服方各剂量组肾组织中SOD活性明显升高(P<0.01),肾脏指数、肾组织中MDA含量和血清AST活性均明显降低(P<0.01),其中对SOD,MDA的作用以四时常服方高剂量组最为显著(P<0.05)。结论敦煌医方四时常服方对镉染毒大鼠肾氧化应激具有一定的拮抗作用,可缓解大鼠染镉中毒后肾脏的损伤。     

熊胆粉对运动性疲劳大鼠的抗疲劳作用研究

目的:分析熊胆粉用于运动性疲劳大鼠抗疲劳作用及其作用机理,旨在为开发缓解疲劳和提高运动能力的系列天然产品提供可靠的实验室依据。方法:将50只wistar大鼠根据随机数字表法分为五组,每组各10只,分别为空白对照组(未给药未运动)、疲劳模型组(未给药的运动大鼠)、高剂量给药组[2.8 g/(kg·d)熊胆粉]、中剂量给药组[1.4 g/(kg·d)熊胆粉]、低剂量给药组[0.7 g/(kg·d)熊胆粉]。空白对照组和疲劳模型组大鼠每日给予相应剂量的蒸馏水。末次灌胃给予熊胆粉溶液后,将各组大鼠分别置于段氏实验跑台,观察其初始时刻状态,记录并对比各组大鼠跑台运动时间;取血,检测并对比各组大鼠血清血乳酸(BLA)、尿素氮(BUN)表达及乳酸脱氢酶(LDH)活力;取血后将大鼠处死,取大鼠肝脏,精密称取100 mg,另取各实验组大鼠后肢大腿内侧肌肉组织100 mg,检测并对比其肝糖原(LG)、肌糖原(MG)含量。结果:五组运动大鼠中,高剂量给药组运动时间>中剂量给药组>低剂量给药组>疲劳模型组,组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。五组大鼠中,空白对照组血清BLA、BUN表达、LDH活力最低,后依次为高剂量给药组、中剂量给药组、低剂量给药组,疲劳模型组最高。血清BLA、BUN表达五组组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);中剂量给药组与高剂量给药组LDH活力比较,差异无统计学意义(P>0.05),其他组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。五组大鼠中,高剂量给药组大鼠LG、MG表达均最高,后依次为中剂量给药组、低剂量给药组,疲劳模型组表达均最低;各组MG含量组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);中剂量给药组与低剂量给药组LG含量比较差异无统计学意义(P>0.05);其他组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:熊胆粉能够提高运动性疲劳大鼠LDH活力,增加其LG与MG含量,使大鼠BLA含量降低,运动耐力大大增强,药物抗运动性疲劳效果理想。     

补阳还五汤对脑缺血大鼠血清TNF-ɑ、IL-6、CRP的影响研究

目的:探讨补阳还五汤对MCAO(大脑中动脉线栓法)大鼠血清TNF-ɑ、IL-6、CRP的影响。方法:60只大鼠随机分为四组:假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤高剂量组。Garcia JH评分标准评价受试大鼠的神经功能,化学发光法检测大鼠外周血清TNF-a、IL-6的水平,免疫比浊法检测大鼠血清CRP水平。结果:术后第7天,补阳还五汤低剂量组和高剂量组大鼠神经功能得到一定程度的恢复,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),同时低剂量组和高剂量组比较差异也有统计学意义(P<0.05)。补阳还五汤低剂量组、高剂量组的TNF-a与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);低剂量组的IL-6、CRP与模型组比较差异均无统计学意义(P>0.05);高剂量组的IL-6、CRP与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:补阳还五汤可下调MCAO大鼠TNF-a、IL-6、CRP水平,通过减轻炎症作用,达到神经保护的作用。     

血府逐瘀汤对大鼠局灶性脑缺血模型的保护作用

目的:探讨血府逐瘀汤对大鼠局灶性脑缺血模型的保护作用。方法:采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO)。将60只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、血府逐瘀汤低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组各10只。测定脑组织中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及一氧化氮合酶(NOS)活性,并进行行为学评分、血液流变学和病理组织学检查。结果:大鼠的行为学表现,造模后的各组大鼠均出现明显的行为学障碍,血府逐瘀汤治疗组大鼠行为学表现均有缓解的趋势;阳性对照组和血府逐瘀汤高剂量组的大鼠行为学障碍得到明显改善,且与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,模型对照组的全血黏度、血浆黏度及红细胞比容都显著升高(P<0.05)。与模型对照组比较,各给药组全血黏度、血浆黏度显著降低(P<0.05);阳性对照组和血府逐瘀汤高剂量组的红细胞比容显著降低(P<0.05)。与空白对照组比较,模型对照组大鼠脑组织中的MDA含量、NOS活性明显升高,SOD、GSH-Px、CAT活性明显降低(P<0.05);与模型对照组比较,血府逐瘀汤治疗组可降低缺血脑组织MDA含量和NOS活性,提高缺血脑组织中SOD、GSH-Px、CAT的活性(P<0.05)。结论:血府逐瘀汤能减缓MCAO模型的行为学障碍,明显提高缺血脑组织中SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA含量,并有降低缺血脑组织中NOS活性的趋势。血府逐瘀汤对局灶性脑缺血模型有一定的保护作用。