自身免疫性肝病相关自身抗体检测及应用进展

自身免疫性肝病(AILD)是一组病因不明、免疫介导的肝脏损伤,血清中常会出现特异性的自身抗体。主要包括自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)、原发性硬化性胆管炎(PSC)及以上两种或三种肝病的重叠综合征(OS)。本文就自身免疫性肝病相关自身抗体免疫学指标检测及应用进展进行简要介绍。     

自身免疫性肝病相关自身抗体谱的检测在原发性胆汁性肝硬化患者中的临床应用

目的 探讨自身免疫性肝病相关自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者中的阳性状况及临床意义.方法 采用间接免疫荧光法(IIF)检测61例PBC(PBC组)、50例自身免疫性肝炎(AIH组)和52例其他肝病(对照组)患者血清抗线粒体抗体(AMA),采用ELISA检测血清自身免疫性肝病相关自身抗体,包括AMA-M2,抗GP210抗体,抗SP100抗体,抗SLA抗体,抗LC1抗体和抗LKM-1抗体.结果 AMA,AMA-M2,抗GP210抗体、抗SP100抗体、抗LC1抗体、抗SLA抗体和抗LKM-1抗体在PBC组的阳性率分别为91.8％(56/61),86.9％(53/61),36.1％(22/61),24.6％(15/61),1.6％(1/61),0％(0/61)和1.6％(1/61);在AIH组的阳性率分别为18.0％(9/50),6.0％(3/50),8.0％(4/50),14.0％(7/50),0％(0/50),6.0％(3/50)和4.0％(2/50);在对照组的阳性率分别为5.8％(3/52),1.9％(1/52),5.8％(3/52),11.5％(6/52),0％(0/52),0％(0/52)和0％(0/52).AMA,AMA-M2和抗GP210抗体在PBC组的阳性率显著高于AIH组(x2值分别为101.1,100.8和11.2,P值均＜0.01).而抗SLA抗体在AIH组的阳性率高于PBC组(x2=9.5,P＜0.01).结论 抗LC1抗体、抗SLA抗体和抗LKM-1抗体在PBC和AIH中阳性率较低,筛查这3种抗体的临床意义可能不大.临床筛查抗GP210抗体和AMA对PBC诊断有重要意义.     

自身免疫性肝病148例临床特点分析

目的 分析自身免疫性肝病（autoimmune liver diseases,ALDS）的临床、生化及自身抗体特点.方法 分析我院1996年-2005年148例ALDS患者其中自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis,AIH）患者52例,原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosi,PBC）患者96例的临床表现,并分析有关实验室检查资料.结果 两组患者临床症状均不典型,肝功能各项指标普遍异常,AIH组以ALT升高更为明显,而PBC组患者ALP和GGT升高更为显著（P＜0.01）.在自身抗体检测情况两组有极大的差异.AIH患者主要以高效价的抗核抗体（antinuclear antibodies,ANA）（44/52）和/或抗平滑肌抗体（antismooth muscle antibodies）（35/52）为主,此外,尚有9.6%（5/52）和3.8%（2/52）的AHI患者出现抗可溶性肝抗原抗体（auti-soluble liver antigen autoantibdies,抗SLA）和抗肝/肾微粒体（liver/kidney microsomal,LKM）抗体阳性.PBC组以抗线粒体抗体（mitahondrial anto-antibodies,AMA）阳性（99.0%）为主,93.8%的患者AMAM2阳性.结论 AIH及PBC的诊断可结合临床、生化、自身抗体检查的结果,其中自身抗体的检测尤为重要.     

自身抗体在自身免疫性肝病诊断中的价值

目的：探讨自身抗体谱分析在自身免疫性肝病（ALD）诊断中的价值。方法回顾性分析864例肝病患者中各类自身免疫性肝病的分布、年龄、性别特征及自身抗体（ANA）、肝抗原自身抗体阳性率。结果864例患者中,病毒性肝炎763例、自身免疫性肝炎（AIH）51例、原发性胆汁性肝硬化（PBC）37例、原发性硬化性胆管炎（PSC）4例和重叠综合征（OS）9例。ALD多见于40岁以上女性。病毒性肝炎组ANA、抗平滑肌肌动蛋白抗体（ASMA）、抗肝肾微粒体抗体1型抗体（LKM-1）的阳性率分别为23．3％、4．6％、1．0％;AIH组ANA、ASMA、抗LKM-1、抗肝细胞溶质抗原1型抗体（抗LC-1）、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体（抗SLA/LP）、抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）的阳性率分别为78．1％、70．6％、7．8％、5．9％、9．8％、29．4％;PBC组ANA、ASMA、抗线粒体抗体亚型M2（AMA-M2）的阳性率分别为83．9％、37．8％、86．5％。结论自身抗体检测是诊断自身免疫性肝病的必要条件,但这些自身抗体也可见于病毒性肝炎。     

自身免疫性肝病患者自身抗体谱的检测及临床应用

目的探讨联合检测多种自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)及自身免疫性肝炎(AIH)诊断中的价值及临床意义。方法用免疫印迹法分别检测2005～2009年济宁医学院附属医院及北京协和医院、山东省立医院、济宁传染病医院提供的32例PBC患者、27例AIH患者和7例健康体检者血清中的抗线粒体(AMA)-M2亚型抗体、抗3E(BPO)抗体、抗Sp100抗体、抗早幼粒细胞性白血病(PML)抗体、抗gp210抗体、抗肝肾微粒体-1(LKM-1)抗体、抗肝特异性胞质1型(LC-1)抗体、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(抗SLA/LP抗体)、抗Ro-52抗体。结果 32例PBC中抗AMA-M2抗体、抗3E(BPO)抗体、抗Sp100抗体、抗PML抗体、抗gp210抗体、抗LC-1抗体、抗SLA/LP抗体、抗Ro-52抗体阳性率分别为81.25%、78.13%、15.63%、56.25%、46.88%、9.38%、6.25%、56.25%,而以上8种自身抗体在27例AIH患者中的阳性率分别为18.52%、18.52%、14.81%、14.81%、7.41%、3.70%、7.41%、66.67%。抗LKM-1抗体在PBC中未检测出,而在AIH的阳性率为11.11%。抗AMA-M2抗体对PBC诊断的敏感度达81.25%,特异度达86.00%;抗3E(BPO)抗体对PBC诊断的敏感度达78.13%,特异度达89.00%;抗PML抗体对PBC诊断的敏感度达56.25%,特异度达75.00%;抗gp210抗体对PBC诊断的敏感度达46.88%,特异度达86.35%,未检测到抗LKM-1抗体。抗LKM-1抗体对AIH诊断的敏感度为11.11%,而特异度为100.00%。结论抗AMA-M2抗体、抗3E抗体、抗PML抗体、抗gp210抗体的联合检测对PBC的诊断有着较高的应用价值,而对AIH的诊断意义不大,而LKM-1对PBC的诊断没有价值,而对AIH具有较高的诊断价值。自身免疫性肝病自身抗体谱检测对PBC、AIH诊断、鉴别诊断、治疗及预后判断均有重要意义。     

原发性胆汁性肝硬化患者血清自身免疫性肝病相关自身抗体谱的检测及临床意义

目的 通过检测PBC患者血清自身免疫性肝病相关自身抗体,探讨这些抗体在PBC患者中的阳性状况及临床意义.方法 采用IIF法检测247例肝病患者(173例PBC、37例AIH和37例LDC)血清AMA,采用ELISA检测血清自身免疫性肝病相关自身抗体(AMA-M2、抗GP210抗体、抗SP100抗体、抗SLA抗体、抗LC1抗体、抗LKM-1抗体).结果 AMA、AMA-M2、抗GP210抗体、抗SP100抗体、抗LC1抗体、抗SLA抗体和抗LKM-1抗体在173例PBC组的阳性率分别为92.5%(160/173)、86.7%(150/173)、35.8%(62/173)、24.3%(42/173)、0.6%(1/173)、O%(0/173)、0.6%(1/173),在37例AIH组的阳性率分别为18.9%(7/37)、5.4%(2/37)、8.1%(3/37)、13.5%(5/37)、0%(0/37)、5.4%(2/37)、2.7%(1/37),在37例LDC组的阳性率分别为5.4%(2/37)、2.7%(1/37)、5.4%(2/37)、10.8%(4/37)、0%(0/37)、0%(0/37)、0%(0/37).AMA、AMA-M2和抗GP210抗体在PBC患者的阳性率显著高于AIH患者x~2值分别为101.3,100.8和11.0,P均<0.01).而抗SLA抗体在AIH患者阳性率高于PBC患者(x~2=9.4,P<0.01).抗GP210抗体阳性PBC患者ALT、TBIL、DBIL、0GT和ALP水平显著高于阴性患者(U值分别为1212.0、1199.0、1218.0、1074.0、1030.0,P均<0.01).AMA阳性PBC患者IgM水平显著高于阴性患者(U=94.0,P<0.05).结论 抗LC1抗体、抗SIA抗体和抗LkM-1抗体在PBC和AIH中阳性率较低,筛查这3种抗体的临床意义可能不大.抗GP210抗体与PBC患者的肝功能损伤有关,AMA与PBC患者的免疫功能相关,临床筛查抗GP210抗体和AMA对PBC诊断有重要意义.     

原发性胆汁性肝硬化和自身免疫性肝炎重叠综合征患者的临床特征分析

目的 分析原发性胆汁性肝硬化（PBC）和自身免疫性肝炎（AIH）重叠综合征（PBC／AIH重叠综合征）患者的临床表现和肝组织病理学的特点。方法 对124例自身免疫性肝病患者的临床资料进行分析，根据国际自身免疫性肝炎小组修订的诊断标准，筛选出19例PBC／AIH重叠综合征患者，分析比较PBC／AIH重叠综合征和单纯PBC、AIH患者的临床表现、肝组织病理学变化。结果 124例自身免疫性肝病患者中19例PBC／AIH重叠综合征，单纯PBC55例、AIH49例，原发性硬化性胆管炎（PSC）1例，分别占15．32％、44．35％、39．52％和0．81％。PBC／AIH重叠综合征实验室检查具有AIH的特点，如血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、免疫球蛋白G的明显升高，同时具有PBC的特点，如转肽酶、碱性磷酸酶、免疫球蛋白M的显著增高；自身抗体检测可见抗核抗体、抗平滑肌抗体、抗线粒体抗体、M2抗体阳性；肝组织病理结果显示，兼有PBC和AIH的特点，如界面炎和碎屑样坏死，汇管区浆细胞浸润，胆管不同程度病变。结论 PBC／AIH重叠综合征并非罕见，它的临床表现、肝组织病理学具有PBC和AIH的双重特征，应对此病充分认识，探索有效的治疗方案。     

关注自身免疫性肝病和自身免疫性胰腺炎的实验诊断

自身免疫性肝病是病理性自身免疫反应诱发的一组肝脏疾病,包括自身免疫性肝炎(autoimmunehepatitis,AIH)、原发性胆汁性肝硬化(primary biliar-y cirrhosis,PBC)、原发性硬化性胆管炎(primarysclerosing cholangitis,PSC)以及它们中的任何两种病的重叠综合征(overlap syndrome,OS)。大多数患者都表现为慢性、进展性的病理过程,晚期多出现肝纤维化乃至肝硬化、肝癌。由于患病率(prevalence)在近年来有所升高,而本病的诊断、治疗与慢性病毒性肝炎又有所不同,故而引起较广泛关注。自身免疫性胰腺炎(autoimmune pancreatitis,AIP)是12年前…     

自身免疫性肝病相关自身抗体谱的检测和临床意义研究

目的为了进一步提高临床对自身免疫性肝病的检出率,分析和研究诊治过程中检测自身免疫性肝病抗体的价值和意义。方法按照随机数字表的方法选取64例于2015年2月至2016年2月该院就诊的自身免疫性肝病患者作为研究对象并设为试验组,选取同时间段就诊的64例病毒性肝炎患者作为对照组,所有患者均进行常规自身免疫性肝病抗体谱检测,比较两组检测结果阳性率差异。结果经过研究发现,试验组患者其自身免疫性肝病抗体谱[抗线粒体抗体(AMA-M2)、抗可溶性肝抗原/抗胰抗原抗体(SLA/LP)、抗肝肾微粒体抗体Ⅰ型(LKM-1)、抗核膜糖蛋白抗体(gp210)、抗可溶性酸性核蛋白抗体(Sp100)、抗肝细胞浆Ⅰ型抗原抗体(LC-1)]阳性率显著高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05);其中自身免疫性肝炎患者以SLA/LP、LKM-1、LC-1作为特有抗体,而原发性胆汁性肝硬化以AMA-M2、gp210、Sp100作为特有抗体。结论临床上对考虑自身免疫性肝病患者,应重视对自身免疫性肝病抗体谱的检测,有利于早期确诊并对病情的严重程度做出判断,值得临床推广和应用。     

Detection of autoantibodies against M2, LKM-1, and SLA in liver diseases by standardized uniform ELISA-techniques

Antibodies directed against soluble liver antigen (SLA), liver kidney microsomal antigen (LKM-1-AG), and antimitochondrial antigen M2 (M2-AMA) are critical serological markers for the differential diagnosis of autoimmune chronic active hepatitis (AI-CAH) and primary biliary cirrhosis (PBC). The exact diagnosis of autoimmune hepatitis and PBC is of great clinical relevance, as it leads to different therapeutic strategies. In the present work, a simple and reliable ELISA test system is described, which applies the same test principle for the detection of three different species of autoantibodies important for the diagnosis of chronic liver disease. The ELISA assays are based on a competitive inhibition of binding of positive standard antibodies by patients sera containing antibodies of unknown specificity. The purified immunoglobulins of clinically and serologically clearly defined patients with SLA or LKM-1 positive AI-CAH and with M2 positive PBC were used as coating- and detection antibodies in the ELISAs. From homogenized rat liver the fractionated 100,000g supernatant was employed for the SLA ELISA, the microsomal preparation served as antigen for the LKM-1 ELISA and the mitochondrial preparation was used for the M2 ELISA. In 1,500 sera of patients with the differential diagnosis of a hepatobiliary disease, 17 gave a positive signal in the SLA ELISA, 12 in the LKM-1-ELISA, and 72 in the M2-ELISA. The results of the ELISAs were compared with Western blotting and immunofluorescence staining pattern on cryostat sections and Hep2 cells. The antibody profiles of several patients are described in detail. © 1994 Wiley-Liss, Inc.     

自身免疫性肝病患者肝纤维化血清标志物检测的意义

目的 探讨血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)和层粘连蛋白(LN)对自身免疫性肝病(ALD)患者肝纤维化诊断及鉴别的意义.方法 采用增强化学发光免疫分析法对37例原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者、25例自身免疫性肝炎(AIH)患者、33例肝硬化患者、37例病毒性肝炎患者及20例健康体检者血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN进行检测,并对部分患者在治疗6个月后再次检测上述指标,同时和部分肝功能指标进行相关性分析.结果 ALD患者4项肝纤维化指标均高于健康对照组(均P<0.05);AIH组4项指标均高于病毒性肝炎组(均P<0.01),ROC曲线下面积分别为0.823、0.849、0.824和0.830; PBC组CⅣ和LN低于肝硬化组(P<0.05);两组ALD患者在经治疗6个月后,上述指标均明显下降(均P<0.05).结论 肝纤维化血清标志物HA、PCⅢ、CⅣ和LN对于ALD患者肝纤维化的诊断及和病毒性肝炎的鉴别具有一定价值,并能间接反映肝脏炎症的情况.     

Significant autoimmune markers of autoimmune liver disorders: Current status

Chronic inflammatory liver diseases are classified as chronic active hepatitis (CAH) or primary biliary cirrhosis (PBC) on the basis of clinical and pathological criteria. Autoantibodies allow the distinction between autoimmune forms of CAH and virally induced forms, in particular CAH non-A, non-B. Three different subgroups of autoimmune-type CAH have been defined so far. Classical autoimmune “lupoid” CAH is characterized by antinuclear antibodies (ANA) and liver-membrane autoantibodies (LMA). Antibodies against a liver-kidney-microsomal antigen (LKM) are found in a small group of generally young patients and are associated with a progressive form of autoimmune CAH. The target antigen as defined by immunoblotting is a protein at 50 kilodaltons (KD), and it has been detected on phenobarbital-inducible isoenzymes of cytochrome P-450. The third subgroup, clinically similar to “lupoid” CAH, is characterized by antibodies against a soluble cytoplasmic liver antigen (anti-SLA). These antibodies cannot be diagnosed by routine methods, i.e., immunofluorescence, but are only found by radioimmunoassay or enzyme immunoassay. In primary biliary cirrhosis (PBC) the immune reactions are directed against the intrahepatic bile ducts rather than hepatocytes. Antimitochondrial antibodies (AMA), traditionally diagnosed by immunofluorescence, are found in up to 100% of PBC patients. Complement-fixation test, radioimmunoassay, and enzyme immunoassay allow the distinction of disease-specific subtypes of AMA. Immunoblotting allows the characterization at the molecular level of two PBC-specific AMA subtypes, anti-p48 and anti-p62. The latter corresponds to the anti-M2 antibodies described previously. All these antibodies are important tools in the differential diagnosis of chronic inflammatory liver diseases. Patients with autoimmune-type CAH benefit from immunosuppressive therapy, while those with virally induced CAH do not. The role of these autoantibodies in the pathogenesis of CAH or PBC is not known as yet, but they are sensitive and specific diagnostic markers.     

自身免疫性肝炎44例分析

目的　探讨自身免疫性肝炎(autoimmunehepatitis,AIH)的免疫学实验诊断特点。方法　观察 44例AIH的临床表现,并分析有关实验室检查资料。结果　本组患者临床症状不典型,肝功能各项指标普遍异常,有 38例患者抗核抗体 (antinuclearantibodies,ANA)阳性, 29例抗平滑肌抗体 (smoothmuscleantibodies,SMA)阳性, 22例抗线粒体抗体 (antimitochondrialantibodies,AMA)阳性(其中 1例M2阳性), 2例抗肝肾微粒体(anti liver/kidneymicrosomalantibodies,anti- LKM)- 1抗体阳性, 4例抗可溶性肝抗原抗体(anti solubleliverantigenantibodies,anti- SLA)阳性。结论　AIH无典型临床症状,患者可以通过自身抗体的检测结合临床表现获得诊断。     

60例自身免疫性肝病超声影像分析

目的 了解自身免疫性肝病的超声表现，从而提高该病的诊断准确率。方法 对经临床及病理确诊的60例自身免疫性肝病患者的超声影像资料进行回顾性综合分析。结果 自身免疫性肝炎50例，原发性胆汁型肝硬化8例，原发性硬化性胆管炎2例。结论 超声显像对于自身免疫性肝病的诊断具有重要的意义。     

自身免疫性肝病抗体在肝病诊断中的临床价值

目的探讨自身免疫性肝病抗体在肝病诊断中的临床价值。方法回顾性分析2145例肝病患者的自身抗体结果,并对自身抗体阳性的结果进行临床分析。结果 2145例患者中共检测出自身抗体阳性359例,阳性率为16.7%。诊断原发性胆汁性肝硬化（PBC）64例,检出率为3.0%,诊断自身免疫性肝炎（AIH）59例,检出率为2.8%。73.4%PBC患者血清抗核抗体（ANA）≥1∶320,且26.6%抗线粒体抗体（AMA）为阳性;49.2%AIH患者血清ANA≥1∶320,且3.3%AMA为阳性。PBC患者核膜型及着丝点型显著多于AIH患者,而均质型及着丝点颗粒型显著少于AIH患者,差异均有统计学意义。ANA阳性≥1∶320乙型肝炎患者谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、谷酰转肽酶（GGT）及碱性磷酸酶（ALP）水平显著高于ANA阳性≥1∶100及ANA阴性患者,差异有统计学意义。结论自身抗体检测是诊断自身免疫性肝病的必要条件,但需鉴别病毒性肝炎、药物性肝炎和其他疾病。